吴杏儿；郑磊；孙世珺
目的:研究微小RNA-497(miR-497)抑制甲状腺乳头状癌(PTC)细胞活力、侵袭和迁移的作用机制.方法:采用TargetScan 6.0软件预测miR-497的靶基因,通过萤光素酶报告基因检测法、RT-qPCR和Western blot进行靶基因验证,再通过RT-qPCR检测PTC组织中miR-497及其靶基因的表达,并通过基因转染研究miR-497及其靶基因对PTC细胞活力、侵袭和迁移的影响.结果:TargetScan 6.0软件预测、萤光素酶报告基因检测法、RT-qPCR和Western blot均证明AKT3是miR-497的直接靶基因.此外,PTC组织中的AKT3表达水平较正常组织高(P<0.05),且与miR-497表达呈负相关(r=-0.5737,P<0.01).下调AKT3可以抑制PTC细胞的活力、迁移和侵袭,与miR-497过表达在PTC细胞中具有相似的作用.结论:miR-497通过直接靶向调节AKT3抑制甲状腺乳头状癌细胞的活力、侵袭和迁移.
作者：张莉君；叶颖；张遂亮；庄菊花；夏伟 刊期： 2018年第12期
目的:检测含F框/WD重复域蛋白7(FBXW7)在1型糖尿病大鼠心肌中的表达,探究其在糖尿病心肌病发生发展中的作用.方法:实验将大鼠分为非糖尿病组(ND组)及糖尿病4、8和12周模型组(DM组),采用链脲佐菌素(60 mg/kg)一次性腹腔注射建立1型糖尿病大鼠模型.HE染色法观察心肌病理结构变化,Western blot和免疫组化法检测心肌中FBXW7蛋白的表达变化.结果:显微镜下可见糖尿病组大鼠心肌局灶性心肌细胞变性、坏死.Western blot和免疫组化结果均显示,4周、8周及12周DM组大鼠心肌中的FBXW7表达相对于ND组显著增加(P<0.01),但是相比于4周和8周DM组,12周DM组大鼠心肌中的FBXW7表达相对下降(P<0.05).结论:随着糖尿病病程的延长,FBXW7在糖尿病心肌病大鼠心肌组织中的表达呈现先升高后降低的趋势,提示其在糖尿病心肌病发生发展中发挥了一定的作用.
作者：申屠路媚；卢敏；王燕；牟艳玲 刊期： 2018年第12期
目的:研究过表达吞蛋白A2(endophilin A2,EndoA2)对异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的心肌肥大的影响.方法:取健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、Ad-EndoA2组、ISO模型组及ISO+Ad-EndoA2组,其中Ad-EndoA2组和ISO+Ad-EndoA2组于给药前1 d左心室壁注射Ad-EndoA2腺病毒,假手术组和ISO组注射磷酸缓冲盐溶液,然后分别连续7 d皮下注射生理盐水或ISO.7 d后用小动物超声测定心功能指标,然后处死大鼠,收集心脏,以心脏重量指数、HE染色及胚胎基因表达水平评价心肌肥大情况,Western blot法检测自噬相关蛋白LC3和P62的表达.结果:小动物超声结果显示,与假手术组相比,ISO组大鼠处于心肌肥大代偿期(左室收缩期前壁厚度、左室收缩期后壁厚度、射血分数和短轴缩短率升高,左室收缩内径及心输出量下降,均P<0.05),心脏重量指数、HE染色及RT-qPCR结果也均显示心脏发生了明显肥大(P<0.05),过表达EndoA2可明显减轻ISO诱导的心肌肥大,改善心功能(P<0.05).Western blot结果显示,过表达EndoA2明显逆转ISO引起的自噬水平降低(P<0.05).结论:过表达EndoA2可减轻ISO诱导的大鼠心肌肥大,可能与加强自噬有关.
作者：王昕秋悦；湛青平；刘芸 刊期： 2018年第12期
目的:研究紫薯花色苷提取物对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化和高脂血症的作用.方法:将8周龄雄性ApoE-/-小鼠随机分为对照组、高脂饮食组、花色苷低剂量组、花色苷高剂量组和立普妥组,共5组(n=10),除对照组小鼠饲喂普通饲料外,其它4组在饲喂高脂饲料8周后,再给予蒸馏水、紫薯花色苷提取物(1.67 mg·kg-1·d-1和8.35 mg·kg-1·d-1)或立普妥(阿托伐他汀钙,2 mg·kg-1·d-1)灌胃8周.心脏取血检测小鼠血清的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;油红O和HE染色评估主动脉根部斑块面积和肝脏的脂肪变性程度;RT-q PCR方法检测主动脉和肝脏中炎症因子的表达.结果:与对照组比较,高脂饮食组小鼠血清的TC、LDL-C和HDL-C水平明显升高(P<0.01),动脉的斑块面积明显增大(P<0.01),肝脏的脂肪变性明显,白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达增加(P<0.01),而过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)的表达降低(P<0.05);高剂量紫薯花色苷提取物可以明显降低TC、TG和LDL-C水平(P<0.01),减少动脉的斑块面积(P<0.01),减轻肝脏的脂肪变性程度,同时还可以降低IL-1β、IL-6和MCP-1的表达(P<0.05),提高PPAR-α的表达(P<0.05).结论:紫薯花色苷提取物可调节血脂,降低炎症细胞因子表达,从而抑制动脉粥样硬化的发展和高脂血症引起的肝组织脂肪变性.
作者：韦永芳；刘寒英；严艳花；朱柳 刊期： 2018年第12期
目的:研究KDM5 B基因在乳腺癌组织中的表达情况,并探讨其表达差异与患者临床病理资料和预后的关系.方法:从肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中收集113例正常乳腺组织和1090例乳腺癌数据集,下载KDM5B mRNA表达谱资料;收集中山大学附属第三医院甲乳外科2015年～2016年乳腺癌切除标本共90例,采用real-time PCR的方法检测乳腺癌及其癌旁组织中KDM5B mRNA的表达量,取中位数分为高表达组与低表达组,分析其与临床资料及病例特征的关系;利用Kaplan-Meier plotter分析KDM5B mRNA表达与乳腺癌患者预后的相关性.结果:KDM5B在乳腺癌中的表达均显著高于正常乳腺组织(P<0.01).在TCGA的乳腺癌数据中,KDM5B的表达与人表皮生长因子受体2(HER2)、雌激素受体(ER)、年龄、病理组织类型及淋巴结转移显著相关(P<0.01),与孕激素受体(PR)、绝经及远处转移无显著相关.在我们收集的乳腺癌样本中,KDM5B的表达与HER2、年龄及淋巴结转移显著相关(P<0.05),而与ER、PR、绝经、病理组织类型和远处转移无显著相关.KDM5B表达越高,乳腺癌患者总生存时间(HR=1.39,P=0.005)和无病生存时间(HR=1.32,P<0.001)越短.结论:在乳腺癌组织中KDM5B高表达,且与患者的预后相关;KDM5B的表达与乳腺癌患者HER2表达、年龄和淋巴结转移显著相关.
作者：熊志勇；吴珏堃；林良奕 刊期： 2018年第12期
目的:探讨抑制骨髓间充质干细胞外泌体的释放对其生物学特性的影响及其机制.方法:利用TALEN技术靶向性敲除Rab27a基因构建外泌体释放缺失小鼠模型,随后分离、培养并鉴定骨髓间充质干细胞,用外泌体提取试剂盒提取培养基中的外泌体,并用纳米颗粒跟踪分析(NTA)计数外泌体的数量,透射电镜观察外泌体的大小及形态.利用EdU实验及检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达来评价间充质干细胞的增殖能力.通过TUNEL染色及MTS实验检测间充质干细胞对缺氧的耐受能力.结果:敲除Rab27a的间充质干细胞释放外泌体的数量明显减少,抑制间充质干细胞外泌体的释放能显著降低其增殖及对缺氧的耐受能力.结论:抑制间充质干细胞外泌体的释放可导致其增殖能力及对缺氧的耐受能力明显降低.
作者：郭贵显；成传访；顾杰蕾；周文怡；汤晓燕；钟赟；陈颜芳；刘世明 刊期： 2018年第12期
目的:探索二甲双胍联合紫杉醇对乳腺癌MCF-7细胞活力和凋亡的影响及其可能的机制.方法:采用不同浓度(2、5、10、20、40和80 mmol/L)二甲双胍作用于体外培养的MCF-7细胞,MTT法检测细胞的活力.采用2 mmol/L二甲双胍和2.4 mg/L紫杉醇单独或联合处理细胞,并加入一磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)信号转导通路抑制剂compound C.实验分为对照组、二甲双胍组、紫杉醇组、联合组和联合+compound C组;流式细胞术检测细胞的凋亡率,采用RT-qPCR和Western blot法检测Bax、Bcl-2和caspase-3的mRNA和蛋白表达量,Western blot检测AMPK和P21蛋白的表达量.结果:不同浓度二甲双胍(2、5、10、20、40和80 mmol/L)显著抑制乳腺癌细胞的活力(P<0.05),且具有一定浓度依赖性.与对照组相比,2 mmol/L二甲双胍和2.4 mg/L紫杉醇单独或联合均可显著抑制细胞活力并诱导其凋亡(P<0.05),显著下调Bcl-2水平(P<0.05),上调Bax和caspase-3水平(P<0.05),促进AMPK和P21蛋白表达.联合使用的效果优于单独使用.加入AMPK抑制剂可削弱此作用.结论:二甲双胍联合紫杉醇可抑制乳腺癌MCF-7细胞活力,诱导其凋亡.此作用与激活AMPK信号转导通路并调节细胞凋亡信号通路有关.
作者：梁君伟；方志华；李青山 刊期： 2018年第12期
目的:探讨黄酒多酚化合物(YWPC)减轻阿霉素(即多柔比星,DOX)所致心脏毒性的作用及其机制.方法:将40只雄性SD大鼠随机分成4组:对照组、YWPC组、DOX组和DOX+YWPC组.干预4周后,超声心动图检测大鼠心功能;病理学染色观察心脏组织病理学改变;比色法、DHE染色、TUNEL染色和Western blot法检测心肌组织中心肌酶、氧化应激和凋亡水平的改变.结果:与对照组相比,DOX组左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短分数(LVFS)明显下降,而收缩期左室内径(LVIDs)和舒张期左室内径(LVIDd)明显增加;而与DOX组相比,DOX+YWPC组LVEF和LVFS增加,LVIDs和LVIDd下降(P<0.05).DOX组血清心肌损伤指标乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、天冬氨酸转氨酶(AST)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)较对照组明显增加;而DOX+YWPC组上述指标较DOX组下降(P<0.05).与对照组比较,YWPC组无明显病理学改变,DOX组出现心肌纤维排列紊乱、细胞核溶解和肌纤维解体,而DOX+YWPC组上述情况明显改善.与对照组比较,DOX组活性氧簇(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽(GSH)水平下降,丙二醛(MDA)水平增加;与DOX组相比,DOX+YWPC组上述指标均得到逆转(P<0.05).同时,DOX组较对照组心肌细胞凋亡水平、Bax/Bcl-2比和cleaved caspase-3水平增加,而DOX+YWPC组心肌细胞凋亡明显受到抑制(P<0.05).结论:黄酒多酚可以通过减少氧化应激和抑制心肌细胞凋亡拮抗阿霉素所致的心脏毒性.
作者：林辉；倪婷娟；张杰；池菊芳；项美香；郭航远 刊期： 2018年第12期
目的:对(+)-2-(1-羟基-4-环己酮)乙基咖啡酸酯(HOEC)在大鼠关节炎模型上进行药效学评价,并利用大鼠全血花生四烯酸(AA)代谢模型,探究引起HOEC对关节炎的非剂量依赖性治疗作用的可能机理.方法:(1)采用大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)模型,研究3个不同剂量的HOEC对CIA的治疗情况,并用免疫组化方法检测关节组织中胞质磷脂酶A2(cPLA2)、5-脂氧合酶(5-LOX)和环氧合酶2(COX-2)的表达水平;(2)ELISA检测HOEC和其体内代谢物咖啡酸对大鼠全血AA代谢模型中代谢产物的作用.结果:(1)HOEC对大鼠CIA有治疗作用,但高剂量(10 mg/kg)组的治疗效果不如低(1 mg/kg)和中剂量(3 kg/kg)组;(2)HOEC对大鼠关节组织中cPLA2、5-LOX和COX-2的表达水平均有抑制作用;(3)HOEC对大鼠全血AA代谢模型中LOX和COX通路的代谢产物均有抑制作用,而咖啡酸对这些代谢产物的抑制作用弱于HOEC.结论:HOEC对大鼠CIA模型的抗炎作用可能与抑制关节组织中cPLA2、5-LOX和COX-2的表达有关;HOEC对治疗大鼠CIA的非剂量依赖现象可能与其代谢产物咖啡酸对AA代谢产物生成的抑制作用弱于HOEC有关.
作者：杨文；刘远儒；李洪林；王蕊 刊期： 2018年第12期
目的:探讨白细胞介素17A(IL-17A)对RAW264.7巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的影响.方法:用不同浓度及的IL-17A处理小鼠RAW264.7细胞6 h或24 h,或用同一浓度IL-17A处理RAW264.7细胞不同时间;采用RT-qPCR及Western blot法检测细胞ABCA1的mRNA和蛋白表达情况;采用NBD-胆固醇法检测细胞胆固醇流出情况;采用油红O染色法测定细胞脂质蓄积情况.结果:与对照组相比,IL-17A可以增加RAW264.7巨噬细胞ABCA1蛋白的表达水平,但不影响ABCA1 mRNA的表达.经IL-17A干预,RAW264.7巨噬细胞内胆固醇向ApoA-1流出增多,同时细胞脂质蓄积显著减少(P<0.01).结论:IL-17A可以增加RAW264.7巨噬细胞ABCA1的表达水平,其机制并不是通过转录水平实现的,这种影响可能与其抗动脉粥样硬化作用有关.
作者：马望歌；周栋；王丽君；刘艳；陈小莉；郭宁；周娟 刊期： 2018年第12期
目的:探究乌骨藤提取物(Marsdenia tenacissima extract,MTE)对黑色素瘤细胞活力及凋亡的作用及机制.方法:用不同浓度(0、50、100和200 mg/L)MTE处理小鼠皮肤黑色素瘤B16-F10细胞24 h或不同浓度MTE处理不同时间(0、24、48、72和96 h),MTT法检测细胞活力.流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞增殖、凋亡和PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白的表达,同时检测通路激动剂胰岛素样生长因子1(IGF-1)处理细胞后p-PI3K及细胞增殖和凋亡相关蛋白的表达.结果:根据预实验结果,选择MTE作用时间为72 h.MTE浓度为100 mg/L和200 mg/L时能明显抑制B16-F10细胞活力及增殖相关蛋白Ki67和PCNA的表达,并且还可诱导B16-F10细胞凋亡,提高凋亡相关蛋白cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的蛋白水平;同时,MTE还可显著降低p-PI3K、p-AKT和mTOR的蛋白水平;此外,激动剂IGF-1可明显减弱MTE抑制细胞活力及诱导细胞凋亡的作用.结论:MTE可通过下调PI3 K/AKT/mTOR通路活性抑制黑色素瘤细胞活力,诱导细胞凋亡.
作者：贺新伟；郭贵龙；陈积贤；吴伟力 刊期： 2018年第12期
目的:探讨网状蛋白1A(RTN1A)对肾小管上皮细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)和白细胞介素8(IL-8)及糖尿病肾病(DN)肾纤维化的影响及潜在机制.方法:构建DN小鼠模型,并检测其血糖、肾脏指数、尿微量白蛋白和肌酐清除率进行验证;Western blot检测RTN1A、p-ERK、ERK、细胞因子VEGF和IL-8以及肾脏纤维化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤维连接蛋白(FN)的表达;高糖处理人肾小管上皮细胞株HK-2模拟体内DN细胞,Western blot和ELISA检测ERK信号蛋白、纤维化标志物及细胞因子分泌变化;高糖联合沉默RTN1A或ERK抑制剂PD98059处理24 h,检测细胞因子的分泌和纤维化蛋白的变化.结果:DN小鼠模型中血糖、肾脏指数、尿微量白蛋白和肌酐清除率均明显高于对照组,说明DN模型构建成功;DN模型小鼠中RTN1A及其下游蛋白p-ERK的水平显著增加,并且细胞因子VEGF和IL-8及纤维化标志物α-SMA和FN也显著增加;高糖处理HK-2细胞后,细胞中RTN1A及其下游蛋白p-ERK水平升高,细胞因子VEGF和IL-8及纤维化标志物α-SMA和FN也显著升高;而ERK抑制剂PD98059处理与沉默RTN1A结果一致,p-ERK、VEGF、IL-8、α-SMA和FN均明显降低.结论:RTN1A可能与DN发生发展有关.沉默RTN1A可能通过ERK信号抑制DN肾炎症反应及纤维化.RTN1A可能是一个有效的治疗靶点.
作者：赵力敏；杨淑芬；陈鹏飞；程文德；马云晖 刊期： 2018年第12期
目的:探讨Krüppel样因子4(KLF4)对结直肠癌细胞活力、凋亡及顺铂化疗敏感性的影响.方法:Western blot法检测KLF4在结直肠癌Caco2、SW480和HCT116细胞中的表达.将SW480细胞分为pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1空质粒)、pcDNA3.1-KLF4组(转染构建的pcDNA3.1-KLF4过表达质粒)和pcDNA3.1-KLF4+顺铂组(转染pcDNA3.1-KLF448 h后用1 mg/L顺铂处理细胞48 h),Western blot检测KLF4、p-IκBα、细胞周期素D1(cyclin D1)和生存素(survivin)的蛋白水平;CCK-8法检测各组细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;DCFH-DA探针检测活性氧簇(ROS)含量.结果:KLF4在结直肠癌细胞中的表达均显著低于在人结肠黏膜上皮NCM460细胞的表达(P<0.05).与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-KLF4组的KLF4蛋白表达显著增高(P<0.05),细胞活力及cyclin D1和survivin的蛋白表达均显著降低,细胞凋亡率、ROS含量及p-IκBα的蛋白表达均显著增高;而pcD-NA3.1-KLF4+顺铂组细胞活力及cyclin D1和survivin的蛋白表达均显著低于pcDNA3.1-KLF4组,细胞凋亡率、ROS含量及p-IκBα的蛋白表达均显著高于pcDNA3.1-KLF4组(P<0.05).结论:上调结直肠癌细胞KLF4基因表达可降低肿瘤细胞活力,诱导细胞凋亡,增强顺铂化疗敏感性,其机制可能与提高细胞内ROS含量及下调NF-κB信号关键分子IκBα的磷酸化水平有关.
作者：杨洲；刚海菊；覃先蓬；贾贵清；王波；杨春；赵高平 刊期： 2018年第12期
目的:设计针对肺癌抗原环加氧酶2(COX-2)的长肽,并鉴定这些长肽的免疫活性.方法:通过NetCTL 1.2、SYFPEITHI和IEDB软件预测打分来选取COX-2的HLA-A2限制性表位;对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位集中区域选取合适长度的长肽,通过体外活性实验验证长肽是否具有免疫活性.树突状细胞(DC)荷肽实验和ELISPOT检测荷长肽DC诱导的外周血单个核细胞(PBMCs)中干扰素γ(IFN-γ)的释放;胞内因子染色检测表位肽诱导CTL的能力;乳酸脱氢酶(LDH)实验和CFSE法检测CTL对靶细胞的杀伤活性.结果:ELISPOT和胞内因子染色实验结果显示,长肽P315-338和P375-401诱导的CTL具有分泌IFN-γ的能力.CFSE和LDH细胞毒实验结果显示表位P315-338和P375-401对靶细胞有一定的杀伤作用.结论:成功筛选并鉴定出针对肺癌抗原COX-2的2条长肽.这2条长肽具有用作免疫治疗疫苗的潜能.
作者：范双莉；任亚丽；赵志华 刊期： 2018年第12期
目的:探讨长链非编码RNA MALAT1(lncRNA-MALAT1)是否可通过靶向下调微小RNA-570-3p(miR-570-3p)促进胃癌细胞增殖.方法:将体外培养的人胃癌细胞株SGC7901分为3组:空白对照组、si-MALAT1组和si-MALAT1 NC组,其中空白对照组为单纯的SGC7901细胞株,si-MALAT1组和si-MALAT1 NC组分别转染ln-cRNA-MALAT1 siRNA及其阴性对照.MTS法检测各组细胞的增殖情况.RT-qPCR检测单纯的SGC7901细胞株培养不同时点的miR-570-3p及不同组别lncRNA-MALAT1和miR-570-3p的表达情况.通过生物信息学软件RegRNA预测获取lncRNA-MALAT1与miR-570-3p潜在的互补结合位点.将MALAT1及其突变体克隆到萤光素酶载体psi-CHECK-2中,构建MALAT1野生型和突变型质粒,并采用酶切和测序方法鉴定psiCHECK-2-MALAT1载体是否构建成功.将MALAT1野生型和突变型质粒分别与miR-570-3p模拟物、miR-570-3p抑制剂、miR-570-3p模拟物阴性对照、miR-570-3p抑制剂阴性对照在293T细胞中共转染,收集细胞后通过双萤光素酶报告系统检测不同组别的萤光素酶活性,从而对lncRNA-MALAT1与miR-570-3p的靶向调节关系进行验证.结果:与空白对照组和si-MALAT1 NC组相比较,si-MALAT1组在不同时点(24、48和72 h)的A490值显著降低(P<0.01).在单纯的SGC7901细胞株中,随着时间的推移,miR-570-3p的表达量逐渐下降(P<0.05).si-MALAT1组lncRNA-MALAT1的表达水平显著降低,而miR-570-3p表达显著升高(P<0.01).双萤光素酶报告基因检测显示,与miR-570-3p模拟物阴性对照组相比,miR-570-3p模拟物组MALAT1野生型报告基因的萤光素酶活性显著降低(P<0.01),而miR-570-3p抑制剂组MALAT1野生型报告基因的萤光素酶活性较miR-570-3p模拟物组明显增高(P<0.01);miR-570-3p模拟物、miR-570-3p抑制剂、miR-570-3p模拟物阴性对照及miR-570-3p抑制剂阴性对照对MALAT1突变型的表达均无明显影响.结论:lncRNA MALAT1能够通过靶向结合并下调miR-570-3p促进胃癌细胞增殖.
作者：侯婧瑛；凌辉；金小岩；罗信；李楚强；王凌云 刊期： 2018年第12期
目的:研究传统中药提取物nodosin对人肝细胞癌HepG2细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法:将nodosin设置为1.25μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L不同浓度组,作用于HepG2细胞24 h后,用Hoechst 33258染色和电镜观察不同浓度的药物对细胞形态学的影响,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用RT-qPCR检测凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)mRNA的表达,用Western blot检测caspase-3及其前体和活化体的蛋白水平.结果:形态学结果显示,随着用药剂量的增加,细胞皱缩和细胞核偏移越明显,凋亡小体在5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L剂量组明显增多.Apaf-1 mRNA的表达增加,caspase-3及其前体的表达和cleaved caspase-3的蛋白水平随着用药剂量的增加逐渐增加(P<0.01).结论:Nodosin能够诱导HepG2细胞凋亡.该作用可能是通过增加Apaf-1 mRNA的表达继之激活caspase-3实现的.
作者：海广范；张慧；马敬；郭兰青；王海燕 刊期： 2018年第12期
目的:采用分子模拟技术及细胞实验研究BRAF蛋白在10-姜酚(10-G)抗黑色素瘤中的作用.方法:将10-G(10、20和40μmol/L)刺激人皮肤黑色素瘤A375细胞24 h,采用MTS法和细胞计数检测细胞活力.采用分子对接及分子动力学模拟分析10-G与BRAF蛋白之间的相互关系.采用Western blot技术检测p-BRAF、总BRAF、p-MEK1/2、p-ERK1/2和p-P38的蛋白水平.结果:10-G可剂量依赖性地降低A375细胞活力和数量,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).10-G与野生型BRAF之间的结合能为-7.358 kcal/mol,与V600E突变型的BRAF之间的结合能为-8.255 kcal/mol.分子动力学模拟证实BRAFV600E与10-G之间的结合是稳定的.10-G能显著抑制A375细胞中p-BRAF、p-MEK1/2和p-P38的蛋白水平(P<0.01),对p-ERK1/2的蛋白水平没有影响.结论:10-G能够抑制黑色素瘤细胞的生长,其机制可能与抑制BRAF激活有关.
作者：张竞之；邓波；江小梨；张双伟；蔡敏；刘彬 刊期： 2018年第12期
目的:研究成纤维细胞生长因子21(FGF-21)对博莱霉素(BLM)诱导的小鼠肺纤维化炎症应答及氧化应激的影响,并探讨其抗肺纤维化的作用机制.方法:建立BLM诱导的小鼠肺纤维化的模型,40只小鼠随机分为对照组、BLM组及FGF-21(1、2及5 mg/kg)+BLM组.Western blot检测I型胶原蛋白(collagen I)、纤连蛋白(fibronectin)和核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达水平.DCFH-DA染色检测活性氧簇(ROS)的生成.ELISA用于测定肺组织炎症因子的表达.试剂盒检测各组小鼠肺组织中的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性和羟脯氨酸(HYP)含量.结果:FGF-21处理显著降低BLM诱导的肺组织炎症介质肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6的表达水平,减少ROS及MDA的含量,并增加抗氧化酶系统SOD和GPx的活性(P<0.05).同时,FGF-21下调BLM诱导的collagen I和fibronectin,并减少TGF-β1及HYP的含量.Nrf2沉默能够逆转FGF-21的抗纤维化作用.结论:FGF-21通过激活Nrf2信号抑制炎症应答进程,减轻氧化损伤,减少细胞外基质沉积,从而缓解BLM诱导的肺纤维化.这可能为肺间质纤维化治疗提供新的靶点.
作者：周淼；李风雷；孙俊波 刊期： 2018年第12期
目的:观察亮蓝G(BBG)对急性一氧化碳中毒(ACMP)引起的大鼠海马组织损伤的影响,探讨配体门控离子通道嘌呤能P2X7受体(P2X7R)在一氧化碳中毒脑损伤中的作用.方法:80只8～10周龄SD大鼠分为对照(control)组、ACMP组、ACMP+BBG组和BBG组.采用腹腔注射CO(100 mL/kg)的方法制备大鼠ACMP模型.检测静脉血中的碳氧血红蛋白(HbCO)浓度来判断CO中毒程度.RT-qPCR检测大鼠海马组织P2X7R的mR-NA表达.干湿称重法检测海马组织水肿程度.ELISA法检测海马组织促炎因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-6的含量.Morris水迷宫实验评价学习记忆能力.HE染色观察海马CA1区细胞形态学改变.结果:与control组(100％)相比,染毒6 h后ACMP组大鼠的存活率降低至55％;海马组织P2X7 R的mRNA表达及促炎因子IL-1β、TNF-α和IL-6的含量均明显增加(P<0.05);含水量升高到80.72％±0.93％;大鼠逃避潜伏期明显延长,在目标象限探索时间明显缩短.值得注意的是,BBG预处理可以明显改善ACMP诱导的这些海马损伤.另外,大鼠染毒后3 d,海马CA1区的神经元排列紊乱稀疏,细胞形态不完整,细胞核深染、固缩.而BBG预处理能够显著改善CA1区的细胞形态.结论:P2X7 R与ACMP诱导的海马损伤相关.BBG能够增加ACMP大鼠的存活率,减少促炎因子的释放,减轻海马水肿,改善学习记忆能力,减轻ACMP引起的CA1区神经元损伤.
作者：杨坤丽；沈慧；李璐；张利彬；李秀娟；魏林郁；黄亚迪；赵红岗；江林华；李东亮 刊期： 2018年第12期
目的:观察黄芪甲苷是否通过调控微小RNA-33a(miR-33a)而影响下游信号三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的表达,促进巨噬细胞内胆固醇流出,从而研究黄芪甲苷抗动脉粥样硬化的作用机制.方法:体内实验:采用HE染色检测各组小鼠主动脉横截面病理损伤程度real-time PCR和Western blot分别检测小鼠主动脉ABCA1的mRNA和蛋白表达.体外实验:建立THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞,然后用黄芪甲苷含药SD大鼠血清处理,采用real-time PCR检测细胞miR-33a表达;细胞随机分为空白血清组、黄芪甲苷含药血清组及黄芪甲苷含药血清+miR-33a mimic处理组,real-time PCR和Western blot法检测细胞ABCA1的mRNA和蛋白表达,油红O染色和高效液相色谱法检测细胞内脂质含量,[3 H]法检测细胞内胆固醇流出.结果:体内实验显示,黄芪甲苷组小鼠血管各层结构正常,排列整齐,局部有小灶性的钙化颗粒物沉积,病变轻,斑块小,泡沫细胞和脂质减少,弹力板基本完整,病变程度明显轻于模型组.与模型组相比,黄芪甲苷组小鼠主动脉的miR-33a表达量降低,ABCA1 mRNA和蛋白相对表达量均升高(P<0.05).体外实验显示,在不影响THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞活性的情况下,黄芪甲苷含药血清能明显上调ABCA1的mRNA和蛋白表达,但能被转染miR-33 mimic抑制;黄芪甲苷含药血清可减少细胞中的脂质蓄积,但能被细胞中转染miR-33 mimic所弱化;黄芪甲苷减少细胞内胆固醇蓄积与其促进细胞内胆固醇流出有关,细胞中转入过量miR-33a可以抑制胆固醇流出.结论:黄芪甲苷可通过减少miR-33a的生成,进而上调ABCA1表达,促进巨噬细胞中胆固醇流出,这可能是黄芪甲苷抗动脉粥样硬化作用的分子机制之一.
作者：秦合伟；李彦杰；张志鑫；任锟；李斯锦；卢永保 刊期： 2018年第12期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
