冯仲林；刘双信；史伟；肖厚勤；梁馨苓；刘晓颖；叶智明；王素霞；梁永正；章斌；王文健；刘艳辉；梅平；徐丽霞；马建超；夏运风
目的：探讨RANK-RANKL在嘌呤霉素氨基核苷肾病（PAN）大鼠动物模型肾脏中的表达。方法36只SD大鼠被分配为PAN组及对照组，单次静脉注射嘌呤霉素氨基核苷（PA，100 mg/kg）制作PAN动物模型。大鼠于第3、7、14天检测蛋白尿及血肌酐。检测肾脏病理，并分析RANK和RANKL变化。结果（1）在PAN SD大鼠动物模型中，第3、7、14天时蛋白尿与对照组比较有显著差别，第7天达到高峰；（2）用Western blotting及RT-PCR定量检测发现RANK-RANKL蛋白及mRNA在PAN模型组高于对照组；（3）用激光共聚焦技术显示足细胞标记蛋白Synaptopodin与RANK完全重合，提示RANK主要在足细胞表达；（4）免疫电镜发现RANK在PAN模型组明显增多，且主要定位于足突的顶部胞膜和胞质内。结论在PAN SD大鼠动物模型足细胞异常表达RANK-RANKL，提示RANK及RANKL在足细胞损伤中可能发挥重要作用。
作者：冯仲林；刘双信；史伟；肖厚勤；梁馨苓；刘晓颖；叶智明；王素霞；梁永正；章斌；王文健；刘艳辉；梅平；徐丽霞；马建超；夏运风 刊期： 2014年第01期
门静脉高压症是一组以门静脉压力升高、门体侧枝循环形成为特征的临床综合症，是肝硬化主要的并发症之一。目前尚无治疗门静脉高压的理想药物，故有必要寻找可有效降低门静脉高压的药物。索拉非尼是口服的酪氨酸激酶抑制剂，已有研究表明，索拉非尼用于门静脉高压症可显著改善血流动力学、抑制新生血管形成、减轻肝脏的纤维化，明显降低门静脉压力。本文就索拉非尼治疗门静脉高压症的研究进展及其相应机制做一综述。
作者：朱云；程旸；李爱民；罗荣城 刊期： 2014年第01期
目的：构建葎草花粉变应原核酸疫苗pcDNA3.1-Hum，并探讨其是否通过诱导Foxp3+Treg细胞分化介导对哮喘模型小鼠的免疫保护作用。方法双酶切pTripIEx2-Hum质粒以获取目的基因，定向插入pcDNA3.1(-)载体以构建pcDNA3.1-Hum核酸疫苗并测序鉴定，转染至COS-7细胞以证实其表达。采用表达的目的蛋白刺激CD4+CD25-T细胞，验证其能否诱导Foxp3+Treg细胞分化。使用pcDNA3.1-Hum免疫正常小鼠，检测特异性IgE、IgG2a水平以探讨其免疫原性、变应原性；免疫哮喘模型小鼠以验证其免疫保护作用。结果测序证实该构建成功并可在真核细胞内表达；证实表达的目的蛋白可诱导CD4+CD25-T细胞向Foxp3+Treg细胞分化。动物实验提示pcDNA3.1-Hum可诱导特异性IgG2a，不能诱导特异性IgE；可明显降低哮喘模型小鼠气道炎症反应、气道高反应性；升高脾脏Foxp3+Treg细胞百分比；降低IL-4、升高IFN-γ水平。结论成功构建了pcDNA3.1-Hum核酸疫苗，表达的目的蛋白可介导Foxp3+Treg细胞分化。动物实验证实该疫苗具有免疫原性及免疫保护作用，并提示其通过诱导Foxp3+Treg细胞分化介导Th1倾向的免疫保护作用。
作者：卢家美；李满祥；孙秀珍；张永红；刘昀；徐晶；张苏梅 刊期： 2014年第01期
目的：探讨内皮素受体A基因（EDNRA）多态性与散发性颅内动脉瘤的相关性。方法在散发性颅内动脉瘤及对照组中，应用聚合酶链反应、限制性片段长度多态性（RFLP）的方法对EDNRA基因3个多态位点进行研究，分析上述多态位点基因型及等位基因频率在两组中的分布，并分析其与颅内动脉瘤大小的关系。结果 EDNRA基因的rs5335、rs6842241、rs6841581位点基因型及等位基因频率在病例组及对照组中的分布无明显差异。Rs6841581 GG基因型频率分布与颅内动脉瘤大小有关， EDNRA的其它多态位点的基因型及等位基因频率与动脉瘤的大小无明显相关。结论 EDNRA基因rs6841581位点与颅内动脉瘤的大小相关，提示EDNRA基因可能参与了颅内动脉瘤的发生发展过程。
作者：刘丽；黄旭升；蔡艺灵；冯凯；杜娟；路浩军；程飞飞 刊期： 2014年第01期
作者设计了一种简单的、不需要复杂管道和动力泵的细胞培养芯片。通过这种芯片可以精确地观察单个或几个细胞的增殖、凋亡的过程，在自动显微成像的帮助下可以详细记录单个细胞对药物的反应等。这种芯片可以在普通的实验室设计和制作，可以放在小的培养皿中，所以很容易把它放到培养箱，从而使细胞有一个稳定的生长环境。作者以PC-12细胞为例，观察了该细胞在这种培养芯片中的生长、增殖和凋亡的过程，证明了这种设计的可行性。同时，这种细胞培养芯片可以很大程度上节约细胞标本和试剂的应用，比较适合稀少样本或者试剂昂贵的细胞学实验。
作者：杜岗；黄正一；常青；李自成 刊期： 2014年第01期
目的：冠脉CT（CCTA）的准确性已经得到证实，但其临床应用的情况目前尚没有统计资料。方法采用回顾性的队列研究方法，连续收集2008年3月3日~2009年6月23日在解放军总医院行CCTA检查的患者，统计其后治疗取向，包括是否进行了CAG，经皮冠状动脉介入治疗（PCI），冠状动脉旁路手术（CABG），药物治疗和正常CAG，并与同期进行的直接CAG进行比较。结果从2008年3月3日~2009年6月23日共行CCTA检查8030例，直接CAG 3260例。CCTA组的危险因素明显低于CAG组，差异有统计学意义（P<0.0001）。大多数患者CCTA后没有进一步行CAG，占87.97%。CCTA后CAG 953例，其中CAG正常3.7%，药物治疗11.3%，PCI 63.4%，CABG 21.6%。直接CAG组3260例，其中CAG正常17.9%，药物治疗25.1%，PCI 52.9%， CABG4.4%。CCTA后CAG和直接CAG组比较，CCTA增加了再血管化治疗率，差异有显著统计学意义（P<0.0001）。结论经过CCT筛选，再血管化治疗率明显提高，而正常CCTA减少。但目前门诊所做的CCTA阳性率较低，大多数为正常或轻中度病变，需CAG的很少，滥用现象则凸显。
作者：盖兢泾；翟学；白启才；王志国；蒋博；汪奇；杨立；盖鲁粤 刊期： 2014年第01期
前列腺凋亡应答蛋白4（Par-4）作为促凋亡因子，先在雄性激素不依赖型前列腺癌细胞（AT-3）中发现。内源性Par-4使癌细胞对凋亡刺激更敏感化，但是外源性Par-4可选择性地直接导致癌细胞凋亡，并通过基因突变实验发现该活性依赖于它的核心结构域SAC。Par-4和SAC可特异性地导致癌细胞凋亡，因此是潜在的癌症靶点治疗药物。本文综述了Par-4的发现、结构、功能及其在细胞内信号通路，后讨论了Par-4和SAC在癌症临床治疗中的应用前景以及在基础研究和临床应用中存在的问题。
作者：吴增丁；王冠林；张宽仁 刊期： 2014年第01期
目的：建立以pBAD33质粒为载体的副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus, VP）基因回补实验平台。方法PCR扩增aphA和opaR的整个ORF区序列，并将其直接克隆入pBAD33质粒中，构建重组质粒。分别将重组质粒转入到ΔopaR和ΔaphA中（分别代表opaR和aphA的突变株），以构建出相应的回补株C-ΔaphA和C-ΔopaR。分别在aphA和opaR基因内设计特异性引物，采用RT-PCR方法，验证在相应的回补突变株中aphA和opaR是否转录。利用引物延伸实验研究野生株（WT）、ΔopaR、ΔaphA、C-ΔaphA和C-ΔopaR中mfpA（aphA负调控，opaR正调控其表达）的相对RNA水平。结果 aphA和opaR在相应的回补株中发生转录；且mRNA水平与野生株一致。结论成功建立了以pBAD33质粒为载体的VP基因回补方法，并得到应用。
作者：陈振鸿；王丽；张义全；冯娇；杨瑞馥；常德；安莉；刘长庭；周冬生 刊期： 2014年第01期
目的：探讨温灸神阙穴对胃穿孔修补术后大鼠胃肠功能恢复的影响及其作用机制。方法30只雄性SD大鼠，以冰醋酸诱导制作胃穿孔模型，并行胃穿孔修补术，术后第8天，将大鼠随机分为模型组、多潘立酮组、温灸组3组，模型组术后予生理盐水灌胃，多潘立酮组以多潘立酮混悬液灌胃，温灸组除用生理盐水灌胃外，加以艾灸按摩器固定于神阙穴进行艾灸，干预10 d后观察和对比各组大鼠胃窦消化间期综合肌电活动，检测外周血TNF-α水平，IL-6水平及T淋巴细胞亚群的数量。结果温灸组的胃肠电活动较模型组活跃，差异具有统计学意义（P<0.05），但与多潘立酮组相比无明显差异（P>0.05）；温灸组的外周血TNF-α水平及IL-6水平较低，T淋巴细胞亚群的数量有改善，与模型组或多潘立酮组均有统计学差异（P<0.05）。结论温灸神阙穴可以促进胃穿孔修补术后大鼠胃肠功能恢复，其机制可能与增强胃肠电活动、抗炎和提高细胞免疫功能有关，是一种简单易行、效果确切的围手术期辅助疗法。
作者：郑权；李华英；文小敏；郑坤才 刊期： 2014年第01期
目的：评估流入反转恢复稳态自由进动（IFIR-FIEASTA）序列诊断老年患者肾动脉狭窄的效能。方法对27例老年患者进行三维对比增强磁共振血管成像（3D CE-MRA）和IFIR-FIEASTA扫描，比较两种检查方法的图像质量，采用Kappa分析检验IFIR-FIEASTA和CE-MRA诊断肾动脉狭窄的一致性。以CE-MRA为金标准，评估IFIR-FIEASTA诊断肾动脉狭窄的敏感度、特异度、准确率、阳性预测值和阴性预测值。结果两种检查方法的图像质量均100%达到诊断要求，但CE-MRA的图像质量显著优于IFIR-FIEASTA。CE-MRA和IFIR-FIEASTA诊断肾动脉狭窄的一致性好；IFIR-FIEASTA诊断肾动脉狭窄的敏感度、特异度、准确率、阳性预测值和阴性预测值分别为97.1%、100%、98.1%、100%和95%。结论IFIR-FIEASTA诊断老年患者肾动脉狭窄的可行性很高，临床实用性强。
作者：徐贤；安宁豫；陈穗惠；李雪；江波；韩邵君；刘新球 刊期： 2014年第01期
目的：探索miR-124a的靶基因iASPP对神经发育的影响。方法利用在线预测软件TargetScan对miR-124a的靶基因进行预测，结合文献资料提到的与神经早期发育有关的基因进行筛选，我们选择iASPP作为miR-124a的候选靶基因。通过荧光素酶报告基因实验对其进行验证，然后在M17细胞中转染miR-124a过表达质粒，用Western blotting实验检测iASPP蛋白表达水平的变化。利用视黄酸诱导M17细胞作为神经元分化模型，通过过表达或者基因干扰的方法，初步探讨iASPP基因对神经发育的影响。结果miR-124a促进神经突起发育，并且能够与iASPP基因的3'非翻译区（3'UTR）相互作用来抑制其蛋白质的表达；iASPP基因的过表达抑制神经突起的发育并且抑制miR-124a促进神经突起生长的作用。结论miR-124a能够通过抑制iASPP基因的表达来促进神经突起生长。
作者：林利芳；谷溪；刘书虎；王雪敏 刊期： 2014年第01期
目的：探讨3-溴丙酮酸（3-BP）增强肝癌细胞对顺铂敏感性的作用及其可能机制。方法MTT法检测3-BP、顺铂对HepG2、SMMC7721细胞的增殖抑制作用。选择低于半数抑制浓度（IC50）的100μmol/L的3-BP和8μmol/L的顺铂单独或联合处理细胞，PI单染流式细胞术检测细胞凋亡，caspase 3活性检测试剂盒测定caspase-3的活性变化，ATP检测试剂盒测定细胞内ATP水平，Western blot检测XIAP、PARP蛋白的表达。结果3-BP在50~400μmol/L浓度范围内对HepG2、SMMC7721细胞具有明显的增殖抑制作用（P<0.01），作用48 h的IC50分别为238.9±13.9μmol/L、278.7±11.7μmol/L；顺铂在2~32μmol/L浓度范围内对HepG2、SMMC7721细胞具有明显的增殖抑制作用（P<0.01），作用48 h的IC50分别为16.4±0.9μmol/L、20.9±1.8μmol/L。100μmol/L 3-BP与8μmol/L顺铂联合作用于HepG2、SMMC7721细胞48 h的增殖抑制率分别为（60.6±2.2）%、（56.8±2.3）%，明显高于对照组和单独用药组（P<0.01）。100μmol/L 3-BP与8μmol/L顺铂联合作用于HepG2、SMMC7721细胞48 h的凋亡率分别为（51.1±4.3）%、（46.5±3.9）%，较单用3-BP、顺铂的凋亡率明显提高（P<0.01）。结论3-BP能增强肝癌细胞HepG2、SMMC7721对顺铂诱导的凋亡的敏感性，其机制可能是通过引起细胞内ATP缺乏、下调XIAP蛋白的表达以及增加caspase-3的活性。
作者：赵素容；张媛媛；吴成柱；李红梅；蒋琛琛；蒋志文；刘浩 刊期： 2014年第01期
目的：比较和分析Child-Pugh评分、Clichy PI（克利希预后指数）、New Clichy PI（新克利希预后指数）、Rotterdam BCS index（鹿特丹BCS指数）及BCS-TIPS指数5种预后模型在中国布-加综合征（BCS）应用中的预测价值。方法回顾性分析我科收治的123例BCS患者的临床资料，其中生存组99例，死亡组24例，分别按相应模型公式计算5种预后模型的指数，应用F检验计算各预后指数在生死两组间的差异，应用受试者工作特征（ROC）曲线分别计算各模型曲线下面积（AUC）及各预后模型预测患者预后的灵敏度和特异度，进行分析。结果 Child-Pugh、Clichy、New Clichy和Rotterdam BCS模型的预后指数在死亡组中分别为8.792±2.0、5.924±0.783、5.695±1.81和0.615±1.133，均大于各模型在生存组中的相应指数（分别为7.141±1.443、5.221±0.834、3.981±1.033和-0.148±0.896），差异有统计学意义（均P<0.01），仅BCS-TIPS模型预后指数两组间差异无统计学意义（P>0.05）。5种预后指数的AUC依次为0.738，0.720，0.776，0.721和0.502，约登指数依次为0.370，0.410，0.439，0.473和0.051。结论Child-Pugh评分、Clichy PI、New Clichy PI和Rotterdam BCS index这4种模型能够区分我国BCS生死两种预后结果，其中又以New Clichy PI的预测价值高，较适用于中国BCS患者，值得推广，另3种模型的预测价值相对较低，而BCS-TIPS模型不宜应用。同时我们仍需致力于自己的BCS预后模型。
作者：张科；徐浩；祖茂衡；魏宁 刊期： 2014年第01期
目的：观察中脑导水管周围灰质腹外侧区（VL-PAG）内促代谢型谷氨酸受体亚型7（mGluR 7）和8（mGluR 8）对大鼠心脏-躯体运动反射（CMR）的调节作用。方法通过心包插管术制作CMR大鼠模型，在VL-PAG内分别注射mGluR 7和mGluR 8的激动剂AMN082和DCPG，观察其对大鼠CMR的调节作用；同时电损毁延髓头端腹内侧区（rostroventral medulla, RVM）亚核中的中缝大核或双侧网状巨细胞核，观察VL-PAG对大鼠CMR的下行调控作用。结果AMN082选择性激活VL-PAG内mGluR 7后，对辣椒素诱发的CMR具有明显的易化作用（P<0.05）；与之相反，DCPG激活VL-PAG内mGluR 8对CAP诱发的CMR具有明显的抑制作用（P<0.05）；这种易化或抑制效应均可被其拮抗剂MSOP完全拮抗；损毁大鼠VL-PAG的主要中继亚核中的中缝大核后，VL-PAG内AMN082微注射所产生的易化效应没有受到明显的影响（P>0.05），VL-PAG内DCPG微注射所产生的抑制效应被部分地减弱（P<0.05）；而双侧网状巨细胞核损毁后，AMN082微注射所产生的易化效应明显被减弱，同时DCPG所产生的抑制效应也有所减弱。结论VL-PAG内mGluR 7和mGluR 8对大鼠CMR具有易化和抑制双向调节效应，而这种双向调节效应很可能是通过RVM的不同亚核、不同神经元的激活而实现的。
作者：孙娜；孔令恒；牛利刚；朱娟霞；徐燕；杜剑青 刊期： 2014年第01期
目的：建立耳蜗基底膜的力学模型，验证基底膜特征频率和特征位置的关系。方法通过所建模型，采用宏观力学方法，简化模型细节，通过仿真工具对基底膜的振动和选频特性进行分析。结果耳蜗基底膜具有较明显的选频特性，即基底膜上离镫骨较近段对高频敏感，离镫骨较远段对低频敏感。结论仿真结果显示，基底膜的选频特性主要由基底膜的宽度等几何尺寸及其材料特性沿纵向变化来实现，与耳蜗内螺旋器上其他微小组织关系不大。
作者：缪吉昌；肖中举；周凌宏 刊期： 2014年第01期
目的：比较隧道式黏膜剥离术（ESTD）与常规黏膜剥离术（ESD）治疗食管大面积浅表性肿瘤手术效率和安全性。方法回顾性分析2010年10月~2013年6月于我院消化内镜中心行食管肿瘤内镜下切除治疗235例患者的临床资料。按照纳入和排除标准，筛选接受ESTD或ESD治疗的食管大面积浅表性肿瘤患者，分析其临床资料。结果共29例患者纳入研究，平均年龄62岁（49~78岁），男16例，女13例，手术平均时间81.3 min（34~239 min）。其中ESTD组11例，ESD组18例。两组比较，ESTD组剥离速度明显快于ESD组（22.4±5.2 mm2/min vs 12.2±4.0 mm2/min，P<0.05）。虽然两组整块切除率差异不明显[100%（11/11） vs 83.3%（15/18），P>0.05]，但在根治性切除率方面，ESTD明显高于ESD组[81.8%（9/11）vs 66.7%（12/18），P<0.05]。ESD组有1例出现术中出血，而ESTD组均无出血、穿孔及纵膈气肿发生。术后8例发生食管狭窄，其发生率同病变环周程度和长度有关（P<0.05）。结论ESTD不仅能安全有效地完成食管大面积的表浅性肿瘤的切除，而且同ESD相比，手术时间短，剥离速度快，肿瘤根治性切除率高。但是，对于食管环周超过3/4或长度超过50 mm的病变，应注意防治术后食管狭窄的发生。
作者：翟亚奇；令狐恩强；李惠凯；秦治初；冯秀雪；王向东；杜红；孟江云；王红斌；朱静 刊期： 2014年第01期
目的：探讨类风湿关节炎（RA）患者滑液（SF）自然杀伤（NK）细胞NK-22促成纤维样滑膜细胞（FLS）增殖作用及相关信号通路。方法采用流式细胞术分选6例RA患者SF中NK-22细胞（2×104），体外悬浮培养2周，佛波酯（20 ng/ml）和离子霉素（0.5μmol/L）刺激后ELISA检测NK-22细胞培养上清IL-22浓度。组织块培养法原代培养RAFLS，NK-22细胞培养上清分别作用于RAFLS24、48、72 h，MTT法检测FLS增殖；同时加入IL-22抗体检测FLS增殖情况。RT-PCR检测rhIL-22及AG490作用后RAFLS Stat3 mRNA的表达，Western blot检测RAFLS p-Stat3蛋白含量。结果①流式分选2×104 NK-22细胞，细胞纯度>90%；①PMA和ionomycin刺激后NK-22细胞培养上清中IL-22浓度为1273.42±254.48 pg/ml；①PMA和ionomycin刺激后NK-22细胞培养上清作用于RAFLS 24 h、48 h、72 h，可明显刺激RAFLS增殖（P<0.05）。IL-22抗体能明显抑制NKp44+NK细胞上清诱导的RA FLS增殖（P<0.01）；①rhIL-22（1 ng/ml）能诱导RAFLS p-Stat3表达（P<0.05）；①AG490能抑制rhIL-22诱导的RAFLS p-Stat3表达（P<0.05）。结论 RA患者SFNK-22细胞体外可分泌高浓度的IL-22，通过激活STAT3信号通路进而刺激RAFLS增殖。
作者：任洁；周毅；吴会霞；戴桃李；朱丽花 刊期： 2014年第01期
目的：观察低强度超声对早孕大鼠药物流产后子宫组织内皮素-1（ET-1）和一氧化氮（NO）的影响。方法雌性早孕大鼠30只，随机分成治疗组和对照组，采用米非司酮和米索前列醇造成流产模型，治疗组给予低强度超声治疗30 min/d，共5 d，对照组采用与治疗组相同的操作方法进行治疗，但仪器无功率输出。5d后取子宫组织制成匀浆，分别用酶联免疫法和化学测试法检测ET-1和NO的含量。结果治疗组子宫组织中ET-1含量明显高于对照组（P<0.05）；NO含量差异无显著性（P>0.05）。结论低强度超声可能通过增加子宫组织中内皮素-1含量，改变ET-1与NO的动态平衡，从而促进子宫平滑肌的收缩。
作者：张艳霞；郭菊芳；林川；陆露；李成志 刊期： 2014年第01期
目的：了解运动在儿童哮喘管理中的作用，探讨适合我国儿童哮喘管理的初步运动处方。方法112例7~14岁哮喘患儿随机分为运动组（56例）和对照组（56例），运动组在给予药物治疗同时给予运动处方，对照组仅给予药物治疗，试验持续4个月。在入组后每日记录哮喘日记卡内容：早晚呼吸峰流、日间和夜间症状评分、β2受体激动剂使用频率、运动情况及及其过程中出现哮喘相关症状情况。结果112例研究对象中，共107例完成试验。运动组日内PEF变异率自第13周开始持续低于对照组（P<0.05）；运动组日间症状评分、夜间症状评分及应急用药量均显著小于对照组（均P<0.05）；试验期间未发生严重不良事件。结论哮喘患儿进行4个月每周3 d，每次持续20 min以上的运动有益于其儿童哮喘控制，并且是安全的。
作者：程波利；黄英 刊期： 2014年第01期
目的：测定肝硬化者血清PG的水平，探讨肝硬化发生胃粘膜病变时胃粘膜的功能状态。方法胃镜观察已确诊的51例肝硬化患者胃粘膜病变，快速尿素酶实验或碳13呼气实验明确幽门螺杆菌感染情况，肝功能进行Child-Pugh分级，乳胶增强免疫比浊法检测血清PG（PGⅠ、PGⅡ）浓度，得出PGⅠ/PGⅡ值（PGR），数据进行统计学分析。结果血清PGⅠ水平比较，肝硬化PHG组明显低于无PHG组及对照组，差异有统计学意义，PGⅡ、PGR差异无统计学意义。肝硬化幽门螺杆菌感染与无幽门螺杆菌感染两组间比较PGⅡ、PGR比较有差异。肝硬化肝功能分级组间及酒精性肝硬化与乙肝肝硬化比较血清PG水平均无明显差异。结论肝硬化合并PHG时血清PGⅠ水平明显降低，胃粘膜损伤可达固有层，分泌功能降低；幽门螺杆菌可以影响PGⅡ水平；血清PG水平与肝功能无明显关系；血清PG水平尤其PGⅠ在一定程度上可以反映肝硬化胃粘膜功能状态。
作者：毛华；李瑞 刊期： 2014年第01期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
