曲小龙；胡厚源
AIM:To investigate the relationship between polyamine metabolism and hypoxia /ischemia ( H/I)-induced cell apoptosis and to determine the mechanisms by which exogenous spermine protects cell apoptosis against AMI in rats .METHOD:The left anterior de-scending coronary artery ( LAD) of the Wistar rats were ligated , and neonatal rat cardiomyocytes were placed under hypoxic conditions for 24 h to establish the model of AMI (or H/I).Exogenous spermine was administered by intraperitoneal injection (2.5 mg/kg daily for 7 days) in vitro and subjected to the cell medium at 5μmol/L as a pre-treatment therapy.RESULTS:AMI (or H/I) induced an increase in polyamine catabolized enzyme SSAT and a decrease in polyamine biosynthesis enzyme ODC , which result in endogenous spermine and spermidine decrease and putrescine increase .At the same time, AMI ( or H/I) lowered cardiac function , increased cTnI and CK-MB concentrations , aggravated myocardial infarct size , cardiomyocyte damage and apoptosis , raised ROS generation , increased the expression of cleaved caspase-3, cleaved caspase-9 and endoplasmic reticulum stress (ERS)-related proteins, promoted the release of cytochrome C and mPTP opening , down-regulated Bcl-2 expression and the phosphorylation of ERK 1/2, PI3K, Akt and GSK-3β, and activated PERK and eIF 2αphosphorylation .Spermine pre-treatment reversed the above-motioned changes .CONCLUSION:AMI ( or H/I ) could induce cardiomyocyte apoptosis and polyamine metabolism disorder .Exogenous spermine attenuates cardiac injury through scavenging the ROS and inhibiting mPTP opening and ERS injury .These findings provide a novel target for the prevention of apoptosis in the setting of AMI .
作者： 刊期： 2016年第08期
目的：探讨重组融合蛋白TAP－SSL5对ApoE基因敲除（ ApoE－／－）小鼠动脉血管粥样硬化斑块形成的影响。方法：21只12周龄ApoE－／－小鼠随机分为3组，每日分别给予TAP－SSL5（3 mg／kg）、SSL5（2 mg／kg）及同等剂量的PBS，高脂饮食饲养12周后，石蜡切片观察主动脉根部粥样硬化斑块形成情况，并应用油红O染色法观察大体动脉标本斑块情况；后应用小鼠细胞炎症因子芯片检测TAP－SSL5对40种炎症因子在动脉组织内的表达情况。结果：高脂饲养12周后，TAP－SSL5组小鼠体重增长明显低于单纯喂食高脂饮食而不进行药物干预组，血清胆固醇（ Tch）水平明显低于对照组，而甘油三酯（ TG）、低密度脂蛋白胆固醇（ LDL）及高密度脂蛋白胆固醇（ HDL）水平无明显变化。TAP－SSL5可以减轻ApoE－／－小鼠动脉血管粥样硬化斑块形成（P＜0．05）。炎症因子芯片表达分析显示，与对照组相比较，TAP－SSL5组GM－CSF、IL－3、IL－10、IL－1β、IL－12p40p70、IL－9、IL－12p70、KC、Lymphotactin、Leptin、MCP－1、MIG、MCSF、MIP－1α、 sTNF RI、RANTES和sTNF RII共17种细胞因子下调明显。结论：重组融合蛋白TAP－SSL5能够在一定程度上抑制ApoE－／－小鼠动脉粥样硬化斑块的形成，其机制与其抗炎、抗凝及抗血小板特性有关，其对细胞因子表达调控的影响有待深入研究。
作者：曲小龙；胡厚源 刊期： 2016年第08期
目的：Sirtuin 3（Sirt3）是线粒体中NAD＋依赖去乙酰化酶，通过赖氨酸乙酰化调节线粒体能量代谢。气体分子H2S具有抗氧化应激、蛋白质硫化和乙酰化等功能。本实验探讨外源性H2 S调控2型糖尿病心肌线粒体脂肪酸氧化及其关键酶的机制。方法及结果：采用db／db小鼠作为2型糖尿病动物模型，给予外源性H2 S作为治疗组（腹腔注射NaHS 30μg／kg 12周）。 Western blot及免疫荧光检测显示db／db小鼠心肌组织CSE的表达及H2 S含量均明显低于NaHS组。提取心肌组织线粒体，给予外源性H2 S组脂肪酸氧化水平、CPT及LCAD的活性及蛋白表达水平明显低于 db／db小鼠。 Co－IP及LC－MS／MS分析，结果显示在db／db小鼠中CPT及LCAD的乙酰化水平明显高于NaHS组，线粒体氧耗呼吸率及线粒体ATP含量明显低于NaHS组。 Western blot结果证实db／db小鼠心肌线粒体中Sirt3、Nampt的表达及NAD＋／NADH的比值明显低于给予外源性H2 S组。高糖高脂处理乳鼠心肌细胞，给予Nampt抑制剂FK866及NaHS，Sirt3的表达下降，但CPT及LCAD表达、活性及乙酰化水平明显增高。结论：本实验证实气体分子H2 S通过调控Nampt－Sirt3－CPT／LCAD乙酰化水平改善高糖高脂时心肌线粒体的脂肪酸氧化。
作者：孙宇；刘宁；郁向静；卢方浩；张林雪；张伟华 刊期： 2016年第08期
目的：Mip2是心肌缺血后适应的一个分子靶点，其表达能抑制氧化应激诱导的心肌细胞凋亡。基于MIP2为WD蛋白，本科室冯衍生博士利用大鼠心肌缺血再灌注动物模型，对MIP2可能的相互作用蛋白进行了筛选，质谱鉴定了若干个蛋白质，其中包括VDAC，但VDAC包括VDAC1、VDAC2和VDAC3，它们与MIP2的关系尚不清楚。本研究在此基础上进一步深入探讨MIP2的心肌细胞保护机制。方法：首先构建了MIP2和VDAC真核表达载体，利用了基因共转染探讨MIP2与VDAC可能的相互作用；然后采用不同的抗体免疫共沉淀加Western blot免疫印迹技术，主要探讨MIP2与VDAC1的相互作用；利用免疫荧光定位探讨MIP2与VDAC1在H9c2细胞内的分布；采用MIP2的结构突变，研究MIP2与VDAC1相互作用的结构域；后通过MIP2的全长与突变体探讨其对H9c2心肌细胞膜电位与细胞死亡率的影响，观察MIP2及其与蛋白相互作用对氧化应激损伤心肌细胞的保护作用。结果：MIP2与VDAC基因共转染后免疫共沉淀加Western blot 鉴定，结果显示MIP2与VDAC1和VDAC2有相互作用关系，与VDAC3无相互作用；GFP与VDAC1抗体免疫共沉淀进一步证明了这种相互作用；细胞免疫共定位显示，MIP2与VDAC1分布于细胞同一区域，支持其在细胞中存在相互作用；MIP2结构突变显示，位于其C端的WD40是与其它蛋白相互作用的结构域。心肌细胞转染基因后施以氧化应激处理，结果显示，虽然MIP2全长能抑制氧化应激诱导的H9 c2心肌细胞线粒体膜电位降低和细胞死亡，但其蛋白结合结构域不能有效抑制这种诱导性的膜电位降低与细胞死亡。结论：VDAC1是MIP2的一个作用靶点，MIP2 C端的WD40是其与VDAC1相互作用的一个结构域。 MIP2能抑制氧化应激诱导的心肌细胞线粒体膜电位降低与细胞死亡，其机制可能与调节VDAC1有关。
作者：蒋磊；陈广斌；王浩；刘可；张华莉；肖献忠 刊期： 2016年第08期
AIM:To investigate the regulation mechanism for insufficient KChIP 2 expression induces Ito,f downregulation and arrhythmogene-sis in cardiac hypertrophy .METHODS:Bidirectional manipulations of MG 53 expression were performed by adenoviral overexpression of MG53 or knockdown of MG53 with RNA interference in neonatal rat ventricular myocytes with or without PE stimulation .Ito,f was re-corded with patch clamp in whole-cell mode 48 h after adenoviral transfection .Then the WT or MG53 knockout ( MG53 -/-) mouse model of left ventricular hypertrophy induced by transverse aortic constriction ( TAC) were used to detect the susceptibility to ventricu-lar arrhythmia.RESULTS: Here, we show muscle-specific MG53 regulates KChIP2 expression and Ito,f densities, where they are downregulated in hearts from MG53 knockout mice and MG53 knockdown rat cardiomyocytes , but upregulated in MG53 overexpressed cells.MG53 expression is decreased in phenylephrine ( PE)-induced cardiomyocyte hypertrophy and restoration of MG 53 rescues PE-induced downregulation of KChIP2 and Ito,f.Furthermore, MG53 is decreased in a mouse model of hypertrophy induced by transverse aortic constriction and ablation of MG 53 increases the susceptibility to ventricular arrhythmia by exaggerating Ito,f remodeling.CON-CLUSION:These findings establish MG53 as a novel regulator of Ito,f and its central role in arrhythmogenesis in hypertrophy .
作者： 刊期： 2016年第08期
目的：本研究旨在探讨人核心聚糖蛋白decorin是否可以缓解糖尿病心肌病并对其中机制进行探索。方法：在本研究中，采用Wistar大鼠作为研究对象，通过腹腔注射链唑霉素并采用高脂饮食喂养6个月诱导糖尿病心肌病模型。通过重组腺相关病毒介导大鼠心脏高表达decorin。在体外研究中，通过高浓度葡萄糖模拟在体高血糖刺激，并在人脐静脉内皮细胞中高表达decorin，通过研究细胞凋亡水平、成管能力、迁移能力和增殖能力，观察其对内皮细胞的保护效应。结果：结果显示，糖尿病心肌病大鼠表现为毛细血管密度减低、心肌纤维化以及心脏功能受损，而过表达decorin可以促进血管内皮生长因子（ VEGF）的表达，增加血管密度，减轻心肌纤维化并缓解糖尿病心肌病大鼠的心脏功能。同时，体外研究结果也表明，高糖可以抑制IGF1R／AKT通路，抑制VEGF的表达，诱导内皮细胞的凋亡增加，抑制细胞的成管能力、迁移能力和增殖能力，而过表达deco－rin则缓解了上述效应。另外，抗IGF1R抗体预处理或者AKT抑制剂处理可以阻断decorin的保护作用。结论：Decorin可以通过激活IGF1R／AKT通路，上调VEGF的表达并促进血管生成，从而缓解糖尿病心肌病。
作者：唐家荣；赖金胜；陈复琼 刊期： 2016年第08期
目的：动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是一种慢性炎症过程，其发病机制复杂，目前公认的是内皮损伤反应学说。有研究称，细胞骨架蛋白与内皮细胞功能及内皮相关信号通路密切相关。 Testin是一种新发现的细胞骨架蛋白，主要分布于黏着斑和细胞间连接的区域，参与细胞间的黏附，调节细胞的运动。然而，Testin在AS中的作用尚不明确。方法：利用家兔高脂饮食喂养16周建立冠脉AS模型，分离冠脉，免疫荧光染色观察Testin的分布，检测AS兔与正常兔Testin的表达水平；分离培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs），分别予以1 mg／L LPS、40 mg／L ox－LDL刺激6 h，检测Testin表达水平的变化；于HUVECs过表达或下调表达Testin，观察其对细胞增殖、凋亡、迁移、招募单核细胞能力及AS相关因子表达的影响。结果：染色示Testin主要表达于血管内皮层并与内皮标志物CD31存在共定位，AS兔Testin mRNA和蛋白表达水平较正常兔降低（P＜0．05）；给予HUVECs刺激后，Testin mRNA和蛋白表达水平降低（ P＜0．05）；过表达或下调Testin，不影响细胞增殖和凋亡能力（ P＞0．05）；过表达Testin可促进HUVECs迁移而抑制单核细胞与其黏附，下调Testin则呈现相反作用（P＜0．05）；过表达Testin可升高一氧化氮合酶水平而降低单核细胞趋化因子1、基质金属蛋白酶2水平，下调Testin则呈现相反趋势（ P＜0．05）。结论：Testin可通过影响内皮功能发挥抗AS作用。
作者：袁梦；张跃；徐昭；李虹敏；劳咪；李广平 刊期： 2016年第08期
目的：研究全反式维甲酸（ all－trans retinoic acid，ATRA）对胃癌细胞SGC－7901存活率与放射敏感性的影响，并讨论其可能的机制。方法：MTT法检测细胞存活率；平板克隆形成实验和流式细胞术分别检测细胞的放射敏感性和细胞周期；实时荧光定量PCR（ RT－qPCR）检测细胞中Bax、Bcl－2、survivin与NF－κB的mRNA表达。结果：ATRA可降低SGC－7901细胞存活率，当浓度到达8μmol／L时，抑制作用达到大；ATRA联合X射线处理后，与单纯放射处理相比，平均致死剂量（D0）和准阈剂量（Dq）显著变小（P＜0．05），且拟合的生存曲线明显下移；ATRA能显著降低放射诱导的细胞G2／M期阻滞，下调SGC－7901细胞Bcl－2与survivin的mRNA表达（ P＜0．05），上调Bax与NF－κB的mRNA表达（P＜0．05）。结论：ATRA能够增加胃癌细胞SGC－7901的凋亡及放射敏感性，可能与抑制细胞周期G2／M期的阻滞作用、下调Bcl－2与survivin mRNA表达和上调NF－κB与Bax mRNA表达有关。
作者：王艳萍；赵先群；张向东；许威；向晓辉 刊期： 2016年第08期
目的：平滑肌蛋白22α（ smooth muscle protein 22α，SM22α）被视为是细胞衰老的标志物，但是其在血管平滑肌细胞（ vascu－lar smooth muscle cell ，VSMC）衰老过程中的作用尚不清楚。本研究旨在探讨SM22α在VSMC衰老和血管老化进程中的作用。方法：利用angiotensin II（Ang II，10－7 mol／L）慢性刺激诱导VSMC衰老；用野生型和SM22α基因敲除小鼠皮下植泵，持续灌注Ang II（1μg? kg－1? min－1）4周，复制高血压模型。通过敲低和过表达SM22α观察其对VSMC衰老及调控通路蛋白表达和活性的影响。结果：Ang II持续刺激可诱导VSMC衰老，伴随着SM22α的表达增高。敲低SM22α可减弱Ang II诱导的VSMC衰老，过表达则反之。在Ang II诱导VSMC衰老条件下，SM22α表达上调抑制Mdm2与p53的结合，上调p53含量。 SM22α表达增加抑制Akt与Mdm2的磷酸化活化，导致Mdm2与p53的结合减弱。 SM22α基因敲除改善Ang II诱导的主动脉VSMC衰老和血压升高。结论：SM22α表达上调抑制Akt／Mdm2通路激活，进而减弱Mdm2与p53的结合，上调p53的表达量，促进衰老。
作者：苗穗兵；谢肖立；尹亚娟；赵丽丽；舒亚南；陈荣；陈鹏；董丽华；林燕玲；吕品；张丹丹；聂茜；薛震颖；韩梅 刊期： 2016年第08期
目的：我们的前期实验发现，腺病毒中介的peroxiredoxin II （ Prx II）过表达可保护心肌细胞防止氧化应激所致的损伤，尽管这样，Prx II在器官和整体动物水平是否具有心肌保护作用，而且这一保护作用是否通过内质网应激发挥作用尚不清楚。方法：应用Langendorff系统构建离体心肌缺血再灌注损伤模型；结扎冠状动脉左前降支，缺血30 min再灌注30 min／3 h／24 h构建体内心肌缺血再灌注损伤模型。结果：离体心肌缺血再灌后，Prx II过表达小鼠心肌收缩大速率（＋dp／dtmax ）和心肌舒张大速率（－dp／dtmax ）恢复较正常对照组明显得到改善；Prx II心肌特异性过表达小鼠与野生型相比，离体和在体心肌缺血再灌后，心肌梗死面积均分别降低了69．13％和60．86％；体内心肌缺血再灌注，与野生型小鼠相比，Prx II心肌特异性过表达小鼠心肌细胞凋亡率降低了52．10％±5．32％；与野生型小鼠相比，Prx II心肌特异性过表达小鼠中内质网通路伴侣分子Hsp90、GRP94、PDI和p－eIF2α的表达量均明显降低（P＜0．05），但cleaved ATF6和XBP－1的表达量在2组小鼠中无明显差异。 p－Akt （Ser473）和p－Akt（Thr308）水平在野生型小鼠明显降低，在Prx II过表达小鼠中仍维持高表达水平（P ＜0．05）。结论：Prx II对缺血再灌注损伤心肌具有保护作用，其机制可能与拮抗p－eIF2α表达、增加p－Akt表达、阻断内质网应激启动的凋亡通路有关。
作者：王慧敏；石晓静；周文娟；耿雪鹏；姬亚歌；肖悦；黄欣；刘宏民；赵文 刊期： 2016年第08期
目的：建立体外培养人肺内微小动脉的方法，并观察其收缩的基本特性，为研究药物及各种活性因子对人肺血管的长期作用提供有效的实验模型。方法：取癌旁5 cm以上的肺组织，于冰浴和无菌条件下，利用显微操作分离出肺内微小动脉，制备成1．8～2．0 mm长的血管条，分2组，一组急性分离组（新鲜组）马上进行血管张力测定；另一组（培养组）置于含DMEM－F12培养基（内含10％胎牛血清、1％青链霉素）的培养皿内，通以95％O2、5％CO2混合气，在37℃的条件下培养48 h。进行血管张力测定时，用2根直径40μm的不锈钢丝平行穿过血管腔，钢丝的4个端分别固定于微血管张力测定仪浴槽内钳夹的4个螺丝上，采用累积给药法，分别给予血管受体依赖性收缩剂血栓素A2类似物U46619和内皮素－1（ET－1），血管非受体依赖性收缩剂60 mmol／L KCl，然后测定血管的张力变化。结果：培养组对血管收缩剂U46619和ET－1能产生浓度依赖性收缩，U46619的pD2为7．60±0．10，Emax为（136．40±6．17）％；ET－1的pD2为（7．17±0．22），Emax为（137．14±5．52）％，结果类似于新鲜组， U46619的pD2为7．78±0．11，Emax为（131．29±3．79）％；ET－1的pD2为7．53±0．15，Emax为（139．11±6．66）％，两组比较均无显著差异。培养组对血管非受体依赖性收缩剂60 mmol／L KCl产生的收缩力Emax为（7．67±0．85） mN；新鲜组的Emax为（7．73±0．97） mN，两组比较无显著差异。结论：采用血管器官培养的方法培养人肺内微小动脉48 h，能维持血管平滑肌的基本收缩特性，可作为研究各种物质对血管长效作用的有效模型。
作者：邝素娟；杨慧；李晓红；刘晓颖；饶芳；单志新；林秋雄；杨敏；余细勇；吴书林；邓春玉 刊期： 2016年第08期
目的：探讨miR－130a在血管紧张素II（angiotensin II， Ang II）诱导心脏间质纤维化中的作用及分子机制。方法：埋植Ang II微渗泵制备小鼠心室重塑模型，超声心动检测小鼠心功能；离体培养乳鼠心脏成纤维细胞，real－time PCR和Western blot检测分子的基因及蛋白表达。结果：在埋植Ang II微渗泵的小鼠心肌组织以及Ang II刺激的乳鼠心脏成纤维细胞，Ang II可上调miR－130a的表达。小鼠腹腔注射25 mg／kg miR－130a 抑制剂锁核酸（locked nucleic acid， LNA）－anti－miR－130a可显著抑制Ang II引起的心肌组织中miR－130a表达增加，改善Ang II引起心脏间质纤维化及舒缩功能障碍。转染miR－130a mimic可进一步促进Ang II引起的纤维化相关分子的表达增加以及肌成纤维细胞转化，miR－130a inhibitor则可抑制Ang II的上述作用。过表达PPAR－γ可抑制Ang II以及Ang II和miR－130a mimic联合应用引起的纤维化相关分子的表达。结论：miR－130a通过调控PPAR－γ的表达参与Ang II的促纤维化效应。
作者：李丽；张城林；赵茜；吴立玲 刊期： 2016年第08期
目的：探讨钙敏感受体（calcium－sensing receptor，CaSR）在氧化型低密度脂蛋白（oxidized low－density lipoprotein，oxLDL）诱导的大鼠胸主动脉平滑肌细胞（A7r5细胞）增殖及迁移中的作用及信号机制。方法：BrdU掺入法检测细胞增殖；伤口愈合实验及Transwell迁移分析检测细胞迁移情况；Western blot方法检测CaSR、PCNA、ERK MAPK通路及PI3K／AKT通路的蛋白表达。结果：（1）小剂量（10 mg／L）oxLDL 作用A7r5细胞24 h促进细胞的增殖和迁移；（2）oxLDL增加A7r5细胞的CaSR表达；（3）CaSR 拮抗剂NPS2390抑制了oxLDL 的作用，而激动剂GdCl3进一步增强了oxLDL 的作用；（4）oxLDL 可促进p－AKT、p－ERK蛋白表达；（5）PI3K／AKT通路抑制剂LY294002、ERK MAPK通路抑制剂PD98059能够抑制oxLDL 诱导的细胞增殖和迁移效应；（6）NPS2390抑制了oxLDL诱导的p－AKT和p－ERK蛋白表达，而GdCl3作用相反。结论：（1）oxLDL诱导A7r5细胞增殖及迁移效应；（2）CaSR参与oxLDL诱导的A7r5细胞增殖及迁移作用；（3）CaSR 通过活化PI3K／AKT通路及ERK MAPK 信号通路参与oxLDL诱导的A7r5细胞增殖及迁移作用。
作者：李忠；徐长庆；田野；郝丽荣；李宏霞 刊期： 2016年第08期
目的：VEGF－VASH1（vasohibin－1）通路在血管新生过程的精细调节中发挥重要作用，转录因子锌指蛋白667（zinc finger protein 667， ZNF667）具有促进血管新生作用。本研究主要探讨ZNF667对上述通路中VEGF和VASH1表达的调控，以期阐明ZNF667促进血管新生的分子机制。方法：采用LAD建立慢性心肌缺血小鼠模型，采用HE染色和CD31免疫组化分析缺血心肌组织形态学变化及微血管形成。采用Matrigel、划痕和Transwell分析HUVEC管型形成和迁移；采用Western blot、ELISA和定量PCR分别检测ZNF667和VASH1蛋白质和mRNA表达；mRNA测序分析ZNF667过表达HUVEC的mRNA差异表达；染色质免疫沉淀（ chromatin immunoprecipitation ， ChIP）检测ZNF667与VEGF和VASH1启动子区结合情况。结果：免疫组化和HE染色显示与假手术组相比，缺血心肌中组织损伤加重伴随有CD31＋微血管数目增加，同时心肌组织中VEGF和ZNF667蛋白和mRNA表达呈时间依赖性增加，而VASH1表达降低。 mRNA测序、ELISA和定量PCR显示ZNF667过表达可促进HUVEC中VEGF表达而抑制VASH1表达。 VASH1过表达可抑制VEGF和ZNF667的促HUVEC管型形成和迁移作用。 ChIP显示ZNF667与VEGF（－346～－350 bp；－265～－269 bp）和VASH1（－170～－175 bp）基因启动子区结合。结论：HUVEC中ZNF667靶向调节VEGF－VASH1通路促进管型形成和迁移作用，这一调节机制可能参与缺血心肌中微血管新生过程。
作者：陈亦菲；邹江；王念；刘可；张华莉；王慷慨；肖献忠 刊期： 2016年第08期
AIM:To investigate the relationship between autophagy and calcification in vascular smooth muscle cells ( VSMCs) after platelet-derived growth factor (PDGF)-BB stimulation.METHODS:Cultured VSMCs were stimulated with PDGF-BB for different time, the expression of vascular calcification-related proteins and autophagy-related proteins were detected by Western blot .The interaction be-tween Beclin1 and PI3KC3 was detected by co-immunoprecipitation.RESULTS: The expression of BMP2 and ALP showed a trend from decline to rise.ALP slumped at 12 h, and BMP2 slumped at 6 h.Moreover, the expression of Beclin-1 showed a trend from riseto decline, and peaked at 12 h.The conversion of LC3-ⅠtoⅡincreased in a time-dependent manner , and peaked at 24 h.The ex-pression of BMP2 and ALP was increased in VSMCs incubated with PDGF-BB and autophagy inhibitor 3-MA, compared with PDGF-BB-stimulated VSMCs.Furthermore, the interaction between Beclin1 and PI3KC3 was enhanced at 6 h after PDGF-BB stimulated, peaked at 12 h, and kept in high level at 24 h.Moreover, the phosphorylation level of Beclin 1 was enhanced by PDGF-BB stimulation, and peaked at 6 h.CONCLUSION:Our findings demonstrate that PDGF-BB-induced autophagy inhibits VSMC calcification by en-hancing Beclin1 phosphorylation and interaction between Beclin 1 and PI3KC3.
作者： 刊期： 2016年第08期
目的：感染负荷被认为是动脉粥样硬化（ AS）新的独立危险因素。金黄色葡萄球菌（ S．aureus）是临床常见的致病菌之一。本课题组前期研究发现，金黄色葡萄球菌超抗原样蛋白－5（SSL5）可以激活血小板。我们推测，SSL5可能通过激活血小板而诱发炎症反应，探讨其机制可以为阐明感染负荷在AS中的作用提供新的实验证据。方法：体外培养人外周血单核细胞及THP－1细胞，以SSL5激活血小板所产生的微粒（ SSL5－PMPs）作用于上述细胞。结果：SSL5－PMPs呈时间和剂量依赖性地促进单核细胞IL－1β、TNF－α、MCP－1和MMP－9的表达；并促进MCP－1诱导的单核细胞迁移；阻断CD40L与CD40的相互作用，可以部分抑制SSL5－PMPs诱导单核细胞产生炎症介质；以siRNA下调单核细胞CD40或TRAF6基因的表达，导致SSL5－PMPs诱导单核细胞炎症介质的产生减少，并抑制NF－κB p65亚单位的磷酸化及核转位；阻断TLR4信号通路对SSL5－PMPs诱导单核细胞释放炎症介质没有影响。结论：SSL5可以激活血小板并产生PMPs；SSL5－PMPs与单核细胞结合，且主要与外周血中的具有促炎作用的单核细胞结合，促进炎性细胞因子的释放，CD40－TRAF6－NF－κB信号通路主要参与了这一过程。本研究为阐明感染负荷的致动脉粥样硬化机制提供了依据。
作者：胡厚源；贝俊杰；肇炜博 刊期： 2016年第08期
目的：本研究拟探讨平滑肌蛋白22α（ SM22α）对血管平滑肌细胞（ VSMC）表面血小板源性生长因子受体β（ PDGFR－β）胞吞的影响，进而揭示SM22α对PDGFR－β活性调控的关键步骤———胞吞和泛素化动态平衡的影响及其对血管重构过程的调控作用。方法：PDGF刺激体外培养大鼠VSMC，考察siRNA敲低SM22α蛋白后不同时点的细胞中，激光共聚焦显微镜观察PDGFR－β在细胞膜分布的异同；利用活细胞工作站实时观察SM22α的表达对PDGFR－β在细胞内内吞体和溶酶体分布的异同；SM22α对c－Cbl或TRAF6等E3泛素连接酶活性的影响；siRNA敲低早期内吞体标志蛋白Rab5、再循环内吞体标志蛋白Rab4和Rab11、多泡体（ MVB）标志蛋白Rab7，观察SM22α对PDGFR－β亚细胞定位的变化及其与血管重构的关系。结果：研究发现，SM22α表达下调促进细胞表面的PDGFR－β的再循环过程，使PDGFR－β在细胞表面的分子数显著减少，激活信号分子Akt和p42／44磷酸化，促进PDGF诱导的VSMC生长、增殖和迁移过程，SM22α对PDGFR－β再循环的调控与血管重构过程密切相关。结论：PDGFR－β调控异常诱发的生物学行为改变是心血管疾病的主要细胞和分子生物学基础，我们的结果表明， SM22α可能通过影响PDGFR－β胞吞和泛素化动态平衡而影响其活性的调控，进而参与血管重构的病理生理过程，阐明其分子机制可为发掘基于影响PDGFR－β功能的心血管疾病药物设计提供新靶点。
作者：麻晓婷；窦永青；李晓坤；孟泽祺；韩梅；聂磊 刊期： 2016年第08期
Exosomes secreted by mesenchymal stem cells have shown great therapeutic potential in regenerative medicine .In this study, we performed meta-analysis to assess the clinical effectiveness of using exosomes in ischemia /reperfusion injury based on the reports pub-lished between January 2000 and September 2015 and indexed in the PubMed and Web of Science databases .The effect of exosomes on heart function was evaluated according to the following parameters:the area at risk as a percentage of the left ventricle , infarct size as a percentage of the area at risk , infarct size as a percentage of the left ventricle , left ventricular ejection fraction , left ventricular frac-tion shortening , end-diastolic volume , and end-systolic volume .Our analysis indicated that the currently available evidence confirmed the therapeutic potential of mesenchymal stem cell-secreted exosomes in the improvement of heart function .However , further mechanis-tic studies, therapeutic safety and clinical trials are required for optimization and validation of this approach to cardiac regeneration after ischemia/reperfusion injury .
作者： 刊期： 2016年第08期
目的：本研究主要探讨HSPB1如何调控细胞的氧化还原状态从而发挥抗心肌损伤的作用。方法：以过氧化氢（ H2 O2）诱导的H9c2心肌细胞氧化应激损伤为模型，转染HSP25表达质粒或小分子干扰RNA，观察细胞存活率、LDH水平、细胞凋亡、活性氧水平、谷胱甘肽含量和GSH／GSSG比值的变化，非还原变性蛋白质印迹检测谷氧还蛋白1（Trx1）、谷胱甘肽过氧化物酶（ GR）氧化还原状态的改变。结果：HSPB1过表达抑制H2 O2所致的LDH释放以及caspase 3和PARP的断裂；HSPB1过表达不能减少过氧化氢引起的活性氧水平增加和不能增加细胞内GSH的含量，但可抑制H2 O2所致的GSH／GSSG比值的降低。非还原性蛋白质印迹显示HSPB1过表达明显减少了H2 O2所致的GR和Trx1的氧化。 HSPB1表达下调促进H2 O2所致的细胞死亡、LDH释放以及caspase 3和PARP的断裂，以及GSH／GSSG比值的下降；同时，非还原性蛋白质印迹显示HSPB1表达下调明显增加了H2 O2所致的GR和Trx1的氧化。结论：HSPB1在心肌细胞氧化应激损伤中通过调控GR和Trx1的氧化还原状态起到抗细胞凋亡的作用。
作者：刘协红；刘丽云；王莉；刘可；刘梅冬；刘瑛；肖献忠；张华莉 刊期： 2016年第08期
目的：高张应变诱导的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells， VSMCs）异常增殖在高血压血管重建发生发展中起重要作用。本研究探讨细胞核骨架（ nuclear envelope ，NE）在其中的作用及其机制。方法：应用腹主动脉缩窄构建高血压大鼠动物模型；应用FX4000张应变加载系统对体外培养大鼠胸主动脉VSMCs分别施加5％（正常生理状态）和15％（模拟高血压状态）幅度的周期性张应变；Western blot检测NE蛋白emerin和lamin A蛋白表达水平；染色质免疫共沉淀、芯片（ CHIP－on－chip）结合MOTIF生物信息学分析检测与emerin和lamin A结合的DNA序列及其特性；protein／DNA array检测抑制emerin或lamin A表达后转录因子活性变化。结果：高血压大鼠颈总动脉emerin和lamin A表达水平明显降低，中膜VSMCs增殖明显增加；体外加载15％周期性张应变模拟高血压病理条件下VSMCs受到的张应变力学刺激，VSMCs的emerin和lamin A表达明显降低，细胞增殖明显增加，这一作用可被emerin或lamin A的高表达载体转染所部分逆转。 emerin和lamin A能够分别与包含多种转录因子启动子结合位点的DNA片段结合，进而调控多种与VSMCs增殖相关的转录因子活性。结论：NE蛋白emerin和lamin A能够响应力学刺激，并通过调控与特异性转录因子启动子区域的结合调控转录因子活性，参与VSMCs增殖功能调控和高血压血管重建。
作者：齐颖新；姚庆苹；韩悦；黄凯；姜宗来 刊期： 2016年第08期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
