杜岗;黄正一;常青;李自成
目的:观察胆汁酸核受体激动剂GW4064对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂联素及其受体和对HepG2细胞脂联素受体的影响。方法用GW4064干预3T3-L1前脂肪细胞的整个分化过程,荧光Real-time PCR法检测分化第0、2、4、6、8天胆汁酸核受体(FXR)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)、脂联素、脂联素受体(AdipoR1、AdipoR2)mRNA相对表达量及ELISA法检测脂联素蛋白水平,同时,GW4064干预饥饿后的HepG2细胞0、12、24、48 h后,荧光Real-time PCR法检测AdipoR1和AdipoR2 mRNA相对表达量。结果 GW4064干预后,3T3-L1前脂肪细胞中FXR、PPARγ2、脂联素、AdipoR2及HepG2细胞AdipoR2 mRNA相对表达量较空白组明显上升,脂联素蛋白水平与其mRNA表达情况一致,差异均有统计学意义(P<0.05),而3T3-L1前脂肪细胞、HepG2细胞的AdipoR1表达无明显改变。结论 GW4064可上调脂肪细胞FXR、PPARγ2、脂联素、AdipoR2及HepG2细胞AdipoR2的表达,而脂联素和AdipoR2是治疗非酒精性脂肪性肝病的两个重要因素,因此FXR激动剂可能通过诱导其表达达到治疗非酒精性脂肪性肝病的目的;另外,PPARγ是脂肪细胞分化成熟的重要调控因子,推测胆汁酸核受体对脂肪细胞的调控可能是通过上调PPARγ实现的。
作者:辛小敏;钟慕晓;张珊珊;彭瑶;朱薇;张亚历 刊期: 2014年第01期
目的:建立以pBAD33质粒为载体的副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus, VP)基因回补实验平台。方法PCR扩增aphA和opaR的整个ORF区序列,并将其直接克隆入pBAD33质粒中,构建重组质粒。分别将重组质粒转入到ΔopaR和ΔaphA中(分别代表opaR和aphA的突变株),以构建出相应的回补株C-ΔaphA和C-ΔopaR。分别在aphA和opaR基因内设计特异性引物,采用RT-PCR方法,验证在相应的回补突变株中aphA和opaR是否转录。利用引物延伸实验研究野生株(WT)、ΔopaR、ΔaphA、C-ΔaphA和C-ΔopaR中mfpA(aphA负调控,opaR正调控其表达)的相对RNA水平。结果 aphA和opaR在相应的回补株中发生转录;且mRNA水平与野生株一致。结论成功建立了以pBAD33质粒为载体的VP基因回补方法,并得到应用。
作者:陈振鸿;王丽;张义全;冯娇;杨瑞馥;常德;安莉;刘长庭;周冬生 刊期: 2014年第01期
目的:研究慢病毒载体基因在肝脏内转染的有效途径。方法本实验根据大鼠消化系统解剖,设计利用经回盲部回结肠静脉穿刺置管至门静脉作为转染途径。通过观察对比尾静脉转染途径大鼠肝脏荧光蛋白表达、基因表达及转氨酶变化情况,探讨不同转染方法的有效性和安全性。结果门静脉转染组和尾静脉转染组大鼠均存活。转染后96 h慢病毒载体携带绿色荧光蛋白在门静脉转染组肝脏呈高表达,14 d后仍有持续表达;尾静脉转染组术后96 h荧光蛋白表达较门静脉组弱,14 d后几无持续表达。RT-PCR检测转染基因LXRα-RNAi效率:转染组LXRαmRNA表达均有下调,门静脉转染组LXRα基因敲减率明显高于尾静脉转染组(0.135±0.002 vs 0.713±0.036,P<0.05),两组血清ALT比较差别无统计学意义。结论经门静脉灌注是基因转染的有效途径,经回盲部回结肠静脉属支穿刺置管可在保证大鼠存活的情况下提高基因转染率,且对肝功能无明显损害,是值得推广的方法。
作者:赵英鹏;李立;马菁番;白建华;刘其雨 刊期: 2014年第01期
目的:观察中脑导水管周围灰质腹外侧区(VL-PAG)内促代谢型谷氨酸受体亚型7(mGluR 7)和8(mGluR 8)对大鼠心脏-躯体运动反射(CMR)的调节作用。方法通过心包插管术制作CMR大鼠模型,在VL-PAG内分别注射mGluR 7和mGluR 8的激动剂AMN082和DCPG,观察其对大鼠CMR的调节作用;同时电损毁延髓头端腹内侧区(rostroventral medulla, RVM)亚核中的中缝大核或双侧网状巨细胞核,观察VL-PAG对大鼠CMR的下行调控作用。结果AMN082选择性激活VL-PAG内mGluR 7后,对辣椒素诱发的CMR具有明显的易化作用(P<0.05);与之相反,DCPG激活VL-PAG内mGluR 8对CAP诱发的CMR具有明显的抑制作用(P<0.05);这种易化或抑制效应均可被其拮抗剂MSOP完全拮抗;损毁大鼠VL-PAG的主要中继亚核中的中缝大核后,VL-PAG内AMN082微注射所产生的易化效应没有受到明显的影响(P>0.05),VL-PAG内DCPG微注射所产生的抑制效应被部分地减弱(P<0.05);而双侧网状巨细胞核损毁后,AMN082微注射所产生的易化效应明显被减弱,同时DCPG所产生的抑制效应也有所减弱。结论VL-PAG内mGluR 7和mGluR 8对大鼠CMR具有易化和抑制双向调节效应,而这种双向调节效应很可能是通过RVM的不同亚核、不同神经元的激活而实现的。
作者:孙娜;孔令恒;牛利刚;朱娟霞;徐燕;杜剑青 刊期: 2014年第01期
目的:建立耳蜗基底膜的力学模型,验证基底膜特征频率和特征位置的关系。方法通过所建模型,采用宏观力学方法,简化模型细节,通过仿真工具对基底膜的振动和选频特性进行分析。结果耳蜗基底膜具有较明显的选频特性,即基底膜上离镫骨较近段对高频敏感,离镫骨较远段对低频敏感。结论仿真结果显示,基底膜的选频特性主要由基底膜的宽度等几何尺寸及其材料特性沿纵向变化来实现,与耳蜗内螺旋器上其他微小组织关系不大。
作者:缪吉昌;肖中举;周凌宏 刊期: 2014年第01期
作者: 刊期: 2014年第01期
目的:观察病态肥胖患者腔镜胃旁路手术麻醉中动脉血二氧化碳分压(PaCO2)与呼吸末二氧化碳分压(Pet-CO2)的关系。方法观察40例BMI为35~50 kg/m2,在腔镜下行胃旁路手术的病态肥胖患者,记录在全麻插管后气腹前、气腹30 min,气腹60 min,气腹120 min,放气后30 min,放气后60 min等不同时间点PaCO2和Pet-CO2的值,比较PaCO2和Pet-CO2的值及其相关性。结果各时间点的Pet-CO2值均低于PaCO2值,在气腹前、气腹时和气腹放气后3种不同的机体状态下PaCO2和Pet-CO2呈密切正相关(P<0.05),在16 mmHg中等压力CO2气腹状态下,气腹后30、60、120 min 3个时间点PaCO2和Pet-CO2的相关性与气腹前、气腹放气后PaCO2和Pet-CO2的相关性的r值有差别。结论病态肥胖患者在中等CO2气腹压,腹腔镜辅助行胃旁路手术中PaCO2和Pet-CO2是密切相关的。
作者:胡冬华;唐杰坷;徐天星;钟曌;梁赵佳;梁健明;聂偲;刘嘉羿;邹启荣;彭雪梅;李雅兰 刊期: 2014年第01期
目的:探索miR-124a的靶基因iASPP对神经发育的影响。方法利用在线预测软件TargetScan对miR-124a的靶基因进行预测,结合文献资料提到的与神经早期发育有关的基因进行筛选,我们选择iASPP作为miR-124a的候选靶基因。通过荧光素酶报告基因实验对其进行验证,然后在M17细胞中转染miR-124a过表达质粒,用Western blotting实验检测iASPP蛋白表达水平的变化。利用视黄酸诱导M17细胞作为神经元分化模型,通过过表达或者基因干扰的方法,初步探讨iASPP基因对神经发育的影响。结果miR-124a促进神经突起发育,并且能够与iASPP基因的3'非翻译区(3'UTR)相互作用来抑制其蛋白质的表达;iASPP基因的过表达抑制神经突起的发育并且抑制miR-124a促进神经突起生长的作用。结论miR-124a能够通过抑制iASPP基因的表达来促进神经突起生长。
作者:林利芳;谷溪;刘书虎;王雪敏 刊期: 2014年第01期
血管周上皮样细胞分化的肿瘤是一组罕见的和血管关系密切的间叶肿瘤,组织学和免疫表型上具有血管周上皮样细胞的特征,联合表达黑色素瘤抗体和肌源性抗体。尽管已有相关病例的报道,如良性血管平滑肌脂肪瘤,但对于其起源及分型仍有争议,需深入探讨。我们报道一例肝脏非特异性血管周上皮样细胞肿瘤,具有不同于一般良性肝脏血管平滑肌脂肪瘤的病理学及免疫组织化学特点。肝脏非特异性血管周上皮样细胞肿瘤可以被新定义为一种具有“潜在恶性风险”或“低度恶性”生物学行为的罕见肿瘤,需收集相关病例及进行长期随访,进一步研究此类肿瘤的生物学行为,更新肝脏血管周上皮样细胞肿瘤的病理分型。
作者:张晓刚;王林;蒋依娜;万真;李文智;姚春和;耿智敏;吕毅 刊期: 2014年第01期
目的:探讨温灸神阙穴对胃穿孔修补术后大鼠胃肠功能恢复的影响及其作用机制。方法30只雄性SD大鼠,以冰醋酸诱导制作胃穿孔模型,并行胃穿孔修补术,术后第8天,将大鼠随机分为模型组、多潘立酮组、温灸组3组,模型组术后予生理盐水灌胃,多潘立酮组以多潘立酮混悬液灌胃,温灸组除用生理盐水灌胃外,加以艾灸按摩器固定于神阙穴进行艾灸,干预10 d后观察和对比各组大鼠胃窦消化间期综合肌电活动,检测外周血TNF-α水平,IL-6水平及T淋巴细胞亚群的数量。结果温灸组的胃肠电活动较模型组活跃,差异具有统计学意义(P<0.05),但与多潘立酮组相比无明显差异(P>0.05);温灸组的外周血TNF-α水平及IL-6水平较低,T淋巴细胞亚群的数量有改善,与模型组或多潘立酮组均有统计学差异(P<0.05)。结论温灸神阙穴可以促进胃穿孔修补术后大鼠胃肠功能恢复,其机制可能与增强胃肠电活动、抗炎和提高细胞免疫功能有关,是一种简单易行、效果确切的围手术期辅助疗法。
作者:郑权;李华英;文小敏;郑坤才 刊期: 2014年第01期
目的:探讨内皮素受体A基因(EDNRA)多态性与散发性颅内动脉瘤的相关性。方法在散发性颅内动脉瘤及对照组中,应用聚合酶链反应、限制性片段长度多态性(RFLP)的方法对EDNRA基因3个多态位点进行研究,分析上述多态位点基因型及等位基因频率在两组中的分布,并分析其与颅内动脉瘤大小的关系。结果 EDNRA基因的rs5335、rs6842241、rs6841581位点基因型及等位基因频率在病例组及对照组中的分布无明显差异。Rs6841581 GG基因型频率分布与颅内动脉瘤大小有关, EDNRA的其它多态位点的基因型及等位基因频率与动脉瘤的大小无明显相关。结论 EDNRA基因rs6841581位点与颅内动脉瘤的大小相关,提示EDNRA基因可能参与了颅内动脉瘤的发生发展过程。
作者:刘丽;黄旭升;蔡艺灵;冯凯;杜娟;路浩军;程飞飞 刊期: 2014年第01期
目的:探讨RANK-RANKL在嘌呤霉素氨基核苷肾病(PAN)大鼠动物模型肾脏中的表达。方法36只SD大鼠被分配为PAN组及对照组,单次静脉注射嘌呤霉素氨基核苷(PA,100 mg/kg)制作PAN动物模型。大鼠于第3、7、14天检测蛋白尿及血肌酐。检测肾脏病理,并分析RANK和RANKL变化。结果(1)在PAN SD大鼠动物模型中,第3、7、14天时蛋白尿与对照组比较有显著差别,第7天达到高峰;(2)用Western blotting及RT-PCR定量检测发现RANK-RANKL蛋白及mRNA在PAN模型组高于对照组;(3)用激光共聚焦技术显示足细胞标记蛋白Synaptopodin与RANK完全重合,提示RANK主要在足细胞表达;(4)免疫电镜发现RANK在PAN模型组明显增多,且主要定位于足突的顶部胞膜和胞质内。结论在PAN SD大鼠动物模型足细胞异常表达RANK-RANKL,提示RANK及RANKL在足细胞损伤中可能发挥重要作用。
作者:冯仲林;刘双信;史伟;肖厚勤;梁馨苓;刘晓颖;叶智明;王素霞;梁永正;章斌;王文健;刘艳辉;梅平;徐丽霞;马建超;夏运风 刊期: 2014年第01期
前列腺凋亡应答蛋白4(Par-4)作为促凋亡因子,先在雄性激素不依赖型前列腺癌细胞(AT-3)中发现。内源性Par-4使癌细胞对凋亡刺激更敏感化,但是外源性Par-4可选择性地直接导致癌细胞凋亡,并通过基因突变实验发现该活性依赖于它的核心结构域SAC。Par-4和SAC可特异性地导致癌细胞凋亡,因此是潜在的癌症靶点治疗药物。本文综述了Par-4的发现、结构、功能及其在细胞内信号通路,后讨论了Par-4和SAC在癌症临床治疗中的应用前景以及在基础研究和临床应用中存在的问题。
作者:吴增丁;王冠林;张宽仁 刊期: 2014年第01期
目的:测定肝硬化者血清PG的水平,探讨肝硬化发生胃粘膜病变时胃粘膜的功能状态。方法胃镜观察已确诊的51例肝硬化患者胃粘膜病变,快速尿素酶实验或碳13呼气实验明确幽门螺杆菌感染情况,肝功能进行Child-Pugh分级,乳胶增强免疫比浊法检测血清PG(PGⅠ、PGⅡ)浓度,得出PGⅠ/PGⅡ值(PGR),数据进行统计学分析。结果血清PGⅠ水平比较,肝硬化PHG组明显低于无PHG组及对照组,差异有统计学意义,PGⅡ、PGR差异无统计学意义。肝硬化幽门螺杆菌感染与无幽门螺杆菌感染两组间比较PGⅡ、PGR比较有差异。肝硬化肝功能分级组间及酒精性肝硬化与乙肝肝硬化比较血清PG水平均无明显差异。结论肝硬化合并PHG时血清PGⅠ水平明显降低,胃粘膜损伤可达固有层,分泌功能降低;幽门螺杆菌可以影响PGⅡ水平;血清PG水平与肝功能无明显关系;血清PG水平尤其PGⅠ在一定程度上可以反映肝硬化胃粘膜功能状态。
作者:毛华;李瑞 刊期: 2014年第01期
目的:了解运动在儿童哮喘管理中的作用,探讨适合我国儿童哮喘管理的初步运动处方。方法112例7~14岁哮喘患儿随机分为运动组(56例)和对照组(56例),运动组在给予药物治疗同时给予运动处方,对照组仅给予药物治疗,试验持续4个月。在入组后每日记录哮喘日记卡内容:早晚呼吸峰流、日间和夜间症状评分、β2受体激动剂使用频率、运动情况及及其过程中出现哮喘相关症状情况。结果112例研究对象中,共107例完成试验。运动组日内PEF变异率自第13周开始持续低于对照组(P<0.05);运动组日间症状评分、夜间症状评分及应急用药量均显著小于对照组(均P<0.05);试验期间未发生严重不良事件。结论哮喘患儿进行4个月每周3 d,每次持续20 min以上的运动有益于其儿童哮喘控制,并且是安全的。
作者:程波利;黄英 刊期: 2014年第01期
目的:探讨在老年人胃肠道大手术中应用乌司他丁对其围术期心脏功能的影响。方法选择60例择期行胃肠道大手术的老年患者(年龄>60岁)随机分为乌司他丁组(U组)和对照组(C组)。U组在人室静脉开放后即开始采用微量泵快速泵入乌司他丁200000 U,于手术开始前泵完,接着持续静脉泵入乌司他丁100000 U/h至手术结束。C组给予同等剂量的生理盐水。监测两组手术开始前(T0),手术开始后1 h(T1),开始后2 h(T2),开始后3 h(T3)的平均动脉压(MPV)、心率(HR),通过床旁多普勒超声心动图监测两组上述各时间点的左室射血分数(LVEF)和心输出量(CO),记录两组患者术毕时多巴胺总的用量。并在手术开始前(T0),手术结束后6 h(T4)和手术结束后12 h(T5)采集两组患者右颈内静脉血检测血清的肌钙蛋白(cTn)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、脑钠肽(BNP)的含量。结果两组在T2和T3时的MPV、LVEF和CO较T0时均显著降低(P<0.05),HR显著升高(P<0.05),两组在T4和T5时的cTn、CK-MB和BNP较T0时显著升高。但C组与U组相比在T2和T3时MPV、LVEF和CO显著降低(P<0.05),HR显著升高(P<0.05),在T4和T5时cTn、CK-MB和BNP则显著升高。结论在老年人胃肠道大手术中应用乌司他丁对患者围术期的心脏功能有明显的保护作用。
作者:陈力;徐世元;李传翔;宋伏虎;王怡 刊期: 2014年第01期
门静脉高压症是一组以门静脉压力升高、门体侧枝循环形成为特征的临床综合症,是肝硬化主要的并发症之一。目前尚无治疗门静脉高压的理想药物,故有必要寻找可有效降低门静脉高压的药物。索拉非尼是口服的酪氨酸激酶抑制剂,已有研究表明,索拉非尼用于门静脉高压症可显著改善血流动力学、抑制新生血管形成、减轻肝脏的纤维化,明显降低门静脉压力。本文就索拉非尼治疗门静脉高压症的研究进展及其相应机制做一综述。
作者:朱云;程旸;李爱民;罗荣城 刊期: 2014年第01期
目的:探讨类风湿关节炎(RA)患者滑液(SF)自然杀伤(NK)细胞NK-22促成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖作用及相关信号通路。方法采用流式细胞术分选6例RA患者SF中NK-22细胞(2×104),体外悬浮培养2周,佛波酯(20 ng/ml)和离子霉素(0.5μmol/L)刺激后ELISA检测NK-22细胞培养上清IL-22浓度。组织块培养法原代培养RAFLS,NK-22细胞培养上清分别作用于RAFLS24、48、72 h,MTT法检测FLS增殖;同时加入IL-22抗体检测FLS增殖情况。RT-PCR检测rhIL-22及AG490作用后RAFLS Stat3 mRNA的表达,Western blot检测RAFLS p-Stat3蛋白含量。结果①流式分选2×104 NK-22细胞,细胞纯度>90%;①PMA和ionomycin刺激后NK-22细胞培养上清中IL-22浓度为1273.42±254.48 pg/ml;①PMA和ionomycin刺激后NK-22细胞培养上清作用于RAFLS 24 h、48 h、72 h,可明显刺激RAFLS增殖(P<0.05)。IL-22抗体能明显抑制NKp44+NK细胞上清诱导的RA FLS增殖(P<0.01);①rhIL-22(1 ng/ml)能诱导RAFLS p-Stat3表达(P<0.05);①AG490能抑制rhIL-22诱导的RAFLS p-Stat3表达(P<0.05)。结论 RA患者SFNK-22细胞体外可分泌高浓度的IL-22,通过激活STAT3信号通路进而刺激RAFLS增殖。
作者:任洁;周毅;吴会霞;戴桃李;朱丽花 刊期: 2014年第01期
目的:了解广州市天河区产后抑郁症(PPD)的发生率及相关危险因素,为PPD的防治提供依据。方法采用爱登堡产后抑郁量表(EPDS)、社会支持评定量表(SSRS)及PPD影响因素调查表对广州市天河区3家医院2013年5月~2013年9月分娩的1428名产妇进行调查。结果1428名产妇中,PPD发生率为20.03%,非条件Logistic回归分析显示文化程度、分娩方式、独生女产妇、婆媳关系、家人对新生儿性别满意度、住房面积等6个因素与PPD的关系有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示文化程度、分娩方式、独生女产妇、婆媳关系、家人对新生儿性别满意度是PPD的危险因素,住房面积与PPD呈负相关, OR值为0.900;产后抑郁组SSRS总分、主观支持分、客观支持分、对支持利用度均低于正常组(P<0.05)。结论广州市天河区PPD发生率较高,应加强对产妇及其家庭的健康教育,加强社会因素干预,防治PPD的发生。
作者:邓爱文;姜婷婷;罗映萍;熊日波 刊期: 2014年第01期
目的:研究新型PET受体靶向显像剂18F-AlF-NOTA-PRGD2用于肿瘤显像的可行性。方法18F-AlF-NOTA-PRGD2采用18氟-氟化铝(18F-AlF)与NOTA-PRGD2在100℃下通过鳌合反应标记制备而得。荷脑胶质瘤U87MG裸鼠经尾静脉注射18F-AlF-NOTA-PRGD2后行体内放射性生物学分布和PET/CT、microPET/CT显像研究。结果18F-AlF-NOTA-PRGD2采用一步法成功标记,反应时间15~20 min,标记产率为17%~25%。体内放射性生物学研究显示该显像剂能靶向肿瘤病灶,静脉注射后1 h和2 h肿瘤摄取量分别达4.14±1.44、2.80±1.18%ID/g(t=1.910,P=0.070),肿瘤/脑比值分别达2.95±0.61、5.21±2.62(t=-1.686,P=0.167)。PET/CT和microPET/CT显像均可清楚显示该显像剂在荷瘤鼠体内的放射性分布情况,肿瘤显像清楚,体内分布良好,但microPET/CT图像质量明显优于PET/CT。结论18F-AlF-NOTA-PRGD2标记简单、易行,在荷瘤鼠体内具有优良的肿瘤靶向性,可发展成为PET肿瘤显像剂。
作者:吴湖炳;王全师;韩彦江;周文兰;李洪生;田颖;王巧愚 刊期: 2014年第01期