邓祯祥；王文辉；李金明
目的：探讨鬼臼毒素纳米脂质载体（POD-NLC）通过内质网应激途径诱导体外永生化人阴道上皮细胞（VK2/E6E7细胞）凋亡的机制。方法自制0.5%POD-NLC和单纯-NLC，实验分为单纯-NLC、0.125μg/mlPOD-NLC、0.25μg/ml POD-NLC、0.5μg/ml POD-NLC和空白对照组，分别作用VK2/E6E7细胞24 h。采用激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）检测各组细胞内Ca2+浓度的变化；RT-PCR和Western blot法检测各组GRP78、GRP94和calpain2基因mRNA和蛋白表达。结果与空白对照组相比，不同浓度POD-NLC可呈浓度依赖性的增加细胞内Ca2+浓度（P<0.01），各药物处理组之间比较有统计学差异（P<0.05）。POD-NLC可上调GRP78、GRP94、calpain2基因mRNA和蛋白表达。单纯-NLC和空白对照组之间差异无统计学意义（P>0.05）。结论POD-NLC诱导VK2/E6E7细胞凋亡的分子机制可能与内质网应激反应性凋亡途径的启动有关。
作者：王琦；韩凯；李雪芽；肖艳；曾抗 刊期： 2014年第06期
目的：探讨胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）对正常人支气管上皮细胞（16HBE）通透性的影响。方法体外培养16HBE，待细胞状态稳定后，用四唑盐（MTT）比色法检测TSLP（0.1、1、10、100 ng/ml）对16HBE细胞活力的影响。使用无血清1640培养基同步化12 h后，分别加入TSLP刺激液0.1 ng/ml和1ng/ml，分别刺激0、0.5、6、12、24 h，使用跨细胞电阻(TER)及异硫氰酸萤光素-右旋糖酐（FITC-DX）透过率检测不同时间及浓度下的TSLP刺激对16HBE单层细胞通透性的影响。Western blotting法检测TSLP对16HBE粘附连接蛋白E钙粘蛋白（E-cadherin）表达的影响。结果<1 ng/ml TSLP刺激对16HBE细胞活力无影响，10 ng/ml TSLP可显著促进细胞增殖（P<0.05）；浓度为0.1 ng/ml及1 ng/ml的两个TSLP处理组与对照组相比，TER值均显著升高（P<0.001），FITC-DX透过率均明显下降（P<0.05），本效应无明显浓度依赖；E-cadherin表达在0.1 ng/mlTSLP处理组较其余两组明显升高；TSLP处理不同时间后，处理24 h组的TER值及E-cadherin表达量较其余组显著升高（P<0.05），FITC-DX透过率在处理12 h组及24 h组均明显下降（P<0.05），其处理12 h组效果更明显。结论 TSLP可明显改善正常支气管上皮屏障功能。
作者：李文嘉；赵海金；董航明；邹飞；蔡绍曦 刊期： 2014年第06期
Wnt/β-catenin信号通路与肿瘤有着密切的关系，此通路的异常活化参与人类多种癌症的发病过程。肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）在全球肿瘤中死亡率位居第3，但其发生发展的分子机制仍不清楚。目前，研究表明Wnt/β-catenin信号通路及其他相互作用信号通路，以及乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒相互作用蛋白等共同在HCC的发生发展过程中起着关键作用，因而，揭示该信号通路在HCC中的作用可为其早期诊断、治疗以及预后提供理论基础。现对Wnt/β-catenin信号通路在HCC中的作用及目前研究状况作一简要综述。
作者：谢亮海；蒋晗；吴福生 刊期： 2014年第06期
目的：探讨塞来昔布（celecoxib）在人食管癌细胞是否影响卡铂介导的细胞毒作用。方法 MTT法检测卡铂单独及联合celecoxib后对食管癌亲代细胞EC109及耐药细胞EC109/CDDP的细胞毒作用。Western blot方法检测卡铂单独及联合celecoxib后caspase-3的活化、PARP蛋白的剪切，以及CTR1蛋白的表达。Caspase-3/7 Assay试剂盒检测细胞caspase-3酶活性。流式细胞仪检测卡铂单独及联合celecoxib作用下细胞凋亡比率。ICP-MS检测卡铂单独及联合celecoxib作用下细胞内卡铂蓄积量。结果卡铂在EC109及EC109/CDDP细胞的IC50在联合应用celecoxib后显著增加，说明celecoxib拮抗了卡铂介导的细胞毒作用。在联合应用celecoxib后caspase-3及PARP蛋白的剪切较单独应用卡铂时明显减少，且caspase-3酶活性较单独应用卡铂时显著降低。此外，联合应用celecoxib后，EC109和EC109/CDDP细胞凋亡率比单独应用卡铂时明显降低，而细胞存活率明显增加。联合应用celecoxib后，EC109和EC109/CDDP细胞内卡铂蓄积量比单独应用卡铂时显著降低，而CTR1蛋白的表达无明显改变。结论 Celecoxib拮抗卡铂在食管癌细胞介导的细胞毒作用，通过降低细胞内卡铂蓄积量抑制卡铂介导的食管癌细胞凋亡。
作者：时粒笠；钟德胜；古春萍；余乐 刊期： 2014年第06期
目的：探讨利用二乙基亚硝胺（DEN）致中毒性肝损伤的方法构建斑马鱼肝纤维化模型的可行性。方法3月龄野生型斑马鱼120条，随机等分为对照组和DEN处理组，分别观察两组斑马鱼生存率及行为学改变，在DEN处理2周、4周和6周末，分别从两组中随机抽取等量样本测量肝指数，并制作石蜡切片，采用HE染色、Gomori氏网状纤维染色及天狼星红苦味酸染色方法观察肝纤维化病变。结果 DEN处理组斑马鱼在造模期间未见明显行为学改变，与对照组斑马鱼相比，DEN处理组斑马鱼肝指数在2周、4周和6周末均无统计学差异。病理染色结果显示造模4周末，DEN处理组斑马鱼肝细胞变性坏死，30%斑马鱼肝脏网状纤维合成分泌增多；6周末，DEN处理组斑马鱼结构紊乱，80%斑马鱼肝脏纤维过度沉积，网状纤维和胶原纤维合成分泌异常增多，可见纤维结节形成。结论采用DEN诱导中毒性肝损伤方法能够成功地构建稳定的斑马鱼肝纤维模型，为进一步探讨肝纤维化的发病机制以及药物筛选奠定了实验基础。
作者：王坤元；刘莉；戴文聪；陈小辉；郑新春；侯金林 刊期： 2014年第06期
目的：以京尼平交联制备丝素蛋白-壳聚糖微球，以牛血清白蛋白（BSA）作为模型蛋白，评价丝素蛋白-壳聚糖微球的缓释能力。方法以无机乳化交联法，京尼平为交联剂，制备缓释BSA的丝素蛋白-壳聚糖微球，通过扫描电镜观察微球表面形态并测量微球的粒径，X-射线衍射及傅里叶红外光谱对微球表征分析，以BCA法测定微球的包封率，载药率和21 d的累积缓释率。结果以京尼平交联制备的丝素蛋白-壳聚糖微球，微球形态较为规则，表面较光滑，粒径分别为7.84±0.97μm，包封率为50.16%±4.32%，载药率为1.25%±0.11%，21 d的累积释放率为75.2%±2.53%。结论以京尼平交联制备的丝素蛋白-壳聚糖微球载药率高，缓释能力显著。
作者：叶漫文；曾曙光；高文峰；容明灯；郭泽鸿；石勇；干辉勇 刊期： 2014年第06期
《南方医科大学学报》（原第一军医大学学报）(ISSN 1673-4254，CN44-1627/R)创刊于1981年，月刊，为国内外发行的高级综合性医药卫生期刊。本刊已被美国Medline/PubMed、美国《化学文摘》(CA)、荷兰《医学文摘》（EMBASE）、中国科学引文数据库（CSCD）、中国科技论文统计源数据库、《中文核心期刊要目总览》（2011年版，北京大学图书馆）等国内外重要数据库收录。
作者： 刊期： 2014年第06期
基于三维Hessian矩阵的肺结节检测方法具有很高的敏感性，却很难避免血管交叉区域产生假阳性。本文提出了一种基于自适应体窗结构分析的方法，首先利用体素的Hessian矩阵特征值设计结构系数分析其灰度分布特征；然后根据结构系数构建三维自适应体窗分析组织的局部结构特征；后使用判别函数检测出结节。通过对17套真实肺部CT图像序列进行实验，结果表明本方法可以检测出不同大小和类型的30个结节，并有效减少了血管交叉区域产生的假阳性。结合自适应体窗的Hessian矩阵检测方法可以提高检测效率，减轻医生工作量，为肺结节后续的分割和治疗提供有力的支持。
作者：王凯；张煜；刘哲星；林炳权；吴志强；曹蕾 刊期： 2014年第06期
目的：探讨阿托伐他汀钙是否通过调节PPARγ和NF-κB活性来抑制Ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞泡沫化形成。方法THP-1巨噬细胞与10、20、40μmol/L阿托伐他汀钙分别预孵育2 h，PBS洗2次，然后与60μg/ml ox-LDL共孵育48 h后，通过酶荧光法检测细胞胆固醇酯与总胆固醇比值，油红O染色观察细胞胞浆内脂质蓄积情况，Western blot分析清道夫受体CD36、SRA的表达，p-iκB和PPARγ的表达，以及ATP结合盒转运蛋白A1（ABCA1）的表达变化。用荧光探针DIL标记ox-LDL的方法，观察阿托伐他汀钙对THP-1巨噬细胞结合ox-LDL能力的影响。结果阿托伐他汀钙浓度依赖性降低THP-1巨噬细胞脂质蓄积和抑制清道夫受体CD36和SRA的表达，同时上调ABCA1表达，并减弱PPARγ和p-iκB活性（P<0.05）。荧光探针DIL标记ox-LDL的方法显示阿托伐他汀钙浓度依赖性降低THP-1巨噬细胞结合ox-LDL能力（P<0.05）。结论阿托伐他汀钙抗动脉硬化作用可能部分通过降低PPARγ和p-iκB活性来抑制脂质蓄积。
作者：成小凤；刘小燕；宋凌鲲；何云；李小庆；张浩 刊期： 2014年第06期
目的：研究唾液与血浆微小RNA（miR）-21对早期食管癌的诊断价值并作对比。方法收集50例Ⅰ期和50例Ⅱ期食管癌患者和50例正常对照组的唾液、血浆标本并进行总RNA抽提行qPCR定量检测miR-21，计算miR-21在唾液与血浆的相对表达量，并分析两者对Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅰ期+Ⅱ期食管癌的诊断价值。结果唾液和血浆miR-21表达水平在Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅰ期+Ⅱ期食管癌患者中显著高于正常对照组，血浆miR-21诊断Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅰ期+Ⅱ期食管癌的敏感性分别为96%、64%和97%，特异性分别为44%、84%和56%；唾液miR-21诊断敏感性分别为90%、88%和89%，特异性均为64%。不论分期如何，两者表达水平显著正相关，诊断价值的差异性没有统计学意义。结论唾液、血浆miR-21均是食管癌诊断的敏感性标志物；检测miR-21在唾液中的表达以诊断食管癌有望代替血浆检测。
作者：叶敏华；叶鹏辉；张伟珠；饶珈琦；谢子钧 刊期： 2014年第06期
目的：构建SDF-1/54R的原核可溶表达载体，并考查其对CXCR7的抑制作用。方法将PCR扩增的SDF-1/54r基因插入带有GST标签的可溶表达载体pET-41a+，并转化BL21（DE3）菌株，IPTG诱导表达的融合蛋白GST-SDF-1/54R通过SDS-PAGE和Western blotting进行检测，并利用GST亲和层析纯化。纯化产物经肠激酶酶切和纯化后得到目的蛋白SDF-1/54R。用SDF-1/54R处理CXCR7高表达的MCF-7细胞，利用MTT和趋化实验评价其对乳腺癌细胞增殖和转移的影响。结果利用新构建的可溶表达系统成功得到了目的蛋白SDF-1/54R，MTT和趋化实验证实SDF-1/54R对乳腺癌细胞MCF-7的增殖和转移具有明显的抑制作用。结论重组载体表达的可溶蛋白SDF-1/54R是一种良好的CXCR7特异性拮抗剂，具有开发成抗肿瘤药物的潜在应用价值。
作者：曹园芝；杨飞华；马伟峰 刊期： 2014年第06期
目的：研究卵胞浆内单精子注射技术（ICSI）中不同来源精子对卵母细胞受精、胚胎质量及发育潜能的影响。方法回顾性分析我中心因单纯男性因素行ICSI助孕治疗的197例患者的临床资料，按不同精子来源分为射精组（n=102）、PESA组（n=68）、TESA组（n=27）3组，其中将射精组又分为严重少弱畸精子症组（n=67）和隐匿精子症组（n=35）。比较4组间受精率、优质胚胎率、新鲜胚胎移植周期的着床率及妊娠率，以及低质胚胎继续培养的优质囊胚形成率。结果少弱畸精子射精组、隐匿精子射精组、PESA组、TESA组的正常受精率分别为64.8%、62.1%、75.6%、61.6%，其中PESA组明显高于其它3组（P<0.05），4组的优质胚胎率、新鲜胚胎移植周期的着床率及妊娠率无明显差异（P>0.05）。4组间低质胚胎继续培养的优质囊胚形成率也无显著差异（P>0.05）。结论PESA来源的精子ICSI中正常受精率较高，但在ICSI中不同来源精子对胚胎质量及发育潜能无显著影响。
作者：谢多；邱卓琳；罗琛；褚庆军；全松 刊期： 2014年第06期
目的：探讨Toll样受体4（TLR4）信号通路在脂肪细胞肾素-血管紧张素系统(RAS)激活的参与机制。方法诱导3T3-L1细胞分化为脂肪细胞，予TLR4特异性激动剂LPS干预，分为对照组、10、100、1000 ng/ml LPS组，应用RT-PCR法、Western-blot法测定TLR4、AGT、ATlR mRNA及蛋白表达并使用免疫荧光双染色法观察NF-κB p65亚基核转位变化；另设10μmol/L厄贝沙坦（AT1R阻滞剂）预处理+100 ng/ml LPS组，观察NF-κB p65亚基核转位情况。结果 LPS干预呈时间依赖性及浓度依赖性升高3T3-L1脂肪细胞TLR4、AGT和AT1R的mRNA表达水平；LPS干预12 h后，TLR4、AGT、AT1R蛋白表达亦呈浓度依赖性升高；各浓度LPS处理组NF-κB p65亚基核转位较对照组明显增强，而10μmol/L厄贝沙坦预处理减弱该效应。结论 TLR4信号通路激活后，上调AGT与AT1R的mRNA及蛋白表达，并激活NF-κB；预先阻断RAS减弱NF-κB的激活。提示TLR4信号激动可激活脂肪细胞局部RAS。
作者：罗金花；孙嘉；蔡德鸿 刊期： 2014年第06期
目的：了解刺激声强度差异对正常人气导短纯音诱发的眼肌前庭诱发肌源性电位（ocular vestibular-evoked myogenic potential, oVEMP）和颈肌前庭肌源性诱发电位（cervical vestibular-evoked myogenic potential, cVEMP）的影响。方法选择国人正常人35例作为研究对象，男16例，女19例，年龄4~40岁（20.80±8.89），以500Hz tone brust为刺激音，按照100、95、90、85、80、75 dB nHL依次进行气导oVEMP和cVEMP检测，计算VEMP在不同刺激声强度的引出率、nI潜伏期、pI潜伏期、nI-pI波间期、振幅值和AR值，进行波形参数计算和声强度组间对比。结果全组正常人oVEMP和cVEMP的阈值分别为86.5±4.37 dB nHL、83.57±4.52 dB nHL。随着刺激声强度的减弱，无论oVEMP还是cVEMP，均表现出引出率下降、振幅减低等特点。在刺激声强度为100 dB nHL和95 dB nHL时，oVEMP和cVEMP的引出率均为100%，两者之间图形参数差异并不显著。结论随着刺激声强度的减弱，oVEMP和cVEMP出现引出率下降、振幅减低的趋势。对于40岁以下的国人人群，建议采用95 dB nHL作为VEMPs测试的大起始刺激强度。
作者：张睿；许珉；张青；杨引通；陈彦飞 刊期： 2014年第06期
目的：研究HBV复制和不同基因表达是否会影响肝细胞内CDC37的表达水平。方法首先扩增HBV 6种基因P、preS1、preS2、S、C和X，并构建至pCMV表达载体，分别转染Huh7和HepG2细胞系，Western blot检测CDC37表达水平；另外将含CDC37基因启动子序列的荧光素酶报告质粒pGL3与HBV的6种基因表达质粒分别共转染Huh7和HepG2细胞系，检测荧光素酶信号。其次分别构建B、C、D和CD重组体4种HBV基因型毒株的1.28拷贝全基因质粒，运用AdEasy腺病毒系统进行重组和包装后分别感染Huh7和HepG2细胞系，并检测CDC37表达水平。结果基因表达结果显示，HBV 6种基因的表达对肝癌细胞系内CDC37的表达水平无明显影响，而且HBV 6种不同蛋白的表达对CDC37启动子的活性无明显影响。1.28拷贝HBV全基因质粒的感染结果显示，HBV不同基因型毒株的复制对CDC37基因的表达水平亦无明显影响。结论 HBV的复制和不同基因的表达不会明显影响CDC37的表达水平。
作者：陈朝武；周彬；徐莹；杨贵奉；王战会 刊期： 2014年第06期
目的：研究在缺氧环境下，两性霉素B（AmB）对食管癌Eca109细胞侵袭迁移能力的影响及其可能的机制。方法取常规培养（37℃，5%CO2，95%空气）对数生长期Eca109细胞，分别加入0、1.25、2.5、5μg/ml的AmB，放入三气培养箱（37℃，3%O2，5%CO2，92%N2）中缺氧培养24 h；采用细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测各组细胞迁移及侵袭能力；采用Real-time PCR和Western Blot检测各组细胞HIF-1α、MMP-2和E-cadherin mRNA及蛋白水平的表达。结果与对照组（0μg/ml）比较，各AmB处理组Eca109细胞体外迁移能力均显著降低（P<0.05），Eca109细胞体外穿过Matrigel胶的细胞数量均显著减少（P<0.05）；与对照组（0μg/ml）比较，各AmB处理组Eca109细胞MMP-2 mRNA及蛋白表达水平均显著下调（P<0.05），E-cadherin mRNA及蛋白表达水平均上调（P<0.05），HIF-1α蛋白水平均下调（P<0.05），HIF-1αmRNA水平无明显变化（P>0.05）。结论 AmB能抑制缺氧条件下食管癌细胞Eca-109细胞的侵袭迁移能力，其机制可能为通过调控HIF-1α及其下游MMP-2、E-cadherin的表达。
作者：康强强；唐敏；侯妍利；段丽群；陈兴月；舒锦；吴府容；王颖；李少林 刊期： 2014年第06期
目的：从分子的遗传变异和表达水平综合探讨卵巢癌的发病机制，为临床诊疗提供新思路。方法从TCGA数据门户上下载大样本的高浆液性卵巢癌DNA拷贝数数据和mRNA表达数据，使用GISTIC对拷贝数变异进行分析，利用SAM软件包samr筛选差异表达基因；并利用GSEA等工具进行生物信息学分析。结果 GISTIC发现45个拷贝数扩增区域；SAM和Fisher's exact test发现拷贝数扩增区域中有40个拷贝数变异的基因能引起表达差异；GSEA富集分析发现这些拷贝数变异基因主要富集在多个有关癌症基因集的研究报告中。结论利用生物信息学方法综合分析拷贝数变异数据和基因表达数据，能充分有效地获取信息，为确定卵巢癌的早期诊断和治疗靶点提供新的思路。
作者：邓祯祥；王文辉；李金明 刊期： 2014年第06期
目的：建立兔烫伤合并海水浸泡的实验模型，探讨烫伤合并海水浸泡复合损伤对肠道损害的影响。方法新西兰兔63只，制作20%TBSA动物烫伤模型后，随机分为单纯烫伤对照组（A组）（n=21）、烫伤后浸泡淡水组（B组）（n=21）和烫伤后浸泡海水组（C组）（n=21），每小组分别在伤后2、4和8 h处死7只动物，抽取心室血及取标本。检测血浆中超氧化物歧化酶（SOD）和脂质过氧化物（LPO）水平，检测肠道组织中PGs含量，形态学观察小肠的炎症反应情况及结构损伤状况，采用SP法检测小肠粘膜细胞中Bax和Bcl-2蛋白的表达情况。结果小肠形态学观察，总体上C组小肠组织炎症反应情况、结构损伤状况较A组和B组严重；C组兔小肠组织中PGs含量、血浆中SOD活力在海水浸泡2、4、8 h后较同期A组和B组明显减少，组间差异有显著性（P<0.01），各时相点间差异有显著性（P<0.01），随着浸泡（或致伤）时间延长含量或活力逐渐减少；C组兔血浆中LPO含量在海水浸泡2、4、8 h后较同期A组和B组明显增加，组间差异有显著性（P<0.01），不同时相点间差异有显著性（P<0.01），随着浸泡（或致伤）时间延长含量逐渐升高；C组兔小肠粘膜组织中凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达在海水浸泡4、8 h后较同期A组和B组明显增强，组间差异有显著性（P<0.01），不同时相点间差异有显著性（P<0.01），随着浸泡（或致伤）时间延长Bax和Bcl-2表达逐渐增强。结论烧伤合并海水浸泡会加重肠粘膜结构破坏和屏障功能损伤，表现在小肠炎症反应和结构损伤状况的加重，小肠组织中PGs含量和血浆中SOD活力降低，血浆中LPO含量升高，小肠粘膜上皮细胞中凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达增强。
作者：徐沛；王甲汉；史鹏伟；马军 刊期： 2014年第06期
目的：构建TM4SF1的真核表达载体并研究其对结直肠癌细胞株HCT116、DLD1迁移及侵袭功能的生物学特性影响。方法根据GenBank：BC034145.1中的TM4SF1的序列设计两条引物，用逆转录的方法获得开放阅读框（ORF区），并将其连接到质粒上，经鉴定后瞬时转染结直肠癌细胞株HCT116及DLD1，应用Western blot及细胞免疫化学方法检测其转染效果及表达情况，采用划痕及transwell实验观察其对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果成功构建PEZ-M29/TM4SF1真核表达载体， Western blot及细胞免疫化学实验结果显示TM4SF1表达上调可以促进结直肠癌细胞株的迁移及侵袭能力。结论成功构建TM4SF1真核表达载体，TM4SF1的上调表达可提高结直肠癌细胞株HCT116、DLD1的迁移及侵袭能力，提示TM4SF1与结直肠癌侵袭转移密切相关，为进一步阐明TM4SF1在结直肠癌转移中的作用及相关机制奠定基础。
作者：王丹；陈娜；彭曼；徐琼；周军 刊期： 2014年第06期
目的：运用激光熔覆技术制备新型纳米钽-钛合金棒并研究其结构特征及生物相容性，为临床选用内固定提供依据。方法以纳米级钽粉（Ta，Tantalum）为原料，利用激光熔覆技术制备两侧具有对称纳米钽涂层的新型钛合金棒。SEM观察微观界面结构、测量孔隙直径并分析金相成分。采用MTT细胞毒性试验和ALP活性检测评价新型纳米钽-钛合金对MC3T3-E1细胞增殖和分化性能的影响。结果扫描电镜下观察到试样的Ta涂层表面呈粗糙多孔结构，钽粉颗粒间致密熔融，孔隙直径平均在200~300μm之间，加工过程前后成分一致；成分分析结果显示熔覆过程并未产生新的元素。两组材料皆可明显促进MC3T3-E1细胞增值，但新型纳米钽-钛合金性能更为优异，同时能够促进成骨细胞的骨化，差异具有统计学意义。结论激光熔覆技术可成功实现钽与医用钛合金的冶金结合，并使其拥有良好的表面结构和生物相容性。
作者：邹琳；江建明；杨勇；陈长军；瞿东滨 刊期： 2014年第06期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
