学术投稿

内质网应激途径在鬼臼毒素纳米脂质载体诱导VK2/E6E7细胞凋亡的机制

王琦;韩凯;李雪芽;肖艳;曾抗

关键词:鬼臼毒素纳米脂质载体, VK2/E6E7细胞, 内质网应激途径, 细胞凋亡
摘要:目的:探讨鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)通过内质网应激途径诱导体外永生化人阴道上皮细胞(VK2/E6E7细胞)凋亡的机制。方法自制0.5%POD-NLC和单纯-NLC,实验分为单纯-NLC、0.125μg/mlPOD-NLC、0.25μg/ml POD-NLC、0.5μg/ml POD-NLC和空白对照组,分别作用VK2/E6E7细胞24 h。采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测各组细胞内Ca2+浓度的变化;RT-PCR和Western blot法检测各组GRP78、GRP94和calpain2基因mRNA和蛋白表达。结果与空白对照组相比,不同浓度POD-NLC可呈浓度依赖性的增加细胞内Ca2+浓度(P<0.01),各药物处理组之间比较有统计学差异(P<0.05)。POD-NLC可上调GRP78、GRP94、calpain2基因mRNA和蛋白表达。单纯-NLC和空白对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论POD-NLC诱导VK2/E6E7细胞凋亡的分子机制可能与内质网应激反应性凋亡途径的启动有关。
南方医科大学学报杂志相关文献
  • Toll样受体4信号激动对脂肪细胞肾素-血管紧张素系统的影响

    目的:探讨Toll样受体4(TLR4)信号通路在脂肪细胞肾素-血管紧张素系统(RAS)激活的参与机制。方法诱导3T3-L1细胞分化为脂肪细胞,予TLR4特异性激动剂LPS干预,分为对照组、10、100、1000 ng/ml LPS组,应用RT-PCR法、Western-blot法测定TLR4、AGT、ATlR mRNA及蛋白表达并使用免疫荧光双染色法观察NF-κB p65亚基核转位变化;另设10μmol/L厄贝沙坦(AT1R阻滞剂)预处理+100 ng/ml LPS组,观察NF-κB p65亚基核转位情况。结果 LPS干预呈时间依赖性及浓度依赖性升高3T3-L1脂肪细胞TLR4、AGT和AT1R的mRNA表达水平;LPS干预12 h后,TLR4、AGT、AT1R蛋白表达亦呈浓度依赖性升高;各浓度LPS处理组NF-κB p65亚基核转位较对照组明显增强,而10μmol/L厄贝沙坦预处理减弱该效应。结论 TLR4信号通路激活后,上调AGT与AT1R的mRNA及蛋白表达,并激活NF-κB;预先阻断RAS减弱NF-κB的激活。提示TLR4信号激动可激活脂肪细胞局部RAS。

    作者:罗金花;孙嘉;蔡德鸿 刊期: 2014年第06期

  • 人肝细胞系L-02细胞单纯肝脂肪变性细胞模型的建立与应用

    目的:探讨建立人肝细胞L-02单纯肝脂肪变性细胞模型的方法与模型的应用。方法体外用1640培养基培养L-02细胞,分为模型组和正常组。当细胞融合达到70%~80%,正常组换用新鲜1640培养液,而模型组改为含有游离脂肪酸(油酸和棕榈酸)混合物的1640培养基诱导培养24 h。以油红O染色定性观察细胞内脂滴并通过显色比较各组间总脂质差别,模型鉴定采用观察细胞内脂滴形态,检测细胞内甘油三酯和细胞培养上清丙二醛含量,并检测细胞凋亡情况;同时利用此模型观察护肝清脂片对脂肪变性肝细胞内脂滴的影响。结果模型组L-02细胞内脂滴大量形成,且甘油三酯明显升高,而培养液中肝酶释放量及丙二醛较正常组没有明显升高,且凋亡率没有明显增加;护肝清脂片含药血清两次给药,可以使细胞内脂滴和甘油三酯明显减少。结论采用油酸和棕榈酸混合物(油酸∶棕榈酸=2∶1)可以成功诱导L-02细胞脂肪变性,该模型适用于治疗脂肪肝药物的研究。

    作者:殷锦锦;唐外姣;曾璐;周本杰 刊期: 2014年第06期

  • 糖尿病大鼠血糖波动模型的建立

    目的:探讨使用普通胰岛素建立大鼠糖尿病血糖波动模型。方法雄性SD大鼠随机分成正常组和模型组,腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,将模型大鼠随机分成持续高血糖组和波动血糖组,血糖波动组大鼠每日2次皮下注射普通胰岛素或灌服葡萄糖诱导建立糖尿病血糖波动模型。观察大鼠一般情况、体质量、一日5次血糖水平、血糖日平均水平(MBG)、日平均血糖的标准差(SDBG)、大血糖波动幅度(LAGE)、血清胰岛素水平(FINS)、胰腺组织病理学改变情况。结果波动血糖组和持续高血糖组大鼠多食、多饮、多尿症状明显;大鼠体质量在不同时间的差别有统计学意义(P<0.01),组间体质量差异无统计学意义(P>0.05)。血糖波动6周后,持续高血糖组、波动血糖组大鼠血糖日平均水平(MBG)、日平均血糖的标准差(SDBG)、大血糖波动幅度(LAGE)明显高于正常组(P<0.01),血清胰岛素水平低于正常组(P<0.05);波动血糖组大鼠SDBG、LAGE明显高于持续高血糖组(P<0.01),MBG、FINS低于持续高血糖组,但差异无统计学意义(P>0.05);成模的糖尿病大鼠胰岛萎缩,形态不规则,分布较为稀疏,数量明显减少,其中以波动血糖组变化更为明显。结论使用每日皮下注射2次普通胰岛素或灌服葡萄糖的方法能成功制作出糖尿病大鼠血糖波动模型。

    作者:吴元洁;吴元波;郑书国;王玉凤;刘晓丽;张晓军;吕明安 刊期: 2014年第06期

  • 经S1骶髂螺钉参数测定及经皮螺钉导向器可行性的数字模型

    目的:探讨一种新的第一骶椎(S1)骶髂螺钉定位方式,为导向器引导经皮骶髂螺钉固定的可行性提供应用解剖学基础。方法纳入100例正常成人骨盆CT原始数据,重建骨盆三维模型。利用Mimics软件中的相关功能寻找到以体表骨性标志定位的S1骶髂螺钉理想操作平面,继而逐步测量该平面上的置钉参数,包括进针点、进针角度γ及安全范围,后利用数字模型检验新的置钉参数的准确性。结果(1)髂前后上棘骨性突出点(分别为A、B)与S1椎体棘突中点构成的平面可作为操作平面;(2) AB连线中后1/3交点可作为此平面上的有效进针点;(3)男性角γ范围:101.4°~117.2°,女性:109.5°~120.78°,左右无差异,性别间有差异;(4)按照新的参数置钉,80例半骨盆模型中置钉成功率统计:男性成功率:92.5%,女性成功率:90%。结论以A、B和S1椎体棘突中点定位操作平面,AB连线中后1/3交点为进针点,男性采取角γ=110°,女性采取γ=115°置钉满意,可作为新的螺钉定位方式及进一步研发经皮导向器设计的应用解剖学依据。

    作者:卢超;宋迎春;高波华;王钢 刊期: 2014年第06期

  • 肠出血型大肠埃希菌O157:H7 ppk基因缺失株的构建及其生物学特性分析

    目的:利用Red重组系统构建肠出血型大肠埃希菌(EHEC)O157:H7 ppk基因缺失株,并研究其生物特性。方法设计并合成一对同源臂引物,每条引物5'端与ppk基因同源,3'端与卡那霉素抗性基因同源,扩增卡那霉素抗性基因片段;制备含有pKD46质粒的EHEC O157:H7 EDL933w感受态细菌,然后将该抗性基因片段电击转化入制备的感受态菌株中;利用pKD46介导的Red重组系统,通过同源重组替换EHEC O157:H7 EDL933w ppk基因,PCR和测序验证;通过革兰染色、测D600值、吉姆萨染色比较EHEC O157:H7 EDL933w野生株和突变株的形态结构、生长能力和黏附性。结果构建了ppk基因缺失并含有卡那霉素抗性的EHEC O157:H7 EDL933w突变菌株(EHEC O157:H7 EDL933wΔppk),初步探索了EHEC O157:H7 EDL933w野生株和突变株的生物学特性。结论本研究运用Red重组系统构建了肠出血型大肠埃希菌O157:H7 ppk基因缺失株,为进一步研究肠出血型大肠埃希菌中ppk基因的调控机制奠定了基础。

    作者:韩朋;孙琦;赵素慧;张其威;万成松 刊期: 2014年第06期

  • TM4SF1真核表达载体的构建及其对结直肠癌细胞株生物学功能的影响

    目的:构建TM4SF1的真核表达载体并研究其对结直肠癌细胞株HCT116、DLD1迁移及侵袭功能的生物学特性影响。方法根据GenBank:BC034145.1中的TM4SF1的序列设计两条引物,用逆转录的方法获得开放阅读框(ORF区),并将其连接到质粒上,经鉴定后瞬时转染结直肠癌细胞株HCT116及DLD1,应用Western blot及细胞免疫化学方法检测其转染效果及表达情况,采用划痕及transwell实验观察其对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果成功构建PEZ-M29/TM4SF1真核表达载体, Western blot及细胞免疫化学实验结果显示TM4SF1表达上调可以促进结直肠癌细胞株的迁移及侵袭能力。结论成功构建TM4SF1真核表达载体,TM4SF1的上调表达可提高结直肠癌细胞株HCT116、DLD1的迁移及侵袭能力,提示TM4SF1与结直肠癌侵袭转移密切相关,为进一步阐明TM4SF1在结直肠癌转移中的作用及相关机制奠定基础。

    作者:王丹;陈娜;彭曼;徐琼;周军 刊期: 2014年第06期

  • 多发性内分泌腺瘤病2A型一例报道及文献回顾

    结合文献总结我院收治的1例多发性内分泌腺瘤病(MEN)2A型的诊治经验,探讨MEN 2A型的临床特点及治疗方法。MEN 2A型的诊断主要依赖相应的超声、CT及实验室检查,早期诊断、早期治疗是提高疗效的关键,RET基因检测是早期诊断MEN 2A及MEN 2B的“金标准”;手术是目前主要的治疗手段。

    作者:于若飞;吴自勍;李爱民;金国萍;罗荣城 刊期: 2014年第06期

  • Wnt/β-catenin信号通路在肝细胞癌中的促进作用

    Wnt/β-catenin信号通路与肿瘤有着密切的关系,此通路的异常活化参与人类多种癌症的发病过程。肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)在全球肿瘤中死亡率位居第3,但其发生发展的分子机制仍不清楚。目前,研究表明Wnt/β-catenin信号通路及其他相互作用信号通路,以及乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒相互作用蛋白等共同在HCC的发生发展过程中起着关键作用,因而,揭示该信号通路在HCC中的作用可为其早期诊断、治疗以及预后提供理论基础。现对Wnt/β-catenin信号通路在HCC中的作用及目前研究状况作一简要综述。

    作者:谢亮海;蒋晗;吴福生 刊期: 2014年第06期

  • CXCR7特异性拮抗剂SDF-1/54R的可溶性表达及活性评价

    目的:构建SDF-1/54R的原核可溶表达载体,并考查其对CXCR7的抑制作用。方法将PCR扩增的SDF-1/54r基因插入带有GST标签的可溶表达载体pET-41a+,并转化BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达的融合蛋白GST-SDF-1/54R通过SDS-PAGE和Western blotting进行检测,并利用GST亲和层析纯化。纯化产物经肠激酶酶切和纯化后得到目的蛋白SDF-1/54R。用SDF-1/54R处理CXCR7高表达的MCF-7细胞,利用MTT和趋化实验评价其对乳腺癌细胞增殖和转移的影响。结果利用新构建的可溶表达系统成功得到了目的蛋白SDF-1/54R,MTT和趋化实验证实SDF-1/54R对乳腺癌细胞MCF-7的增殖和转移具有明显的抑制作用。结论重组载体表达的可溶蛋白SDF-1/54R是一种良好的CXCR7特异性拮抗剂,具有开发成抗肿瘤药物的潜在应用价值。

    作者:曹园芝;杨飞华;马伟峰 刊期: 2014年第06期

  • 二乙基亚硝胺诱导建立斑马鱼肝纤维化模型

    目的:探讨利用二乙基亚硝胺(DEN)致中毒性肝损伤的方法构建斑马鱼肝纤维化模型的可行性。方法3月龄野生型斑马鱼120条,随机等分为对照组和DEN处理组,分别观察两组斑马鱼生存率及行为学改变,在DEN处理2周、4周和6周末,分别从两组中随机抽取等量样本测量肝指数,并制作石蜡切片,采用HE染色、Gomori氏网状纤维染色及天狼星红苦味酸染色方法观察肝纤维化病变。结果 DEN处理组斑马鱼在造模期间未见明显行为学改变,与对照组斑马鱼相比,DEN处理组斑马鱼肝指数在2周、4周和6周末均无统计学差异。病理染色结果显示造模4周末,DEN处理组斑马鱼肝细胞变性坏死,30%斑马鱼肝脏网状纤维合成分泌增多;6周末,DEN处理组斑马鱼结构紊乱,80%斑马鱼肝脏纤维过度沉积,网状纤维和胶原纤维合成分泌异常增多,可见纤维结节形成。结论采用DEN诱导中毒性肝损伤方法能够成功地构建稳定的斑马鱼肝纤维模型,为进一步探讨肝纤维化的发病机制以及药物筛选奠定了实验基础。

    作者:王坤元;刘莉;戴文聪;陈小辉;郑新春;侯金林 刊期: 2014年第06期

  • 整合卵巢癌染色体拷贝数变异与差异表达基因的生物信息学分析

    目的:从分子的遗传变异和表达水平综合探讨卵巢癌的发病机制,为临床诊疗提供新思路。方法从TCGA数据门户上下载大样本的高浆液性卵巢癌DNA拷贝数数据和mRNA表达数据,使用GISTIC对拷贝数变异进行分析,利用SAM软件包samr筛选差异表达基因;并利用GSEA等工具进行生物信息学分析。结果 GISTIC发现45个拷贝数扩增区域;SAM和Fisher's exact test发现拷贝数扩增区域中有40个拷贝数变异的基因能引起表达差异;GSEA富集分析发现这些拷贝数变异基因主要富集在多个有关癌症基因集的研究报告中。结论利用生物信息学方法综合分析拷贝数变异数据和基因表达数据,能充分有效地获取信息,为确定卵巢癌的早期诊断和治疗靶点提供新的思路。

    作者:邓祯祥;王文辉;李金明 刊期: 2014年第06期

  • HuR蛋白118位苏氨酸对热应激状态下的双特异性磷酸酶1的转录后调控

    目的:探讨RNA结合蛋白HuR 118位苏氨酸对热应激状态下的双特异性磷酸酶1(DUSP1)转录后调控机制。方法构建HuR 118位苏氨酸突变体真核表达质粒,并用脂质体转染NIH 3T3细胞,Real-time PCR检测其对DUSP1 mRNA水平的影响, Western blotting检测其对DUSP1蛋白表达的效应。结果(1)小鼠HuR不同突变体真核表达载体质粒构建成功;(2)热休克刺激后,HuR T118磷酸化明显增强;(3)过表达HuR(WT)与HuR(T118E),经过热休克刺激后,DUSP1 mRNA水平明显升高,其蛋白表达也有上调;过表达HuR(T118E)时,DUSP1的mRNA水平明显上调,而蛋白水平在热休克刺激前后均上调,其表达变化无差异而过表达HuR(T118A),热休克刺激前后DUSP1 mRNA水平及蛋白表达均下调;(4)热休克刺激下,HuR(WT)可以从细胞核内转位到细胞质并形成颗粒;当过表达HuR(T118E)时,在静息状态下,HuR(T118E)弥散分布于细胞质,热休克刺激会使其在细胞质形成明显的颗粒;而过表达HuR(T118A)时,热休克刺激并不能使其移位出核。结论 RNA结合蛋白HuR参与了DUSP1的转录后调控,可以通过其118位的苏氨酸磷酸化提高热休克刺激后的DUSP1的基因及蛋白水平。

    作者:张传丽;罗海华;姜勇 刊期: 2014年第06期

  • 实时超声造影技术诊断肾脏实性占位病变的价值

    目的:探讨实时超声造影技术在肾脏实性占位病变中诊断及鉴别诊断的临床应用价值。方法对140例肾脏实性占位病变患者,年龄22~87岁(平均61.3±15.5岁),共152个病灶,大小0.6~9.7 cm(平均3.1±1.9 cm)。采用经外周静脉团注声诺维(SonoVue),使用对比脉冲序列(CPS)技术进行实时超声造影检查,观察肾脏实性占位病变造影剂的灌注过程,分析其灌注特点。结果经病理学证实,137个为恶性病变(127个肾透明细胞癌、8个肾乳头状癌及2个肾嫌色细胞癌);15个为良性病变(13个肾血管平滑肌脂肪瘤及2个肾嗜酸性细胞瘤),均表现出不同的增强特征。137个恶性病变中98个(71.5%)表现为造影剂皮质期快速增强,104个(75.9%)表现为髓质晚期或延迟期快速廓清,即“快进快出”,并125个(91.2%)具有假包膜的恶性病灶周边环状高增强。病灶直径D≤2 cm,表现为均匀增强为主;2 cm4 cm,表现为不均匀增强伴大片坏死。15个良性病变表现为造影剂皮质期缓慢或与肾实质同步增强,随后延迟期缓慢廓清,即“慢进慢出”。与病理诊断比较,实时超声造影技术诊断的特异性、准确性及阳性预测值分别为94.9%、96.1%、73.7%,均高于常规超声诊断(分别为72.3%、71.1%、19.1%),并差异有统计学意义(P<0.001);而实时超声造影技术诊断的敏感性及阴性预测值分别为93.3%及99.2%,均高于常规超声诊断(分别为60%及94.3%),但差异无统计学意义(P=0.084及0.062,>0.05)。结论实时超声造影技术对肾脏实性占位病变诊断及鉴别诊断具有一定的临床应用价值。

    作者:李鑫;梁萍;于晓玲;于杰;程志刚;韩志宇;刘方义;穆梦娟 刊期: 2014年第06期

  • 佳剂量链脲佐菌素构建糖尿病小鼠的淋巴瘤模型

    目的:选择合适剂量的链脲佐菌素(STZ)诱导形成糖尿病鼠,而后用该鼠构建小鼠淋巴瘤的荷瘤模型。方法健康雄性Balb/c小鼠200只随机分为正常对照组(50只)和实验组(75、150、200 mg/kg d STZ,各50只)。一次性腹腔注射不同剂量STZ,定期监测小鼠体质量和血糖变化,观察各组造模成功率及死亡率,生存时间。糖尿病造模成功后皮下或尾静脉注射A20淋巴瘤细胞,分别在1个月后、3个月后观察成瘤率、死亡率,生存时间。结果 STZ 150 mg/kg组和STZ 200 mg/kg组与对照组相比,体重均显著降低,血糖显著升高(均P<0.05),而STZ 75 mg/kg组改变不明显。STZ 200 mg/kg组死亡率明显高于STZ 150 mg/kg组,生存时间明显缩短(均P<0.05)。正常对照组、STZ 150 mg/kg组、STZ 200 mg/kg组皮下注射A20淋巴瘤细胞死亡率、成瘤率无统计学差异(P>0.05),尾静脉注射3个月后有统计学意义(P<0.05)。结论一次性腹腔注射STZ 150 mg/kg死亡率低,糖尿病成模率高,生存时间长,是构建Balb/c小鼠移植瘤模型的理想剂量。

    作者:汤瑶;雷翔慧;简文静;严金海;吴自勍;赵彤 刊期: 2014年第06期

  • 齐墩果酸协同环孢素A延长大鼠移植肾的存活时间

    目的:观察齐墩果酸(OA)协同环孢素A(CsA)对大鼠移植肾存活的影响,探讨将齐墩果酸应用于肾移植术后免疫抑制治疗的临床价值。方法以BN大鼠为供体,LEW大鼠为受体,建立大鼠同种异体肾移植模型。将40只受体大鼠随机均分为对照组、OA组、CsA组、OA+CsA组,术前1 d开始进行干预。记录肾移植大鼠存活时间,并监测其血清肌酐浓度。术后第5天,免疫组化法检测移植肾CD4+和CD8+T细胞的浸润;多功能流式点阵仪(Luminex)检测以下因子的血清浓度:促炎细胞因子白介素-1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)、白介素-17(IL-17)和抗炎细胞因子白介素-10(IL-10),以及趋化因子单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、干扰素诱导的蛋白-10(IP-10)、巨噬细胞炎性蛋白(MIP)和IFN-γ诱导的单核细胞因子(Mig);酶联免疫斑点法(ELISpot)检测表达IFN-γ、IL-10、IL-4和IL-17的T细胞频率。结果与其它各组比较,OA+CsA组的移植肾存活时间显著延长,浸润移植肾的CD4+和CD8+T细胞数量显著降低。与对照组比较,处理组的IL-1β、IP-10、MCP-1、Mig、MIP和IFN-γ、IL-17、IL-4的T细胞频率显著降低,但IL-10和IL-10的T细胞频率则显著升高。其中OA+CsA组较其他2个处理组的差异更为明显。结论 OA能协同CsA减轻肾移植大鼠排斥反应和炎症反应,延缓大鼠移植肾功能衰竭,延长大鼠移植肾存活时间。在临床肾移植领域,OA具有协同CsA促进移植肾存活的潜力。

    作者:钱坤;廖雯婷;李建军;蒋鸿涛;周浩;龙建华;秦国庆;王毅 刊期: 2014年第06期

  • 大样本芯片数据分析亚洲人乳腺癌差异表达基因及可能信号通路

    目的:初步分析亚洲人乳腺癌差异表达基因及可能涉及的信号通路。方法从GEO数据库下载5套亚洲人乳腺癌基因芯片数据集(GSE6367、GSE9309、GSE15852、GSE33447和GSE45255),共获得318例乳腺癌和60例正常乳腺组织的基因表达谱数据,进行基因差异表达谱和信号通路分析,并用荧光定量PCR法检测32对乳腺癌患者癌和癌旁标本,验证其中部分基因的差异表达。结果大样本芯片数据分析显示,436个基因在乳腺癌组织出现差异表达,其中上调的有259个,下调的有177个。Pathway分析发现代谢相关的信号通路可能参与了亚洲人乳腺癌发生发展过程。经荧光定量PCR验证,KRT19、ADIPOQ、CFD、RBP4、LPL、ABCA8、CD36基因表达情况与芯片数据分析结果一致。结论本研究比较完整地揭示了亚洲人乳腺癌基因差异表达谱特征和所涉及的重要信号通路,其中CD36基因可能与亚洲人乳腺癌发病密切相关,ABCA8基因可能是亚洲人乳腺癌新的致病基因。

    作者:陈路嘉;叶长生;黄仲曦;李欣;姚广裕;刘民锋;胡晓磊;董建宇;郭昭泽 刊期: 2014年第06期

  • 刺激声强度对气导短纯音诱发的眼肌和颈肌前庭诱发肌源性电位的影响

    目的:了解刺激声强度差异对正常人气导短纯音诱发的眼肌前庭诱发肌源性电位(ocular vestibular-evoked myogenic potential, oVEMP)和颈肌前庭肌源性诱发电位(cervical vestibular-evoked myogenic potential, cVEMP)的影响。方法选择国人正常人35例作为研究对象,男16例,女19例,年龄4~40岁(20.80±8.89),以500Hz tone brust为刺激音,按照100、95、90、85、80、75 dB nHL依次进行气导oVEMP和cVEMP检测,计算VEMP在不同刺激声强度的引出率、nI潜伏期、pI潜伏期、nI-pI波间期、振幅值和AR值,进行波形参数计算和声强度组间对比。结果全组正常人oVEMP和cVEMP的阈值分别为86.5±4.37 dB nHL、83.57±4.52 dB nHL。随着刺激声强度的减弱,无论oVEMP还是cVEMP,均表现出引出率下降、振幅减低等特点。在刺激声强度为100 dB nHL和95 dB nHL时,oVEMP和cVEMP的引出率均为100%,两者之间图形参数差异并不显著。结论随着刺激声强度的减弱,oVEMP和cVEMP出现引出率下降、振幅减低的趋势。对于40岁以下的国人人群,建议采用95 dB nHL作为VEMPs测试的大起始刺激强度。

    作者:张睿;许珉;张青;杨引通;陈彦飞 刊期: 2014年第06期

  • 激光熔覆技术制备的纳米钽-钛合金棒结构特征及生物相容性

    目的:运用激光熔覆技术制备新型纳米钽-钛合金棒并研究其结构特征及生物相容性,为临床选用内固定提供依据。方法以纳米级钽粉(Ta,Tantalum)为原料,利用激光熔覆技术制备两侧具有对称纳米钽涂层的新型钛合金棒。SEM观察微观界面结构、测量孔隙直径并分析金相成分。采用MTT细胞毒性试验和ALP活性检测评价新型纳米钽-钛合金对MC3T3-E1细胞增殖和分化性能的影响。结果扫描电镜下观察到试样的Ta涂层表面呈粗糙多孔结构,钽粉颗粒间致密熔融,孔隙直径平均在200~300μm之间,加工过程前后成分一致;成分分析结果显示熔覆过程并未产生新的元素。两组材料皆可明显促进MC3T3-E1细胞增值,但新型纳米钽-钛合金性能更为优异,同时能够促进成骨细胞的骨化,差异具有统计学意义。结论激光熔覆技术可成功实现钽与医用钛合金的冶金结合,并使其拥有良好的表面结构和生物相容性。

    作者:邹琳;江建明;杨勇;陈长军;瞿东滨 刊期: 2014年第06期

  • 胸腺基质淋巴细胞生成素增强正常人支气管上皮细胞屏障功能

    目的:探讨胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)对正常人支气管上皮细胞(16HBE)通透性的影响。方法体外培养16HBE,待细胞状态稳定后,用四唑盐(MTT)比色法检测TSLP(0.1、1、10、100 ng/ml)对16HBE细胞活力的影响。使用无血清1640培养基同步化12 h后,分别加入TSLP刺激液0.1 ng/ml和1ng/ml,分别刺激0、0.5、6、12、24 h,使用跨细胞电阻(TER)及异硫氰酸萤光素-右旋糖酐(FITC-DX)透过率检测不同时间及浓度下的TSLP刺激对16HBE单层细胞通透性的影响。Western blotting法检测TSLP对16HBE粘附连接蛋白E钙粘蛋白(E-cadherin)表达的影响。结果<1 ng/ml TSLP刺激对16HBE细胞活力无影响,10 ng/ml TSLP可显著促进细胞增殖(P<0.05);浓度为0.1 ng/ml及1 ng/ml的两个TSLP处理组与对照组相比,TER值均显著升高(P<0.001),FITC-DX透过率均明显下降(P<0.05),本效应无明显浓度依赖;E-cadherin表达在0.1 ng/mlTSLP处理组较其余两组明显升高;TSLP处理不同时间后,处理24 h组的TER值及E-cadherin表达量较其余组显著升高(P<0.05),FITC-DX透过率在处理12 h组及24 h组均明显下降(P<0.05),其处理12 h组效果更明显。结论 TSLP可明显改善正常支气管上皮屏障功能。

    作者:李文嘉;赵海金;董航明;邹飞;蔡绍曦 刊期: 2014年第06期

  • 内质网应激途径在鬼臼毒素纳米脂质载体诱导VK2/E6E7细胞凋亡的机制

    目的:探讨鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)通过内质网应激途径诱导体外永生化人阴道上皮细胞(VK2/E6E7细胞)凋亡的机制。方法自制0.5%POD-NLC和单纯-NLC,实验分为单纯-NLC、0.125μg/mlPOD-NLC、0.25μg/ml POD-NLC、0.5μg/ml POD-NLC和空白对照组,分别作用VK2/E6E7细胞24 h。采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测各组细胞内Ca2+浓度的变化;RT-PCR和Western blot法检测各组GRP78、GRP94和calpain2基因mRNA和蛋白表达。结果与空白对照组相比,不同浓度POD-NLC可呈浓度依赖性的增加细胞内Ca2+浓度(P<0.01),各药物处理组之间比较有统计学差异(P<0.05)。POD-NLC可上调GRP78、GRP94、calpain2基因mRNA和蛋白表达。单纯-NLC和空白对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论POD-NLC诱导VK2/E6E7细胞凋亡的分子机制可能与内质网应激反应性凋亡途径的启动有关。

    作者:王琦;韩凯;李雪芽;肖艳;曾抗 刊期: 2014年第06期

南方医科大学学报杂志

南方医科大学学报杂志

主管:广东省教育厅

主办:南方医科大学