邹琳；江建明；杨勇；陈长军；瞿东滨
目的：研究唾液与血浆微小RNA（miR）-21对早期食管癌的诊断价值并作对比。方法收集50例Ⅰ期和50例Ⅱ期食管癌患者和50例正常对照组的唾液、血浆标本并进行总RNA抽提行qPCR定量检测miR-21，计算miR-21在唾液与血浆的相对表达量，并分析两者对Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅰ期+Ⅱ期食管癌的诊断价值。结果唾液和血浆miR-21表达水平在Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅰ期+Ⅱ期食管癌患者中显著高于正常对照组，血浆miR-21诊断Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅰ期+Ⅱ期食管癌的敏感性分别为96%、64%和97%，特异性分别为44%、84%和56%；唾液miR-21诊断敏感性分别为90%、88%和89%，特异性均为64%。不论分期如何，两者表达水平显著正相关，诊断价值的差异性没有统计学意义。结论唾液、血浆miR-21均是食管癌诊断的敏感性标志物；检测miR-21在唾液中的表达以诊断食管癌有望代替血浆检测。
作者：叶敏华；叶鹏辉；张伟珠；饶珈琦；谢子钧 刊期： 2014年第06期
目的：以京尼平交联制备丝素蛋白-壳聚糖微球，以牛血清白蛋白（BSA）作为模型蛋白，评价丝素蛋白-壳聚糖微球的缓释能力。方法以无机乳化交联法，京尼平为交联剂，制备缓释BSA的丝素蛋白-壳聚糖微球，通过扫描电镜观察微球表面形态并测量微球的粒径，X-射线衍射及傅里叶红外光谱对微球表征分析，以BCA法测定微球的包封率，载药率和21 d的累积缓释率。结果以京尼平交联制备的丝素蛋白-壳聚糖微球，微球形态较为规则，表面较光滑，粒径分别为7.84±0.97μm，包封率为50.16%±4.32%，载药率为1.25%±0.11%，21 d的累积释放率为75.2%±2.53%。结论以京尼平交联制备的丝素蛋白-壳聚糖微球载药率高，缓释能力显著。
作者：叶漫文；曾曙光；高文峰；容明灯；郭泽鸿；石勇；干辉勇 刊期： 2014年第06期
Wnt/β-catenin信号通路与肿瘤有着密切的关系，此通路的异常活化参与人类多种癌症的发病过程。肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）在全球肿瘤中死亡率位居第3，但其发生发展的分子机制仍不清楚。目前，研究表明Wnt/β-catenin信号通路及其他相互作用信号通路，以及乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒相互作用蛋白等共同在HCC的发生发展过程中起着关键作用，因而，揭示该信号通路在HCC中的作用可为其早期诊断、治疗以及预后提供理论基础。现对Wnt/β-catenin信号通路在HCC中的作用及目前研究状况作一简要综述。
作者：谢亮海；蒋晗；吴福生 刊期： 2014年第06期
目的：初步分析亚洲人乳腺癌差异表达基因及可能涉及的信号通路。方法从GEO数据库下载5套亚洲人乳腺癌基因芯片数据集（GSE6367、GSE9309、GSE15852、GSE33447和GSE45255），共获得318例乳腺癌和60例正常乳腺组织的基因表达谱数据，进行基因差异表达谱和信号通路分析，并用荧光定量PCR法检测32对乳腺癌患者癌和癌旁标本，验证其中部分基因的差异表达。结果大样本芯片数据分析显示，436个基因在乳腺癌组织出现差异表达，其中上调的有259个，下调的有177个。Pathway分析发现代谢相关的信号通路可能参与了亚洲人乳腺癌发生发展过程。经荧光定量PCR验证，KRT19、ADIPOQ、CFD、RBP4、LPL、ABCA8、CD36基因表达情况与芯片数据分析结果一致。结论本研究比较完整地揭示了亚洲人乳腺癌基因差异表达谱特征和所涉及的重要信号通路，其中CD36基因可能与亚洲人乳腺癌发病密切相关，ABCA8基因可能是亚洲人乳腺癌新的致病基因。
作者：陈路嘉；叶长生；黄仲曦；李欣；姚广裕；刘民锋；胡晓磊；董建宇；郭昭泽 刊期： 2014年第06期
目的：研究在缺氧环境下，两性霉素B（AmB）对食管癌Eca109细胞侵袭迁移能力的影响及其可能的机制。方法取常规培养（37℃，5%CO2，95%空气）对数生长期Eca109细胞，分别加入0、1.25、2.5、5μg/ml的AmB，放入三气培养箱（37℃，3%O2，5%CO2，92%N2）中缺氧培养24 h；采用细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测各组细胞迁移及侵袭能力；采用Real-time PCR和Western Blot检测各组细胞HIF-1α、MMP-2和E-cadherin mRNA及蛋白水平的表达。结果与对照组（0μg/ml）比较，各AmB处理组Eca109细胞体外迁移能力均显著降低（P<0.05），Eca109细胞体外穿过Matrigel胶的细胞数量均显著减少（P<0.05）；与对照组（0μg/ml）比较，各AmB处理组Eca109细胞MMP-2 mRNA及蛋白表达水平均显著下调（P<0.05），E-cadherin mRNA及蛋白表达水平均上调（P<0.05），HIF-1α蛋白水平均下调（P<0.05），HIF-1αmRNA水平无明显变化（P>0.05）。结论 AmB能抑制缺氧条件下食管癌细胞Eca-109细胞的侵袭迁移能力，其机制可能为通过调控HIF-1α及其下游MMP-2、E-cadherin的表达。
作者：康强强；唐敏；侯妍利；段丽群；陈兴月；舒锦；吴府容；王颖；李少林 刊期： 2014年第06期
结合文献总结我院收治的1例多发性内分泌腺瘤病（MEN）2A型的诊治经验，探讨MEN 2A型的临床特点及治疗方法。MEN 2A型的诊断主要依赖相应的超声、CT及实验室检查，早期诊断、早期治疗是提高疗效的关键，RET基因检测是早期诊断MEN 2A及MEN 2B的“金标准”；手术是目前主要的治疗手段。
作者：于若飞；吴自勍；李爱民；金国萍；罗荣城 刊期： 2014年第06期
目的：探讨鬼臼毒素纳米脂质载体（POD-NLC）通过内质网应激途径诱导体外永生化人阴道上皮细胞（VK2/E6E7细胞）凋亡的机制。方法自制0.5%POD-NLC和单纯-NLC，实验分为单纯-NLC、0.125μg/mlPOD-NLC、0.25μg/ml POD-NLC、0.5μg/ml POD-NLC和空白对照组，分别作用VK2/E6E7细胞24 h。采用激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）检测各组细胞内Ca2+浓度的变化；RT-PCR和Western blot法检测各组GRP78、GRP94和calpain2基因mRNA和蛋白表达。结果与空白对照组相比，不同浓度POD-NLC可呈浓度依赖性的增加细胞内Ca2+浓度（P<0.01），各药物处理组之间比较有统计学差异（P<0.05）。POD-NLC可上调GRP78、GRP94、calpain2基因mRNA和蛋白表达。单纯-NLC和空白对照组之间差异无统计学意义（P>0.05）。结论POD-NLC诱导VK2/E6E7细胞凋亡的分子机制可能与内质网应激反应性凋亡途径的启动有关。
作者：王琦；韩凯；李雪芽；肖艳；曾抗 刊期： 2014年第06期
目的：探讨阿托伐他汀钙是否通过调节PPARγ和NF-κB活性来抑制Ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞泡沫化形成。方法THP-1巨噬细胞与10、20、40μmol/L阿托伐他汀钙分别预孵育2 h，PBS洗2次，然后与60μg/ml ox-LDL共孵育48 h后，通过酶荧光法检测细胞胆固醇酯与总胆固醇比值，油红O染色观察细胞胞浆内脂质蓄积情况，Western blot分析清道夫受体CD36、SRA的表达，p-iκB和PPARγ的表达，以及ATP结合盒转运蛋白A1（ABCA1）的表达变化。用荧光探针DIL标记ox-LDL的方法，观察阿托伐他汀钙对THP-1巨噬细胞结合ox-LDL能力的影响。结果阿托伐他汀钙浓度依赖性降低THP-1巨噬细胞脂质蓄积和抑制清道夫受体CD36和SRA的表达，同时上调ABCA1表达，并减弱PPARγ和p-iκB活性（P<0.05）。荧光探针DIL标记ox-LDL的方法显示阿托伐他汀钙浓度依赖性降低THP-1巨噬细胞结合ox-LDL能力（P<0.05）。结论阿托伐他汀钙抗动脉硬化作用可能部分通过降低PPARγ和p-iκB活性来抑制脂质蓄积。
作者：成小凤；刘小燕；宋凌鲲；何云；李小庆；张浩 刊期： 2014年第06期
目的：探讨利用二乙基亚硝胺（DEN）致中毒性肝损伤的方法构建斑马鱼肝纤维化模型的可行性。方法3月龄野生型斑马鱼120条，随机等分为对照组和DEN处理组，分别观察两组斑马鱼生存率及行为学改变，在DEN处理2周、4周和6周末，分别从两组中随机抽取等量样本测量肝指数，并制作石蜡切片，采用HE染色、Gomori氏网状纤维染色及天狼星红苦味酸染色方法观察肝纤维化病变。结果 DEN处理组斑马鱼在造模期间未见明显行为学改变，与对照组斑马鱼相比，DEN处理组斑马鱼肝指数在2周、4周和6周末均无统计学差异。病理染色结果显示造模4周末，DEN处理组斑马鱼肝细胞变性坏死，30%斑马鱼肝脏网状纤维合成分泌增多；6周末，DEN处理组斑马鱼结构紊乱，80%斑马鱼肝脏纤维过度沉积，网状纤维和胶原纤维合成分泌异常增多，可见纤维结节形成。结论采用DEN诱导中毒性肝损伤方法能够成功地构建稳定的斑马鱼肝纤维模型，为进一步探讨肝纤维化的发病机制以及药物筛选奠定了实验基础。
作者：王坤元；刘莉；戴文聪；陈小辉；郑新春；侯金林 刊期： 2014年第06期
《南方医科大学学报》（原第一军医大学学报）(ISSN 1673-4254，CN44-1627/R)创刊于1981年，月刊，为国内外发行的高级综合性医药卫生期刊。本刊已被美国Medline/PubMed、美国《化学文摘》(CA)、荷兰《医学文摘》（EMBASE）、中国科学引文数据库（CSCD）、中国科技论文统计源数据库、《中文核心期刊要目总览》（2011年版，北京大学图书馆）等国内外重要数据库收录。
作者： 刊期： 2014年第06期
目的：探讨一种新的第一骶椎（S1）骶髂螺钉定位方式，为导向器引导经皮骶髂螺钉固定的可行性提供应用解剖学基础。方法纳入100例正常成人骨盆CT原始数据，重建骨盆三维模型。利用Mimics软件中的相关功能寻找到以体表骨性标志定位的S1骶髂螺钉理想操作平面，继而逐步测量该平面上的置钉参数，包括进针点、进针角度γ及安全范围，后利用数字模型检验新的置钉参数的准确性。结果（1）髂前后上棘骨性突出点（分别为A、B）与S1椎体棘突中点构成的平面可作为操作平面；（2） AB连线中后1/3交点可作为此平面上的有效进针点；（3）男性角γ范围：101.4°~117.2°，女性：109.5°~120.78°，左右无差异，性别间有差异；（4）按照新的参数置钉，80例半骨盆模型中置钉成功率统计：男性成功率：92.5%，女性成功率：90%。结论以A、B和S1椎体棘突中点定位操作平面，AB连线中后1/3交点为进针点，男性采取角γ=110°，女性采取γ=115°置钉满意，可作为新的螺钉定位方式及进一步研发经皮导向器设计的应用解剖学依据。
作者：卢超；宋迎春；高波华；王钢 刊期： 2014年第06期
目的：运用激光熔覆技术制备新型纳米钽-钛合金棒并研究其结构特征及生物相容性，为临床选用内固定提供依据。方法以纳米级钽粉（Ta，Tantalum）为原料，利用激光熔覆技术制备两侧具有对称纳米钽涂层的新型钛合金棒。SEM观察微观界面结构、测量孔隙直径并分析金相成分。采用MTT细胞毒性试验和ALP活性检测评价新型纳米钽-钛合金对MC3T3-E1细胞增殖和分化性能的影响。结果扫描电镜下观察到试样的Ta涂层表面呈粗糙多孔结构，钽粉颗粒间致密熔融，孔隙直径平均在200~300μm之间，加工过程前后成分一致；成分分析结果显示熔覆过程并未产生新的元素。两组材料皆可明显促进MC3T3-E1细胞增值，但新型纳米钽-钛合金性能更为优异，同时能够促进成骨细胞的骨化，差异具有统计学意义。结论激光熔覆技术可成功实现钽与医用钛合金的冶金结合，并使其拥有良好的表面结构和生物相容性。
作者：邹琳；江建明；杨勇；陈长军；瞿东滨 刊期： 2014年第06期
目的：研究HBV复制和不同基因表达是否会影响肝细胞内CDC37的表达水平。方法首先扩增HBV 6种基因P、preS1、preS2、S、C和X，并构建至pCMV表达载体，分别转染Huh7和HepG2细胞系，Western blot检测CDC37表达水平；另外将含CDC37基因启动子序列的荧光素酶报告质粒pGL3与HBV的6种基因表达质粒分别共转染Huh7和HepG2细胞系，检测荧光素酶信号。其次分别构建B、C、D和CD重组体4种HBV基因型毒株的1.28拷贝全基因质粒，运用AdEasy腺病毒系统进行重组和包装后分别感染Huh7和HepG2细胞系，并检测CDC37表达水平。结果基因表达结果显示，HBV 6种基因的表达对肝癌细胞系内CDC37的表达水平无明显影响，而且HBV 6种不同蛋白的表达对CDC37启动子的活性无明显影响。1.28拷贝HBV全基因质粒的感染结果显示，HBV不同基因型毒株的复制对CDC37基因的表达水平亦无明显影响。结论 HBV的复制和不同基因的表达不会明显影响CDC37的表达水平。
作者：陈朝武；周彬；徐莹；杨贵奉；王战会 刊期： 2014年第06期
目的：探讨Toll样受体4（TLR4）信号通路在脂肪细胞肾素-血管紧张素系统(RAS)激活的参与机制。方法诱导3T3-L1细胞分化为脂肪细胞，予TLR4特异性激动剂LPS干预，分为对照组、10、100、1000 ng/ml LPS组，应用RT-PCR法、Western-blot法测定TLR4、AGT、ATlR mRNA及蛋白表达并使用免疫荧光双染色法观察NF-κB p65亚基核转位变化；另设10μmol/L厄贝沙坦（AT1R阻滞剂）预处理+100 ng/ml LPS组，观察NF-κB p65亚基核转位情况。结果 LPS干预呈时间依赖性及浓度依赖性升高3T3-L1脂肪细胞TLR4、AGT和AT1R的mRNA表达水平；LPS干预12 h后，TLR4、AGT、AT1R蛋白表达亦呈浓度依赖性升高；各浓度LPS处理组NF-κB p65亚基核转位较对照组明显增强，而10μmol/L厄贝沙坦预处理减弱该效应。结论 TLR4信号通路激活后，上调AGT与AT1R的mRNA及蛋白表达，并激活NF-κB；预先阻断RAS减弱NF-κB的激活。提示TLR4信号激动可激活脂肪细胞局部RAS。
作者：罗金花；孙嘉；蔡德鸿 刊期： 2014年第06期
目的：探讨RNA结合蛋白HuR 118位苏氨酸对热应激状态下的双特异性磷酸酶1（DUSP1）转录后调控机制。方法构建HuR 118位苏氨酸突变体真核表达质粒，并用脂质体转染NIH 3T3细胞，Real-time PCR检测其对DUSP1 mRNA水平的影响， Western blotting检测其对DUSP1蛋白表达的效应。结果（1）小鼠HuR不同突变体真核表达载体质粒构建成功；（2）热休克刺激后，HuR T118磷酸化明显增强；（3）过表达HuR(WT)与HuR（T118E），经过热休克刺激后，DUSP1 mRNA水平明显升高，其蛋白表达也有上调；过表达HuR(T118E)时，DUSP1的mRNA水平明显上调，而蛋白水平在热休克刺激前后均上调，其表达变化无差异而过表达HuR（T118A），热休克刺激前后DUSP1 mRNA水平及蛋白表达均下调；（4）热休克刺激下，HuR（WT）可以从细胞核内转位到细胞质并形成颗粒；当过表达HuR（T118E）时，在静息状态下，HuR（T118E）弥散分布于细胞质，热休克刺激会使其在细胞质形成明显的颗粒；而过表达HuR（T118A）时，热休克刺激并不能使其移位出核。结论 RNA结合蛋白HuR参与了DUSP1的转录后调控，可以通过其118位的苏氨酸磷酸化提高热休克刺激后的DUSP1的基因及蛋白水平。
作者：张传丽；罗海华；姜勇 刊期： 2014年第06期
目的：探讨实时超声造影技术在肾脏实性占位病变中诊断及鉴别诊断的临床应用价值。方法对140例肾脏实性占位病变患者，年龄22~87岁（平均61.3±15.5岁），共152个病灶，大小0.6~9.7 cm（平均3.1±1.9 cm）。采用经外周静脉团注声诺维（SonoVue），使用对比脉冲序列（CPS）技术进行实时超声造影检查，观察肾脏实性占位病变造影剂的灌注过程，分析其灌注特点。结果经病理学证实，137个为恶性病变（127个肾透明细胞癌、8个肾乳头状癌及2个肾嫌色细胞癌）；15个为良性病变（13个肾血管平滑肌脂肪瘤及2个肾嗜酸性细胞瘤），均表现出不同的增强特征。137个恶性病变中98个（71.5%）表现为造影剂皮质期快速增强，104个（75.9%）表现为髓质晚期或延迟期快速廓清，即“快进快出”，并125个（91.2%）具有假包膜的恶性病灶周边环状高增强。病灶直径D≤2 cm，表现为均匀增强为主；2 cm4 cm，表现为不均匀增强伴大片坏死。15个良性病变表现为造影剂皮质期缓慢或与肾实质同步增强，随后延迟期缓慢廓清，即“慢进慢出”。与病理诊断比较，实时超声造影技术诊断的特异性、准确性及阳性预测值分别为94.9%、96.1%、73.7%，均高于常规超声诊断（分别为72.3%、71.1%、19.1%），并差异有统计学意义（P<0.001）；而实时超声造影技术诊断的敏感性及阴性预测值分别为93.3%及99.2%，均高于常规超声诊断（分别为60%及94.3%），但差异无统计学意义（P=0.084及0.062，>0.05）。结论实时超声造影技术对肾脏实性占位病变诊断及鉴别诊断具有一定的临床应用价值。
作者：李鑫；梁萍；于晓玲；于杰；程志刚；韩志宇；刘方义；穆梦娟 刊期： 2014年第06期
目的：构建TM4SF1的真核表达载体并研究其对结直肠癌细胞株HCT116、DLD1迁移及侵袭功能的生物学特性影响。方法根据GenBank：BC034145.1中的TM4SF1的序列设计两条引物，用逆转录的方法获得开放阅读框（ORF区），并将其连接到质粒上，经鉴定后瞬时转染结直肠癌细胞株HCT116及DLD1，应用Western blot及细胞免疫化学方法检测其转染效果及表达情况，采用划痕及transwell实验观察其对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果成功构建PEZ-M29/TM4SF1真核表达载体， Western blot及细胞免疫化学实验结果显示TM4SF1表达上调可以促进结直肠癌细胞株的迁移及侵袭能力。结论成功构建TM4SF1真核表达载体，TM4SF1的上调表达可提高结直肠癌细胞株HCT116、DLD1的迁移及侵袭能力，提示TM4SF1与结直肠癌侵袭转移密切相关，为进一步阐明TM4SF1在结直肠癌转移中的作用及相关机制奠定基础。
作者：王丹；陈娜；彭曼；徐琼；周军 刊期： 2014年第06期
基于三维Hessian矩阵的肺结节检测方法具有很高的敏感性，却很难避免血管交叉区域产生假阳性。本文提出了一种基于自适应体窗结构分析的方法，首先利用体素的Hessian矩阵特征值设计结构系数分析其灰度分布特征；然后根据结构系数构建三维自适应体窗分析组织的局部结构特征；后使用判别函数检测出结节。通过对17套真实肺部CT图像序列进行实验，结果表明本方法可以检测出不同大小和类型的30个结节，并有效减少了血管交叉区域产生的假阳性。结合自适应体窗的Hessian矩阵检测方法可以提高检测效率，减轻医生工作量，为肺结节后续的分割和治疗提供有力的支持。
作者：王凯；张煜；刘哲星；林炳权；吴志强；曹蕾 刊期： 2014年第06期
目的：利用Red重组系统构建肠出血型大肠埃希菌（EHEC）O157：H7 ppk基因缺失株,并研究其生物特性。方法设计并合成一对同源臂引物，每条引物5'端与ppk基因同源，3'端与卡那霉素抗性基因同源，扩增卡那霉素抗性基因片段；制备含有pKD46质粒的EHEC O157：H7 EDL933w感受态细菌，然后将该抗性基因片段电击转化入制备的感受态菌株中；利用pKD46介导的Red重组系统，通过同源重组替换EHEC O157：H7 EDL933w ppk基因，PCR和测序验证；通过革兰染色、测D600值、吉姆萨染色比较EHEC O157：H7 EDL933w野生株和突变株的形态结构、生长能力和黏附性。结果构建了ppk基因缺失并含有卡那霉素抗性的EHEC O157：H7 EDL933w突变菌株（EHEC O157：H7 EDL933wΔppk），初步探索了EHEC O157：H7 EDL933w野生株和突变株的生物学特性。结论本研究运用Red重组系统构建了肠出血型大肠埃希菌O157：H7 ppk基因缺失株，为进一步研究肠出血型大肠埃希菌中ppk基因的调控机制奠定了基础。
作者：韩朋；孙琦；赵素慧；张其威；万成松 刊期： 2014年第06期
目的：研究卵胞浆内单精子注射技术（ICSI）中不同来源精子对卵母细胞受精、胚胎质量及发育潜能的影响。方法回顾性分析我中心因单纯男性因素行ICSI助孕治疗的197例患者的临床资料，按不同精子来源分为射精组（n=102）、PESA组（n=68）、TESA组（n=27）3组，其中将射精组又分为严重少弱畸精子症组（n=67）和隐匿精子症组（n=35）。比较4组间受精率、优质胚胎率、新鲜胚胎移植周期的着床率及妊娠率，以及低质胚胎继续培养的优质囊胚形成率。结果少弱畸精子射精组、隐匿精子射精组、PESA组、TESA组的正常受精率分别为64.8%、62.1%、75.6%、61.6%，其中PESA组明显高于其它3组（P<0.05），4组的优质胚胎率、新鲜胚胎移植周期的着床率及妊娠率无明显差异（P>0.05）。4组间低质胚胎继续培养的优质囊胚形成率也无显著差异（P>0.05）。结论PESA来源的精子ICSI中正常受精率较高，但在ICSI中不同来源精子对胚胎质量及发育潜能无显著影响。
作者：谢多；邱卓琳；罗琛；褚庆军；全松 刊期： 2014年第06期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
