学术投稿

十二指肠钩虫金属蛋白酶组织抑制剂同源物Ad-TIMPL-1基因克隆及其原核表达

邓莉;邵正;许琴英;胡晶晶;彭礼飞

关键词:十二指肠钩虫, 金属蛋白酶组织抑制剂, 克隆, 原核表达
摘要:目的 克隆十二指肠钩虫金属蛋白酶组织抑制剂同源物(TIMPL)Ad-TIMPL-1基因并进行原核表达.方法 分别用3'RACE及RT-PCR技术从十二指肠钩虫成虫cDNA中扩增编码Ad-TIMPL-1的cDNA 3’末端及5’末端序列;序列经拼接后进行初步生物信息学分析;将Ad-TIMPL-1成熟肽编码序列克隆至原核表达载体pET-32a,构建重组表达质粒;重组质粒转化至大肠杆菌BL21( DE3)后,用IPIG诱导表达,SDS-PAGE分析表达情况.结果 成功克隆获得了编码Ad-TIMPL-1的全长cDNA序列并登记到GenBank (accession no.EF495071);Ad-TIMPL-1完整阅读框为396bp,编码132个氨基酸残基组成的蛋白,含16个氨基酸残基组成的信号肽;成功构建了原核表达重组质粒pET-32a/Ad-TIMPL-1,并在大肠杆菌中得到了表达.结论 本研究首先从十二指肠钩虫中克隆到了Ad-TIMPL-1基因并进行了原核表达,为进一步研究其生物学功能奠定了基础.
热带医学杂志相关文献
  • 疟原虫和其他病原体混合感染的研究进展

    疟疾是一类在热带和亚热带地区非常流行的疾病,混合感染现象在疟疾流行区普遍存在.能够引起混合感染的病原体种类很多,其中比较常见的有HIV、结核分枝杆菌、血吸虫和钩虫.本文就疟疾和HIV、EB病毒,疟疾和蠕虫,以及疟疾和细菌的混合感染作一综述.

    作者:李苗;罗恩杰 刊期: 2011年第08期

  • 广州大学城10所高校大学生亚健康现状调查

    目的 了解广州市大学生亚健康状态的主要影响因素,探讨其成因并提出相应的预防对策.方法 采用经过改进的调查问卷对广州大学城10所高校共2 000名大学生进行问卷调查,用EpiData3.1建立数据库,SPSS13.0统计软件进行分析.结果 广州大学生中普遍存在不同程度的亚健康状态,受调查者中有64.4%(1 270/1 971)的学生处于亚健康状态;主要表现为注意力难以集中、记忆力差、活力减退等;不同大学生群体亚健康症状表现差异有统计学意义;影响健康的主要因素为缺少体育锻炼、精神高度紧张、睡眠质量差等.结论 学校要引导大学生进行科学合理的体育锻炼,通过多种途径让学生了解健康知识,关注家庭经济较困难的学生.

    作者:练桂雄;苏绮雯;李铁刚 刊期: 2011年第08期

  • 乙型肝炎病毒基因B和C型与阿德福韦酯疗效关系的研究

    目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因B和C型与阿德福韦酯的疗效关系.方法 选取应用阿德福韦酯10mg/d进行抗病毒治疗12、24、36、48周的136例慢性乙型肝炎患者作为研究对象,用聚合酶链反应(PCR)-微板核酸杂交-酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测分析基因型,评价阿德福韦酯治疗不同基因型HBV的疗效.结果 136份样本中,HBV基因B型39份,HBV基因C型97份.在治疗12、24、36、48周时,B基因型患者丙氨酸氨基转移酶(ALT)的变化、血清HBV DNA水平下降比例≥2log10及完全抑制情况与C基因型患者相比差异均无统计学意义(P>0.05).结论 本研究所观察的样本中,阿德福韦酯的抗病毒疗效与HBV基因B型和C型均无相关性.

    作者:韩思源;张丽华;邓瑞莲;王燕 刊期: 2011年第08期

  • 泌尿道感染菌谱的组成及其耐药性变迁

    目的 分析临床泌尿道感染菌的组成及耐药性变迁,为临床泌尿道感染合理使用抗生素提供依据.方法 对2008-2010年所有洁净尿标本的感染菌采用VITEK2-compact微生物全自动分析仪进行细菌鉴定及药敏试验.结果 尿培养标本分离出病原菌1 179株,其中排在前3位的分别是大肠埃希菌、白色念珠菌、粪肠球菌,分别占革兰阴性菌、真菌和革兰阳性菌的68.3%、67.4%、35%;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对美罗培南、米诺环素的耐药率低(0),其次为亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、头孢替坦;粪肠球菌和屎肠球菌是尿中常见的菌种,对链霉素、替考拉宁、万古霉素和利奈唑烷的耐药率低;白色念珠菌对两性霉素B、制霉素的耐药率均为0.结论 泌尿道感染以大肠埃希菌和白色念珠菌多,多为多重耐药菌株;定期系统地监测细菌耐药对临床用药具有重要意义.

    作者:叶振东;乔亚峰;张国雄;范晓怡 刊期: 2011年第08期

  • 血吸虫病合并非癌性CEA明显增高一例

    1病历摘要患者女,61岁,因“食欲不振、乏力20余天伴发热”人院.患者20余天前无明显诱因开始出现食欲不振,四肢乏力,继之出现发热,热峰40℃,有畏寒;个人史:患者自诉所住地区(江苏-高淳-阳江镇)近期有血吸虫病发病者十余人.人院体格检查:体温37.8C,脉搏69次/min,腹软,中上腹部轻度压痛,反跳痛阴性,未触及异常包块.胃镜示:慢性浅表活动性胃炎伴灶性糜烂.血常规示:WBC:21.3×109/L,N%:33.0%,E%:50%,RBC:3.46× 1012/L,HB:112 g/L,HCV:0.329 L/L,PLT:323×109/L,CEA:259.75 ng/ml(参考值<5 ng/ml).

    作者:曹友红 刊期: 2011年第08期

  • 2010年深圳市流感流行病学分析

    目的 对2010年深圳市流感监测结果进行分析,了解流感的流行趋势,为流感防治提供科学依据.方法 收集全市31家监测单位的流感样病例数据、病原学检测结果和暴发疫情资料进行分析.结果 2010年深圳市的流感样病例百分比(ILI%)为5.43%.2010年全市共采集日常监测ILI咽拭标本4 031份,分离出445株流感病毒,阳性率为11.0%,其中14株季节性H1N1亚型(3.1%),42株季节性H3N2亚型(9.4%),171株甲型H1N1亚型(38.4%),213株B(Victoria,47.9%)亚型,5株B(Yamagata,1.1%)亚型.2010年全市报告了89起ILI暴发疫情,发病总人数741人,流感PCR检测阳性79起,其中季节性甲型6起(6.8%),乙型67起(75.3%),甲型H1N1流感6起(6.8%).结论 2010年深圳市流感活动较低,未出现明显的高峰.

    作者:王昕;程小雯;房师松;吴春利;吕星;张仁利;马汉武 刊期: 2011年第08期

  • 不同疗程的乳酸杆菌阴道胶囊治疗细菌性阴道病对妊娠结局的影响

    目的 研究乳酸杆菌阴道胶囊治疗低危的妊娠期细菌性阴道病(BV)的转阴率及其与不良妊娠结局间的关系,评估双疗程方案对治疗后持续BV阳性患者的意义.方法 选用唾液酸酶法对孕16~20周的低危患者进行BV筛查,追踪比较乳酸杆菌阴道胶囊单疗程治疗组、双疗程组和对照组3组病人治疗后1周及孕晚期的转阴率及妊娠结局.结果 BV总检出率为17.6%.在治疗后1周及孕晚期,对照组的转阴率分别为1.2%和62.3%,两治疗组的BV转阴率均高于80%,对照组与两治疗组间的差异有统计学意义(P<0.01).对照组较两治疗组的胎膜早破发生率高、分娩孕周短、产后出血量多、新生儿出生体重轻、产妇产后第1天的体温高.对于持续性BV阳性的病人,双疗程组与单疗程组在BV转阴率、不良妊娠结局间的差异无统计学意义.结论 低危妊娠期BV患者予乳酸杆菌阴道胶囊治疗能使BV有效转阴,并可改善妊娠结局.对于治疗后持续性BV阳性的病人,暂无证据支持予第二疗程治疗.

    作者:李艳芳;李道成;李越游 刊期: 2011年第08期

  • Nd:YAG激光泪道成形术和鼻泪管支架术治疗慢性泪囊炎的疗效对比

    目的 比较Nd:YAG激光泪道成形术和鼻泪管支架术治疗慢性泪囊炎的临床效果.方法 93例(102眼)慢性泪囊炎患者随机分成两组,一组应用Nd:YAG激光泪道成形术治疗,另一组应用鼻泪管支架术治疗,比较两组的治疗效果.结果 应用Nd:YAG激光泪道成形术治疗57眼,有效39眼(68.42%);鼻泪管支架术治疗45眼,有效40眼(88.89%),两组疗效差异有统计学意义(X2=6.03,P<0.01).结论 鼻泪管支架术相对于同样微创的Nd:YAG激光泪道成形术治疗慢性泪囊炎疗效更加稳定,手术成功率更高,不失为微创治疗慢性泪囊炎的首选术式.

    作者:杨成明;曾庆国;包伟光 刊期: 2011年第08期

  • 胱抑素C评价早中期慢性肾脏病患者肾功能损害的临床价值

    目的 探讨血清胱抑素C(Cys C)评价早中期慢性肾脏病(CKD)患者肾功能损害的临床价值.方法 以2008年1月至2010年12月深圳市第六人民医院肾内科住院治疗的221例CKD1~3期患者为观察对象,测定Cys C、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、血尿酸(BUA)及血白蛋白(A1b),与MDRD公式计算的肾小球滤过率(GFR)进行比较.结果 CKD1~3期患者Cys C随着GFR的下降而升高,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05);血清Cys C水平与SCr、BUN及BUA水平呈明显正相关(r=0.650,P=0.000;r=0.631,P=0.000;r=0.309,P=0.000),与GFR水平呈明显负相关(r=-0.717,P=0.000).CKD2期患者Cys C异常检出率为32.8%,SCr为0;CKD3期患者Cys C异常检出率为73.0%,SCr为58.4%,CKD3期患者Cys C、SCr的异常检出率差异有统计学意义(P<0.05).Cys C评估GFR的接受者操作特征曲线下面积(AUCROC)为0.853,敏感性为0.780,特异性为0.817;SCr的AUCROC为0.924,敏感性为0.793,特异性为0.958;联合Cys C和SCr后,AUCROC上升至0.940,敏感性为0.853,特异性为0.950.结论 Cys C是评估早中期CKD患者肾功能损害的敏感指标,联合应用Cys C和SCr可提高对早中期慢性肾功能不全患者的诊断效能.

    作者:陈结慧;祝胜郎;叶玲;朱恒梅;李向阳;蒋莹;李就鸿 刊期: 2011年第08期

  • 2型糖尿病患者糖尿病足的危险因素分析

    目的 总结分析2型糖尿病患者糖尿病足(DF)的患病情况及相关危险因素,为临床治疗和预防DF提供依据.方法 选择2型糖尿病患者189例为研究对象,根据病情分为DF组和非DF组,回顾分析其性别、年龄、病程、入院时血压、空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白、血肌酐、尿素氮,以及尿白蛋白、糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变、周围神经病变等因素.结果 DF所占比例为15%.DF组与非DF组相比,病程、餐后2h血糖、糖化血红蛋白、血肌酐、尿素氮、尿白蛋白、糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变、周围神经病变等因素差异均有统计学意义(P<0.05).其中病程、糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变、周围神经病变进入回归模型亦有统计学意义(P<0.05).结论 2型糖尿病的病程、肾病、视网膜病变、周围神经病变是DF发生的独立危险因素.

    作者:林揆斌;沈阳 刊期: 2011年第08期

  • 食管静脉出血套扎联合生长抑素防止再出血的观察

    目的 观察食管静脉曲张破裂出血行食管静脉曲张套扎术(EVL)后联合使用生长抑素对预防近期再出血的有效性.方法 总结2001年10月至2010年10月因静脉曲张破裂引起上消化道大出血的病例174例,予内镜套扎治疗后,将使用生长抑素治疗病例设为观察组(68例),未使用生长抑素治疗病例设为对照组(106例),比较两组近期再出血的发生率.结果 174例食管静脉曲张破裂出血患者经内镜下套扎治疗后,观察组近期再出血率为22.06%,高于对照组近期再出血率(7.55%),两组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 EVL预防再出血疗效较好,EVL联合使用生长抑素对预防近期再出血无优势,且生长抑素增加患者的医疗费用,对轻症病例不推荐使用.

    作者:王胜炳;汪福群;崔毅 刊期: 2011年第08期

  • 一种新型慢病毒载体制备体系的改进

    目的 完善已初步建立的以痘病毒为辅助病毒的慢病毒载体(LV)瞬时制备体系.方法 通过同源重组质粒pZIPPY-NEO/GUS,将vTF7-3痘病毒D13L基因的ORF通过同源重组被新霉素基因(neo)以及可视性筛选基因(GuS)替代,制备D13L缺陷性痘病毒(vTF7-3-ΔD13L).结果 经RT-PCR鉴定,D13L基因被完全敲除.制备体系中将vTF7-3-ΔD13L代替vTF7-3后,制备体系培养上清经RT-PCR、Western blotting分别检测到慢病毒载体特异性RNA序列以及特征性p24蛋白的存在,提示系统可以正常制备出慢病毒载体颗粒,并进一步评价了慢病毒载体的感染性.此外,对此系统的动力学特征也进行了初步分析.结论 vTF7-3-ΔD 13L制备成功,通过此系统可制备出没有复制性痘病毒污染的慢病毒载体,本研究为该系统的大规模应用奠定了客观基础.

    作者:马强;舒文;李明;吴英松 刊期: 2011年第08期

  • 人副流感病毒广州分离株ZYMgz01全基因组序列测定及分析

    目的 探讨广州地区副流感病毒的基因组结构和基因型.方法 参照GenBank副流感病毒(U51116)全基因组序列设计11对引物,覆盖副流感病毒基因组的全长.以副流感病毒cDNA为模板分段扩增病毒基因组的全长,各片段克隆到T载体上,并进行序列测定和分析.结果 人副流感病毒ZYMgz01株全基因组核酸序列为15 462 bp,提交到GenBank的序列号为EU326526,与3型副流感病毒保守基因同源性为94.0%,具有3型副流感病毒的结构特征.基因组序列同源性比较结果显示,ZHYMgz01株病毒与兰州的LZ22 (FJ455842)病毒株的同源性高,为99.1%;与美国突变病毒株(U51116)同源性为95.1%;与美国病毒株(Z11575)同源性为95.2%;与日本(AB012132)病毒株的同源性为94.8%,而与加拿大(EU424062)病毒株的同源性为94.8%.系统进化树显示ZHYMgz01病毒株与兰州的LZ22病毒株同属一个进化分支.结论 广州地区儿童呼吸道感染的副流感病毒ZHYMgz01全基因组为15 462 bp,与3型副流感病毒的同源性高,确定ZHYMgz01是3型副流感病毒.3型副流感病毒系统进化可能与地域差异有一定的关系.

    作者:陈翊;曾华;钟家禹;林涛;朱冰;周荣 刊期: 2011年第08期

  • 凝血酶激活的纤溶抑制物及其编码基因多态性与冠心病的相关性研究

    目的 研究凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFT)及其编码基因多态性与冠心病(CHD)之间的相关性.方法 应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性分析技术(PCR-RFLP)对136例冠心病患者和85名健康对照者的TAFI编码基因Thr325Ile和Thr147Ala的基因多态性进行分析,同时采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法对所有受试者血浆TAFI的抗原及活性水平进行检测,探讨TAFI及其编码基因的基因多态性与CHD的关系.结果 健康对照组和CHD组血浆TAFI的抗原与活性水平分别为(72.50±33.95)%、(21.75+13.79)μg/ml和(185.21±89.82)%、(91.29±43.48) μg/ml,两组之间的差异有统计学意义(P<0.01).在健康对照组和CHD组TAFI编码基因的基因多态性分布中,Thr325Ile编码基因的3种基因型和Thr147Ala编码基因的3种基因型两组之间基因型及等位基因的多态性分布频率差异无统计学意义(P>0.05).在Thr325Ile编码基因的3种基因型中,Thr325Thr基因型血浆TAFI的抗原水平明显高于其他两种基因型(Thr325Ile和Ile325Ile),差异有统计学意义(P<0.01),而后两种基因型之间差异无统计学意义(P>0.05);Ile325Ile基因型血浆TAFI的活性水平较其他两种基因型(Thr325Thr和Thr325Ile)低,差异有统计学意义(P<0.01),而后两者之间的差异无统计学意义(P>0.05);在Thr147Ala编码基因的3种基因型(Ala147Ala、Ala147Thr和Thr147Thr)之间,血浆TAFI的抗原与活性水平的差异无统计学意义(P>0.05).结论 TAFI可能是CHD的危险因子;TAFI编码基因Thr325Ile的基因多态性对血浆TAFI的抗原与活性水平有一定的影响,但TAFI的两种编码基因Thr325Ile与Ala147Thr的基因多态性与CHD的发生并无明显的相关性.

    作者:孙彦;蔡叶琴;宋作林;李卓成;霍光;谢小军;熊辉 刊期: 2011年第08期

  • 原发性肾病综合征中医证候荟萃分析

    目的 研究原发性肾病综合征的中医证候分布,总结其主要的证候类型.方法 通过计算机检索国内1997-2010年关于中医药治疗原发性肾病综合征的文献,运用随机对照试验表对文献进行评估,采用JADAD治疗评分表对文献进行评价,将符合标准的文献运用加权百分率法进行荟萃分析.结果 共有9篇文献入选本研究,得到701例病人15种证型,其中主要的证型为脾肾阳虚型(29.5%)、肝肾阴虚型(16.7%)、阴虚湿热型(13.8%).结论 脾肾阳虚、肝肾阴虚、阴虚湿热为原发性肾病综合征的主要证型.

    作者:孙晓敏;赵晓山;余克强 刊期: 2011年第08期

  • 2006-2009年南山区学生肺结核病例情况分析

    目的 分析近年南山区校园结核病的发病情况,为有效预防和控制学校结核病疫情提供依据.方法 将2006-2009年在深圳市南山区慢性病防治院就诊的学生肺结核初诊病例182例作为研究对象,收集病例的相关资料,采用描述性分析方法分析病例发现、分布特征和治疗转归等情况.结果 2006-2009年南山区学生肺结核病例占全区同期活动性肺结核病例的比例逐年递增,分别为0.99%、1.64%、1.88%和3.99%;因症就诊方式发现的病例分别占初诊、确诊和涂阳病例的70.9%、67.9%和90.0%,是发现学生病例的主要方式;小学、中学、大学初诊病例确诊率分别为5.56%、27.3%和35.8%,差异有统计学意义(P=0.029).结论 应采取多种措施继续加强学校肺结核预防控制工作,并将工作重点放在大学生群体.

    作者:郭旭君;王健;钟涛 刊期: 2011年第08期

  • 环孢素A抑制正常人外周血记忆CD4+T细胞产生IL-22的实验研究

    目的 探讨环孢素A(CsA)是否能够抑制正常人CD4+T细胞产生白细胞介素22(IL-22).方法 使用密度梯度离心法制备正常人外周血单个核淋巴细胞(PBMCs),加入PMA+Inomycin刺激细胞后,做细胞内细胞因子染色,流式细胞仪检测正常人外周血PBMCs中产生IL-22的T细胞亚群,以及IL-17-IFN-γ-IL-22+CD4+T细胞亚群(Th22);PMA+Inomycin刺激正常人PBMCs,同时加或不加环孢素A(CsA)后,做细胞内细胞因子染色,流式细胞仪检测IL-22+CD4+T细胞和IFN-γ+CD4+T细胞的比例,以及IL-22+CD4+T细胞表达记忆表型分子CD45RO情况.结果 正常人外周血中产生IL-22的T细胞以CD4+T细胞为主,且存在仅分泌IL-22,不分泌IL-17和IFN-γ的Th22亚群;CsA以剂量依赖方式抑制CD4+T细胞产生IL-22和IFN-γ; CsA抑制外周血PBMCs中记忆CD4+T细胞产生IL-22.结论CsA能抑制正常人外周血中记忆CD4+T细胞产生IL-22.

    作者:沈二霞;杨宝欣;李旸;周茂华 刊期: 2011年第08期

  • 起搏QRS波时限与左心结构和功能的关系

    目的 探讨长期右室心尖起搏患者的起搏QRS时限与左心结构、左心室收缩功能及心室间不同步的关系.方法 长期右室心尖部起搏患者共105例,通过常规体表心电图测得起搏QRS(pQRS)时限,运用常规心脏超声心动图检测主动脉根部内径(A0)、左房内径(LAD)、收缩末期左心室内径(LVDs)、舒张末期左心室内径(LVDd)、室间隔厚度(IVST)、左室后壁厚度(LVPWT)及左室射血分数(LVEF),分析pQRS时限与以上各心超指标的关系.结果 pQRS时限与LVDd、LVDs及IVST呈正相关(r分别为0.334、0.385和0.289,前两者P<0.01,后者P<0.05),与LVEF负相关(r=-0.312,P<0.05);pQRS时限与LAD的相关性更显著(r=0.595,P<0.01).以pQRS时限≥180ms诊断左房扩大时,敏感度和特异度分别为86.49%和67.74%.结论 对于长期右室心尖部起搏的患者,pQRS时限与左心大小及左心室收缩功能相关;pQRS时限延长(≥180ms),提示左心房扩大.

    作者:罗红;李存仁;刘志东;李雪峰;刘丽媚;阿雪波 刊期: 2011年第08期

  • 广州市越秀区2008-2009年手足口病流行病学特征

    目的 探讨广州市越秀区手足口病的流行病学特征,为制定科学的防控措施提供依据.方法 统计分析从国家疾病监测信息管理系统获得的越秀区手足口病病例资料.结果 广州市越秀区2008-2009年共发生手足口病1 331例,2008年发病率为3.96/万,2009年发病率为7.50/万,2009年手足口病的发病率明显上升(X2=125.7,P<0.001).男女比为1.61:1,2~4岁组儿童发病率高,4-6月为发病高峰,流动人口密集的地区发病率较高,流行期间易在托幼机构中引起暴发.2008年及2009年报告实验室确诊病例为61例和120例,分别占总报告例数的12.71%和13.78%,其中2008年EV71占优势,2009年则是CoxA16占优势.结论 手足口病的发生有明显的地区、年龄和时间差异,掌握手足口病流行病学特征,将有助于更好地开展预防和控制工作.

    作者:湛柳华;周文;罗晓风;肖晓玲;周德谦;曾维斌;顾哲青 刊期: 2011年第08期

  • 荆州市疾病预防控制机构人力资源现况分析

    目的 了解荆州市疾病预防控制机构人力资源的现状,为今后人力资源的合理配置提供参考依据.方法 收集2009年荆州市市、县(市)两级疾病预防控制中心人力资源的资料,采用Excel 2003进行汇总统计,运用SPSS13.0对数据资料进行描述性统计分析.结果 全市两级疾病预防控制机构中35~55岁年龄段职工占62.14%;研究生学历人员仅占0.72%,本科学历占20.83%;高、中、初级职称比例为1.28:5.65:3.07;业务与行管工勤人员比例分别为74.82%和25.88%.高级职称和本科学历及以上人员中,市级分别占78.13%和54.62%,县(市)级疾病预防控制机构分别占21.88%和45.38%.结论 人力资源的配置结构不合理,分布不均衡,应加强继续医学教育,采取优惠政策引进高层次的人才.

    作者:吕叶静 刊期: 2011年第08期

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主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会