学术投稿

体外人巨细胞病毒感染细胞细胞周期素表达改变与细胞病变的关系

陈敦金;赵杨;闻良珍;佘若菁

关键词:人巨细胞病毒, 细胞周期蛋白, 人胚肺成纤维细胞, 流式细胞仪, 蛋白免疫印记法
摘要:目的探讨人巨细胞病毒( human cytomegalovirus, HCMV)感染的人胚肺成纤维上皮细胞( human embryo lung fibroblast, HEL)细胞周期素 E (cyclin E)、 D (cyclin D)、 A (cyclin A)、 B (cyclin B)表达的改变与细胞病变的关系.方法建立体外 HCMV感染细胞膜型,观察感染细胞感染 12、 48h后细胞病变( cytopathologic effects, CPE);并在相同时间点收获细胞,用乙醇固定 HCMV感染的宿主细胞后用 PI染色,经流式细胞术( FACSVantage)根据细胞 DNA倍性分选出 G1、 S、 G2/M期细胞,然后分别取等量细胞裂解, 用 Western blot分析上面各不同时相细胞中 cyclins的表达.结果 ①培养 12h,仅病毒感染组在电镜可观察到细胞肿胀,其余各组未见明显病变;②培养 48h,与 HCMV169感染组相比,药物干预 HCMV169感染 HEL两组细胞中,光镜及电镜 CPE程度较轻,正常组细胞无 CPE;③乙醇固定细胞经流式细胞术分选,感染 12、 48h细胞均以 G1为主,少见 S期细胞、未见 G2期和 M期的细胞,与正常对照组比较有显著差异( P< 0.05);根据细胞 DNA倍性分选出的各期细胞裂解行 Western blot检测,正常细胞未检测到 cyclins,感染细胞中 cyclin E、 cyclin D有明显表达,未见 cyclin A、 cyclin B的表达.④ Western blot对分选后的感染细胞中 cyclin E、 cyclin D表达的检测与流式细胞术分析的结果一致.结论体外 HCMV感染细胞细胞周期进程受阻与细胞病变关系密切,细胞周期进程异常可能是导致细胞病变的病理学基础.
热带医学杂志相关文献
  • 日本血吸虫线粒体 DNA的遗传变异

    目的对中国不同自然隔离群的日本血吸虫线粒体 DNA进行遗传变异的研究,为中国日本血吸虫地域株的划分提供依据.方法采用聚合酶链反应( PCR)技术对中国 7省 11地日本血吸虫的线粒体 NADH脱氢酶 1( ND1)和细胞色素 C氧化酶 1( CO1)基因片段进行扩增,将扩增产物测序,计算序列遗传距离( D).用 SAS统计分析软件绘制聚类图.结果两片段 PCR扩增产物分子量分别为 450与 470左右;其中中国大陆与中国台湾日本血吸虫之间的 D为 0.1710~ 0.5003;中国大陆各地域株之间 D为 0~ 0.4179;中国大陆山区型日本血吸虫之间 D为 0;中国大陆湖沼洲滩型日本血吸虫株之间 D为 0.0451~ 0.1481;湖北省境内 5个不同地域株之间 D为 0~ 0.0112.结论中国日本血吸虫在线粒体 DNA水平上至少可分为不同层次的 5类:①中国台湾;②云南洱源、四川天全;③湖北 5地; ④安徽贵池、湖南岳阳、江西新建.其中①与其它余几类在总体上可分为两大类.

    作者:郭凯文;牛安欧 刊期: 2004年第04期

  • 广州市白云区酱油卫生质量监测结果分析

    目的了解与比较我区酱油生产厂家与工厂食堂的酱油卫生质量状况,为我区开展食品卫生监督工作提供一项可靠依据.方法 随机抽取辖区酱油生产厂家生产的和工厂食堂食用的酱油样品,按 GB2717-1996<酱油卫生标准>的检验项目进行检验与评价.结果共抽检 82份酱油,总合格率为 64.6%,生产厂家样品合格率为 2.9%,工厂食堂样品合格率为 46.3%.单项指标显示,厂家样品氨基酸态氮合格率为 87.8%,较食堂样品此项目的合格率 48.8%为高,总酸的合格率二者分别为 100%和 92.7%,苯甲酸的合格率分别为 92.7%和 95.1%,菌落总数的合格率分别为 97.6%和 95.1%.结论 影响酱油卫生质量的主要指标为氨基酸态氮不合格以及总酸、苯甲酸钠、菌落总数超标,提示厂家生产和工厂食堂食用酱油的卫生质量状况存在严重问题,特别是工厂食堂食用的酱油,这些问题应当引起卫生监督部门的高度重视.

    作者:李荔 刊期: 2004年第04期

  • 外伤性截瘫患者的整体护理

    目的探讨为外伤性截瘫患者进行整体护理的体会.方法对 52例不同年龄外伤性截瘫患者进行心理护理、手术前后护理及预防并发症的护理.结果 由于及时的治疗、精心的护理,避免了脊髓损伤的加重和并发症的发生.结论为外伤性截瘫患者进行细致的护理对病情的转归和预防及减少并发症的发生有着重要的意义.

    作者:李秀珍;邓树珍;李桂梅;彭红霞;黄雪娟;李红芳 刊期: 2004年第04期

  • p38 MAPK 信号转导通路研究进展

    丝裂原活化蛋白激酶( mitogen activated protein kinase, MAPK)是细胞内的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,它存在于大多数细胞内,是真核细胞转导细胞外信号到细胞内引起细胞反应的一类重要信号系统.它通过影响基因的转录和调控,进而影响细胞的生物学行为,如细胞增殖、分化、转化及凋亡等 [1].研究发现,其中的 p38 MAPK信号通路参与了细胞的生长发育及细胞间功能同步等多种生理过程,并与炎症、应激反应的调控密切相关,被认为是细胞信息传递的交汇点和共同通路.

    作者:唐皓;马中富 刊期: 2004年第04期

  • 蒿属花粉 cDNA文库的构建和初步鉴定

    目的构建蒿属花粉 cDNA表达文库.方法应用定向克隆技术将相应 dscDNA片段插入λ ExCell/Not I/EcoR I/CIP载体的 Not I和 EcoR I双酶切位点间,经包装、转染宿主菌,构建成 cDNA文库.检测文库库容量和重组效率,并采用 PCR方法对插入片段大小进行分析.结果 成功构建了一个含有 5.6× 105个重组子的 cDNA表达文库,重组率为 100%,插入片段大小平均约 1.3kb.结论 所建文库容量及插入片段大小适合对蒿属花粉特异性重组变应原的进一步研究.

    作者:刘志刚;吉坤美;高波;何毅华;黄妩姣;吴晓蔓 刊期: 2004年第04期

  • 广州市 1999~ 2002年境外人员肺结核病监测情况分析

    目的研究境外人员结核病检出情况,防止结核病传入.方法采用普通 X线胸片和痰涂片检查的方法进行肺结核病监测.结果 1999~ 2002年广州口岸 10 901名境外人员中共检出肺结核 223例,总检出率 2 050/10万.其中活动性肺结核 21例,检出率 193/10万;痰涂片检查 19例,阳性 5例,涂阳率 26.3%.结论结核病检出率呈上升趋势,检出的活动性肺结核病例全部来自亚洲.结合文献就如何加强对境外人员肺结核病监测,提出了几点措施.

    作者:王向阳;李华;曾妍;雷兆良 刊期: 2004年第04期

  • 卡氏肺孢子虫包囊形态学数据和参数的建立和分析

    目的建立并分析卡氏肺孢子虫包囊的形态学数据和参数.方法 使用计算机图像分析系统测量卡氏肺孢子虫包囊的长径、短径、周长及等效直径,计算其面积、体积、圆球度及成熟包囊数量等数据.结果包囊长径大值为 8.31μ m,小值为 2.31μ m;包囊短径大值为 6.30μ m,小值为 1.69μ m;包囊周长大值为 25.43μ m,小值为 6.83μ m;包囊面积大值为 38.53μ m2,小值为 3.36μ m2;包囊体积大值为 164.73μ m3,小值为 4.64μ m3.结论 卡氏肺孢子虫包囊形态学数据和参数的建立为量化及评价虫体的形态奠定了基础.

    作者:宫玉香;常志尚;孙勇力;张忠广;曾宪忠;王元松 刊期: 2004年第04期

  • 广州市服务行业从业人员健康调查

    目的了解广州市服务行业从业人员的健康状况.方法以整群抽样方式在 2002、 2003年抽取观察对象,收集相关资料和血清标本,进行丙氨酸转氨酶( ALT)、乙肝血清标志物( HBVM)和肠道致病菌的检测.结果 2002、 2003年服务行业从业人员中检测结果异常率分别为 8.5%、 9.2%;其中 HBsAg阳性人数分别占检测结果异常者的 93.2%、 85.4%.结论广州市服务行业从业人员检测结果异常中以 HBsAg阳性占首位,应加强对易感人群的预防乙型肝炎的健康教育及乙肝疫苗的预防接种.

    作者:许宏建;岑咏珍;刘芳兰;孟瑞琳;何由成;刘少梅 刊期: 2004年第04期

  • 中式肉干生产过程中HACCP系统的应用探讨

    目的探讨 HACCP体系在中式肉干等熟肉制品加工生产过程中的运用.方法参照卫生部食品企业 HACCP实施指南,选择广州某区肉类制品公司,通过对产品描述,生产加工过程的危害分析,确定危害性显著的控制措施.结果 初步确定冻肉验收、烘烤、探测金属碎屑三个环节为关键控制点.针对关键控制点提出相关干预措施.结论该系统是适合中式肉干类熟肉制品食品安全卫生质量管理系统.

    作者:马林;谭铭雄;贾煦;彭志丽;何洁仪 刊期: 2004年第04期

  • 喉罩内气管插管运用于临床急救的可行性研究

    目的为临床急救工作探索一条更便捷、更实用、更易普及的常规人工通气方法,以提高急救工作的成功率.方法在急救工作中随机选择 100例需急救气管插管者,比较运用喉罩内气管插管 (intubating, LMA)与常规气管插管的所耗时间及成功率.结果 急救者(非麻醉科医师)运用常规气管插管对病人进行人工通气成功率仅为 9%,所费平均时间 6min 26s,其余以喉罩内气管插管对病人进行人工通气均获成功,所耗时间平均 2min 40s.结论 喉罩内气管插管比现行常规气管插管更简易、更可靠、更易普及推广,前者可取代后者作为医疗常规的地位.

    作者:肖生红;詹鸿;陈国蓉 刊期: 2004年第04期

  • 婴儿急性上消化道出血75例临床研究

    目的为探讨引起婴儿急性上消化道出血的常见原因、出血程度与临床表现,以研究防治方法.方法对 75例婴儿进行生命体征评估及行相应实验室检查,并进行相关影像学检查.结果维生素 K缺乏症 25例,占 33.33%;应激性溃疡 23例,占 30.67%;反流性食管炎 7例,占 9.33%;感染性腹泻 5例,占 6.67%;坏死性小肠炎 5例,占 6.67%;肠套叠 3例,占 4%;多脏器功能损害 3例,占 4%;白血病 2例,占 2.67%;十二指肠憩室 1例,占 1.33%.伴面色苍白 62例,占 82.67%;全身软弱,哭声无力 60例,占 80%;四肢冷 55例,占 73.33%;少尿 49例,占 65.33%;神志不清 28例,占 37.33%;血压下降 53例,占 70.66%.治愈 69例( 84%),未愈 3例( 4%),死亡 3例( 4%).结论婴儿急性上消化道出血病因以维生素 K缺乏和应激性溃疡为主,极易出现失血性贫血和失血性休克;应采取积极治疗原发性疾病、注意喂养和及早使用维生素 K为主的综合防治方法.

    作者:张小玲 刊期: 2004年第04期

  • 江滩型地区不同季节人畜血吸虫感染规律的研究

    目的了解在当前农村社会、经济状况下江滩型地区人畜血吸虫感染规律,为制定符合该类地区特点的血吸虫病防治对策提供依据.方法分别在 2002年 6、 9月下旬和 12月上旬用单纯随机抽样的方法在三联村 5周岁以上常住沿江居民中随机抽取 500人,利用 Kato-Katz法进行 1粪 3检,阳性者计算虫卵数,对该村所有耕牛用棉析孵化法检查是否感染,以判断春、夏、秋不同季节人畜血吸虫感染情况.结果总体看来,人群感染率夏季为 12.93%,显著高于春( 4.23%)、秋 (2.69% )季,春季略高于秋季,但差异无显著性.不同性别、职业、文化程度人群夏季感染率均显著地高于春秋季,除农民春季明显高于秋季外,其余春秋季之间差异均无显著性.病人感染度秋季 (178.14± 147.44)高,夏季 (127.03± 186.52)次之,春季 (18.96± 13.54)低.耕牛感染率夏季 (42.62% )显著高于春 (7.41% )、秋 (1.75% )季,春季略高于秋季,但差异无显著性.结论江滩型地区人畜感染血吸虫的主要季节在夏季,秋季感染率低.

    作者:何家昶;夏长根;但新民;王恩木;姚振琦;俞宗国;蔡伟;吴维铎;聂明保 刊期: 2004年第04期

  • 信号序列捕获--一种筛选分泌性和膜性蛋白的工具

    分泌性和膜性蛋白在自身稳定、体液调节、细胞粘附、细胞间通讯等多种生物过程中起着重要作用.Tashiro等( 1993年)首先报道了可以选择性回收编码分泌性蛋白的信号序列捕获( signal sequence trap, SST)方法,近年在标记分子选择、表达细胞以及信号序列来源等多方面进行了改进,本文就这一领域的研究进展作一综述.

    作者:张奉学;余传信 刊期: 2004年第04期

  • 广州市东山区2001~ 2002年学校卫生综合评价分析

    目的了解和掌握东山区中小学学校卫生状况,探讨存在的问题及解决办法.方法对 56所中小学 2001~ 2002年学校卫生综合评价情况进行分析.结果 56所中小学综合评价均为合格 ,其中环境噪声、教室采光、学校食品卫生、课桌椅、教室照明和厕所合格率分别为 16.07%、 48.21%、 64.3%、 89.13%、 94.64%和 98.21%.结论对学校加强预防性卫生监督 ,有助于提高监督成效.

    作者:张惠洁 刊期: 2004年第04期

  • 广州市东山、越秀区居民肥胖与高血压关系分析

    目的探讨广州市东山、越秀区居民肥胖与高血压的关系.方法根据 2002年广东省居民营养与健康状况调查方案,采用多阶段随机整群抽样方法,随机抽取广州市东山、越秀区常住居民,体检获取身高、体重、腰围、血压值,并对资料进行描述性分析.结果两个区居民超重率男性为 33.3% (标化率 26.66% ),女性为 28.4% (标化率 21.91% );肥胖率男性为 6.7% (标化率 6.4% ),女性为 7.2% (标化率 5.09% );标化超重率、标化肥胖率男、女性间差异均没有统计学意义( P >0.05);男女性的平均收缩压、舒张压均随着体重指数的上升而上升( r男收缩压 =0.751,r男舒张压 =0.547, r女收缩压 =0.801,r女舒张压 =0.587,P< 0.01);男女性的高血压患病率随着体重指数的上升而上升(趋势χ 2男 =30.32,趋势χ 2女 =121.32, P< 0.01);男女性腹部肥胖组的平均收缩压、舒张压及高血压患病率均高于腰围正常组( P< 0.01).结论超重和肥胖与高血压有关联,是高血压的重要影响因素.

    作者:刘伟佳;邱小玲;方芳;马文军;罗不凡;潘冰莹 刊期: 2004年第04期

  • 大学生蠕形螨感染的调查分析

    目的调查广州医学院 2001级大学生人体蠕形螨的感染情况,探讨蠕形螨感染与皮肤疾病、宿舍分布的关系.方法采用透明胶纸粘贴法对 468名在校大学生蠕形螨感染进行调查,同时观察其面部皮肤状况,询问其所住宿舍状况并记录于调查表内.结果广州医学院 2001级大学生 468人,检出人体蠕形螨者 85人,感染率 18.16%.男学生感染率为 18.37% (52/ 283人 ),女学生为 17.84% (33/ 185人 ),两者无显著性差异 (P >0.05).从学生来源地看,城镇学生感染率为 15.94% (51/ 320人 ),农村学生为 22.97% (34/ 148人 ),两者无显著性差异 (P >0.05).感染者的感染度以每条透明胶纸 1~ 3条虫为多,占 87.06% (74/ 85人 ).检获的螨大多为毛囊蠕形螨 ,占 70.59% (60/ 85人 ),单一感染皮脂蠕形螨仅 15.29% (13/ 85人 ),两者混合感染为 14.12% (12/ 85人 ).面部有痤疮、毛囊炎或毛囊扩张者蠕形螨感染率均高于面部皮肤正常、有痒感者( P< 0.05);有痒感者蠕形螨感染率与面部皮肤正常者无显著性差异 (P >0.05).感染蠕形螨者具有显著的宿舍聚集性( P< 0.01).结论广州医学院 2001级大学生人体蠕形螨感染较为普遍.感染大多为毛囊蠕形螨,少数为皮脂蠕形螨及两者混合感染,两种蠕形螨的感染度都属轻度.蠕形螨感染可能是痤疮、毛囊炎或毛囊扩张等皮肤疾病的致病因素之一.蠕形螨感染可以通过同住一间宿舍增加相互感染的机会.

    作者:陈新宇;沈浩贤;李小敏;林文苑;李甘平;阮玉芬;王欣珏;蔡翠婷 刊期: 2004年第04期

  • 乙型肝炎患者血浆D-二聚体定量检测及临床研究

    目的探讨乙型肝炎患者血浆 D 二聚体定量检测的临床诊断价值.方法应用全自动生化分析仪,以免疫比浊法分别测定 125例乙型肝炎患者及 68例正常人 D 二聚体定量水平.结果乙型肝炎患者血浆 D 二聚体定量水平均高于正常对照组( P< 0.001),且随着病情的严重程度而增高.结论 乙型肝炎患者体内呈现不同程度的继发性纤溶,提示 D 二聚体可作为一项监测乙肝患者病情的实验指标.

    作者:邓小燕;潘昆贻;雷尉华 刊期: 2004年第04期

  • 兴宁市1999~ 2003年新生儿破伤风流行病学分析

    目的分析广东省兴宁市 1999~ 2003年新生儿破伤风( NNT)发病情况,探讨有效的防治措施.方法对 1999~ 2003年兴宁市新生儿破伤风疫情资料进行分析.结果 5年共报告 NNT 10例,其中本地人口病例 4例,流动人口 4例,外地前来就医 2例, 病死率 20%.本地发生病例 8例分布于本市 7个镇.7月病例多,占 40%.发病日龄集中在出生后 5~ 7d.结论 今后应继续推广住院分娩,普及新法接生,加强流动人口育龄妇女的妇幼保健工作,宣传新生儿破伤风防治知识,革除产妇野外分娩的陋俗,有计划开展育龄妇女破伤风类毒素免疫接种工作,继续做好 NNT疫情监测工作,巩固兴宁市消除新生儿破伤风目标成果.

    作者:赖利玲;傅浩忠 刊期: 2004年第04期

  • 军团菌分离培养法的改进及应用

    目的建立完善军团菌分离培养的检验方法,提高阳性检出率.方法用分离培养法,依据菌落形态和在缺乏 L 半胱氨酸的平板和血平板不生长初判军团菌,再用血清凝集进行分型,结合生化反应和 PCR结果进行确证.结果用本文方法成功检测出军团菌,在 2003年对广州地区各种水体进行军团菌检测, 121宗水样中分离出军团菌 31宗,总污染率为 25.6%,其中公共场所冷却塔水中军团菌污染率为 43.48%.阳性率与国内外报道接近.结论本方法有很好的分离培养效果,广州地区部分水体中存在军团菌污染,尤以公共场所冷却塔水中军团菌污染情况较为严重.

    作者:何晖;龚玉姣;莫自耀 刊期: 2004年第04期

  • 社区卫生服务站护理人员现况调查分析

    目的为有计划有针对性地进行社区护理人员培训提供依据.方法采用统一问卷调查 , 调查内容包括一般资料、相关知识学习情况、从事护理工作年限和在岗培训情况.结果 护理人员学历偏低,社区护理所必备的相关知识掌握不够,从事社区护理时间短和经验不足,培训机会少,难以满足不断增长的社区卫生护理需求.结论 必须采取相应的措施,加强社区护理人员的培训,提高社区护理队伍的水平.

    作者:曾红莲 刊期: 2004年第04期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会