张晔；张连阳；孙士锦；李阳；谭浩
目的：探索母体肢体缺血预处理（ LIP）对宫内窘迫胎鼠复氧后海马神经元线粒体结构和功能的影响。方法：将孕20 d的40只SD大鼠随机分为假手术组（ S组）、LIP对照组、胎鼠宫内窘迫组（ FD组）和LIP＋FD组。通过实验设计建立胎鼠宫内窘迫模型，观察各组胎鼠海马CA1区线粒体超微结构的变化；检测海马线粒体跨膜电位变化；测定海马组织活性氧簇（ ROS）、三磷酸腺苷（ ATP）、丙二醛（ MDA）含量及锰－超氧化物歧化酶（ Mn－SOD）活性变化。结果：（1）与S组比较，FD组和LIP＋FD组电镜下观察胎鼠海马CA1区线粒体呈不同程度破坏，线粒体膜电位下降，ATP含量和Mn－SOD活性降低，ROS和MDA含量增加（P＜0．05）。（2）与FD组比较，LIP＋FD组胎鼠海马CA1区线粒体的超微结构保持较好的完整性，线粒体膜电位明显提高，海马ATP含量和Mn－SOD活性显著增高，ROS和MDA含量减少（ P＜0．05）。结论：母体肢体缺血预处理对宫内窘迫胎鼠复氧后海马神经元线粒体功能具有保护作用。
作者：卢欢；郑晓春；陈小琳；吴希珠；郑官林 刊期： 2015年第06期
作者： 刊期： 2015年第06期
作者： 刊期： 2015年第06期
目的：探索纳米材料聚乙烯亚胺（ PEI ）携载不同分子量的蛋白质转染进人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）的作用及优化其佳配比条件。方法：利用物理化学作用构建6组PEI－DNase I（DNA酶I）复合体，运用激光散射技术初步摸索其佳摩尔比，用透射电镜直观复原纳米－蛋白复合体外貌；同时，原代分离培养健康人的骨髓间充质干细胞并进行体外扩增，通过构建成功的4组PEI－GFP（绿色荧光蛋白）纳米蛋白复合体对hBMSCs进行转染，共聚焦荧光显微镜下观察荧光表达情况，再通过MTT法检测该复合体对细胞增殖的毒性影响，并用β－半乳糖苷酶实验验证其转入蛋白的活性表现。结果：当PEI与蛋白质的摩尔比为4∶1时，形成的复合体转染效率高，β－半乳糖苷酶实验细胞染色变蓝。结论：PEI能与蛋白质形成纳米复合体，并能转染多种蛋白质进入人骨髓间充质干细胞，所转染的蛋白质分子仍具有活性，为细胞重编程技术提供了新途径。
作者：姜霖；吴岳恒；李晓红；潘宇；肖静；杨翔宇；冯媛；余细勇 刊期： 2015年第06期
目的：探讨脑缺血及后适应对树鼩海马内质网应激信号分子蛋白激酶R样内质网激酶（ PERK）及葡萄糖调节蛋白78（GRP78）的影响及后适应的脑保护机制。方法：光化学反应诱导树鼩局部血栓性脑缺血，于脑缺血后3．5 h夹闭、打开缺血侧颈总动脉交替3个循环（每次5 min）以复制缺血后适应模型。 HE染色观察缺血侧海马神经元损伤及超微结构变化，RT－PCR检测脑缺血及后适应不同时间海马组织PERK及GRP78 mRNA表达的变化，免疫组织化学法与Western blot法检测PERK及GRP78的蛋白定位及表达变化。结果：海马神经元随脑缺血时间延长而损伤加重，缺血24 h损伤为严重，后适应可减轻损伤。脑缺血4 h、24 h及72 h PERK的mRNA及蛋白表达较假手术组增高（P＜0．05），后适应组与相应的缺血组相比，PERK 的mRNA及蛋白表达减少，4 h、24 h差异显著（ P＜0．05）；脑缺血4 h、24 h及72 h GRP78的mRNA及蛋白表达与假手术组无明显差异，后适应24 h组较缺血24 h组表达增高（ P＜0．05）。结论：树鼩局部血栓性脑缺血可激活缺血侧海马内质网应激反应，引起PERK／eIF2α信号转导通路中相关分子PERK 的mRNA及蛋白表达增高。缺血后适应处理通过下调PERK、上调GRP78的表达，减轻内质网应激反应，减少神经元损伤，具有一定的脑保护作用。
作者：陈理军；马艳；李霞；陈静；李树清；张颖 刊期： 2015年第06期
目的：通过体外实验观察罗米地辛对效应T细胞和调节性T细胞的作用。方法：取CFSE标记的淋巴细胞、CD4＋T细胞和CD8＋T细胞作为反应细胞，实验组加入不同浓度梯度（1、3、5μmol／L）的罗米地辛及CD3／CD28单抗进行淋巴细胞培养，以仅加入CD3／CD28单抗作为阳性对照组，另设空白对照组。培养72 h后检测各组细胞的增殖情况。以淋巴细胞作为反应细胞，实验组、阳性对照组及空白对照组设定同上，72 h后检测各组中CD4＋Foxp3＋T细胞与CD4＋T细胞的比例变化。同时采用ELISA检测培养液中相关细胞因子，如TNF－α、IL－10及TGF－β水平的变化。结果：罗米地辛剂量依赖性地抑制CD3／CD28单抗诱导的淋巴细胞、CD4＋T细胞和CD8＋T细胞的增殖（P＜0．05）。在CD3／CD28单抗存在的条件下，1μmol／L的罗米地辛不能诱导CD4＋Foxp3＋T细胞的比例上调（P＞0．05）。但提高罗米地辛的浓度至3μmol／L和5μmol／L后，CD4＋Foxp3＋T细胞的比例显著提高（P＜0．05）。随着罗米地辛浓度的增加，TNF－α和IL－10水平呈剂量依赖性降低，但各实验组明显高于空白对照组而低于阳性对照组（P＜0．05）。 TGF－β在阳性对照组虽稍有升高，但与空白对照组相比无显著差异（P＞0．05）。而随着罗米地辛浓度的增加，TGF－β水平呈剂量依赖性升高，3实验组间及与空白对照组、阳性对照组间差异显著（P＜0．05）。结论：体外实验研究显示罗米地辛不仅能够有效抑制效应性T细胞的增殖，而且一定浓度的罗米地辛可上调调节性T细胞的比例，这可能与TGF－β升高有关，而与IL－10变化无关。
作者：田孝军；徐晶；蒋继贫 刊期： 2015年第06期
目的：探讨巨噬细胞在脂多糖（ LPS）的持续刺激下产生免疫抑制后的表型变化及对T细胞影响的分子机制。方法：蔗糖密度梯度离心法从全血中分离人外周血单个核细胞，结合磁珠细胞分选技术分选出单核细胞，体外诱导单核细胞分化为巨噬细胞，以未处理和IFN－γ处理为对照，对LPS处理48 h的巨噬细胞进行形态学观察、细胞表面分子（ HLA－DR、CD14、CCR7、HLA－ABC及CD40）表达的检测和细胞因子（ IL－10、IL－12、IL－6及TNF－α）分泌水平的检测。同时将LPS诱导的巨噬细胞与CD3＋T细胞进行异体共培养，进一步观察巨噬细胞对T细胞增殖能力的影响。用实时荧光定量PCR验证Toll样受体4（ TLR4）信号通路中的非MyD88依赖型途径相关分子的表达水平。结果：LPS处理48 h的巨噬细胞，抗原递呈能力（ HLA－DR）下降，免疫抑制细胞因子IL－10升高，把LPS诱导的巨噬细胞与异体T细胞共培养6 d，其促进CD8＋T细胞增殖的能力较弱。实时荧光定量PCR结果显示LPS持续刺激下巨噬细胞的TRIF、IRF3和CIITA均呈下调状态。结论：持续LPS处理巨噬细胞48 h 后，巨噬细胞呈现一种免疫抑制的状态，且其刺激CD8＋T细胞增殖的能力减弱，这种状态与非MyD88依赖型TLR4信号通路受损有关。
作者：龙允麟；陈颖；余汝媛；汪洋 刊期： 2015年第06期
目的：探讨纳米金（gold nanoparticles，GNPs）对人肝癌阿霉素（adriamycin，ADM）耐药细胞株HepG2／ADM的阿霉素耐药性的逆转作用及其可能机制。方法：MTT比色法检测GNPs对人肝癌细胞株HepG2及其耐药细胞株HepG2／ADM对不同浓度 ADM 耐药性的影响；流式细胞术检测 GNPs 处理后 ADM （2 mg／L ）对HepG2／ADM细胞凋亡的影响；紫外分光光度计检测GNPs处理后HepG2／ADM细胞内ADM的药物浓度；谷胱甘肽（ GSH）检测试剂盒（ DTNB法）检测GNPs处理后HepG2／ADM细胞GSH的含量。结果：GNPs处理前HepG2和HepG2／ADM细胞对不同浓度ADM的半数抑制浓度分别为：（9．16±2．03）mg／L、（29．46±1．73）mg／L，耐药倍数为3．22；GNPs处理后HepG2／ADM 细胞对不同浓度ADM的半数抑制浓度为（15．18±0．85）mg／L，逆转指数为1．95。GNPs＋ADM组HepG2／ADM的细胞凋亡率明显高于单独ADM组（P＜0．05）。 HepG2／ADM组细胞内的ADM含量低于HepG2组细胞内的ADM含量（ P＜0．01）；GNPs处理后HepG2／ADM细胞内的ADM含量较处理前明显增加（P＜0．01）。 HepG2／ADM组细胞内GSH含量高于HepG2组（P＜0．01）；GNPs处理后HepG2／ADM细胞内的GSH含量较处理前明显降低（ P＜0．05）。结论：纳米金具有逆转耐药肝癌细胞对阿霉素耐药性的作用，并且可以降低细胞内GSH含量及增加胞内化疗药物浓度。
作者：邵明涛；潘运龙；覃莉；巫青；丁晖；赵晓旭 刊期： 2015年第06期
目的：探讨肾脏去神经（ renal denervation， RDN）对动脉粥样硬化（ atherosclerosis，AS）家兔肿瘤坏死因子α（TNF－α）、白细胞介素1α（IL－1α）和白细胞介素6（IL－6）的影响。方法：28只雄性新西兰白兔随机分为对照组、RDN后高脂饲养（ high－fat diet， HFD）组（ RDN组）、假手术后HFD组（假手术组）和单纯HFD组（ HFD组），每组7只。测量各组血浆去甲肾上腺素（ norepinephrine，NE）、炎症因子及血脂水平；免疫组化检测血管紧张素II （Ang II）的表达，Western blot检测核因子κB（NF－κB）和血管紧张素II 1型受体（AT1R）的表达；real－time PCR检测TNF－α、IL－1α和IL－6 mRNA的表达；光镜下观察肾动脉结构改变和主动脉病理变化。结果：8周后RDN组NE水平明显低于假手术组和HFD组（P＜0．05）；RDN组血浆甘油三酯（TG）水平低于HFD组（P＜0．05）；RDN组的Ang II蛋白表达低于假手术组和HFD组（P＜0．01）；RDN组NF－κB蛋白表达低于假手术组（P＜0．05）；RDN组TNF－α和IL－1α的血浆水平低于假手术组和HFD组（P＜0．05），RDN组IL－6 mRNA的表达低于假手术组（P＜0．01）。结论：RDN能有效抑制全身交感神经活性，降低血浆TG水平，减轻血管炎症反应，延缓动脉粥样硬化的发展。
作者：谭震；杨瀚晅；卢嘉奕；刘畅；殷跃辉 刊期： 2015年第06期
目的：观察熊去氧胆酸治疗婴儿肝炎综合征的临床疗效，并初步探讨其药理机制。方法：选择76例婴儿肝炎综合征患儿为研究对象，根据治疗方法不同分为常规治疗组及熊去氧胆酸治疗组，另选择同期门诊体检健康儿童20名作为对照组。常规治疗组给予抗病毒、护肝等治疗，熊去氧胆酸治疗组在常规治疗组基础上加用熊去氧胆酸（10 mg? kg－1? d－1），疗程为2～3周。治疗2周后，比较常规治疗组和熊去氧胆酸治疗组治疗前后血清总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、谷丙转氨酶（ALT）、谷氨酰转肽酶（GGT）、总胆汁酸（TBA）和TNF－α、IL－6的变化情况。结果：（1）婴儿肝炎综合征患儿血清TNF－α和IL－6均明显高于对照组（P＜0．01）。（2）常规治疗组患儿治疗后血清TBIL、DBIL、ALT、GGT、TBA及TNF－α和IL－6均较治疗前下降，差异有统计学意义（ P＜0．01）。（3）熊去氧胆酸治疗组患儿治疗后血清TBIL、DBIL、ALT、GGT、TBA及TNF－α和IL－6均较常规治疗组显著降低，差异有统计学意义（P＜0．01）。结论：在常规治疗基础上加用熊去氧胆酸能更有效减轻婴儿肝炎综合征患儿全身炎症反应，减轻肝脏损伤。
作者：朱磊；朱俊岭；钮明杨；胡丹；祁伯祥 刊期： 2015年第06期
目的：探讨组胺H3受体（H3R）在小鼠成肌细胞C2C12成肌分化过程及分化后的横纹肌细胞中的表达和可能发挥的作用。方法：诱导C2C12细胞成肌分化，测量H3R和分化晚期标志物肌球蛋白重链mRNA和蛋白的表达；分化过程中加入H3R拮抗剂ciproxifan，测量分化早期标志物desmin、中期标志物myogenin和肌球蛋白重链mRNA的表达。 Fluo－4结合剂标记分化后的横纹肌胞内钙离子，测量双极交流电200 mA刺激下，H3R激动剂甲基组胺（RMeHA）对胞浆中钙离子浓度的影响。结果：H3R和肌球蛋白重链在成肌分化过程中表达量逐渐增加。 Ciproxifan在成肌分化过程中对3种分化标志物mRNA的表达与对照组相比无差异（ P＞0．05）。 RMeHA在浓度10 nmol／L～100μmol／L刺激细胞5～20 min，可呈钟形降低因交流电引起的肌浆钙离子浓度的升高（ P＜0．05），其中RMeHA 100 nmol／L在10 min和20 min对电刺激细胞中Ca2＋的抑制百分率高。相同浓度的RMeHA在20 min和10 min时对Ca2＋的抑制率比其在5 min时高（P＜0．05）。结论：H3R可能在成肌分化过程中的作用不大，而在分化成熟细胞中可以降低电刺激引起的胞浆钙离子浓度的升高。
作者：齐麟；冯晓；陈燕；薛瑞；张凤；王素云；孙素珂；建国 刊期： 2015年第06期
目的：采用维生素C处理体外培养的去分化脂肪（ dedifferentiated fat，DFAT）细胞，以期进一步提高DFAT细胞的心肌分化效率。方法：用天花板贴壁培养法使大鼠成熟脂肪细胞去分化为DFAT细胞，并体外培养增殖至第3代，然后在培养基中添加维生素C或（和）乳鼠心脏细胞裂解液诱导DFAT细胞心肌分化。3周后，用倒置相差显微镜观察DFAT细胞的形态变化，用real－time PCR、免疫荧光和Western blot检测DFAT细胞的心肌特异性标志物cTnT、GATA－4及NKx2．5 mRNA和蛋白的表达。结果：大鼠脂肪细胞经天花板贴壁培养后形态转变为成纤维细胞样的DFAT细胞。 DFAT细胞在普通培养条件下可自发表达少量心肌特异性标志物。经乳鼠心脏细胞裂解液诱导后，DFAT细胞体积增大、变长，可见肌管样结构，cTnT、GATA－4及NKx2．5 mRNA和蛋白的表达水平较普通培养的DFAT细胞显著升高。在维生素C的作用下，DFAT细胞cTnT、GATA－4及NKx2．5的表达水平进一步升高。未观察到自发性搏动细胞。结论：维生素C可促进DFAT细胞分化为心肌样细胞。
作者：李福海；李宗庄；蒋智；易韦；张陈匀 刊期： 2015年第06期
目的：探讨右美托咪定（dexmedetomidine，DEX）能否通过 CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）凋亡通路减轻小鼠缺血再灌注（I／R）性肺损伤。方法：选取雄性8～10周龄C57BL／6J小鼠40只，体重18～22 g，复制在体左肺I／R损伤模型。随机分为4组：假手术组（ sham组），I／R模型组（ I／R组），生理盐水对照组（ I／R＋NS组），右美托咪定干预组（ I／R＋DEX组）。 DEX组在小鼠左肺缺血前30 min腹腔注射DEX 25μg／kg，I／R＋NS组给予与DEX 等体积的生理盐水。实验毕，留取左肺组织。测定肺组织干湿比（ W／D ）及总肺含水量（TLW），行肺组织损伤评估（IQA），光、电镜观察肺组织形态学及超微结构改变。原位末端标记（TUNEL）法检测组织细胞凋亡指数（AI）。 Western blot 和逆转录PCR（RT－PCR）分别检测CHOP、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）蛋白和mRNA表达量。结果：与sham组比，I／R组和I／R＋NS组肺W／D、TLW、IQA、AI明显升高（P＜0．01），肺组织形态破坏显著，CHOP、GRP78蛋白和mRNA表达量增加（ P＜0．01）；I／R组与I／R＋NS组相比，上述指标无显著差异。与I／R组比，I／R＋DEX组肺组织W／D、TLW、IQA及AI明显下降（ P＜0．05），组织损伤明显减轻， CHOP蛋白和mRNA表达量下降（ P＜0．01）。结论：DEX可有效减轻小鼠缺血／再灌注性肺损伤，其机制可能与其抑制CHOP通路所致凋亡有关。
作者：陈丹；宋冬；叶玉柱；何金波；陈磊；邱晓晓；林丽娜；王万铁 刊期： 2015年第06期
目的：探讨加减一阴煎对去势大鼠内皮功能紊乱的影响。方法：采用血管张力仪测定SD大鼠内皮依赖性舒张功能，扫描电镜观察胸主动脉内皮细胞形态，Western blotting技术检测内皮脂肪酶的表达，HE染色观察大鼠子宫内膜的形态。结果：加减一阴煎逆转了去势大鼠内皮依赖性舒张功能的降低；加减一阴煎减少了去势大鼠内皮细胞脂质的堆积，降低了去势大鼠内皮脂肪酶的表达水平；加减一阴煎对去势大鼠子宫湿重的影响不大。结论：加减一阴煎可改善去势大鼠血管内皮依赖性舒张功能，维持内皮细胞形态的完整。
作者：徐静婷；曹娅麟；郑文晖；张亚星；王玲；王庭槐 刊期： 2015年第06期
目的：研究高血压与2型糖尿病联合作用是否能导致小鼠心功能障碍和心肌重塑。方法：将14周龄的2型糖尿病和非糖尿病小鼠经血管紧张素II（ Ang II）给药4周诱导小鼠形成轻度高血压。运用超声波心动描记术和多巴酚丁胺负荷试验评价小鼠左心室功能；HE染色分析左心室心肌细胞的肥大作用；Western blotting测定心肌组织中磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（ p－AMPK）的表达水平。结果：与非糖尿病小鼠比较，糖尿病小鼠（ DM组）的心脏功能和心肌结构无明显变化；Ang II给药不影响2型糖尿病小鼠和非糖尿病小鼠的体重和血糖含量，但血压明显增高；左心室重量和心肌细胞表面积结果分析显示，Ang II诱导2型糖尿病小鼠的左心室肥大程度显著大于Ang II组；Ang II给药的2型糖尿病小鼠左心室的缩短分数和射血分数显著降低，而Ang II组小鼠无明显变化；Western blotting结果显示Ang II组、DM组和DM＋Ang II组小鼠左心室组织中p－AMPK的表达量显著降低。结论：2型糖尿病小鼠心脏功能和心肌结构无明显变化，当高血压存在时2型糖尿病小鼠容易发生心脏功能障碍和心肌重塑，提示高血压是2型糖尿病小鼠心脏功能障碍和心肌重塑的关键因子。
作者：黄美松；刘鹏；陈立兵；胡阳黔 刊期： 2015年第06期
目的：探讨活血降脂方对小鼠脂肪肝的防治作用及机制。方法：高脂饲料喂养小鼠，分别用不同剂量的活血降脂方（由人参、三七、天麻组成，命名为GST）给小鼠灌胃2周，检测血脂、肝组织甘油三酯（ TG）含量，并观察肝指数和肝脏病理变化，筛选出药物的佳用药剂量。此外，小鼠分为正常对照（ NC）组，喂基础饲料；模型组喂高脂饲料。12周后将模型小鼠随机分为高脂（ HF ）组，正常饮食（ ND ）组和GST组。除HF组饲高脂饲料外，其余各组饲基础饲料；GST组给予GST灌胃2周，其余各组以同等容积蒸馏水灌胃。检测血清总胆固醇（ TC）、TG、高密度脂蛋白胆固醇（ HDL－C）、低密度脂蛋白胆固醇（ LDL－C）及肝组织TC 、TG含量，观察肝指数、肝组织超氧化物歧化酶（ SOD）活性、丙二醛（ MDA）含量，肝组织病理变化及过氧化物酶体增殖物激活受体α（ PPARα）、细胞色素P4502E1（ CYP2E1）的mRNA表达。结果：GST可显著降低血脂、肝脂和MDA水平，增加SOD活性，明显降低肝指数并改善肝组织脂肪变性，增加肝组织PPARαmRNA表达、抑制CYP2E1 mRNA的表达。结论： GST具有有效防治脂肪肝的作用，其机制可能与上调肝组织 PPARαmRNA的表达、降低血清和肝组织 TG含量、下调CYP2E1 mRNA的表达以及抗脂质过氧化反应有关。
作者：胡巢凤；孙丽萍；周晗；杨钦河；陆大祥 刊期： 2015年第06期
目的：观察脂多糖（ lipopolysaccharide，LPS）作用后微囊介导的血管内皮钙黏蛋白（ vascular endo－thelial cadherin，VE－Cad）胞吞，及其在血管通透性增高中的作用。方法：采用人血管内皮细胞株CRL－2922，以及免疫组化、免疫印迹、免疫共沉淀等技术方法，观察LPS处理后不同时点细胞质膜微囊重要结构蛋白小窝蛋白1（caveolin－1， Cav1）的蛋白表达和磷酸化，Cav1与VE－Cad的共沉淀和共定位，以及微囊抑制剂对LPS处理后Cav1与VE－Cad的共沉淀、VE－Cad质膜表达和单层细胞通透性的影响。结果：（1） LPS处理后Cav1蛋白表达无显著变化，但其Tyr14位点的磷酸化水平逐渐增高（P＜0．05），Cav1与VE－Cad的免疫共沉淀逐渐增多（P＜0．05），免疫组化激光共聚焦显微镜观察在4 h时可见明显的共定位；（2）细胞质膜微囊抑制剂非律平（5 mg／L）可以显著减少LPS处理4 h Cav1与VE－Cad的免疫共沉淀（P＜0．05），增强VE－Cad的质膜表达（P＜0．05），改善单层细胞通透性（P＜0．05）。结论：细胞质膜微囊介导VE－Cad胞吞参与了LPS作用后血管通透性增高的形成。
作者：张晔；张连阳；孙士锦；李阳；谭浩 刊期： 2015年第06期
目的：探讨转录因子c－Jun对Mepe基因的转录调控作用，并寻找c－Jun在Mepe启动子上的特异性结合位点。方法：利用免疫组织化学方法定位c－Jun与Mepe在小鼠骨组织的表达；采用real－time PCR的方法检测c－Jun的表达量改变对Mepe mRNA表达的影响；应用双萤光素酶报告基因检测系统及定点突变技术分析c－Jun对Mepe基因启动子转录活性的影响。结果：转录因子c－Jun在小鼠骨细胞胞核中呈阳性表达，而Mepe在小鼠骨细胞的胞浆中有表达；real－time PCR显示c－Jun过表达后，Mepe mRNA的表达显著增加（ P＜0．05）；双萤光素酶报告基因检测系统检测显示，在成骨细胞中转染pCMV－3Tag－1－c－Jun的实验组Mepe启动子的转录活性升高（P＜0．05）；定点突变c－Jun的潜在结合位点后，Mepe启动子的转录活性显著下降（ P＜0．05）。结论：转录因子c－Jun可通过Mepe启动子上潜在的c－Jun结合位点上调成骨细胞中该基因的转录。
作者：张娟娟；刘宗霞；孙岩 刊期： 2015年第06期
目的：探讨一种有效记录成骨细胞L型钙通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法。此方法使玻璃电极与细胞内液保持电化学连续性，使细胞内环境保持稳定，改善常规全细胞膜片钳破膜造成的破膜难和封接不稳，以及常规全细胞膜片钳破膜后造成的封接不稳。方法：以成骨细胞为研究对象，采用β－七叶素穿孔全细胞膜片钳技术，记录骨细胞L型钙通道电流。结果：采用这种穿孔全细胞膜片钳技术，能有效记录到成骨细胞上L型钙通道电流。结论：穿孔膜片钳技术是一种简便而有效的记录全细胞电流的实验方法，该方法的建立为今后更深入的研究疾病中成骨细胞的病理生理机制提供实验基础。
作者：王文伟；祁小燕；张雪梅 刊期： 2015年第06期
目的：探讨间充质干细胞（ MSC）条件培养基（ MSCCM）对氧化应激损伤的心肌细胞的保护作用及机制。方法：用流式细胞术对MSC进行鉴定，再用MTT实验确定MSCCM对抗H2 O2氧化应激损伤的佳孵育时间。将H9c2细胞分为正常组、模型组、模型＋MSCCM组和MSCCM组。模型＋MSCCM组和MSCCM组均用MSC－CM进行预孵育24 h，模型组和模型＋MSCCM组用浓度为300μmol／L的H2 O2作用4 h模拟心肌细胞的氧化应激损伤。利用流式细胞术检测损伤后心肌细胞的线粒体膜电位变化、凋亡比率等指标，通过荧光显微镜检测细胞ROS产生的变化，Western blot检测Nrf2／ARE通路的相关蛋白表达。结果：MSCCM组心肌细胞的线粒体膜电位、凋亡比率和ROS产生与正常组相比均无显著差异（ P＞0．05）；模型＋MSCCM组的线粒体膜电位、凋亡比例和ROS产生与模型组相比差异显著（P＜0．01）；在0 h到24 h这段时间内，心肌细胞Nrf2／ARE通路中的Nrf2核转位与HO－1表达均随着MSCCM孵育时间延长而增加。结论：MSCCM可以保护心肌细胞，对抗H2 O2诱导的氧化应激损伤，其机制可能与激活Nrf2／ARE通路有关。
作者：董曦；孙桂波；罗云；陈素红；孙晓波 刊期： 2015年第06期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
