学术投稿

RNAi沉默Notch1基因对胃癌BGC-823细胞增殖和迁移及侵袭能力的影响

赵恩昊;金鑫;沈志勇;刘骅;曹晖

关键词:胃肿瘤细胞, Notch1基因, RNA干扰, 细胞增殖
摘要:目的 研究Notch1基因在胃癌细胞增殖、迁移和侵袭过程中的作用.方法 采用RT-PCR和Western blot分别检测不同的胃癌细胞(SGC-7901、BGC-823、MKN-45和MKN-28)和正常胃黏膜上皮细胞(GES-1) Notch1的表达水平,构建RNAi片段靶向抑制Notch1高表达的胃癌细胞株,采用CCK8实验和迁移侵袭实验检测RNAi对胃癌细胞体外的增殖、迁移和侵袭能力的影响.结果 胃癌BGC-823细胞中Notch1 mRNA和蛋白均呈现高表达,RNAi片段转染后BGC-823细胞的Notch1 mRNA和蛋白表达水平明显下降.CCK8实验显示,从转染第3天起,RNAi组细胞生长速度明显减缓(F=4.644,P=0.046);迁移实验结果显示,RNAi组的穿膜细胞数[(30.1±3.1)个]显著低于阴性对照组[(44.5±3.2)个]和空白对照组[(46.1±2.6)个];侵袭实验的结果也显示,RNAi组的穿膜细胞数[(22.9±4.5)个]显著低于阴性对照组[(37.3±4.2)个]和空白对照组[(37.8±3.7)个],各组间的差异有统计学意义(P<0.05).结论 Notch1基因表达的降低可以抑制胃癌BGC-823细胞的增殖,降低细胞的迁移和侵袭能力,Notch1可能与胃癌的发生、发展和转移有着密切的关系.
中华胃肠外科杂志相关文献
  • 直肠癌患者术后应激性溃疡出血影响因素分析

    目的 探讨直肠癌患者术后发生应激性溃疡出血(SUB)的影响因素.方法 回顾性分析天津市人民医院结直肠外科收治的直肠癌手术患者临床资料,根据其术后是否发生SUB将其分为SUB组(58例)和对照组(402例),采用单因素和多因素分析的方法研究发生SUB的影响因素.结果 SUB组患者术前各项慢性疾病发病率均高于对照组(P<0.01和P<0.05);除肾功能不全外,SUB组患者的各种术后并发症发生率也均高于对照组(P<0.05).单因素和多因素分析结果显示,高龄(OR=2.893,95%CI:1.118~5.543)、饮酒史(OR=3.839,95%CI:1.012~6.654)、术前患有慢性疾病(OR=4.646,95%CI:1.872~8.892)、术中出血量大(OR=5.129,95%CI:2.829~9.328)、术后发生严重并发症(OR=6.576,95%CI:4.539~13.278)、术后应用糖皮质激素(OR=2.978,95%CI:1.013~4.512)和术前应用非甾体类抗炎药物(OR=2.126,95%CI:1.287~7.636)是导致患者术后发生SUB的危险因素;术后预防性使用制酸剂(OR=0.102,95%CI:0.017~0.196)是患者术后发生SUB的保护因素.结论 应对发生SUB的高危患者加强监护并积极采取有效措施进行预防以改善其预后.

    作者:陈超;石洋;张锡朋;张培达 刊期: 2012年第12期

  • 富含骨髓间充质干细胞的脱细胞真皮基质补片修复大鼠肛门括约肌损伤的实验研究

    目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSC)联合脱细胞真皮基质(ADM)补片治疗大鼠肛门括约肌损伤的可行性.方法 体质量300~400 g的Wistar大鼠30只,按随机数字表法分成A、B、C3组,制成肛门括约肌损伤模型备用.2周后,A组直接进行端端缝合修补,B组端端缝合后加修补处覆盖ADM补片,C组端端缝合后加修补处覆盖种植有MSC的ADM补片.6周后,各组大鼠整体取出包括肛管及下端直肠在内的环形标本,行苏木精-伊红和Masson三色染色,观察组织形态学改变.结果 2周后大鼠肛门括约肌损伤模型建立成功,模型鼠肛门潮湿,肛门周围有稀便.经过修补处理后6周,组织学观察见A、B组肛门括约肌损伤处被纤维结缔组织填充并伴炎性细胞浸润,在损伤修补处可见大量被染成蓝色的散乱胶原纤维沉积,未见明显血管增生.C组肛门括约肌损伤修补处蓝色胶原沉积较A、B组减少,可见被染成红色的肌纤维分布.结论 富含BMSC的ADM补片移植可在一定程度上促进大鼠损伤肛门括约肌的再生并减轻瘢痕形成.

    作者:周井义;汪名飞;陈炜;丁召;江从庆;钱群;刘志苏 刊期: 2012年第12期

  • 两种不同荷包缝合技术在吻合器痔上黏膜环切钉合术中应用的疗效比较

    吻合器痔上黏膜环切钉合术(procedure for prolapse and hemorrhoids,PPH)具操作简单,并发症少,恢复快等优点,现已在临床上广泛开展[1].荷包缝合是PPH手术的关键步骤.何种荷包缝合方式更为理想,目前尚无统一意见[2].本研究就双荷包缝合和改良单荷包双牵引法对PPH治疗重度痔的效果进行了对照研究.

    作者:杨斌;赖东明;周泉波;江志鹏;张育超;周军;陈双 刊期: 2012年第12期

  • 吻合器痔上黏膜环切钉合术15年疗效再评估

    吻合器痔上黏膜环切钉合术(PPH)是近10余年来发展起来的治疗重度痔的一项重要技术,其治疗原理基于“肛垫”学说,与传统痔核切除手术相比,具有手术时间短、术后疼痛轻、住院天数少和功能恢复较快等优势,但术后复发和痔核的再次脱出发生率也较高.此外,PPH对于因直肠前突等原因引起的出口梗阻型便秘近期疗效也较佳.

    作者:姚礼庆;钟芸诗;任重 刊期: 2012年第12期

  • 结肠镜复位急诊处理高龄患者乙状结肠扭转

    目的 探讨高龄乙状结肠扭转患者的急诊治疗策略.方法 回顾性分析上海长海医院急诊收治的14例高龄乙状结肠扭转患者的临床资料.结果 14例患者年龄70~93(79.1±7.2)岁,其中男性11例,女性3例.所有患者均急诊行肠镜下减压复位术,均成功复位,无一例急诊行手术治疗,首次急诊复位后4例患者复发,复发率为28.6%,再次接受肠镜下减压复位均获成功.结论 肠镜下减压复位是无明显腹膜炎体征高龄乙状结肠扭转患者的急诊首选治疗方法,其安全、有效并可多次进行.

    作者:楼征;于恩达;孟荣贵;张卫;刘连杰;王汉涛;傅传刚 刊期: 2012年第12期

  • 肠结核与原发性小肠淋巴瘤内镜及CT特征的鉴别分析

    目的 分析肠结核(ITB)与原发性小肠淋巴瘤(PSIL)的临床、内镜及CT特点,为两者的鉴别诊断提供依据.方法 回顾性分析2005年6月至2011年7月间江苏省苏北人民医院收治的经手术和病理证实的24例ITB与23例PSIL患者的临床、内镜及CT资料.所有病例均有完整的临床及CT资料,其中20例ITTB及20例PSIL患者有完整的内镜检查资料.结果 ITB患者发热(58.3%)和盗汗(50.0%)症状的出现率以及肺结核(54.2%)和腹水(54.2%)的发生率明显高于PSIL患者(分别为4.3%、8.6%、4.3%和21.7%,P<0.01和P<0.05),但腹部肿块(4.2%)、便血(8.3%)和肠穿孔(0)的出现率则明显低于PSIL患者(分别为39.1%、47.8%和39.1%,均P<0.01).ITB患者内镜下的环形溃疡和鼠咬状溃疡分别占40%和35%,而PSIL患者则以肿块状和息肉状突起为主(占55%).ITB患者CT影像以多节段病变、分层状增厚、肠壁单层状均匀增厚、肠壁积气、肠壁水肿带、肠腔狭窄、中空淋巴结和木梳征为多见,而PSIL患者则多表现为单节段病变、肠壁偏心状增厚和肠套叠(均P<0.05).PSIL患者肠壁增厚程度和淋巴结肿大程度明显高于ITB组,但病变肠壁的强化程度则明显低于ITB组(均P<0.05).结论 ITB与PSIL各有其临床特点,结合内镜和CT的特征可以进行鉴别诊断.

    作者:朱庆强;吴晶涛;陈文新;王守安;征锦 刊期: 2012年第12期

  • 虚拟瘘道移位内口封闭术治疗肛瘘26例

    肛瘘是一种反复发作的肛周软组织慢性感染性疾病,是临床多发的常见肛肠疾病之一.挂线疗法是目前治疗肛瘘的主要方法之一,方法简捷,治愈率高,但术后愈合较慢,术后肛门功能可因病情的轻重而受到不同程度的损伤,甚至造成肛门不全失禁[1].近年来,我们在总结前人经验基础上,设计了一种新的肛瘘手术方法—虚拟瘘道移位内口封闭术.

    作者:宋平亮;周志伟;崔敏;胡聪;陈于明;钟雄东 刊期: 2012年第12期

  • 新型光敏药物对胃癌MGC803细胞的光动力学治疗研究

    目的 探讨一种新型光敏药物对人胃癌细胞MGC803的光动力学治疗(PDT)作用及其机制.方法 采用bleaching光漂白法评价中国医学科学院生物医学工程研究所纳米与分子设计实验室合成的新型光敏药物(药物A)的光稳定性;MTT法检测药物A对MGC803细胞的杀伤作用;共聚焦激光显微镜(LSCM)观察药物在MGC803细胞内定位情况;Hoechst染色和流式细胞术(Annexin V/PI双染)检测PDT后细胞死亡方式.结果 光照实验表明,药物A对光比较稳定;MTT结果显示,药物A自身对MGC803细胞无暗毒性作用(P>0.05),单纯光照本身对细胞生长亦无任何影响(P>0.05),但光照后药物A对MGC803细胞有强烈杀伤作用(P<0.05),半数致死剂量LD50值为1.74 μmol/L,当药物A浓度为3.12 μmol/L时,细胞存活率为(17.3±1.8)%,浓度继续增加药效不再增加;LSCM观察显示,药物定位于MGC803细胞溶酶体内;Hoechst染色和Annexin V/PI双染表明,细胞死亡方式主要为坏死.结论 药物A是一种能够有效杀伤胃癌MGC803细胞的新型光敏药物.

    作者:陈靖京;魏武;纪爱芳;刘天军 刊期: 2012年第12期

  • 竞争性内源性RNA调控机制及其在结直肠癌发生发展中的作用

    MicroRNA可以抑制mRNA的表达;新的研究则证实,还存在“mRNA抑制microRNA”这样一种反向的作用模式.通过这两种作用模式,拥有相同的microRNA结合位点的mRNA分子之间可以通过竞争性结合相同的microRNA而进行相互调控.这就是竞争性内源性RNA(ceRNA)调控机制,它的提出极大地丰富了基因的调控网络,为基因调控机制的研究开辟了一个新领域.目前已有实验证实,在HCT116结肠癌细胞系中,KRAS和PTEN之间、ZEB2和ceRNA机制进行相互调控.

    作者:高显华;傅传刚;劳昕元;谈竹君 刊期: 2012年第12期

  • 盆底疝与肛门坠胀

    肛门坠胀是肛肠科的常见病,由于其病因复杂,包括盆底疝、直肠炎、子宫后位、慢性盆腔炎、盆腔瘀血证、前列腺炎、腰椎间盘突出甚至内分泌紊乱等均可引起不同程度的肛门坠胀不适,因此,诊断和治疗均有一定难度.在所有的病因之中,盆底疝与其关系十分密切,也是临床上经常容易忽视的问题.

    作者:杨向东;龚文敬;蓝海波;贺百林 刊期: 2012年第12期

  • 改良括约肌间瘘管结扎术治疗经括约肌型肛瘘

    目的 探讨改良括约肌间瘘管结扎术(LIFT-plug术式)治疗经括约肌型肛瘘的疗效及安全性.方法 回顾性分析2010年11月至2012年2月间在北京朝阳医院接受LIFT-plug术治疗的36例经括约肌型慢性肛瘘患者的临床资料.结果 36例患者中34例(94.4%)痊愈.手术时间12~35(平均17)min,中位术后住院时间5d,创面中位愈合时间18 d,术后未出现肛门失禁和其他严重并发症.所有患者均接受了至少3个月的随访,2例(5.6%)复发.结论 LIFT-plug术式操作简单、治愈率高、创伤小、愈合快,不影响肛门功能,是一种针对经括约肌型肛瘘较理想的方法.

    作者:崔金杰;王振军;郑毅;韩加刚;杨新庆 刊期: 2012年第12期

  • RNAi沉默Notch1基因对胃癌BGC-823细胞增殖和迁移及侵袭能力的影响

    目的 研究Notch1基因在胃癌细胞增殖、迁移和侵袭过程中的作用.方法 采用RT-PCR和Western blot分别检测不同的胃癌细胞(SGC-7901、BGC-823、MKN-45和MKN-28)和正常胃黏膜上皮细胞(GES-1) Notch1的表达水平,构建RNAi片段靶向抑制Notch1高表达的胃癌细胞株,采用CCK8实验和迁移侵袭实验检测RNAi对胃癌细胞体外的增殖、迁移和侵袭能力的影响.结果 胃癌BGC-823细胞中Notch1 mRNA和蛋白均呈现高表达,RNAi片段转染后BGC-823细胞的Notch1 mRNA和蛋白表达水平明显下降.CCK8实验显示,从转染第3天起,RNAi组细胞生长速度明显减缓(F=4.644,P=0.046);迁移实验结果显示,RNAi组的穿膜细胞数[(30.1±3.1)个]显著低于阴性对照组[(44.5±3.2)个]和空白对照组[(46.1±2.6)个];侵袭实验的结果也显示,RNAi组的穿膜细胞数[(22.9±4.5)个]显著低于阴性对照组[(37.3±4.2)个]和空白对照组[(37.8±3.7)个],各组间的差异有统计学意义(P<0.05).结论 Notch1基因表达的降低可以抑制胃癌BGC-823细胞的增殖,降低细胞的迁移和侵袭能力,Notch1可能与胃癌的发生、发展和转移有着密切的关系.

    作者:赵恩昊;金鑫;沈志勇;刘骅;曹晖 刊期: 2012年第12期

  • 腹部创伤时结肠损伤的处理

    结肠损伤发生率不高,但处理不当后果严重.以往对结肠损伤均采用一期造口二期还纳的处理方法,不但增加患者痛苦,也浪费宝贵的医疗资源.近年来的研究结果表明,创伤后生理状况不稳定是导致结肠吻合口瘘的主要原因.因此,主张对于生理状况稳定的患者,可以进行结肠修补或一期切除吻合.对于腹腔开放或暂时性腹腔关闭的患者,在确定性关腹时也可以对符合条件的患者进行结肠切除吻合术.

    作者:朱维铭;黎介寿 刊期: 2012年第12期

  • 腹腔镜辅助胃癌根治术1380例临床疗效分析

    目的 探讨腹腔镜辅助胃根治术的安全性和临床疗效.方法 回顾性分析2007年5月至2012年8月间在福建医科大学附属协和医院行腹腔镜辅助胃癌根治术的1380例患者的临床资料.结果 全组中转开腹率1.2%(17/1380),手术时间(196.2±59.2) min,术中出血量(79.7±115.8) ml,淋巴清扫数目(30.1±11.0)枚/例.术后首次下床活动时间(2.4±1.0)d,肛门排气时间(3.3±1.2)d,进食流质时间(4.2±1.6)d,住院时间(12.4±8.5)d.术后并发症发生率为12.1%(167/1380),围手术期死亡率为0.4%(5/1380).按手术例数(手术经验)进行相关分析显示,手术中转开腹率和手术时间随手术例数增多而下降,而淋巴结清扫数目随手术例数的增加而增多(均P<0.05).1332例(96.5%)患者获术后随访,中位随访时间19个月,术后3年生存率为71.0%.结论 腹腔镜辅助胃癌根治术安全可行,且具有较好的临床疗效.随着外科医师技术的不断成熟,手术中转开腹率、手术时间及淋巴结清扫数目均能逐步改善.

    作者:黄昌明;林建贤;郑朝辉;李平;谢建伟;王家镔;陆俊;陈起跃 刊期: 2012年第12期

  • 克罗恩病活动指数对术后患者症状复发的诊断价值

    目的 探讨克罗恩病活动指数(CDAI)对克罗恩病患者肠切除术后症状复发的诊断价值.方法 将2003年3月至2010年3月间在浙江省丽水市人民医院施行初次肠切除手术的85例克罗恩病患者纳入研究.术后12个月,所有患者均接受肠镜检查并进行CDAI评分.将Rutgeerts内镜评分大于或等于i2定义为内镜复发;内镜复发的同时,出现需药物控制的症状,视为症状复发.采用受试者工作特征(ROC)曲线来评价单独应用CDAI及CDAI联合内镜评估对术后症状复发的诊断价值.结果 术后12个月,85例患者中有19例出现症状复发,其CDAI值为205 ±93,明显高于持续缓解的患者(97±44,P<0.01).ROC曲线显示,CDAI判断术后症状复发的曲线下面积为0.786;取CDAI佳截点(150),其敏感度、特异度和准确率分别为73.7%、81.8%和80.0%.当CDAI联合内镜评估,其判断术后症状复发的特异度和准确率分别提高至95.5%和90.6%.一致性检验显示,CDAI联合内镜评估的诊断价值(Kappa=0.718)明显高于单独采用CDAI (Kapp a=0.462).结论 CDAI能较好地判断克罗恩病术后症状复发情况;将CDAI与内镜评估相结合能进一步提高诊断的准确性.

    作者:陈成龙;汪望月;陈光兰 刊期: 2012年第12期

  • 高分辨率测压对排粪功能障碍的诊断意义

    直肠肛管动力检测有助于临床医生了解患者排粪功能障碍的病理生理机制[1].目前,临床应用较广泛的是水灌注测压(water perfused manometry,WPM).随着压力传感技术和计算机技术的进步,高分辨率测压技术应运而生,先应用于食管动力检测[2].现逐渐应用于直肠肛管动力检测.

    作者:刘建磊;李宁 刊期: 2012年第12期

  • T4a期胃癌根治术后280例患者的预后分析

    目的 探讨影响T4a期胃癌根治术后患者远期生存和复发的因素.方法 回顾性分析1997年1月至2003年12月间天津医科大学附属肿瘤医院收治的280例T4a期胃癌根治术患者的临床和随访资料.结果 280例患者术后5年生存率为50.0%;术后复发158例(56.4%),3年无瘤生存率为57.5%.多因素分析显示,淋巴结转移数目和淋巴结转移率(MLR)是影响术后患者总体生存期的独立因素(均P<0.05);淋巴结转移范围是影响术后无病生存期的独立因素(P<0.05);淋巴结转移范围、淋巴结转移数目和MLR是影响术后复发的独立因素(均P<0.05).结论 淋巴结转移数目、范围和MLR是影响T4a期胃癌患者根治术后远期生存和复发的主要因素.

    作者:高卫峰;梁寒;邓靖宇;王殿昌;张汝鹏 刊期: 2012年第12期

  • 直肠异物导致结肠穿孔二例

    直肠异物临床上虽不多见,但其导致的结肠穿孔时有发生,由于对本病认识不足,常导致误诊.2010年5月至2011年11月,解放军210医院共收治2例因肛门自纳异物导致结肠破裂的病例,术前考虑为上消化道穿孔,术中发现为结肠穿孔.

    作者:张雪梅;王朝晖;高建军 刊期: 2012年第12期

  • 内镜黏膜切除术治疗结直肠息肉2609例

    目的 探讨内镜黏膜切除术(EMR)应用于常规结直肠息肉切除的安全性及有效性.方法 总结2007年1月至2010年12月期间浙江省海宁市第二人民医院应用EMR技术治疗2609例结直肠息肉患者的临床资料.结果 2609例共计切除结直肠息肉3578枚,除2例不完全切除外均完整切除,标本的完整率99.9%.术中和围手术期并发症发生率为0.8%(22/2609),主要为术中出血7例,术后延时出血5例和热灼伤10例,均经对症处理痊愈.1530例患者获得3~12个月的随访,原切除部位无一例复发.结论 EMR应用于常规结直肠息肉切除安全、有效.

    作者:邓德昌;方晓明;居海红;沈文晓;叶海飞 刊期: 2012年第12期

  • 应用LIFT-plug手术治疗肛瘘26例临床分析

    采用脱细胞异体真皮基质(acellular extracellular matrix,AEM)材料应用于肛瘘治疗的出发点是将AEM材料填塞进肛门瘘管中,这样可以避免对肛门括约肌的破坏和损伤,从而有效预防术后肛门功能不全或肛门失禁[1].但Plug手术(肛瘘栓填塞术)成功率仅在30%~60%之间[2].王振军[3]将LIFT手术与Plug手术结合在一起后,治愈率可达95%以上.武汉钢铁集团公司总医院于2011年3月起开展LIFT-plug手术治疗肛瘘,至2012年3月完成26例,疗效满意.

    作者:司徒光伟;吕警军;屈兵;辜良刚 刊期: 2012年第12期

中华胃肠外科杂志

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主管:中国科学技术协会

主办:中华医学会,中山大学