房思宁;杜晓红;李放娟;郑利雄
目的构建PGEX-6P-3-CCT原核表达载体,获得大量纯化的LMP1羧基端蛋白.方法通过RT-PCR技术从B95-8细胞中扩增EBVLMP1 CCT cDNA,克隆至PGEM-T easy载体上并测序.利用引物上的BamH I与EcoRI酶切位点将CCT基因插入PGEX-6P-3,转化大肠杆菌BL21,限制性内切酶消化鉴定.IPTG诱导重组菌株表达,用SDS-PAGE与Western blot对表达产物进行鉴定,并用Sepharose 4B亲和层析柱对表达产物进行纯化,PreScissionProteas酶对融合蛋白进行解离.结果扩增的LMP1 CCT长度为597bp,测序结果与已知序列吻合.重组子经酶切鉴定,获得PGEX-6P-3-CCT原核表达菌株,Western blot表明重组蛋白能被LMP1单克隆抗体特异结合.获得约51kDa的PGEX-6P-3-CCT融合蛋白,分离纯化出约21kDa的LMP1 CCT蛋白.结论成功获得EBV LM1 CCT蛋白,为研究LMP1致瘤机制,研制生物抗癌药物奠定基础.
作者:张雪雁;汤郡;杨英;马桂璋 刊期: 2003年第02期
目的了解大专学生的心理健康状况,为学生的健康教育和心理咨询提供合理建议.方法采用症状自评量表(SCL-90)对教育学院102名学生进行问卷调查.结果大专学生除了敌对一项与全国常模相近无差异(P>0.05)外,躯体化低于全国常模(P<0.01),其他各项均值高于全国常模(P<0.01).结论大专学生心理健康状况不容乐观,应加强心理健康教育及心理咨询.
作者:陈旸 刊期: 2003年第02期
目的构建EBV-LMP1基因的杆状病毒重组供体质粒,包装重组LMP1的杆状病毒,感染昆虫细胞进行表达.方法先将已克隆的LMP1 cDNA与线性化的pFASTBAcHTb进行连接,使pFASTBACHTb-LMP1与DH10BAc感受菌进行转座重组,利用抗性及蓝白斑筛选重组Bacmid/LMP1克隆,提取Bacmid/LMP1转染昆虫细胞Sf9包装杆状病毒,利用病毒感染Sf9细胞进行蛋白表达,通过免疫荧光、SDS-PAGE和Western-blot检测表达情况.结果获得了重组LMP1的杆状病毒,细胞能表达出与LMP1单抗结合的蛋白,分子量为63kDa左右,细胞可直接分泌LMP1蛋白至上清.结论LMP1能在昆虫细胞中获得良好表达,为研究肿瘤疫苗及LMP1在EBV致瘤分子机理中的作用奠定了基础.
作者:林勇平;吴淑华;杨英;汤郡;马桂璋 刊期: 2003年第02期
目的了解瑞安市大力开展浙江省结核病控制项目,切实有效地预防与控制结核病的传播与流行.方法根据<浙江省结核病控制项目实施方案>的精神,特制订<瑞安市结核病控制项目实施细则>.结果(1)明确项目组织与分工,具体实施市疾控中心对本市贫困肺结核病人抗结核药品及辅助检查费的减、免审核批准,负责全市结核病防治业务的归口管理,落实肺结核病的诊断、治疗、管理及有关技术规范.(2)通过项目宣传及培训,促使医疗单位对病员报告及转诊管理,提高了结防督导员的业务水平和归口管理能力.(3)通过项目督导和督查,提高了肺结核病人的管理率、规则治疗率,且使门诊肺结核病人诊治数大大增加,2001年门诊初诊数为654例,菌阳数124例;2002年同期达到1200例,菌阳数238例.结论结防工作中也反映出我市基层防保队伍力量和人员素质低下,多数医疗单位不重视归口管理工作,痰检阳性率低,为此,完善督导机制,加强随访,努力提高菌阳检出率是非常迫切和必要的.
作者:郑玉明 刊期: 2003年第02期
本文在多年实践的基础上,对制作寄生虫虫卵永久性玻片标本的方法进行了改进,并详细介绍了两种具体制作方法.用改进方法制作的标本,虫卵能保持原来的形态及色泽,清晰可见,易于辨认,并可永久保存,有效地解决了使用传统方法制作的寄生虫虫卵玻片标本易出现气泡、空隙和发霉,虫卵变形,不便观察和保存的问题.
作者:樊中丽 刊期: 2003年第02期
目的对1例侵染颅脑之粪类圆线虫作出诊断与治疗.方法取病人脑脊液检查.结果在病人的脑脊液中检及1条粪类圆线虫丝状蚴,根据其食道占虫体40%和尾端分叉特点诊断,治疗用阿苯哒唑20mg/kg/d×9.结论国内首例引起脑膜炎的粪类圆线虫得到诊断与治疗.
作者:李友松;林金祥;陈宝建;许龙善 刊期: 2003年第02期
聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术是一种简便、快速、灵敏的基因突变分析方法,能有效地检出碱基突变.目前,该方法在寄生虫学领域已得到日益广泛和深人的应用,尤其是近几年来用于寄生虫的分子分类学、分子遗传学、虫种及虫株鉴定等方面的研究已取得了很大的成功.本文综述了该技术的基本原理、影响因素、研究进展及其在寄生虫学方面的应用.
作者:陈红玲;林瑞庆;朱兴全;李国清 刊期: 2003年第02期
目的观察协同刺激分子B7-1/2(CD80/CD86)对日本血吸虫感染小鼠后Th1/Th2细胞因子水平的影响,探讨B7-1/2介导Th1/Th2免疫偏移对控制血吸虫虫卵肉芽肿的作用.方法取小鼠感染后6、8、10和12w的脾淋巴细胞用抗CD80mAb和抗CD86mAb处理后培养72h,用ELISA双抗体夹心法测定培养上清中IFN-γ和IL-4的表达水平的动态变化.结果抗CD80mAb和抗CD86mAb对IFN-γ的抑制作用不明显,但二者均能显著抑制IL-4的表达水平,尤其是抗CD86mAb对IL-4抑制作用非常显著.结论通过干预B7:CD28协同刺激途径可以调节Th1/Th2细胞因子的表达水平,而且B7-2分子对Th2反应的影响作用大于B7-1分子.B7:C1D28协同刺激途径可以调节Th1/Th2免疫偏移,为控制日本血吸虫肉芽肿病变提供了一种新途径.
作者:田芳;夏超明;骆伟;龚唯;周卫芳 刊期: 2003年第02期
目的构建恶性疟原虫海南株线粒体复合体Ⅱ琥珀酸-泛醌还原酶辅基铁-硫蛋白(iron-sulfur protein,Ip)基因原核表达质粒pET28α-Ip,测定Ip基因序列,为研究铁-硫蛋白基因功能奠定基础.方法采用PCR技术从恶性疟原虫海南株基因组DNA中扩增出Ip基因,扩增产物经纯化后,用BamHI+XhoI双酶切,定向克隆人pET28α质粒,转化大肠杆菌DH5α,再用BamHI+XhoI酶切及PCR扩增对重组子进行鉴定.用Sanger双脱氧链终止法进行DNA序列测定,并进行同源性比较.结果筛选出编码海南株Ip基因的原核表达质粒pET28α-Ip,海南株Ip基因序列与K1、3D7株高度同源.结论pET28α-Ip重组质粒的构建,为进一步研究铁-硫蛋白基因奠定基础.
作者:马长玲;余新炳;单志新;吴忠道;徐劲 刊期: 2003年第02期
因在器官发育及细胞程序性死亡的遗传调节方面所作出的突出贡献,Sydney Brenner,H.Robert Horvitz及Joln E.Sulston荣获2002年度诺贝尔生理学/医学奖.本文概要介绍这一生命科学的重大发现,以及这一科学发现和其它生命科学研究所用的优秀模型生物-秀丽新杆线虫.
作者:林瑞庆;陈红玲;朱兴全;宋慧群 刊期: 2003年第02期
目的了解贯众(Dryopteris crossirhizomz)不同提取液对革兰氏阳性球菌的抑菌作用.方法分别用水以及3种不同pH值的70%乙醇为溶媒提取贯众干品以制备贯众提取液,利用打孔法和试管稀释法测定提取液对13种微生物的抑制效果.结果每1ml含生药1g的贯众醇提液、水提液对革兰氏阳性菌有较强的抑制作用,尤其是革兰氏阳性球菌如金黄色葡萄球菌和甲型溶血性链球菌等.对革兰氏阴性菌和真菌的抑制作用较弱,但对普通变形杆菌则有较强的抑制作用.不同pH值的抽提溶剂对药物的有效抑菌成份的提出效果不同,抽提溶剂pH越小,有效成份的提出效果越好.结论贯众醇提液、水提液对革兰氏阳性菌有较强的抑制作用,尤其是对革兰氏阳性球菌,而对革兰氏阴性菌和真菌的抑制作用则较弱.贯众的抗菌成份易溶于水,抽提效果随pH减小而增加.
作者:罗海华;潘实清;刘长秀;周红;龙启才;周金美 刊期: 2003年第02期
目的了解广东省兴宁市城乡中小学生视力不良现况.方法对市教育局直属城乡20所中小学,其中中学14所,小学6所共36032名学生进行普查,采用统一的灯箱对数视力表,悬挂时5.0行与被检查者双眼同一水平高度;检查距离为5m,检查人员经过统一培训,统一操作方法和程序.判断标准:被检查者单侧裸视力<5.0为视力不良.视力不良分类标准:4.9为轻度视力不良,4.6~4.8为中度视力不良,≤4.5为重度视力不良.结果检查学生36032名,视力不良14543人,视力不良率为40.36%.随年级增高而明显上升,差异有统计学意义(P<0.01),并有逐年递增趋势(P<0.01).城镇学生视力不良率高于乡村学生,差异有统计学意义(P<0.01).结论中小学生视力不良与学生课业负担重、视近时间、坐姿、读写习惯、用眼卫生等因素有关.因此应对师生,特别是小学生进行广泛卫生知识教育,养成良好的用眼卫生习惯,从根本上降低青少年学生视力不良的发生.
作者:罗国清;黄德恩;吴艳丽 刊期: 2003年第02期
目的调查南通市几类人群中输血传播病毒(TTV)、庚型肝炎病毒(HGV)和人巨细胞病毒(HCMV)的感染状况.方法选择献血员、非肝病人群、急性病毒性肝炎(AH)与慢性病毒性肝炎(CH)患者、肝炎肝硬化(LC)以及原发性肝癌(PHC)患者为调查对象.采用半巢式聚合酶链反应检测TTV DNA、巢式聚合酶链反应检测HGVRNA、核酸斑点杂交法检测HCMV DNA.采用微量细胞毒试验方法检测人外周血T细胞亚群.结果义务献血员、非肝病人群、AH、CH、LC和PHC人群的TTV感染率分别为9.2%、24.0%、46.6%、41.6%和63.6%,后三种人群的感染率显著高于义务献血员(P<0.01).HGV感染率在有偿献血员、AH、CH和LC人群中分别为2.9%、9.6%、17.6%和13.8%,但各组之间无统计学差异(P>0.05).HCMV在非肝病人群、AH、CH和LC人群中的感染率各为26.7%、38.9%、65.8%和77.8%,CH组与LC组的感染率显著高于非肝病人群(P<0.01).结论HGV、TTV、HCMV在南通市人群包括献血员中有一定的感染率,在筛选献血员时有必要对此三种病毒进行检测,以防止其经输血途径传播.
作者:汪晓莺;汤伟;张冬雷;季玉红 刊期: 2003年第02期
目的了解非淋菌性尿道炎(NGU)支原体感染及药物敏感情况.方法应用泌尿生殖道支原体药敏试剂盒对186例疑为NGU患者的尿道或宫颈分泌物进行检测和药敏试验.结果支原体培养阳性88例,阳性率为47.31%,其次解脲支原体(Uu)阳性47例,阳性率为25.27%.药敏试验结果表明支原体对交沙霉素、阿奇霉素、强力霉素、罗红霉素敏感,敏感率分别为97.7%、96.6%、94.3%、90.9%.其次为泰利必妥、美满霉素、诺氟沙星、螺旋霉素、红霉素,敏感率分别为88.6%、87.5%、80.7%、73.9%、72.7%.敏感性低为四环素67.0%其耐药率为33.0%.结论临床治疗支原体感染引起的非淋菌性尿道炎好选用交沙霉素、阿奇霉素、强力霉素、罗红霉素.不宜选用四环素.
作者:房思宁;杜晓红;李放娟;郑利雄 刊期: 2003年第02期
目的了解2002年广州市登革热流行的临床特征.方法回顾性分析978例登革热患者的临床特征.结果临床特征为发热(100%),头痛(91.31%),全身肌痛(69.02%),骨痛(49.49%),皮疹(59.2%),白细胞及血小板显著减少分别占62.47%、62.26%;淋巴结肿大、肝肿大及脾肿大较少,分别占9.61%、3.78%、5.21%;而合并肝脏损害多(72.39%),肾脏损害较少(0.2%).结论本次登革热流行规模大,临床表现典型,合并肝脏损害较多.
作者:陈燕清;张复春;王建 刊期: 2003年第02期
目的探讨门脉高压症术后围手术期死亡原因,探讨防治措施.方法回顾分析160例肝炎肝硬化门脉高压症手术病人围手术期资料.结果围手术期死亡10例均为术后发生肝肾综合征所致.结论肝肾综合征的发生与手术前、后肝功能状况有关,尤其受到术后肝功能状况恶化的直接影响.术后肝肾综合征涉及手术创伤、术后腹水、发热、感染合并症,既往除肝硬化之外的其他疾病等因素.术前进行积极、有效的护肝和支持治疗后,在肝功能处于Child's A级水平时进行手术,可以预防和减少术后肝肾综合征.
作者:邝伟明;张辉;胡石奇 刊期: 2003年第02期
目的了解肿瘤患者院内感染发病情况,分析发生院内感染的原因,以便加强监测和防制.方法查阅1999~2002年住院病例17015份,逐份进行回顾性调查分析.结果4年中总出院人数为17015例,发生院内感染1068例,感染率为6.3%,各感染部位以呼吸道为高,占50.1%,各月份感染率以6~9月居高,院内感染与住院时间、年龄、死亡率有关,抗生素的使用率较高,微生物学送检率较低,病原菌主要为条件致病菌,其中G-杆菌占61.8%,真菌占10.9%.结论医院布局合理,各项规章制度完善,医务人员院内感染监控知识和职业道德的强化,加强院内感染的监测及院内感染漏报率、病原送检管理,合理使用抗生素等,有利于防制院内感染.
作者:邱卫黎;林志雄;黄华兰;郑立;王逸如;杨郁素 刊期: 2003年第02期
目的探讨HCV核心蛋白N端119aa片段表达产物的抗原性及用于抗-HCV抗体检测的可能性.方法把HCV C119-pET32a/BL21重组菌进行发酵表达,提取包涵体,并用阳离子柱进一步纯化目的蛋白.用Western blot及ELISA分析该融合蛋白的免疫特异性及敏感性.结果所表达的目的蛋白约占菌体总蛋白的20%,SDS-PAGE结果表明所纯化的目的蛋白纯度大于95%.Western blot及ELISA结果显示该融合蛋白具有良好的免疫特异性,所检测的47份临床HCV感染血清的阳性率为91.5%,而阴性对照及HBV感染血清则未见阳性结果.结论该HCV C119融合蛋白检测HCV感染患者血清具有良好的特异性和敏感性,可望用于HCV抗体检测试剂盒的研制.
作者:吴娴波;陈白虹;卢建溪;吴英松;张彦明;王萍;董文其;李明 刊期: 2003年第02期
目的分析深圳市宝安区暂住人口1995~2001年法定传染病甲、乙、丙类流行特征.方法利用法定传染病计算机联网疫情报告系统,以传染病发病率为基础进行暂住和常住人口相关指标进行描述性统计分析.结果从1995~2001年,省外暂住人口传染病发病数比省内暂住人口发病数高2.51倍,省外暂住人口传染病发病数比常住人口发病数高2.24倍.结论暂住人口传染病管理中重点是省外暂住人口.
作者:常改凤;祁志刚;魏宝升;马智超 刊期: 2003年第02期
目的探讨手指血与静脉血中葡萄糖浓度的关系.方法用血糖仪和全自动生化分析仪测定.结果同一病人的手指血与静脉血葡萄糖浓度在血糖仪上的结果一致(P>0.05).结论血糖仪检测手指血结果准确可靠.
作者:吴人凤 刊期: 2003年第02期