赵素容；张媛媛；吴成柱；李红梅；蒋琛琛；蒋志文；刘浩
目的：探讨RANK-RANKL在嘌呤霉素氨基核苷肾病（PAN）大鼠动物模型肾脏中的表达。方法36只SD大鼠被分配为PAN组及对照组，单次静脉注射嘌呤霉素氨基核苷（PA，100 mg/kg）制作PAN动物模型。大鼠于第3、7、14天检测蛋白尿及血肌酐。检测肾脏病理，并分析RANK和RANKL变化。结果（1）在PAN SD大鼠动物模型中，第3、7、14天时蛋白尿与对照组比较有显著差别，第7天达到高峰；（2）用Western blotting及RT-PCR定量检测发现RANK-RANKL蛋白及mRNA在PAN模型组高于对照组；（3）用激光共聚焦技术显示足细胞标记蛋白Synaptopodin与RANK完全重合，提示RANK主要在足细胞表达；（4）免疫电镜发现RANK在PAN模型组明显增多，且主要定位于足突的顶部胞膜和胞质内。结论在PAN SD大鼠动物模型足细胞异常表达RANK-RANKL，提示RANK及RANKL在足细胞损伤中可能发挥重要作用。
作者：冯仲林；刘双信；史伟；肖厚勤；梁馨苓；刘晓颖；叶智明；王素霞；梁永正；章斌；王文健；刘艳辉；梅平；徐丽霞；马建超；夏运风 刊期： 2014年第01期
目的：构建葎草花粉变应原核酸疫苗pcDNA3.1-Hum，并探讨其是否通过诱导Foxp3+Treg细胞分化介导对哮喘模型小鼠的免疫保护作用。方法双酶切pTripIEx2-Hum质粒以获取目的基因，定向插入pcDNA3.1(-)载体以构建pcDNA3.1-Hum核酸疫苗并测序鉴定，转染至COS-7细胞以证实其表达。采用表达的目的蛋白刺激CD4+CD25-T细胞，验证其能否诱导Foxp3+Treg细胞分化。使用pcDNA3.1-Hum免疫正常小鼠，检测特异性IgE、IgG2a水平以探讨其免疫原性、变应原性；免疫哮喘模型小鼠以验证其免疫保护作用。结果测序证实该构建成功并可在真核细胞内表达；证实表达的目的蛋白可诱导CD4+CD25-T细胞向Foxp3+Treg细胞分化。动物实验提示pcDNA3.1-Hum可诱导特异性IgG2a，不能诱导特异性IgE；可明显降低哮喘模型小鼠气道炎症反应、气道高反应性；升高脾脏Foxp3+Treg细胞百分比；降低IL-4、升高IFN-γ水平。结论成功构建了pcDNA3.1-Hum核酸疫苗，表达的目的蛋白可介导Foxp3+Treg细胞分化。动物实验证实该疫苗具有免疫原性及免疫保护作用，并提示其通过诱导Foxp3+Treg细胞分化介导Th1倾向的免疫保护作用。
作者：卢家美；李满祥；孙秀珍；张永红；刘昀；徐晶；张苏梅 刊期： 2014年第01期
目的：比较和分析Child-Pugh评分、Clichy PI（克利希预后指数）、New Clichy PI（新克利希预后指数）、Rotterdam BCS index（鹿特丹BCS指数）及BCS-TIPS指数5种预后模型在中国布-加综合征（BCS）应用中的预测价值。方法回顾性分析我科收治的123例BCS患者的临床资料，其中生存组99例，死亡组24例，分别按相应模型公式计算5种预后模型的指数，应用F检验计算各预后指数在生死两组间的差异，应用受试者工作特征（ROC）曲线分别计算各模型曲线下面积（AUC）及各预后模型预测患者预后的灵敏度和特异度，进行分析。结果 Child-Pugh、Clichy、New Clichy和Rotterdam BCS模型的预后指数在死亡组中分别为8.792±2.0、5.924±0.783、5.695±1.81和0.615±1.133，均大于各模型在生存组中的相应指数（分别为7.141±1.443、5.221±0.834、3.981±1.033和-0.148±0.896），差异有统计学意义（均P<0.01），仅BCS-TIPS模型预后指数两组间差异无统计学意义（P>0.05）。5种预后指数的AUC依次为0.738，0.720，0.776，0.721和0.502，约登指数依次为0.370，0.410，0.439，0.473和0.051。结论Child-Pugh评分、Clichy PI、New Clichy PI和Rotterdam BCS index这4种模型能够区分我国BCS生死两种预后结果，其中又以New Clichy PI的预测价值高，较适用于中国BCS患者，值得推广，另3种模型的预测价值相对较低，而BCS-TIPS模型不宜应用。同时我们仍需致力于自己的BCS预后模型。
作者：张科；徐浩；祖茂衡；魏宁 刊期： 2014年第01期
血管周上皮样细胞分化的肿瘤是一组罕见的和血管关系密切的间叶肿瘤，组织学和免疫表型上具有血管周上皮样细胞的特征，联合表达黑色素瘤抗体和肌源性抗体。尽管已有相关病例的报道，如良性血管平滑肌脂肪瘤，但对于其起源及分型仍有争议，需深入探讨。我们报道一例肝脏非特异性血管周上皮样细胞肿瘤，具有不同于一般良性肝脏血管平滑肌脂肪瘤的病理学及免疫组织化学特点。肝脏非特异性血管周上皮样细胞肿瘤可以被新定义为一种具有“潜在恶性风险”或“低度恶性”生物学行为的罕见肿瘤，需收集相关病例及进行长期随访，进一步研究此类肿瘤的生物学行为，更新肝脏血管周上皮样细胞肿瘤的病理分型。
作者：张晓刚；王林；蒋依娜；万真；李文智；姚春和；耿智敏；吕毅 刊期： 2014年第01期
目的：建立以pBAD33质粒为载体的副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus, VP）基因回补实验平台。方法PCR扩增aphA和opaR的整个ORF区序列，并将其直接克隆入pBAD33质粒中，构建重组质粒。分别将重组质粒转入到ΔopaR和ΔaphA中（分别代表opaR和aphA的突变株），以构建出相应的回补株C-ΔaphA和C-ΔopaR。分别在aphA和opaR基因内设计特异性引物，采用RT-PCR方法，验证在相应的回补突变株中aphA和opaR是否转录。利用引物延伸实验研究野生株（WT）、ΔopaR、ΔaphA、C-ΔaphA和C-ΔopaR中mfpA（aphA负调控，opaR正调控其表达）的相对RNA水平。结果 aphA和opaR在相应的回补株中发生转录；且mRNA水平与野生株一致。结论成功建立了以pBAD33质粒为载体的VP基因回补方法，并得到应用。
作者：陈振鸿；王丽；张义全；冯娇；杨瑞馥；常德；安莉；刘长庭；周冬生 刊期： 2014年第01期
作者设计了一种简单的、不需要复杂管道和动力泵的细胞培养芯片。通过这种芯片可以精确地观察单个或几个细胞的增殖、凋亡的过程，在自动显微成像的帮助下可以详细记录单个细胞对药物的反应等。这种芯片可以在普通的实验室设计和制作，可以放在小的培养皿中，所以很容易把它放到培养箱，从而使细胞有一个稳定的生长环境。作者以PC-12细胞为例，观察了该细胞在这种培养芯片中的生长、增殖和凋亡的过程，证明了这种设计的可行性。同时，这种细胞培养芯片可以很大程度上节约细胞标本和试剂的应用，比较适合稀少样本或者试剂昂贵的细胞学实验。
作者：杜岗；黄正一；常青；李自成 刊期： 2014年第01期
目的：研究新型PET受体靶向显像剂18F-AlF-NOTA-PRGD2用于肿瘤显像的可行性。方法18F-AlF-NOTA-PRGD2采用18氟-氟化铝（18F-AlF）与NOTA-PRGD2在100℃下通过鳌合反应标记制备而得。荷脑胶质瘤U87MG裸鼠经尾静脉注射18F-AlF-NOTA-PRGD2后行体内放射性生物学分布和PET/CT、microPET/CT显像研究。结果18F-AlF-NOTA-PRGD2采用一步法成功标记，反应时间15~20 min，标记产率为17%~25%。体内放射性生物学研究显示该显像剂能靶向肿瘤病灶，静脉注射后1 h和2 h肿瘤摄取量分别达4.14±1.44、2.80±1.18%ID/g（t=1.910，P=0.070），肿瘤/脑比值分别达2.95±0.61、5.21±2.62（t=-1.686，P=0.167）。PET/CT和microPET/CT显像均可清楚显示该显像剂在荷瘤鼠体内的放射性分布情况，肿瘤显像清楚，体内分布良好，但microPET/CT图像质量明显优于PET/CT。结论18F-AlF-NOTA-PRGD2标记简单、易行，在荷瘤鼠体内具有优良的肿瘤靶向性，可发展成为PET肿瘤显像剂。
作者：吴湖炳；王全师；韩彦江；周文兰；李洪生；田颖；王巧愚 刊期： 2014年第01期
作者： 刊期： 2014年第01期
目的：研究慢病毒载体基因在肝脏内转染的有效途径。方法本实验根据大鼠消化系统解剖，设计利用经回盲部回结肠静脉穿刺置管至门静脉作为转染途径。通过观察对比尾静脉转染途径大鼠肝脏荧光蛋白表达、基因表达及转氨酶变化情况，探讨不同转染方法的有效性和安全性。结果门静脉转染组和尾静脉转染组大鼠均存活。转染后96 h慢病毒载体携带绿色荧光蛋白在门静脉转染组肝脏呈高表达，14 d后仍有持续表达；尾静脉转染组术后96 h荧光蛋白表达较门静脉组弱，14 d后几无持续表达。RT-PCR检测转染基因LXRα-RNAi效率：转染组LXRαmRNA表达均有下调，门静脉转染组LXRα基因敲减率明显高于尾静脉转染组（0.135±0.002 vs 0.713±0.036，P<0.05），两组血清ALT比较差别无统计学意义。结论经门静脉灌注是基因转染的有效途径，经回盲部回结肠静脉属支穿刺置管可在保证大鼠存活的情况下提高基因转染率，且对肝功能无明显损害，是值得推广的方法。
作者：赵英鹏；李立；马菁番；白建华；刘其雨 刊期： 2014年第01期
目的：比较16G及18G空芯针对不同声像学特征的乳腺病灶行超声引导穿刺活检的准确性。方法行超声引导16G及18G空芯针乳腺穿刺活检后外科手术切除的病例955例。超声引导穿刺活检病理结果与手术切除病理结果对比，根据超声声像学特征分组分析穿刺活检的符合率、敏感性、假阴性率、低估率。结果穿刺活检病理结果中，恶性占84.1%，高危占8.4%，良性占7.5%。16G及18G穿刺活检与术后病理的总符合率分别为92.4%及92.8%；完全敏感性及假阴性率均分别为98.6%及1.4%；高危低估率及导管内癌低估率分别为16G：48.0%及46.2%；18G：53.3%及41.2%。两种方法间无统计学差异（P>0.01）。同时，对于两种方法，肿块型病灶的穿刺符合率均明显高于非肿块型病灶（P<0.01）。对于直径小于等于10 mm的肿块型病灶，穿刺符合率明显降低（P<0.01）。含钙化病灶与不含钙化病灶间的穿刺符合率无统计学差异（P>0.01）。结论超声引导16G及18G空芯针穿刺活检对于诊断直径大于10 mm的肿块型乳腺病灶均是准确的方法。
作者：周洁莹；唐杰；罗渝昆；王知力；吕发勤；张明博；付帅；徐清华 刊期： 2014年第01期
目的：冠脉CT（CCTA）的准确性已经得到证实，但其临床应用的情况目前尚没有统计资料。方法采用回顾性的队列研究方法，连续收集2008年3月3日~2009年6月23日在解放军总医院行CCTA检查的患者，统计其后治疗取向，包括是否进行了CAG，经皮冠状动脉介入治疗（PCI），冠状动脉旁路手术（CABG），药物治疗和正常CAG，并与同期进行的直接CAG进行比较。结果从2008年3月3日~2009年6月23日共行CCTA检查8030例，直接CAG 3260例。CCTA组的危险因素明显低于CAG组，差异有统计学意义（P<0.0001）。大多数患者CCTA后没有进一步行CAG，占87.97%。CCTA后CAG 953例，其中CAG正常3.7%，药物治疗11.3%，PCI 63.4%，CABG 21.6%。直接CAG组3260例，其中CAG正常17.9%，药物治疗25.1%，PCI 52.9%， CABG4.4%。CCTA后CAG和直接CAG组比较，CCTA增加了再血管化治疗率，差异有显著统计学意义（P<0.0001）。结论经过CCT筛选，再血管化治疗率明显提高，而正常CCTA减少。但目前门诊所做的CCTA阳性率较低，大多数为正常或轻中度病变，需CAG的很少，滥用现象则凸显。
作者：盖兢泾；翟学；白启才；王志国；蒋博；汪奇；杨立；盖鲁粤 刊期： 2014年第01期
目的：探索miR-124a的靶基因iASPP对神经发育的影响。方法利用在线预测软件TargetScan对miR-124a的靶基因进行预测，结合文献资料提到的与神经早期发育有关的基因进行筛选，我们选择iASPP作为miR-124a的候选靶基因。通过荧光素酶报告基因实验对其进行验证，然后在M17细胞中转染miR-124a过表达质粒，用Western blotting实验检测iASPP蛋白表达水平的变化。利用视黄酸诱导M17细胞作为神经元分化模型，通过过表达或者基因干扰的方法，初步探讨iASPP基因对神经发育的影响。结果miR-124a促进神经突起发育，并且能够与iASPP基因的3'非翻译区（3'UTR）相互作用来抑制其蛋白质的表达；iASPP基因的过表达抑制神经突起的发育并且抑制miR-124a促进神经突起生长的作用。结论miR-124a能够通过抑制iASPP基因的表达来促进神经突起生长。
作者：林利芳；谷溪；刘书虎；王雪敏 刊期： 2014年第01期
目的：探讨3-溴丙酮酸（3-BP）增强肝癌细胞对顺铂敏感性的作用及其可能机制。方法MTT法检测3-BP、顺铂对HepG2、SMMC7721细胞的增殖抑制作用。选择低于半数抑制浓度（IC50）的100μmol/L的3-BP和8μmol/L的顺铂单独或联合处理细胞，PI单染流式细胞术检测细胞凋亡，caspase 3活性检测试剂盒测定caspase-3的活性变化，ATP检测试剂盒测定细胞内ATP水平，Western blot检测XIAP、PARP蛋白的表达。结果3-BP在50~400μmol/L浓度范围内对HepG2、SMMC7721细胞具有明显的增殖抑制作用（P<0.01），作用48 h的IC50分别为238.9±13.9μmol/L、278.7±11.7μmol/L；顺铂在2~32μmol/L浓度范围内对HepG2、SMMC7721细胞具有明显的增殖抑制作用（P<0.01），作用48 h的IC50分别为16.4±0.9μmol/L、20.9±1.8μmol/L。100μmol/L 3-BP与8μmol/L顺铂联合作用于HepG2、SMMC7721细胞48 h的增殖抑制率分别为（60.6±2.2）%、（56.8±2.3）%，明显高于对照组和单独用药组（P<0.01）。100μmol/L 3-BP与8μmol/L顺铂联合作用于HepG2、SMMC7721细胞48 h的凋亡率分别为（51.1±4.3）%、（46.5±3.9）%，较单用3-BP、顺铂的凋亡率明显提高（P<0.01）。结论3-BP能增强肝癌细胞HepG2、SMMC7721对顺铂诱导的凋亡的敏感性，其机制可能是通过引起细胞内ATP缺乏、下调XIAP蛋白的表达以及增加caspase-3的活性。
作者：赵素容；张媛媛；吴成柱；李红梅；蒋琛琛；蒋志文；刘浩 刊期： 2014年第01期
门静脉高压症是一组以门静脉压力升高、门体侧枝循环形成为特征的临床综合症，是肝硬化主要的并发症之一。目前尚无治疗门静脉高压的理想药物，故有必要寻找可有效降低门静脉高压的药物。索拉非尼是口服的酪氨酸激酶抑制剂，已有研究表明，索拉非尼用于门静脉高压症可显著改善血流动力学、抑制新生血管形成、减轻肝脏的纤维化，明显降低门静脉压力。本文就索拉非尼治疗门静脉高压症的研究进展及其相应机制做一综述。
作者：朱云；程旸；李爱民；罗荣城 刊期： 2014年第01期
前列腺凋亡应答蛋白4（Par-4）作为促凋亡因子，先在雄性激素不依赖型前列腺癌细胞（AT-3）中发现。内源性Par-4使癌细胞对凋亡刺激更敏感化，但是外源性Par-4可选择性地直接导致癌细胞凋亡，并通过基因突变实验发现该活性依赖于它的核心结构域SAC。Par-4和SAC可特异性地导致癌细胞凋亡，因此是潜在的癌症靶点治疗药物。本文综述了Par-4的发现、结构、功能及其在细胞内信号通路，后讨论了Par-4和SAC在癌症临床治疗中的应用前景以及在基础研究和临床应用中存在的问题。
作者：吴增丁；王冠林；张宽仁 刊期： 2014年第01期
目的：评估流入反转恢复稳态自由进动（IFIR-FIEASTA）序列诊断老年患者肾动脉狭窄的效能。方法对27例老年患者进行三维对比增强磁共振血管成像（3D CE-MRA）和IFIR-FIEASTA扫描，比较两种检查方法的图像质量，采用Kappa分析检验IFIR-FIEASTA和CE-MRA诊断肾动脉狭窄的一致性。以CE-MRA为金标准，评估IFIR-FIEASTA诊断肾动脉狭窄的敏感度、特异度、准确率、阳性预测值和阴性预测值。结果两种检查方法的图像质量均100%达到诊断要求，但CE-MRA的图像质量显著优于IFIR-FIEASTA。CE-MRA和IFIR-FIEASTA诊断肾动脉狭窄的一致性好；IFIR-FIEASTA诊断肾动脉狭窄的敏感度、特异度、准确率、阳性预测值和阴性预测值分别为97.1%、100%、98.1%、100%和95%。结论IFIR-FIEASTA诊断老年患者肾动脉狭窄的可行性很高，临床实用性强。
作者：徐贤；安宁豫；陈穗惠；李雪；江波；韩邵君；刘新球 刊期： 2014年第01期
目的：通过观察腺苷对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后细胞凋亡及葡萄糖调节蛋白-78（GRP-78）和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶12（caspase 12）表达的影响，探讨其对脊髓损伤的保护作用。方法通过阻断大鼠肾动脉水平的腹主动脉90 min建立大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型。27只成年健康雄性SD大鼠随机分成3组：假手术组（A组）；缺血再灌注损伤组（B组）；腺苷预处理组（C组）。于再灌注6、12、24 h观察大鼠并对其后肢运动功能进行评分，取再灌注24 h大鼠的L2-L5节段脊髓组织作HE染色及TUNEL染色，Western blot检测GRP-78和caspase 12蛋白的表达。结果 HE染色结果显示：C组细胞水肿等组织形态学变化较B组轻；TUNEL染色结果显示：与A组比较，B组的凋亡细胞数量显著增加；与B组相比，C组凋亡细胞数量较少。WB检测结果显示：相较于B组，C组GRP-78蛋白表达增多（P<0.01），caspase 12蛋白表达减少（P<0.01）。结论腺苷通过上调GRP-78的表达，下调caspase 12的表达，抑制细胞凋亡而发挥其保护作用。
作者：富旗；周正芳；李小辉；郭惠明；范小平；陈寄梅；庄建；郑少忆；朱平 刊期： 2014年第01期
目的：观察病态肥胖患者腔镜胃旁路手术麻醉中动脉血二氧化碳分压（PaCO2）与呼吸末二氧化碳分压（Pet-CO2）的关系。方法观察40例BMI为35~50 kg/m2，在腔镜下行胃旁路手术的病态肥胖患者，记录在全麻插管后气腹前、气腹30 min，气腹60 min，气腹120 min，放气后30 min，放气后60 min等不同时间点PaCO2和Pet-CO2的值，比较PaCO2和Pet-CO2的值及其相关性。结果各时间点的Pet-CO2值均低于PaCO2值，在气腹前、气腹时和气腹放气后3种不同的机体状态下PaCO2和Pet-CO2呈密切正相关（P<0.05），在16 mmHg中等压力CO2气腹状态下，气腹后30、60、120 min 3个时间点PaCO2和Pet-CO2的相关性与气腹前、气腹放气后PaCO2和Pet-CO2的相关性的r值有差别。结论病态肥胖患者在中等CO2气腹压，腹腔镜辅助行胃旁路手术中PaCO2和Pet-CO2是密切相关的。
作者：胡冬华；唐杰坷；徐天星；钟曌；梁赵佳；梁健明；聂偲；刘嘉羿；邹启荣；彭雪梅；李雅兰 刊期： 2014年第01期
目的：观察中脑导水管周围灰质腹外侧区（VL-PAG）内促代谢型谷氨酸受体亚型7（mGluR 7）和8（mGluR 8）对大鼠心脏-躯体运动反射（CMR）的调节作用。方法通过心包插管术制作CMR大鼠模型，在VL-PAG内分别注射mGluR 7和mGluR 8的激动剂AMN082和DCPG，观察其对大鼠CMR的调节作用；同时电损毁延髓头端腹内侧区（rostroventral medulla, RVM）亚核中的中缝大核或双侧网状巨细胞核，观察VL-PAG对大鼠CMR的下行调控作用。结果AMN082选择性激活VL-PAG内mGluR 7后，对辣椒素诱发的CMR具有明显的易化作用（P<0.05）；与之相反，DCPG激活VL-PAG内mGluR 8对CAP诱发的CMR具有明显的抑制作用（P<0.05）；这种易化或抑制效应均可被其拮抗剂MSOP完全拮抗；损毁大鼠VL-PAG的主要中继亚核中的中缝大核后，VL-PAG内AMN082微注射所产生的易化效应没有受到明显的影响（P>0.05），VL-PAG内DCPG微注射所产生的抑制效应被部分地减弱（P<0.05）；而双侧网状巨细胞核损毁后，AMN082微注射所产生的易化效应明显被减弱，同时DCPG所产生的抑制效应也有所减弱。结论VL-PAG内mGluR 7和mGluR 8对大鼠CMR具有易化和抑制双向调节效应，而这种双向调节效应很可能是通过RVM的不同亚核、不同神经元的激活而实现的。
作者：孙娜；孔令恒；牛利刚；朱娟霞；徐燕；杜剑青 刊期： 2014年第01期
目的：研究本地区妊娠合并梅毒的发病趋势及围产儿感染梅毒高危因素。方法对2009年1月~2013年4月本院重症孕产妇救治中心住院的孕产妇及其妊娠合并梅毒围产儿进行多因素分析。统计指标包括孕妇年龄、孕产次、梅毒血清学结果、苄星青霉素治疗、居住地区、配偶梅毒血清学结果、分娩方式、新生儿梅毒血清学结果（1.1.2）。结果2009~2013年我院孕产妇妊娠合并梅毒平均发病率2.55‰，2009、2010年年发病率分别为3.08‰和3.13‰，与1994~2000年广州地区妊娠合并梅毒平均发病率1.51‰相比显著升高（P=0.0039）。经过规范抗梅毒治疗，孕产妇的新生儿梅毒血清学检测阳性率55.81%，配偶无感染梅毒的新生儿梅毒检测阳性率54.348%，均显著低于未治疗组（P<0.01）和配偶为梅毒患者组（P<0.05）。妊娠合并梅毒孕产妇中，配偶系梅毒患者占82.14%，流动居民80.36%，多次孕产史78.57%。结论对本院21920例孕产妇调查显示，近5年妊娠合并梅毒发病率呈线性增长趋势，但是，近3年的发病率遏制在全国发病率2‰~5‰的下限。未接受抗梅毒治疗和配偶为梅毒患者系新生儿梅毒检测阳性的高危因素；流动居民、配偶系梅毒患者和多次孕产史是孕产妇感染梅毒的高危因素。改善围产期医疗条件将有效降低孕产妇妊娠合并梅毒发病率；建立孕产妇及配偶双方同时接受苄星青霉素治疗的医疗渠道将有效降低新生儿梅毒检测阳性率和母婴垂直传播感染梅毒的几率。
作者：肖雪；周燕媚；孙雯；陈敦金 刊期： 2014年第01期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
