学术投稿

健康成人24h尿液细胞外囊泡定量及大小分布

林韩翡;刘新宇;徐小蒙;Luca Musante;Harry Holthofer;邹和群

关键词:尿液细胞外微囊泡, 外泌体, 纳米颗粒跟踪分析
摘要:目的 研究观察健康成人24h尿液细胞外囊泡(uEVs)数量、大小分布及个体间差异.方法 利用液压透析滤过法分离9名健康成年人24h uEVs,通过western blot(WB)和透射电镜(TEM)技术验证uEVs的分离效果,应用BCA蛋白定量法及纳米微粒跟踪分析技术分别对富集的uEVs样品进行蛋白定量测定和囊泡数量及大小分布的分析.结果 TEM下可见大小不等、形状不一的囊泡.WB技术检测到外泌体的标记物—人肿瘤易感基因(TSG101).9名健康成人24h尿液分离的uEVs样品蛋白定量范围为132.50~760.70ng/mL.纳米微粒跟踪分析技术检测结果显示24h uEVs数量为(3.56~5.12)×1012个,CV=14.23%.24h分泌的uEVs中,直径在<40nm范围内的囊泡占所检测到的总囊泡数的0.04~0.69%,数量为(1.80~26.49)×109个;符合外泌体直径范围(40~100nm)的囊泡占总囊泡数的22.07%~42.08%,数量为(1.00~1.77)×1012个.符合微囊泡直径范围(100~1000nm)的囊泡约占总囊泡数的57.88%~77.85%,数量为(2.09~3.86)×1012个.结论 新型液压透析滤过法能高效、便捷地实现大样本尿液uEVs的分离.健康成人分泌的24h uEVs个体间差异较小,是uEVs相关研究较理想的标本来源.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 肌电生物反馈在调节咀嚼肌群肌电活动中的作用

    目的 研究肌电生物反馈在调节咀嚼肌群肌电活动中的作用.方法 选取安氏Ⅱ类下颌后缩畸形青少年病人20例,年龄10~14岁,ANB角>6°,性别不限,记录肌电生物矫治前大咬合位颞肌与嚼肌的肌电活动值及其活动比率作为对照组,记录肌电生物反馈治疗期间和治疗结束后颞肌、嚼肌的肌电活动值及其比率变化作为实验组.分析肌电生物反馈治疗前后颞肌和嚼肌肌电活动值及其颞肌/嚼肌活动比率的变化,探讨肌电生物反馈在调节颞肌和嚼肌肌电活动值及其活动比率的作用.结果 肌电生物反馈能有效加强颞肌的肌电活动值,颞肌肌电活动值治疗后比治疗前有效加强(P<0.05),颞肌嚼肌活动比率升高,从治疗前1.76±1.46,治疗后4.71±4.03,治疗后1d升至2.57±2.07,(t=4.86,P<0.05).结论 肌电生物反馈治疗能有效调节颞肌、嚼肌的肌电活动值,维持颞肌/嚼肌肌电活动比值的升高.

    作者:冯航;黄妙琼;马凤禅;孙鹏 刊期: 2015年第11期

  • 依达拉奉可减轻大鼠氧化应激及延缓心肌纤维化

    目的 探讨依达拉奉减轻氧化应激和抗心肌纤维化作用.方法 将50只8周龄SD雄性大鼠随机分5组(对照组,模型组,依达拉奉低、中、高浓度组).采用异丙肾上腺素(ISO)构建大鼠心肌纤维化模型,依达拉奉(Eda)各剂量组同时予以依达拉奉干预,共14d.第15天检测各组心肌纤维化程度、左心室质量指数(LVMI)、胶原容积分数(CVF),以及心肌组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白(ColⅠ、ColⅢ)、羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量,采用免疫荧光和Western blot检测心肌组织TGF-β1的表达.结果 模型组CVF和LVMI均显著高于对照组(P均为0.000),依达拉奉组随着治疗浓度的增加(低、中、高浓度),CVF和LVMI呈下降趋势(P<0.05);模型组CoiⅠ、ColⅢ和Hyp均显著高于对照组(P均为0.000),随着治疗浓度的增加,ColⅠ、ColⅢ和Hyp呈下降趋势;模型组MDA显著高于对照组(P=0.000),SOD和NO水平则显著低于对照组(P均为0.000);依达拉奉低、中、高浓度组SOD和NO明显高于模型组(P<0.05);模型组TGF-β1显著高于对照组(P=0.000),依达拉奉低、中、高浓度组TGF-β1明显低于模型组;MDA与LVMI、CVF、ColⅠ、ColⅢ、Hyp呈正相关,而SOD和NO均与LVMI、CVF、ColⅠ、ColⅢ、Hyp呈负相关;TGF-β1与LVMI、CVF、ColⅠ、ColⅢ、Hyp、MDA呈正相关,而与SOD、NO呈负相关.结论 依达拉奉能减轻氧化应激及抑制TGF-β1表达从而延缓心肌纤维化.

    作者:王世祥;陆志锋;许卫;陈友权;陈晞明 刊期: 2015年第11期

  • spvB/spvC基因对沙门菌毒力及宿主免疫功能的影响

    目的 研究spvB/spvC基因对沙门菌毒力及对宿主免疫系统的影响.方法 野生型沙门菌(STM.211)、敲除spvB基因的沙门菌(STM.211-△spvB)、敲除spvC基因的沙门菌(STM.211-△spvC)、敲除spvB及spvC基因的沙门菌(STM.211-△spvB.spvC)和PBS组分别经腹腔注射0.2 mL105CFU的STM.211、STM.211-△spvB、STM.211-△spvC、STM.211-△spvB.spvC感染BALB/c小鼠,观察小鼠精神状态、运动情况、腹泻、体质量、毛发改变等感染中毒症状,用ELISA法测定小鼠血清IL-10、IL-12、IFN-γ水平;并分离小鼠肝、脾,观察靶器官大体观及显微镜下的病理改变.结果 (1)STM.211、STM.211-△spvB和STM.211-△spvC组的中毒症状明显较PBS组严重,STM.211-△spvB.spvC组与PBS组间无明显差异;(2)STM.211组、STM.211-△spvB组、STM.211-△spvC组的IFN-γ和IL-12分泌量均显著低于STM.211-△spvB.spvC组(P<0.05),而IL-10的分泌量明显高于STM.211-△spvB.spvC组(P<0.05);STM.211组、STM.211-△spvB组、STM.211-△spvC组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 (1)spvB/spvC基因缺失对沙门菌毒力影响不明显,但spvB.spvC基因共同缺失,使沙门菌毒力减弱;(2)spvB/spvC基因相对抑制TH1细胞因子IFN-γ和IL-12的分泌,促进TH2细胞因子IL-10的分泌,使免疫应答向TH2方向偏移,从而有利于病原菌抵抗和逃避宿主的免疫防御,加重感染结局.

    作者:刘晓艳;陈强;李红;朱春晖;吴春雪;王文杏;余晓君 刊期: 2015年第11期

  • 肾移植受者侵袭性曲霉菌感染的早期血清学诊断

    目的 探讨l,3-β-D葡聚糖(BG)与半乳甘露聚糖(GM)在肾移植受者侵袭性曲霉菌感染(IA)早期血清学诊断中的临床价值.方法 收集69例肾移植受者的血液标本,分成:确诊组、临床诊断组、拟诊组和非感染组,对4组血液样本进行检测及统计学分析.结果 确诊组、临床诊断组、拟诊组的BG浓度显著高于对照组(P<0.05),其敏感性、特异性阳性预测值、阴性预测值分别为69.49%、70%、93.18%、35.71%.3组的GM浓度亦显著高于对照组(P<0.05);其敏感性、特异性阳性预测值、阴性预测值分别为84.75%、90%、96.15%、52.63%.结论 血中的BG和GM浓度检测可以作为肾移植受者IA的早期诊断依据之一,浓度升高提示发生感染的可能.同时行BG实验与GM检测能提高诊断效能,减少漏诊.

    作者:石向华;范礼佩;刘丁;李留洋;李民 刊期: 2015年第11期

  • 联合检测细胞蜡块中的napsin A和甲状腺转录因子-1有助于肺腺癌胸水的诊断

    目的 探讨细胞蜡块免疫组织化学napsinA和甲状腺转录因子-1(TTF-1)的检测对肺腺癌胸水的诊断价值.方法 收集48例有肺腺癌病史胸水的细胞涂片、细胞蜡块切片及对应的免疫组织化学切片,比较细胞涂片和细胞蜡块免疫组化两种方法诊断肺腺癌阳性率;对免疫指标napsin A和TTF-1诊断肺腺癌价值进行评估.结果 细胞蜡块免疫组化诊断肺腺癌阳性率高于细胞涂片,差异具有统计学意义(84.44%vs55.56%P<0.05).TTF-1和napsinA在肺腺癌细胞蜡块中表达率分别为94.74%(36/38)和78.95%(30/38),二者在间皮反应增生中均不表达,差异均具有统计学意义(P<0.05);联合napsinA和TTF-1检测有较高的诊断价值,其诊断肺腺癌的灵敏度和特异度为97.37%和100%.结论 细胞蜡块免疫组织化学napsinA和TTF-1检测较传统细胞涂片有助于提高肺腺癌胸水诊断阳性率,二者联合检测对肺腺癌胸水有较高的诊断价值.

    作者:徐小艳;刘红伟;姜黄;李川;袁淑慧;杨金花 刊期: 2015年第11期

  • 肠出血型大肠埃希菌O157:H7 espF基因缺失株和回补株的构建

    目的 利用Red同源重组系统敲除肠出血型大肠埃希菌的espF基因及其核苷酸片段;建立以pBAD33质粒为载体的espF基因回补实验平台.方法 设计1对同源臂引物扩增卡那霉素抗性打靶片段,将抗性打靶片段电转入含有PKD46质粒的EDL933w,在PKD46介导的重组系统帮助下,打靶片段和菌体espF基因发生同源重组,PCR和测序验证;PCR扩增espF及其核苷酸片段的整个ORF区序列,将其克隆入pBAD33质粒,分别将重组质粒转入相应的缺失株,以构建出相应的回补突变株.采用RT-PCR的方法验证在相应的回补突变株中espF及其核苷酸片段是否转录.结果 构建了espF基因及其核苷酸片段缺失的EHEC O157:H7 EDL933w突变菌株和相应的回补株,且espF基因及其核苷酸片段在回补株中均发生转录.结论 本研究运用Red重组t系统构建了肠出血型大肠埃希菌O157:H7 espF基因缺失株,并建立以pBAD33质粒为载体的EHEC O157:H7基因回补方法,为进一步研究肠出血型大肠埃希菌中espF基因的调控机制奠定了基础.

    作者:华颖;孙琦;王湘雨;杜艳丽;邵娜;张其威;赵卫;万成松 刊期: 2015年第11期

  • 瑞香素对HMGB1释放及HMGB1诱发的炎症反应的双重抑制作用

    目的 探讨瑞香素对高迁移率族蛋白1(HMGB1)释放及其诱发炎症反应的双重抑制作用.方法 RAW264.7细胞常规培养,不同浓度的瑞香素单独或联合脂多糖(LPS)作用细胞不同的时间,ELISA检测晚期炎症因子HMGB1的释放;Western blot检测JAK1/2、STAT1的磷酸化.THP-1细胞常规培养,不同浓度的瑞香素单独或联合rhHMGB1刺激细胞不同的时间,ELISA检测炎症因子TNF-α,IL-6,PGE2的释放;NO检测试剂盒检测NO水平;Western blot检测iNOS、COX-2的表达及p38、ERK、JNK的磷酸化水平.结果 瑞香素浓度依赖性的下调HMGB1的释放,抑制rhHMGB1诱导的iNOS、COX-2的表达及TNF-α,IL-6,PGE2、NO的释放.WB结果显示,瑞香素显著下调脂多糖诱导的JAK-STAT1信号磷酸化,但对rhHMGB1诱导的MAPKs磷酸化无明显抑制作用.结论 瑞香素能够抑制HMGB1释放及其诱发的炎症反应,而且瑞香素可能通过抑制JAK-STAT1信号途径减弱HMGB1的释放.

    作者:戚之琳;齐世美;凌烈锋;冯遵永 刊期: 2015年第11期

  • HMGB1对人鼻咽癌细胞株C666-1体外增殖的影响

    目的 观察高迁移率族蛋白1(HMGB1)对人鼻咽癌细胞株C666-1增殖的影响并探讨其可能的机制.方法 用siRNA干扰鼻咽癌细胞株C666-1HMGB1基因,CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,Western blot检测cyclinD1,CDK6及相关通路蛋白表达.用带GFP的HMGB1质粒转染鼻咽癌细胞株C666-1,EDU和CCK-8检测细胞增殖.结果 干扰HMGB1的表达后,细胞增殖明显减慢(P<0.001);细胞周期分析显示处于G1期细胞比例增多(P<0.001),S期细胞比例明显下降(P<0.001);Western blot结果显示cyclinD1、CDK6的表达下调,STAT3,P-STAT3的表达也下调.过表达HMGB1后,EDU显示处于S期细胞比例增多(P<0.05);CCK-8显示细胞增殖明显增快(P<0.001).结论 HMGB1促进人鼻咽癌细胞株C666-1的增殖,可能通过STAT3信号通路上调cyclinD1、CDK6促进鼻咽癌细胞株C666-1由G1期进入S期从而调控其增殖.

    作者:华胜妮;肖芦山;吴德华 刊期: 2015年第11期

  • 人CD45基因克隆及其在Hela细胞中的表达

    目的 克隆人CD45cDNA并导入Hela细胞中表达,建立研究CD45功能的细胞模型.方法 采用RT-PCR方法从人外周血单个核细胞中扩增CD45基因PTPRC的cDNA,将其克隆至pMD-18T载体.构建重组真核表达载体PcDNA3.1-3xflag-CD45,经HindⅢ和XhoⅠ双酶切及测序验证.将其转染至Hela细胞,以流式细胞术(FCM)和免疫印迹(WB)分析CD45在Hela细胞中的表达情况,碱性磷酸酶试剂盒检测CD45的活性.结果 分离到长约3900bp的人PTPRCcDNA片段,将其插入pMD-18T载体获得了cDNA克隆.酶切和测序结果证实重组表达载体PcDNA3.l-3xflag-CD45构建成功,FCM和WB分析表明CD45能在Hela细胞中有效表达,且表达的重组CD45蛋白具有生物学活性.结论 成功获得人PTPRCcDNA克隆并在Hela细胞中有效表达,为进一步研究CD45功能奠定了基础.

    作者:李捷;许天昱;吴璐琳;张丽芸;卢晓;左大明;陈政良 刊期: 2015年第11期

  • 倾向评分配比在SPSS软件上的实现

    目的 研究倾向评分配比法在SPSS软件上的实现,并对分析结果进行解释.方法 通过安装与SPSS对应版本能够连接的R软件和插件,以及实现倾向评分配比需要的程序包,在SPSS界面添加PS Matching模块,然后结合实例演示如何使用模块.结果 成功实现了评分配比,并对匹配效果给出直观和定量的统计描述与评价.结论 在SPSS软件中,可以较为方便地实现倾向评分配比.

    作者:黄福强;杜春霖;孙梦辉;宁冰;罗颖;安胜利 刊期: 2015年第11期

  • 新木脂素的酶法糖基化及抗肿瘤活性

    目的 以厚朴酚与和厚朴酚为底物,进行酶法糖基化修饰以及检测其抗肿瘤活性,提高新木脂素类化合物(厚朴酚与和厚朴酚)的水溶性和生物活性.方法 利用来源于Bacillus的糖基转移酶(YjiC),通过酶法糖基化制备厚朴酚与和厚朴酚糖基化产物;经高效液相色谱(HPLC)、液相串联质谱(LC-MS)、核磁共振(NMR)检测分析鉴定其结构;通过MTT法检测药物对多种肿瘤细胞的增殖抑制效应.结果 利用酶法糖基化反应制备了2个新木脂素(厚朴酚与和厚朴酚)糖基化产物,并显著提高了其水溶性;糖基化产物分别鉴定为magnolol-2-O-β-D-glucopyranoside(1)和honokiol-4'-O-β-D-glucopyranoside(2);MTT结果显示,厚朴酚与和厚朴酚及其糖基化产物对4种肿瘤细胞均表现出较强的抑制细胞增殖的作用,且呈现浓度依赖性,其IC50范围为9.41~111.21μmol/L.结论 厚朴酚与和厚朴酚糖基化产物显著提高水溶性以及增加了药物对SMMC7721细胞的敏感性,并具有良好的应用前景.

    作者:李红梅;李静;靳伟;郭星;李楠;马涛;霍强;吴成柱 刊期: 2015年第11期

  • 狼毒大戟提取物通过NF-κB通路激活潜伏HIV

    目的 研究狼毒大戟提取物对潜伏HIV激活的影响,探讨其激活潜伏HIV可能的机制以及清除HIV的作用.方法 取新鲜狼毒大戟植物根部组织,液氮速冻并粉碎成末,冷冻干燥3d后称取少量,采用丙酮一步法提取并浓缩.以甲醇-水为流动相,采用HPLC反相C18柱分离,并通过MS鉴定后,得到狼毒大戟提取物(EFE).以潜伏HIV细胞系J-Lat10.6为激活模型,以TNF-α(10ng/mL)作为阳性对照,EFE(50μg/mL)处理24h后,采用FACS分析GFP阳性率以观测激活活性.采用不同浓度NF-κB抑制剂(Bay11-7082)抑制EFE活性,并用WB检测2h内p65入核水平,以及24h内HIV蛋白p24随时间点变化情况.结果 丙酮一步法可简便快速从狼毒大戟植物中提取得到EFE,经鉴定含prostratin及其类似物,分离后测得其中prostratin浓度为0.53mmol/L.EFE(50μg/mL)作用24h可产生约50%激活潜伏HIV活性,同时HIV蛋白p24水平随时间显著增加.进一步研究发现NF-κB通路抑制剂(Bay11-7082)可对EFE活性产生浓度依赖抑制作用,且2h内胞核p65水平在EFE作用下增加明显.结论 狼毒大戟提取物EFE含有效成分prostratin及其类似物,可产生较强激活潜伏HIV活性,其机制为通过激活NF-κB通路促进p65入核从而发挥作用.

    作者:潘晓彦;张明娇;曾晓云;林健;李琳;李珉珉;赵伟 刊期: 2015年第11期

  • 精氨酸抗利尿激素对急性肺损伤大鼠肺水肿液的清除作用

    目的 探讨精氨酸抗利尿激素(AVP)对急性肺损伤肺水肿液清除作用.方法 48只健康成年的雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组(ALI组)、AVP组,观察各组肺组织病理形态学、肺水含量、肺泡上皮通透性及肺泡液体清除率(AFC)变化,测定肺泡上皮钠通道(ENaC)和钠/钾ATP酶(Na+,K+-ATPase)表达情况.结果 经AVP治疗后,模型组肺泡上皮通透性(0.27±0.15vs0.59±0.19)及肺水含量(5.01±1.59vs8.67±1.79)减轻,AFC增加(23.56±4.51vs8.28±3.57),α-ENaC(1.296±0.322vs0.349±0.141)和α1-Na+,K+-ATPase表达增加(1.421±0.389vs0.338±0.186),均有显著差异(P<0.05).结论 AVP能促进AFC,其作用途径可能是上调α-ENaC和α1-Na+,K+-ATPase通道蛋白实现的.

    作者:邓旺;王导新 刊期: 2015年第11期

  • 健康成人24h尿液细胞外囊泡定量及大小分布

    目的 研究观察健康成人24h尿液细胞外囊泡(uEVs)数量、大小分布及个体间差异.方法 利用液压透析滤过法分离9名健康成年人24h uEVs,通过western blot(WB)和透射电镜(TEM)技术验证uEVs的分离效果,应用BCA蛋白定量法及纳米微粒跟踪分析技术分别对富集的uEVs样品进行蛋白定量测定和囊泡数量及大小分布的分析.结果 TEM下可见大小不等、形状不一的囊泡.WB技术检测到外泌体的标记物—人肿瘤易感基因(TSG101).9名健康成人24h尿液分离的uEVs样品蛋白定量范围为132.50~760.70ng/mL.纳米微粒跟踪分析技术检测结果显示24h uEVs数量为(3.56~5.12)×1012个,CV=14.23%.24h分泌的uEVs中,直径在<40nm范围内的囊泡占所检测到的总囊泡数的0.04~0.69%,数量为(1.80~26.49)×109个;符合外泌体直径范围(40~100nm)的囊泡占总囊泡数的22.07%~42.08%,数量为(1.00~1.77)×1012个.符合微囊泡直径范围(100~1000nm)的囊泡约占总囊泡数的57.88%~77.85%,数量为(2.09~3.86)×1012个.结论 新型液压透析滤过法能高效、便捷地实现大样本尿液uEVs的分离.健康成人分泌的24h uEVs个体间差异较小,是uEVs相关研究较理想的标本来源.

    作者:林韩翡;刘新宇;徐小蒙;Luca Musante;Harry Holthofer;邹和群 刊期: 2015年第11期

  • 稳定低表达DNA甲基转移酶3b基因对膀胱癌细胞生长和凋亡的影响

    目的 探讨稳定低表达DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)基因对人膀胱癌细胞生长和凋亡的影响.方法 包装表达DNMT3b siRNA和阴性对照siRNA的慢病毒,通过慢病毒感染的方法获得稳定低表达DNMT3b的膀胱癌细胞BIU-87及对照细胞.MTT和流式细胞仪检测DNMT3b稳定低表达对细胞增殖和凋亡的影响;体内裸鼠成瘤实验观察DNMT3b稳定低表达对肿瘤的抑制效果;荧光定量PCR和Western blot检测DNMT3b稳定低表达对细胞生长和凋亡相关基因表达的影响;甲基化特异性PCR检测对细胞生长和凋亡相关基因甲基化的影响.结果 荧光定量PCR和Western blot检测结果显示,DNMT3b mRNA和蛋白水平在BIU-87稳定细胞株中稳定低表达;DNMT3b稳定低表达可以抑制BIU-87细胞的生长,并且抑制裸鼠皮下瘤体的生长;DNMT3b稳定低表达可以促进BIU-87细胞的凋亡;DNMT3b稳定低表达可以增加凋亡及细胞生长相关基因DAPK,Bax和RASSF1A mRNA和蛋白水平的表达;DNMT3b稳定低表达可以减少凋亡及细胞生长相关基因DAPK,Bax和RASSF1A启动子区域的甲基化水平.结论 DNMT3b稳定低表达可能通过调控凋亡相关基因以及细胞生长相关基因启动子区域的甲基化水平来影响基因的表达,从而抑制BIU-87细胞的生长,诱导细胞凋亡.

    作者:陈柯;李炳坤;许凯;徐啊白;刘春晓;郑少波;徐亚文;贾晨尧;刘奇 刊期: 2015年第11期

  • 肝移植术后稳定生存者外周血中差异表达miRNA及其功能预测

    目的 寻找肝移植术后长期稳定生存者外周血中有意义的生物学标志物.方法 纳入肝移植术后稳定存活患者29例(STA组),反复排斥反应者10例(RJ组),健康对照者17例(HC组),利用芯片检测各组PBMCs中microRNAs的表达谱,并用Real-timePCR对差异表达的microRNAs进行验证.结果 芯片结果显示STA组对比于RJ组共13个microRNA表达明显下调,经Real-time PCR验证3个microRNA(miR-106b,miR-18b,miR-340)表达下调.结论 肝移植患者外周血miR-106b、miR-18b、miR-340可作为肝移植术后潜在标志物.

    作者:钟克波;张鹏;何晓顺;朱晓峰 刊期: 2015年第11期

  • 移植日C反应蛋白水平对异基因造血干细胞移植早期感染及预后的预测意义

    目的 探讨移植日C反应蛋白(CRP)水平对异基因造血干细胞移植早期败血症等感染事件发生的预测意义.方法 回顾性分析78例异基因移植患者病例资料,采用受试者工作特征曲线(ROC)评估CRP诊断移植早期败血症的临床参考值及相应灵敏度和特异度,以所得临床参考值为临界值将病例资料分为低CRP组和高CRP组,分析比较两组间的移植相关并发症及总生存(OS)和复发率等.结果 CRP诊断移植早期败血症的临床参考值为23.3mg/L(AUC=0.735,P=0.001,95%CI0.623~0.848),相应灵敏度和特异度分别为0.793和0.592;高CRP组粒系平均重建时间较低CRP组延迟0.71d(P=0.237),巨核系平均重建时间显著延迟4.09d(P=0.048);高CRP组移植早期败血症及巨细胞病毒(CMV)血症发生率较低CRP组显著增高(53.5%vs17.1%,P=0.001;72.1%vs 37.1%,P=0.003),但两组间EB病毒(EBV)血症、肺部侵袭性真菌感染及急性移植物抗宿主病(aGVHD)发生率无统计学差异(41.9%vs22.9%,P=0.094;14.0%vs5.7%,P=0.285, 51.2%vs45.7,P=0.656);高CRP组中位随访318(7~773)d,低CRP组中位随访299(78~747)d,高CRP组2年OS率较低CRP组显著降低(42.5%vs78.4%,P=0.022),高CRP组2年累计复发率较低CRP组高(52.3%vs19.8%,P=0.235),但差异无统计学意义;Logistic多因素分析显示高CRP水平是移植早期败血症的独立危险因素(OR=5.090,95%CI1.115~23.229,P=0.036).结论 移植日CRP水平对异基因造血干细胞移植早期败血症有一定的预测意义,高CRP水平提示较高的移植早期败血症和CMV血症发生率以及较差的预后.

    作者:沈克锋;刘启发;孙竞;江千里;张钰;周红升;戴敏;肖敏;王瑾 刊期: 2015年第11期

  • RAM-HPLC在线富集技术检测脑脊液中利福平的浓度

    目的 建立大体积直接进样的限进性液相色谱(RAM-HPLC)法,实现脑脊液样品的在线直接进样富集并检测脑脊液中的利福平.方法 以自制限进性填料柱为前处理柱,LunaC18为分析柱,前处理流动相为水—甲醇(95:5,V/V),流速为1mL/min,分析流动相为甲醇-乙腈-10 mmol/L乙酸铵溶液(60:5:35,V/V/V),柱温为25℃,检测波长为254nm.结果 选择100μL为进样体积,其峰面积是进样量为20μL时的5.33倍,有效提高了HPLC的检测灵敏度.利福平在0.25~8μg/mL的浓度范围内浓度和峰面积具有良好的线性关系(r=0.9997),LOD和LOQ分别为0.07μg/mL和0.25μg/mL,日内日间精密度均小于5%,低中高3个浓度下的空白加样回收率为87.69%~102.11%,测定给药(剂量为10mg/kg)2h后的人脑脊液中利福平浓度为0.29μg/mL.结论 该方法简单快速,适用于脑脊液中利福平的富集检测,满足临床个体化用药指导.

    作者:杨晓萍;张晓惠;黄艳萍;王荣;谢华;李文斌;郭佑民 刊期: 2015年第11期

  • 血清1,5-脱水葡萄糖醇可反映暴发性1型糖尿病患者的血糖急性变化

    目的 本文探讨1,5-脱水葡萄糖醇(1,5-AG)是否可以作为暴发性1型糖尿病(FT1DM)的血清学指标.方法 纳入15例初诊为FT1DM患者和73例2型糖尿病(T2DM)患者,检测两组的血清生物化学、糖化血红蛋白(Glycosylatedhemoglobin Alc,HbAlc)以及血清1,5-AG等指标.结果 FT1DM组与T2DM组的基本资料比较结果显示,空腹血糖(FBG)、果糖胺(FMN)、肌酐(Cr)、尿素(Urea)、HbAlc以及血清1,5-AG存在统计学差异,P<0.05.在FT1DM患者中,血清1,5-AG水平与FBG(r=-0.646,P=0.032)和FMN (r=-0.680,P=0.021)呈负相关.在T2DM患者中,血清1,5-AG与FBG、FMN以及HbAlc水平呈负相关(r=-0.407,P=0.001;r=-0.314,P=0.01,r=-0.576,P<0.01).受试者ROC曲线分析显示:血清1,5-AG曲线下面积为0.804,Cutoff值为67.95,灵敏度和特异度分别为:82.9%和60%.结论 血清1,5-AG可以反映FT1DM患者的急性血糖变化,结合患者的临床特点和其他相关指标有利于迅速的鉴别诊断FT1DM,减少FT1DM患者的死亡率.

    作者:葛金莲;徐大成;彭友帆;张明琛;曹文艳 刊期: 2015年第11期

  • 贝叶斯期中分析与经典期中分析在成组序贯设计中的比较

    目的 比较贝叶斯期中分析与经典方法的期中分析的差异.方法 以对照组(Control)和试验组(Treatment)的两样本均数比较为分析目的,即θ=μT-μc(θ越大疗效越好),建立H0:θ≤0;H1:θ>0的优效性假设检验(拒绝H0,即支持处理组疗效).按照成组序贯设计的数据要求,在每次期中分析时刻,计算各种先验分布的贝叶斯期中分析Ⅰ类错误、功效、平均样本量、平均阶段数等指标.结果 在Pocock和O'Brien&Fleming设计中,Skeptical先验和Handicap先验的Ⅰ类错误ε均能控制在0.05左右.当O'Brien&Fleming和Pocock方法功效在80%时,基于Handicap先验和Skeptical先验的贝叶斯功效相对来说明显较低,而基于Non-informative先验和Enthusiastic先验的贝叶斯功效则明显较高.结论 Skeptical先验和Handicap先验的贝叶斯期中分析能较好的控制Ⅰ类错误ε,基于Skeptical先验和Handicap先验的贝叶斯期中分析相对于O'Brien&Fleming方法均能够明显增加试验提前终止的可能性,而对于Pocock方法则没有太大实际意义.

    作者:原玲玲;詹志颖;谭旭辉 刊期: 2015年第11期

南方医科大学学报杂志

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