姚树桐；李严严；刘庆华；岳峰；田华；桑慧；杨娜娜；秦树存
目的：探讨组胺H3受体（H3R）在小鼠成肌细胞C2C12成肌分化过程及分化后的横纹肌细胞中的表达和可能发挥的作用。方法：诱导C2C12细胞成肌分化，测量H3R和分化晚期标志物肌球蛋白重链mRNA和蛋白的表达；分化过程中加入H3R拮抗剂ciproxifan，测量分化早期标志物desmin、中期标志物myogenin和肌球蛋白重链mRNA的表达。 Fluo－4结合剂标记分化后的横纹肌胞内钙离子，测量双极交流电200 mA刺激下，H3R激动剂甲基组胺（RMeHA）对胞浆中钙离子浓度的影响。结果：H3R和肌球蛋白重链在成肌分化过程中表达量逐渐增加。 Ciproxifan在成肌分化过程中对3种分化标志物mRNA的表达与对照组相比无差异（ P＞0．05）。 RMeHA在浓度10 nmol／L～100μmol／L刺激细胞5～20 min，可呈钟形降低因交流电引起的肌浆钙离子浓度的升高（ P＜0．05），其中RMeHA 100 nmol／L在10 min和20 min对电刺激细胞中Ca2＋的抑制百分率高。相同浓度的RMeHA在20 min和10 min时对Ca2＋的抑制率比其在5 min时高（P＜0．05）。结论：H3R可能在成肌分化过程中的作用不大，而在分化成熟细胞中可以降低电刺激引起的胞浆钙离子浓度的升高。
作者：齐麟；冯晓；陈燕；薛瑞；张凤；王素云；孙素珂；建国 刊期： 2015年第06期
目的：研究高血压与2型糖尿病联合作用是否能导致小鼠心功能障碍和心肌重塑。方法：将14周龄的2型糖尿病和非糖尿病小鼠经血管紧张素II（ Ang II）给药4周诱导小鼠形成轻度高血压。运用超声波心动描记术和多巴酚丁胺负荷试验评价小鼠左心室功能；HE染色分析左心室心肌细胞的肥大作用；Western blotting测定心肌组织中磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（ p－AMPK）的表达水平。结果：与非糖尿病小鼠比较，糖尿病小鼠（ DM组）的心脏功能和心肌结构无明显变化；Ang II给药不影响2型糖尿病小鼠和非糖尿病小鼠的体重和血糖含量，但血压明显增高；左心室重量和心肌细胞表面积结果分析显示，Ang II诱导2型糖尿病小鼠的左心室肥大程度显著大于Ang II组；Ang II给药的2型糖尿病小鼠左心室的缩短分数和射血分数显著降低，而Ang II组小鼠无明显变化；Western blotting结果显示Ang II组、DM组和DM＋Ang II组小鼠左心室组织中p－AMPK的表达量显著降低。结论：2型糖尿病小鼠心脏功能和心肌结构无明显变化，当高血压存在时2型糖尿病小鼠容易发生心脏功能障碍和心肌重塑，提示高血压是2型糖尿病小鼠心脏功能障碍和心肌重塑的关键因子。
作者：黄美松；刘鹏；陈立兵；胡阳黔 刊期： 2015年第06期
目的：观察熊去氧胆酸治疗婴儿肝炎综合征的临床疗效，并初步探讨其药理机制。方法：选择76例婴儿肝炎综合征患儿为研究对象，根据治疗方法不同分为常规治疗组及熊去氧胆酸治疗组，另选择同期门诊体检健康儿童20名作为对照组。常规治疗组给予抗病毒、护肝等治疗，熊去氧胆酸治疗组在常规治疗组基础上加用熊去氧胆酸（10 mg? kg－1? d－1），疗程为2～3周。治疗2周后，比较常规治疗组和熊去氧胆酸治疗组治疗前后血清总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、谷丙转氨酶（ALT）、谷氨酰转肽酶（GGT）、总胆汁酸（TBA）和TNF－α、IL－6的变化情况。结果：（1）婴儿肝炎综合征患儿血清TNF－α和IL－6均明显高于对照组（P＜0．01）。（2）常规治疗组患儿治疗后血清TBIL、DBIL、ALT、GGT、TBA及TNF－α和IL－6均较治疗前下降，差异有统计学意义（ P＜0．01）。（3）熊去氧胆酸治疗组患儿治疗后血清TBIL、DBIL、ALT、GGT、TBA及TNF－α和IL－6均较常规治疗组显著降低，差异有统计学意义（P＜0．01）。结论：在常规治疗基础上加用熊去氧胆酸能更有效减轻婴儿肝炎综合征患儿全身炎症反应，减轻肝脏损伤。
作者：朱磊；朱俊岭；钮明杨；胡丹；祁伯祥 刊期： 2015年第06期
目的：探讨微小RNA145（ miRNA145）对肝癌细胞生长、凋亡及侵袭转移的影响。方法：实验将HepG2细胞随机设置为3组：空白对照组、空质粒组及转染组，转染后real－time PCR法检测验证各组细胞miR－NA145及N－钙黏蛋白（ N－cadherin） mRNA的表达，并用Western blot检测miRNA145目标蛋白N－钙黏蛋白的表达， MTS增殖实验检测各组细胞的生长情况，流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡率，Transwell法检测各组细胞的侵袭转移能力。结果：Real－time PCR结果证实转染组细胞miRNA145表达比空质粒组和空白对照组细胞明显增多（P＜0．05），同时N－钙黏蛋白的表达在转染组细胞中显著减少（P＜0．05）；经Western blot结果证实，转染组细胞中N－钙黏蛋白表达比空质粒组和空白对照组细胞明显减少（ P＜0．05）；转染组细胞活性在转染后第2天、第3天均明显下降，70．04％的细胞周期停止在G1期，转染后HepG2细胞凋亡率明显增高，细胞的侵袭转移能力下降，差异均有统计学意义。结论：上调miRNA145表达能有效抑制肝癌细胞的细胞周期进展和侵袭转移，促进细胞凋亡。
作者：王寰昱；王亚峰；张昆松；张朝晖；张梓健；黄陕州；吴健；彭宝岗；陈东；周奇 刊期： 2015年第06期
目的：探讨转录因子c－Jun对Mepe基因的转录调控作用，并寻找c－Jun在Mepe启动子上的特异性结合位点。方法：利用免疫组织化学方法定位c－Jun与Mepe在小鼠骨组织的表达；采用real－time PCR的方法检测c－Jun的表达量改变对Mepe mRNA表达的影响；应用双萤光素酶报告基因检测系统及定点突变技术分析c－Jun对Mepe基因启动子转录活性的影响。结果：转录因子c－Jun在小鼠骨细胞胞核中呈阳性表达，而Mepe在小鼠骨细胞的胞浆中有表达；real－time PCR显示c－Jun过表达后，Mepe mRNA的表达显著增加（ P＜0．05）；双萤光素酶报告基因检测系统检测显示，在成骨细胞中转染pCMV－3Tag－1－c－Jun的实验组Mepe启动子的转录活性升高（P＜0．05）；定点突变c－Jun的潜在结合位点后，Mepe启动子的转录活性显著下降（ P＜0．05）。结论：转录因子c－Jun可通过Mepe启动子上潜在的c－Jun结合位点上调成骨细胞中该基因的转录。
作者：张娟娟；刘宗霞；孙岩 刊期： 2015年第06期
目的：探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2（ mTORC2）通路在苯丙胺致中枢神经损伤过程中的变化。方法：通过注射苯丙胺建立大鼠动物模型，采用open field方法测试大鼠的自主行为活动，用透射电镜观察大鼠纹状体的超微结构，用Western blot方法检测mTORC2信号通路的变化，用免疫组化方法观察mTORC2阳性神经元的变化。结果：苯丙胺大鼠在行为学上出现刻板行为，纹状体细胞和神经纤维的超微结构受损，磷酸化的mTORC2和蛋白激酶B（ Akt）表达减少，并且磷酸化的mTORC2阳性细胞也减少。结论：mTORC2通路的抑制可能在苯丙胺致纹状体结构的损伤中起重要作用。
作者：王海树；何文姬；宿宝贵；潘三强 刊期： 2015年第06期
目的：探讨间充质干细胞（ MSC）条件培养基（ MSCCM）对氧化应激损伤的心肌细胞的保护作用及机制。方法：用流式细胞术对MSC进行鉴定，再用MTT实验确定MSCCM对抗H2 O2氧化应激损伤的佳孵育时间。将H9c2细胞分为正常组、模型组、模型＋MSCCM组和MSCCM组。模型＋MSCCM组和MSCCM组均用MSC－CM进行预孵育24 h，模型组和模型＋MSCCM组用浓度为300μmol／L的H2 O2作用4 h模拟心肌细胞的氧化应激损伤。利用流式细胞术检测损伤后心肌细胞的线粒体膜电位变化、凋亡比率等指标，通过荧光显微镜检测细胞ROS产生的变化，Western blot检测Nrf2／ARE通路的相关蛋白表达。结果：MSCCM组心肌细胞的线粒体膜电位、凋亡比率和ROS产生与正常组相比均无显著差异（ P＞0．05）；模型＋MSCCM组的线粒体膜电位、凋亡比例和ROS产生与模型组相比差异显著（P＜0．01）；在0 h到24 h这段时间内，心肌细胞Nrf2／ARE通路中的Nrf2核转位与HO－1表达均随着MSCCM孵育时间延长而增加。结论：MSCCM可以保护心肌细胞，对抗H2 O2诱导的氧化应激损伤，其机制可能与激活Nrf2／ARE通路有关。
作者：董曦；孙桂波；罗云；陈素红；孙晓波 刊期： 2015年第06期
目的：观察抗衰老Klotho蛋白对大鼠乳鼠原代心肌细胞缺氧／复氧（ H／R）损伤的作用并探讨其作用机制。方法：建立大鼠乳鼠心肌细胞H／R模型，并将心肌细胞分为正常对照组、H／R模型组和不同浓度（0．1μmol／L、1μmol／L和10μmol／L） Klotho作用H／R组。观察各组心肌细胞H／R前后搏动频率变化，利用MTT方法检测细胞存活率；测定各组心肌细胞H／R后LDH、CK、AST的漏出量及MDA含量、SOD活性；流式细胞术检测各组心肌细胞的凋亡率；real－time PCR检测各组心肌细胞中内质网应激标记及凋亡相关分子GRP78、CRT和CHOP和caspase－12 mRNA的表达情况；Western blot法检测心肌细胞内内质网应激凋亡蛋白CHOP和caspase－12蛋白表达及Akt磷酸化水平。结果：与正常对照组相比，H／R模型组中心肌细胞搏动频率和细胞存活率显著下降，细胞凋亡率显著升高（P＜0．05）；LDH、CK、AST和MDA含量升高而SOD活性显著降低（P＜0．05）；GRP78、CRT、CHOP和caspase－12 mRNA表达显著增高（ P＜0．05）；CHOP和caspase－12蛋白表达随之增高而Akt的磷酸化水平显著降低（P＜0．05）。与H／R模型组相比，抗衰老Klotho蛋白作用H／R心肌细胞后，心肌细胞搏动频率和细胞存活率显著升高，细胞凋亡率逐渐降低（P＜0．05），LDH、CK、AST和MDA含量下降而SOD活性显著增高（P＜0．05），GRP78、CRT、CHOP和caspase－12 mRNA的表达逐渐降低（ P＜0．05），CHOP和caspase－12蛋白表达也随之降低，而Akt磷酸化水平显著增加（ P＜0．05）。结论：抗衰老Klotho蛋白能够提升H／R损伤后心肌细胞的存活率，抑制细胞凋亡，通过抵抗氧化应激和过度内质网应激反应发挥作用，并与激活Akt磷酸化有关。
作者：张军；代文静；周敬群；张家俊；曹志刚 刊期： 2015年第06期
目的：探讨长期有氧运动对心梗后心力衰竭（心衰）大鼠模型左心室及交感神经重塑（结构重塑与功能重塑）的影响，为心衰的机制研究及康复治疗提供科学依据和有效方法。方法：健康雄性Wistar大鼠通过结扎冠状动脉前降支建立心梗后心衰模型，术后4周随机分为假手术安静组（S组）、心衰安静组（H组）和心衰运动组（ HE组）。 HE组进行10周跑台训练，S组和H组保持安静状态。超声心动术检测心脏结构与功能，即左室舒张期内径（ LVIDd）、左室收缩期内径（ LVIDs）、左室舒张期前壁厚度（ LVAWDd）、左室收缩期前壁厚度（ LVAWDs）、左室舒张期后壁厚度（LVPWDd）、左室收缩期后壁厚度（LVPWDs）、缩短分数（FS）和左室射血分数（LVEF）；Masson染色进行心脏组织病理学观察并获得心肌胶原容积分数（ CVF ）；高压液相色谱法检测心肌和血浆去甲肾上腺素（ NE）水平；经皮下引导电极连续采集心电信号，对自主神经功能参数———心率变异性（ HRV）进行频域分析，包括总功率谱（ TP）、归一化低频功率谱（ LFn）、归一化高频功率谱（ HFn）和LF／HF比值；实时荧光定量PCR检测心肌I型胶原（ Col－I）、III型胶原（ Col－III）、心房钠尿因子（ ANF）、α－肌球蛋白重链（α－MHC）、β－肌球蛋白重链（β－MHC）和肌质网Ca2＋－ATP酶（ SERCA2a） mRNA表达，Western blotting法检测心肌神经生长因子（ NGF）及其受体（ TrkA）和酪氨酸羟化酶（ TH）蛋白表达。结果：（1）与S组比较，H组体重（ BW）、LVIDd、FS、LVEF、TP、HFn、α－MHC和SER－CA2a的mRNA，NGF、TrkA和TH的蛋白表达降低（ P＜0．05）；左室重量（ LVW）、左室质量指数（ LVMI）、LVAWDd、LVAWDs、LVPWDd、LVPWDs、CVF、血浆和心肌NE含量、LFn、LF／HF、ANF、β－MHC、Col－I和Col－III的 mRNA表达升高（P＜0．05）。（2）与H组比较，HE组LVW、LVMI、LVIDd、FS、LVEF、TP、HFn、α－MHC和SERCA2a的 mRNA， NGF、TrkA和TH的蛋白表达升高（P＜0．05）；CVF、血浆和心肌NE含量、LFn、LF／HF、ANF、β－MHC、Col－I和Col－III的mRNA表达降低（P＜0．05）。结论：长期有氧运动可抑制心梗后心衰大鼠左室重塑与交感神经重塑，心功能和自主调节改善。
作者：甄洁；李晓霞 刊期： 2015年第06期
目的：构建聚合物／液晶细胞模型，探究其表面弹性对大鼠骨髓干细胞黏附情况的影响。方法：溶剂挥发致相分离方法构建聚合物／液晶细胞模型，通过偏光显微镜、扫描式电子显微镜及X射线衍射观察细胞模型的表面特征。全骨髓细胞贴壁培养法分离大鼠骨髓间充质干细胞（ BMSCs），通过表面因子检测和诱导其成骨成脂分化进行鉴定。培养3代后分4组：纯PU空白对照组，10％膜组，30％膜组和50％膜组。接种细胞密度为5×107／L，待细胞贴壁24h后作细胞骨架染色处理，激光共聚焦显微镜观察细胞附着在材料上的情况并拍照。结果：溶剂挥发致相分离方法成功构建3种不同硬度的聚合物／液晶细胞模型；表面因子检测显示CD29、CD44、CD90呈阳性表达，而CD34和CD45呈阴性表达；经过茜素红S染色和油红O染色，成骨成脂分化形成的钙结节和脂滴都显而易见；细胞骨架染色拍摄结果显示，纯PU对照组、10％膜组和30％膜组上的细胞铺展面积较广，肌动蛋白微丝和细胞核清晰明显；而50％膜组的细胞铺展面积较小，细胞核虽较清晰，但是肌动蛋白微丝却模糊不清。结论：合适液晶含量的聚合物／液晶生物膜能支持大鼠骨髓干细胞的贴壁生长，而液晶含量过高则抑制细胞的贴壁生长。
作者：郭燕珊；吴昊；郑力恒；尚玉攀；屠美；张嘉晴 刊期： 2015年第06期
目的：探讨纳米金（gold nanoparticles，GNPs）对人肝癌阿霉素（adriamycin，ADM）耐药细胞株HepG2／ADM的阿霉素耐药性的逆转作用及其可能机制。方法：MTT比色法检测GNPs对人肝癌细胞株HepG2及其耐药细胞株HepG2／ADM对不同浓度 ADM 耐药性的影响；流式细胞术检测 GNPs 处理后 ADM （2 mg／L ）对HepG2／ADM细胞凋亡的影响；紫外分光光度计检测GNPs处理后HepG2／ADM细胞内ADM的药物浓度；谷胱甘肽（ GSH）检测试剂盒（ DTNB法）检测GNPs处理后HepG2／ADM细胞GSH的含量。结果：GNPs处理前HepG2和HepG2／ADM细胞对不同浓度ADM的半数抑制浓度分别为：（9．16±2．03）mg／L、（29．46±1．73）mg／L，耐药倍数为3．22；GNPs处理后HepG2／ADM 细胞对不同浓度ADM的半数抑制浓度为（15．18±0．85）mg／L，逆转指数为1．95。GNPs＋ADM组HepG2／ADM的细胞凋亡率明显高于单独ADM组（P＜0．05）。 HepG2／ADM组细胞内的ADM含量低于HepG2组细胞内的ADM含量（ P＜0．01）；GNPs处理后HepG2／ADM细胞内的ADM含量较处理前明显增加（P＜0．01）。 HepG2／ADM组细胞内GSH含量高于HepG2组（P＜0．01）；GNPs处理后HepG2／ADM细胞内的GSH含量较处理前明显降低（ P＜0．05）。结论：纳米金具有逆转耐药肝癌细胞对阿霉素耐药性的作用，并且可以降低细胞内GSH含量及增加胞内化疗药物浓度。
作者：邵明涛；潘运龙；覃莉；巫青；丁晖；赵晓旭 刊期： 2015年第06期
目的：探讨1，3－二环戊基－1，2，3，6－四氢嘧啶－4，5－二甲酸二乙酯（ZL－5015）对内毒素攻击小鼠的保护作用及机制。方法：腹腔注射脂多糖（70 mg／kg）制备小鼠内毒素中毒死亡模型和内毒素血症模型。脂多糖（10 mg／L）刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生炎症相关细胞因子作为体外炎症模型。 ELISA法检测细胞白细胞介素1β（ IL－1β）、白细胞介素10（IL－10）和肿瘤坏死因子α（TNF－α）的含量。 Real－time PCR检测细胞因子mRNA的表达水平。结果：ZL－5015（100和200 mg／kg）预防性灌胃给药能小幅提高内毒素中毒小鼠的存活率和存活时间，在中毒早期能降低内毒素血症小鼠血清中IL－1β和TNF－α的水平，提高IL－10的水平。体外实验表明， ZL－5015（10、20和40μmol／L）能抑制内毒素刺激的腹腔巨噬细胞IL－1β和TNF－α蛋白及mRNA的表达，促进IL－10蛋白及mRNA的表达。结论：四氢嘧啶类化合物ZL－5015能提高内毒素中毒小鼠的存活率和存活时间，但作用较弱，其作用机制可能与抑制促炎细胞因子IL－1β和TNF－α、促进抑炎细胞因子IL－10的表达有关。
作者：邱小惠；林嘉；余传林；陈娜娜；雷林生 刊期： 2015年第06期
目的：研究氧化低密度脂蛋白（ oxidized low－density lipoprotein，ox－LDL）对巨噬细胞自噬的诱导作用，并探讨可能的分子机制。方法：体外培养RAW264．7巨噬细胞，给予抗CD36单克隆抗体（2 mg／L）、二亚苯基碘鎓（diphenyleneiodonium，DPI；5μmol／L）、3－甲基腺嘌呤（3－methyladenine，3－MA；3 mmol／L）或雷帕霉素（1μmol／L）预处理1 h，再加入ox－LDL（100 mg／L）继续培养12 h。采用MTT法检测细胞活力，采用相应试剂盒测定培养液乳酸脱氢酶（ lactic dehydrogenase，LDH）、细胞内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（ nicotinamide adenine dinucleotide phos－phate，NADPH）氧化酶、超氧化物歧化酶（ superoxide dismutase，SOD）活性以及活性氧簇（ reactive oxygen species， ROS）和丙二醛（ malondialdehyde，MDA）水平，以评价细胞膜完整性和氧化应激反应。采用免疫印迹技术检测自噬标志分子beclin－1和微管相关蛋白1轻链3－II（ microtubule－associated protein 1 light chain 3－II，LC3－II）表达变化。结果：ox－LDL诱导巨噬细胞自噬反应，表现为beclin－1和LC3－II上调；与自噬抑制剂3－MA相似，抗CD36单抗可显著抑制ox－LDL所诱导的LC3－II和beclin－1表达。抗CD36单抗明显抑制ox－LDL所诱导的氧化应激，包括抑制NAD－PH氧化酶活性和ROS、MDA水平以及升高SOD活性，其作用与NADPH氧化酶抑制剂DPI相似。另外，DPI显著抑制ox－LDL所诱导的beclin－1和LC3－II表达，且ox－LDL所诱导的细胞活力降低和LDH漏出可被3－MA促进并可被自噬诱导剂雷帕霉素拮抗。结论：ox－LDL可诱导巨噬细胞自噬，其机制可能与CD36介导ox－LDL摄取进而触发的氧化应激有关，且一定程度的自噬可减轻ox－LDL所诱导的巨噬细胞损伤。
作者：姚树桐；李严严；刘庆华；岳峰；田华；桑慧；杨娜娜；秦树存 刊期： 2015年第06期
目的：研究WNT5B在乳腺癌中的表达，初步探讨WNT5B与乳腺癌临床病理特征的关系。方法：采用real－time PCR和Western blot法检测67例乳腺癌及癌旁组织中WNT5B在mRNA和蛋白水平的表达情况，通过免疫组织化学方法检测WNT5B在乳腺癌和癌旁组织中的表达并分析WNT5B的表达与相关临床病理指标之间的关系。结果：67例乳腺癌组织标本中均有不同程度WNT5B的mRNA及蛋白表达，且WNT5B在乳腺癌组织的表达明显低于癌旁组织（P＜0．05）；其中WNT5B在原发性肿瘤大小T≤20 mm的乳腺癌患者中的表达明显高于其在T＞20 mm组患者中的表达（P＜0．05）；WNT5B的表达与乳腺癌患者腋窝淋巴结转移情况、组织学分级、相关的免疫组织化学指标（ ER、PR、c－ErBb－2、p53和Ki－67）之间无明显的相关性（ P＞0．05）。结论： WNT5 B在乳腺癌组织中的表达低于癌旁组织，WNT5B表达与乳腺癌患者原发肿瘤大小呈负相关，提示WNT5B可能作为乳腺癌预后的一个新的分子标志物，为乳腺癌的诊治提供新的思路。
作者：刘洪涛；周凡涵；申媛媛；张艾洁；赖艳梅；厉红元 刊期： 2015年第06期
目的：探讨肾脏去神经（ renal denervation， RDN）对动脉粥样硬化（ atherosclerosis，AS）家兔肿瘤坏死因子α（TNF－α）、白细胞介素1α（IL－1α）和白细胞介素6（IL－6）的影响。方法：28只雄性新西兰白兔随机分为对照组、RDN后高脂饲养（ high－fat diet， HFD）组（ RDN组）、假手术后HFD组（假手术组）和单纯HFD组（ HFD组），每组7只。测量各组血浆去甲肾上腺素（ norepinephrine，NE）、炎症因子及血脂水平；免疫组化检测血管紧张素II （Ang II）的表达，Western blot检测核因子κB（NF－κB）和血管紧张素II 1型受体（AT1R）的表达；real－time PCR检测TNF－α、IL－1α和IL－6 mRNA的表达；光镜下观察肾动脉结构改变和主动脉病理变化。结果：8周后RDN组NE水平明显低于假手术组和HFD组（P＜0．05）；RDN组血浆甘油三酯（TG）水平低于HFD组（P＜0．05）；RDN组的Ang II蛋白表达低于假手术组和HFD组（P＜0．01）；RDN组NF－κB蛋白表达低于假手术组（P＜0．05）；RDN组TNF－α和IL－1α的血浆水平低于假手术组和HFD组（P＜0．05），RDN组IL－6 mRNA的表达低于假手术组（P＜0．01）。结论：RDN能有效抑制全身交感神经活性，降低血浆TG水平，减轻血管炎症反应，延缓动脉粥样硬化的发展。
作者：谭震；杨瀚晅；卢嘉奕；刘畅；殷跃辉 刊期： 2015年第06期
目的：观察高糖培养对心肌细胞钙网蛋白（ calreticulin，CRT）表达的变化、线粒体功能和细胞凋亡的影响。方法：将培养的AC－16人心肌细胞随机分为正常糖浓度组、高糖组、高糖＋CRT siRNA （ small interfering RNA）组及等渗组，分别测定各组心肌细胞凋亡率、细胞内活性氧水平、线粒体功能和CRT表达水平的变化。结果：与正常糖浓度培养的心肌细胞相比，高糖组心肌细胞凋亡率增加，活性氧生成增多，线粒体膜电位及呼吸链酶活性降低，同时CRT表达升高；CRT siRNA可以减轻高糖组心肌细胞线粒体损伤，但细胞内活性氧的生成与高糖组相比未见显著差异。结论：CRT介导的线粒体损伤可能参与高糖时心肌细胞凋亡的增加。
作者：闫蕊；单虎；林琳；刁佳宇；张明；朱延河；谭武红；魏瑾 刊期： 2015年第06期
目的：通过体外实验观察罗米地辛对效应T细胞和调节性T细胞的作用。方法：取CFSE标记的淋巴细胞、CD4＋T细胞和CD8＋T细胞作为反应细胞，实验组加入不同浓度梯度（1、3、5μmol／L）的罗米地辛及CD3／CD28单抗进行淋巴细胞培养，以仅加入CD3／CD28单抗作为阳性对照组，另设空白对照组。培养72 h后检测各组细胞的增殖情况。以淋巴细胞作为反应细胞，实验组、阳性对照组及空白对照组设定同上，72 h后检测各组中CD4＋Foxp3＋T细胞与CD4＋T细胞的比例变化。同时采用ELISA检测培养液中相关细胞因子，如TNF－α、IL－10及TGF－β水平的变化。结果：罗米地辛剂量依赖性地抑制CD3／CD28单抗诱导的淋巴细胞、CD4＋T细胞和CD8＋T细胞的增殖（P＜0．05）。在CD3／CD28单抗存在的条件下，1μmol／L的罗米地辛不能诱导CD4＋Foxp3＋T细胞的比例上调（P＞0．05）。但提高罗米地辛的浓度至3μmol／L和5μmol／L后，CD4＋Foxp3＋T细胞的比例显著提高（P＜0．05）。随着罗米地辛浓度的增加，TNF－α和IL－10水平呈剂量依赖性降低，但各实验组明显高于空白对照组而低于阳性对照组（P＜0．05）。 TGF－β在阳性对照组虽稍有升高，但与空白对照组相比无显著差异（P＞0．05）。而随着罗米地辛浓度的增加，TGF－β水平呈剂量依赖性升高，3实验组间及与空白对照组、阳性对照组间差异显著（P＜0．05）。结论：体外实验研究显示罗米地辛不仅能够有效抑制效应性T细胞的增殖，而且一定浓度的罗米地辛可上调调节性T细胞的比例，这可能与TGF－β升高有关，而与IL－10变化无关。
作者：田孝军；徐晶；蒋继贫 刊期： 2015年第06期
目的：探讨一种有效记录成骨细胞L型钙通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法。此方法使玻璃电极与细胞内液保持电化学连续性，使细胞内环境保持稳定，改善常规全细胞膜片钳破膜造成的破膜难和封接不稳，以及常规全细胞膜片钳破膜后造成的封接不稳。方法：以成骨细胞为研究对象，采用β－七叶素穿孔全细胞膜片钳技术，记录骨细胞L型钙通道电流。结果：采用这种穿孔全细胞膜片钳技术，能有效记录到成骨细胞上L型钙通道电流。结论：穿孔膜片钳技术是一种简便而有效的记录全细胞电流的实验方法，该方法的建立为今后更深入的研究疾病中成骨细胞的病理生理机制提供实验基础。
作者：王文伟；祁小燕；张雪梅 刊期： 2015年第06期
目的：探讨活血降脂方对小鼠脂肪肝的防治作用及机制。方法：高脂饲料喂养小鼠，分别用不同剂量的活血降脂方（由人参、三七、天麻组成，命名为GST）给小鼠灌胃2周，检测血脂、肝组织甘油三酯（ TG）含量，并观察肝指数和肝脏病理变化，筛选出药物的佳用药剂量。此外，小鼠分为正常对照（ NC）组，喂基础饲料；模型组喂高脂饲料。12周后将模型小鼠随机分为高脂（ HF ）组，正常饮食（ ND ）组和GST组。除HF组饲高脂饲料外，其余各组饲基础饲料；GST组给予GST灌胃2周，其余各组以同等容积蒸馏水灌胃。检测血清总胆固醇（ TC）、TG、高密度脂蛋白胆固醇（ HDL－C）、低密度脂蛋白胆固醇（ LDL－C）及肝组织TC 、TG含量，观察肝指数、肝组织超氧化物歧化酶（ SOD）活性、丙二醛（ MDA）含量，肝组织病理变化及过氧化物酶体增殖物激活受体α（ PPARα）、细胞色素P4502E1（ CYP2E1）的mRNA表达。结果：GST可显著降低血脂、肝脂和MDA水平，增加SOD活性，明显降低肝指数并改善肝组织脂肪变性，增加肝组织PPARαmRNA表达、抑制CYP2E1 mRNA的表达。结论： GST具有有效防治脂肪肝的作用，其机制可能与上调肝组织 PPARαmRNA的表达、降低血清和肝组织 TG含量、下调CYP2E1 mRNA的表达以及抗脂质过氧化反应有关。
作者：胡巢凤；孙丽萍；周晗；杨钦河；陆大祥 刊期： 2015年第06期
目的：观察齐墩果酸对矽肺大鼠肿瘤坏死因子α（ TNF－α）和胶原表达的影响及其可能作用机制。方法：80只SPF级Wistar雄性大鼠，随机分为对照组、模型组、齐墩果酸组和溶剂组，每组20只。除对照组外，其余组大鼠采用非暴露法气管内一次性注入SiO2悬液（250 mg／kg）复制动物矽肺模型。齐墩果酸组自注射SiO2后每天给予齐墩果酸60 mg／kg灌胃，溶剂组每天用0．6％羧甲基纤维素钠溶液（10 mL／kg）灌胃，对照组用生理盐水（10 mL／kg）灌胃，连续56 d。动物分别在注射SiO2后第7、14、28和56天处死（每次每组5只）。处死后检测各组大鼠肺系数，并观察形态学变化；应用ELISA法检测大鼠血清中TNF－α的含量；试剂盒检测肺组织中总胶原蛋白含量；免疫组织化学法检测肺组织核因子κB（NF－κB）表达。结果：（1）与对照组比较，模型组和溶剂组大鼠肺系数和总胶原蛋白含量明显升高，结合形态学变化，矽肺模型造模成功。齐墩果酸组各时点肺系数和总胶原蛋白含量比模型组和溶剂组相应时点低，但比对照组高。（2）模型组和溶剂组大鼠血清中的TNF－α含量各时点明显升高，高峰在第14天，之后稍降，但明显高于对照组，差异有统计学意义；模型组与溶剂组各时点比较，差异无统计学意义。齐墩果酸组TNF－α含量与模型组相比均降低，各时点比较差异有统计学意义。（3）模型组和溶剂组大鼠肺组织中NF－κB表达量逐渐升高，至第28天达高峰，各时点与对照组比较差异均有统计学意义。齐墩果酸组的NF－κB阳性表达趋势与模型组相同，但明显低于模型组而高于对照组，各时点与对照组比较差异有统计学意义。结论：齐墩果酸通过抑制TNF－α和胶原表达减缓矽肺纤维化的发生，可能与NF－κB通路有关。
作者：彭海兵；王建行；刘燕；张娜；田景瑞；肖永红 刊期： 2015年第06期
中国病理生理杂志
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主办：中国病理生理学会
