曹园芝；杨飞华；马伟峰
目的：探讨实时超声造影技术在肾脏实性占位病变中诊断及鉴别诊断的临床应用价值。方法对140例肾脏实性占位病变患者，年龄22~87岁（平均61.3±15.5岁），共152个病灶，大小0.6~9.7 cm（平均3.1±1.9 cm）。采用经外周静脉团注声诺维（SonoVue），使用对比脉冲序列（CPS）技术进行实时超声造影检查，观察肾脏实性占位病变造影剂的灌注过程，分析其灌注特点。结果经病理学证实，137个为恶性病变（127个肾透明细胞癌、8个肾乳头状癌及2个肾嫌色细胞癌）；15个为良性病变（13个肾血管平滑肌脂肪瘤及2个肾嗜酸性细胞瘤），均表现出不同的增强特征。137个恶性病变中98个（71.5%）表现为造影剂皮质期快速增强，104个（75.9%）表现为髓质晚期或延迟期快速廓清，即“快进快出”，并125个（91.2%）具有假包膜的恶性病灶周边环状高增强。病灶直径D≤2 cm，表现为均匀增强为主；2 cm4 cm，表现为不均匀增强伴大片坏死。15个良性病变表现为造影剂皮质期缓慢或与肾实质同步增强，随后延迟期缓慢廓清，即“慢进慢出”。与病理诊断比较，实时超声造影技术诊断的特异性、准确性及阳性预测值分别为94.9%、96.1%、73.7%，均高于常规超声诊断（分别为72.3%、71.1%、19.1%），并差异有统计学意义（P<0.001）；而实时超声造影技术诊断的敏感性及阴性预测值分别为93.3%及99.2%，均高于常规超声诊断（分别为60%及94.3%），但差异无统计学意义（P=0.084及0.062，>0.05）。结论实时超声造影技术对肾脏实性占位病变诊断及鉴别诊断具有一定的临床应用价值。
作者：李鑫；梁萍；于晓玲；于杰；程志刚；韩志宇；刘方义；穆梦娟 刊期： 2014年第06期
目的：运用激光熔覆技术制备新型纳米钽-钛合金棒并研究其结构特征及生物相容性，为临床选用内固定提供依据。方法以纳米级钽粉（Ta，Tantalum）为原料，利用激光熔覆技术制备两侧具有对称纳米钽涂层的新型钛合金棒。SEM观察微观界面结构、测量孔隙直径并分析金相成分。采用MTT细胞毒性试验和ALP活性检测评价新型纳米钽-钛合金对MC3T3-E1细胞增殖和分化性能的影响。结果扫描电镜下观察到试样的Ta涂层表面呈粗糙多孔结构，钽粉颗粒间致密熔融，孔隙直径平均在200~300μm之间，加工过程前后成分一致；成分分析结果显示熔覆过程并未产生新的元素。两组材料皆可明显促进MC3T3-E1细胞增值，但新型纳米钽-钛合金性能更为优异，同时能够促进成骨细胞的骨化，差异具有统计学意义。结论激光熔覆技术可成功实现钽与医用钛合金的冶金结合，并使其拥有良好的表面结构和生物相容性。
作者：邹琳；江建明；杨勇；陈长军；瞿东滨 刊期： 2014年第06期
目的：探讨Toll样受体4（TLR4）信号通路在脂肪细胞肾素-血管紧张素系统(RAS)激活的参与机制。方法诱导3T3-L1细胞分化为脂肪细胞，予TLR4特异性激动剂LPS干预，分为对照组、10、100、1000 ng/ml LPS组，应用RT-PCR法、Western-blot法测定TLR4、AGT、ATlR mRNA及蛋白表达并使用免疫荧光双染色法观察NF-κB p65亚基核转位变化；另设10μmol/L厄贝沙坦（AT1R阻滞剂）预处理+100 ng/ml LPS组，观察NF-κB p65亚基核转位情况。结果 LPS干预呈时间依赖性及浓度依赖性升高3T3-L1脂肪细胞TLR4、AGT和AT1R的mRNA表达水平；LPS干预12 h后，TLR4、AGT、AT1R蛋白表达亦呈浓度依赖性升高；各浓度LPS处理组NF-κB p65亚基核转位较对照组明显增强，而10μmol/L厄贝沙坦预处理减弱该效应。结论 TLR4信号通路激活后，上调AGT与AT1R的mRNA及蛋白表达，并激活NF-κB；预先阻断RAS减弱NF-κB的激活。提示TLR4信号激动可激活脂肪细胞局部RAS。
作者：罗金花；孙嘉；蔡德鸿 刊期： 2014年第06期
目的：以京尼平交联制备丝素蛋白-壳聚糖微球，以牛血清白蛋白（BSA）作为模型蛋白，评价丝素蛋白-壳聚糖微球的缓释能力。方法以无机乳化交联法，京尼平为交联剂，制备缓释BSA的丝素蛋白-壳聚糖微球，通过扫描电镜观察微球表面形态并测量微球的粒径，X-射线衍射及傅里叶红外光谱对微球表征分析，以BCA法测定微球的包封率，载药率和21 d的累积缓释率。结果以京尼平交联制备的丝素蛋白-壳聚糖微球，微球形态较为规则，表面较光滑，粒径分别为7.84±0.97μm，包封率为50.16%±4.32%，载药率为1.25%±0.11%，21 d的累积释放率为75.2%±2.53%。结论以京尼平交联制备的丝素蛋白-壳聚糖微球载药率高，缓释能力显著。
作者：叶漫文；曾曙光；高文峰；容明灯；郭泽鸿；石勇；干辉勇 刊期： 2014年第06期
目的：利用Red重组系统构建肠出血型大肠埃希菌（EHEC）O157：H7 ppk基因缺失株,并研究其生物特性。方法设计并合成一对同源臂引物，每条引物5'端与ppk基因同源，3'端与卡那霉素抗性基因同源，扩增卡那霉素抗性基因片段；制备含有pKD46质粒的EHEC O157：H7 EDL933w感受态细菌，然后将该抗性基因片段电击转化入制备的感受态菌株中；利用pKD46介导的Red重组系统，通过同源重组替换EHEC O157：H7 EDL933w ppk基因，PCR和测序验证；通过革兰染色、测D600值、吉姆萨染色比较EHEC O157：H7 EDL933w野生株和突变株的形态结构、生长能力和黏附性。结果构建了ppk基因缺失并含有卡那霉素抗性的EHEC O157：H7 EDL933w突变菌株（EHEC O157：H7 EDL933wΔppk），初步探索了EHEC O157：H7 EDL933w野生株和突变株的生物学特性。结论本研究运用Red重组系统构建了肠出血型大肠埃希菌O157：H7 ppk基因缺失株，为进一步研究肠出血型大肠埃希菌中ppk基因的调控机制奠定了基础。
作者：韩朋；孙琦；赵素慧；张其威；万成松 刊期： 2014年第06期
目的：选择合适剂量的链脲佐菌素（STZ）诱导形成糖尿病鼠，而后用该鼠构建小鼠淋巴瘤的荷瘤模型。方法健康雄性Balb/c小鼠200只随机分为正常对照组（50只）和实验组（75、150、200 mg/kg d STZ，各50只）。一次性腹腔注射不同剂量STZ，定期监测小鼠体质量和血糖变化，观察各组造模成功率及死亡率，生存时间。糖尿病造模成功后皮下或尾静脉注射A20淋巴瘤细胞，分别在1个月后、3个月后观察成瘤率、死亡率，生存时间。结果 STZ 150 mg/kg组和STZ 200 mg/kg组与对照组相比，体重均显著降低，血糖显著升高(均P<0.05)，而STZ 75 mg/kg组改变不明显。STZ 200 mg/kg组死亡率明显高于STZ 150 mg/kg组，生存时间明显缩短（均P<0.05）。正常对照组、STZ 150 mg/kg组、STZ 200 mg/kg组皮下注射A20淋巴瘤细胞死亡率、成瘤率无统计学差异（P>0.05），尾静脉注射3个月后有统计学意义（P<0.05）。结论一次性腹腔注射STZ 150 mg/kg死亡率低，糖尿病成模率高，生存时间长，是构建Balb/c小鼠移植瘤模型的理想剂量。
作者：汤瑶；雷翔慧；简文静；严金海；吴自勍；赵彤 刊期： 2014年第06期
结合文献总结我院收治的1例多发性内分泌腺瘤病（MEN）2A型的诊治经验，探讨MEN 2A型的临床特点及治疗方法。MEN 2A型的诊断主要依赖相应的超声、CT及实验室检查，早期诊断、早期治疗是提高疗效的关键，RET基因检测是早期诊断MEN 2A及MEN 2B的“金标准”；手术是目前主要的治疗手段。
作者：于若飞；吴自勍；李爱民；金国萍；罗荣城 刊期： 2014年第06期
目的：探讨阿托伐他汀钙是否通过调节PPARγ和NF-κB活性来抑制Ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞泡沫化形成。方法THP-1巨噬细胞与10、20、40μmol/L阿托伐他汀钙分别预孵育2 h，PBS洗2次，然后与60μg/ml ox-LDL共孵育48 h后，通过酶荧光法检测细胞胆固醇酯与总胆固醇比值，油红O染色观察细胞胞浆内脂质蓄积情况，Western blot分析清道夫受体CD36、SRA的表达，p-iκB和PPARγ的表达，以及ATP结合盒转运蛋白A1（ABCA1）的表达变化。用荧光探针DIL标记ox-LDL的方法，观察阿托伐他汀钙对THP-1巨噬细胞结合ox-LDL能力的影响。结果阿托伐他汀钙浓度依赖性降低THP-1巨噬细胞脂质蓄积和抑制清道夫受体CD36和SRA的表达，同时上调ABCA1表达，并减弱PPARγ和p-iκB活性（P<0.05）。荧光探针DIL标记ox-LDL的方法显示阿托伐他汀钙浓度依赖性降低THP-1巨噬细胞结合ox-LDL能力（P<0.05）。结论阿托伐他汀钙抗动脉硬化作用可能部分通过降低PPARγ和p-iκB活性来抑制脂质蓄积。
作者：成小凤；刘小燕；宋凌鲲；何云；李小庆；张浩 刊期： 2014年第06期
目的：探讨一种新的第一骶椎（S1）骶髂螺钉定位方式，为导向器引导经皮骶髂螺钉固定的可行性提供应用解剖学基础。方法纳入100例正常成人骨盆CT原始数据，重建骨盆三维模型。利用Mimics软件中的相关功能寻找到以体表骨性标志定位的S1骶髂螺钉理想操作平面，继而逐步测量该平面上的置钉参数，包括进针点、进针角度γ及安全范围，后利用数字模型检验新的置钉参数的准确性。结果（1）髂前后上棘骨性突出点（分别为A、B）与S1椎体棘突中点构成的平面可作为操作平面；（2） AB连线中后1/3交点可作为此平面上的有效进针点；（3）男性角γ范围：101.4°~117.2°，女性：109.5°~120.78°，左右无差异，性别间有差异；（4）按照新的参数置钉，80例半骨盆模型中置钉成功率统计：男性成功率：92.5%，女性成功率：90%。结论以A、B和S1椎体棘突中点定位操作平面，AB连线中后1/3交点为进针点，男性采取角γ=110°，女性采取γ=115°置钉满意，可作为新的螺钉定位方式及进一步研发经皮导向器设计的应用解剖学依据。
作者：卢超；宋迎春；高波华；王钢 刊期： 2014年第06期
目的：探讨使用普通胰岛素建立大鼠糖尿病血糖波动模型。方法雄性SD大鼠随机分成正常组和模型组，腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型，将模型大鼠随机分成持续高血糖组和波动血糖组，血糖波动组大鼠每日2次皮下注射普通胰岛素或灌服葡萄糖诱导建立糖尿病血糖波动模型。观察大鼠一般情况、体质量、一日5次血糖水平、血糖日平均水平（MBG）、日平均血糖的标准差（SDBG）、大血糖波动幅度（LAGE）、血清胰岛素水平（FINS）、胰腺组织病理学改变情况。结果波动血糖组和持续高血糖组大鼠多食、多饮、多尿症状明显；大鼠体质量在不同时间的差别有统计学意义（P<0.01），组间体质量差异无统计学意义（P>0.05）。血糖波动6周后，持续高血糖组、波动血糖组大鼠血糖日平均水平（MBG）、日平均血糖的标准差（SDBG）、大血糖波动幅度（LAGE）明显高于正常组（P<0.01)，血清胰岛素水平低于正常组（P<0.05）；波动血糖组大鼠SDBG、LAGE明显高于持续高血糖组（P<0.01)，MBG、FINS低于持续高血糖组，但差异无统计学意义（P>0.05）；成模的糖尿病大鼠胰岛萎缩，形态不规则，分布较为稀疏，数量明显减少，其中以波动血糖组变化更为明显。结论使用每日皮下注射2次普通胰岛素或灌服葡萄糖的方法能成功制作出糖尿病大鼠血糖波动模型。
作者：吴元洁；吴元波；郑书国；王玉凤；刘晓丽；张晓军；吕明安 刊期： 2014年第06期
基于三维Hessian矩阵的肺结节检测方法具有很高的敏感性，却很难避免血管交叉区域产生假阳性。本文提出了一种基于自适应体窗结构分析的方法，首先利用体素的Hessian矩阵特征值设计结构系数分析其灰度分布特征；然后根据结构系数构建三维自适应体窗分析组织的局部结构特征；后使用判别函数检测出结节。通过对17套真实肺部CT图像序列进行实验，结果表明本方法可以检测出不同大小和类型的30个结节，并有效减少了血管交叉区域产生的假阳性。结合自适应体窗的Hessian矩阵检测方法可以提高检测效率，减轻医生工作量，为肺结节后续的分割和治疗提供有力的支持。
作者：王凯；张煜；刘哲星；林炳权；吴志强；曹蕾 刊期： 2014年第06期
目的：研究HBV复制和不同基因表达是否会影响肝细胞内CDC37的表达水平。方法首先扩增HBV 6种基因P、preS1、preS2、S、C和X，并构建至pCMV表达载体，分别转染Huh7和HepG2细胞系，Western blot检测CDC37表达水平；另外将含CDC37基因启动子序列的荧光素酶报告质粒pGL3与HBV的6种基因表达质粒分别共转染Huh7和HepG2细胞系，检测荧光素酶信号。其次分别构建B、C、D和CD重组体4种HBV基因型毒株的1.28拷贝全基因质粒，运用AdEasy腺病毒系统进行重组和包装后分别感染Huh7和HepG2细胞系，并检测CDC37表达水平。结果基因表达结果显示，HBV 6种基因的表达对肝癌细胞系内CDC37的表达水平无明显影响，而且HBV 6种不同蛋白的表达对CDC37启动子的活性无明显影响。1.28拷贝HBV全基因质粒的感染结果显示，HBV不同基因型毒株的复制对CDC37基因的表达水平亦无明显影响。结论 HBV的复制和不同基因的表达不会明显影响CDC37的表达水平。
作者：陈朝武；周彬；徐莹；杨贵奉；王战会 刊期： 2014年第06期
目的：研究唾液与血浆微小RNA（miR）-21对早期食管癌的诊断价值并作对比。方法收集50例Ⅰ期和50例Ⅱ期食管癌患者和50例正常对照组的唾液、血浆标本并进行总RNA抽提行qPCR定量检测miR-21，计算miR-21在唾液与血浆的相对表达量，并分析两者对Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅰ期+Ⅱ期食管癌的诊断价值。结果唾液和血浆miR-21表达水平在Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅰ期+Ⅱ期食管癌患者中显著高于正常对照组，血浆miR-21诊断Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅰ期+Ⅱ期食管癌的敏感性分别为96%、64%和97%，特异性分别为44%、84%和56%；唾液miR-21诊断敏感性分别为90%、88%和89%，特异性均为64%。不论分期如何，两者表达水平显著正相关，诊断价值的差异性没有统计学意义。结论唾液、血浆miR-21均是食管癌诊断的敏感性标志物；检测miR-21在唾液中的表达以诊断食管癌有望代替血浆检测。
作者：叶敏华；叶鹏辉；张伟珠；饶珈琦；谢子钧 刊期： 2014年第06期
目的：建立兔烫伤合并海水浸泡的实验模型，探讨烫伤合并海水浸泡复合损伤对肠道损害的影响。方法新西兰兔63只，制作20%TBSA动物烫伤模型后，随机分为单纯烫伤对照组（A组）（n=21）、烫伤后浸泡淡水组（B组）（n=21）和烫伤后浸泡海水组（C组）（n=21），每小组分别在伤后2、4和8 h处死7只动物，抽取心室血及取标本。检测血浆中超氧化物歧化酶（SOD）和脂质过氧化物（LPO）水平，检测肠道组织中PGs含量，形态学观察小肠的炎症反应情况及结构损伤状况，采用SP法检测小肠粘膜细胞中Bax和Bcl-2蛋白的表达情况。结果小肠形态学观察，总体上C组小肠组织炎症反应情况、结构损伤状况较A组和B组严重；C组兔小肠组织中PGs含量、血浆中SOD活力在海水浸泡2、4、8 h后较同期A组和B组明显减少，组间差异有显著性（P<0.01），各时相点间差异有显著性（P<0.01），随着浸泡（或致伤）时间延长含量或活力逐渐减少；C组兔血浆中LPO含量在海水浸泡2、4、8 h后较同期A组和B组明显增加，组间差异有显著性（P<0.01），不同时相点间差异有显著性（P<0.01），随着浸泡（或致伤）时间延长含量逐渐升高；C组兔小肠粘膜组织中凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达在海水浸泡4、8 h后较同期A组和B组明显增强，组间差异有显著性（P<0.01），不同时相点间差异有显著性（P<0.01），随着浸泡（或致伤）时间延长Bax和Bcl-2表达逐渐增强。结论烧伤合并海水浸泡会加重肠粘膜结构破坏和屏障功能损伤，表现在小肠炎症反应和结构损伤状况的加重，小肠组织中PGs含量和血浆中SOD活力降低，血浆中LPO含量升高，小肠粘膜上皮细胞中凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达增强。
作者：徐沛；王甲汉；史鹏伟；马军 刊期： 2014年第06期
目的：观察沙格列汀对脂肪肝合并糖尿病大鼠模型干预疗效，探讨其改善脂肪肝的可能机制。方法利用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素（STZ）建立非酒精性脂肪肝（NAFLD）合并2型糖尿病（T2DM）大鼠模型。实验动物分为3组，分别是正常对照组、模型对照组及沙格列汀干预组，干预组给予沙格列汀溶液（10 mg/kg/d）灌胃8周，对照组给予同体积生理盐水灌胃。实验结束后检测各组大鼠空腹血糖、胰岛素、血脂、肝功能、肝指数、肝组织氧化应激指标及病理改变，透射电镜检测肝细胞超微结构，免疫组化及Western blot检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax在肝组织的表达。结果与模型组比，干预组血糖、胰岛素、HOMA-IR、肝功能、肝质量、肝指数均显著降低（P<0.01)，体质量、血脂略有降低，但差异不显著（P>0.05），SOD显著升高（P<0.01），MDA显著降低（P<0.05）；与正常组比，干预组谷草转氨酶无显著差异（P>0.05）。HE及油红染色结果显示：与模型组比，干预组肝细胞内脂肪滴减少。电镜结果显示：模型组细胞浆内见大量脂肪滴，粗面内质网水肿，离散，线粒体数目减少，结构紊乱，肿胀。干预组细胞浆内脂肪滴减少，内质网围绕核膜排列整齐，线粒体结构较清晰。免疫组化法、Western blot检测结果显示：与正常组比，模型组Bax表达增多，Bcl-2表达减少；与模型组比，干预组Bax表达减少，Bcl-2表达增多。结论沙格列汀对高糖高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素诱导的脂肪肝合并糖尿病大鼠有较好的治疗作用。其可能通过有效降糖，缓和胰岛素抵抗及降低氧化应激反应、保护细胞器结构、增加抗凋亡蛋白基因表达等发挥对非酒精性脂肪性肝病的治疗作用。
作者：刘艳；张振；陈容平；孙嘉；陈宏 刊期： 2014年第06期
目的：为精确且快速进行低剂量稀疏角度锥束CT图像重建，本文提出一种基于分裂Bregman数学方法的紧框架约束的图像重建算法。方法首先选择紧框架（Tight Frame）作为正则化项，根据压缩感知原理建立小化目标函数，利用分裂Bregman数学方法将求解问题分为3步：（1）使用改进的前向投影算法快速计算出投影矩阵；（2）引入中间量，用分裂Bregman原理将无法直接差分的L1正则化问题转化为可直接差分的L2正则化问题，并利用共轭梯度算法求解；（3）利用分裂Bregman原理中的收缩公式更新中间量。结果仿真和实际重建的CT图像实验表明，相比于传统的带有正则化约束的凸集投影（POCS）代数迭代重建模式，分裂Bregman方法在图像保真和计算时间等方面均取得了上佳的效果，并且具有广泛的适用性。结论在稀疏角度锥束CT图像迭代重建条件下，本文提出的方法能够快速精确重建出满意的锥束CT图像，且图像重建速度和图像质量较凸集投影方法有较大提高。
作者：杨柳；齐宏亮；徐圆；甄鑫；卢文婷；周凌宏 刊期： 2014年第06期
目的：探讨塞来昔布（celecoxib）在人食管癌细胞是否影响卡铂介导的细胞毒作用。方法 MTT法检测卡铂单独及联合celecoxib后对食管癌亲代细胞EC109及耐药细胞EC109/CDDP的细胞毒作用。Western blot方法检测卡铂单独及联合celecoxib后caspase-3的活化、PARP蛋白的剪切，以及CTR1蛋白的表达。Caspase-3/7 Assay试剂盒检测细胞caspase-3酶活性。流式细胞仪检测卡铂单独及联合celecoxib作用下细胞凋亡比率。ICP-MS检测卡铂单独及联合celecoxib作用下细胞内卡铂蓄积量。结果卡铂在EC109及EC109/CDDP细胞的IC50在联合应用celecoxib后显著增加，说明celecoxib拮抗了卡铂介导的细胞毒作用。在联合应用celecoxib后caspase-3及PARP蛋白的剪切较单独应用卡铂时明显减少，且caspase-3酶活性较单独应用卡铂时显著降低。此外，联合应用celecoxib后，EC109和EC109/CDDP细胞凋亡率比单独应用卡铂时明显降低，而细胞存活率明显增加。联合应用celecoxib后，EC109和EC109/CDDP细胞内卡铂蓄积量比单独应用卡铂时显著降低，而CTR1蛋白的表达无明显改变。结论 Celecoxib拮抗卡铂在食管癌细胞介导的细胞毒作用，通过降低细胞内卡铂蓄积量抑制卡铂介导的食管癌细胞凋亡。
作者：时粒笠；钟德胜；古春萍；余乐 刊期： 2014年第06期
目的：了解刺激声强度差异对正常人气导短纯音诱发的眼肌前庭诱发肌源性电位（ocular vestibular-evoked myogenic potential, oVEMP）和颈肌前庭肌源性诱发电位（cervical vestibular-evoked myogenic potential, cVEMP）的影响。方法选择国人正常人35例作为研究对象，男16例，女19例，年龄4~40岁（20.80±8.89），以500Hz tone brust为刺激音，按照100、95、90、85、80、75 dB nHL依次进行气导oVEMP和cVEMP检测，计算VEMP在不同刺激声强度的引出率、nI潜伏期、pI潜伏期、nI-pI波间期、振幅值和AR值，进行波形参数计算和声强度组间对比。结果全组正常人oVEMP和cVEMP的阈值分别为86.5±4.37 dB nHL、83.57±4.52 dB nHL。随着刺激声强度的减弱，无论oVEMP还是cVEMP，均表现出引出率下降、振幅减低等特点。在刺激声强度为100 dB nHL和95 dB nHL时，oVEMP和cVEMP的引出率均为100%，两者之间图形参数差异并不显著。结论随着刺激声强度的减弱，oVEMP和cVEMP出现引出率下降、振幅减低的趋势。对于40岁以下的国人人群，建议采用95 dB nHL作为VEMPs测试的大起始刺激强度。
作者：张睿；许珉；张青；杨引通；陈彦飞 刊期： 2014年第06期
目的：探讨建立人肝细胞L-02单纯肝脂肪变性细胞模型的方法与模型的应用。方法体外用1640培养基培养L-02细胞，分为模型组和正常组。当细胞融合达到70%~80%，正常组换用新鲜1640培养液，而模型组改为含有游离脂肪酸（油酸和棕榈酸）混合物的1640培养基诱导培养24 h。以油红O染色定性观察细胞内脂滴并通过显色比较各组间总脂质差别，模型鉴定采用观察细胞内脂滴形态，检测细胞内甘油三酯和细胞培养上清丙二醛含量，并检测细胞凋亡情况；同时利用此模型观察护肝清脂片对脂肪变性肝细胞内脂滴的影响。结果模型组L-02细胞内脂滴大量形成，且甘油三酯明显升高，而培养液中肝酶释放量及丙二醛较正常组没有明显升高，且凋亡率没有明显增加；护肝清脂片含药血清两次给药，可以使细胞内脂滴和甘油三酯明显减少。结论采用油酸和棕榈酸混合物（油酸∶棕榈酸=2∶1）可以成功诱导L-02细胞脂肪变性，该模型适用于治疗脂肪肝药物的研究。
作者：殷锦锦；唐外姣；曾璐；周本杰 刊期： 2014年第06期
目的：探讨利用二乙基亚硝胺（DEN）致中毒性肝损伤的方法构建斑马鱼肝纤维化模型的可行性。方法3月龄野生型斑马鱼120条，随机等分为对照组和DEN处理组，分别观察两组斑马鱼生存率及行为学改变，在DEN处理2周、4周和6周末，分别从两组中随机抽取等量样本测量肝指数，并制作石蜡切片，采用HE染色、Gomori氏网状纤维染色及天狼星红苦味酸染色方法观察肝纤维化病变。结果 DEN处理组斑马鱼在造模期间未见明显行为学改变，与对照组斑马鱼相比，DEN处理组斑马鱼肝指数在2周、4周和6周末均无统计学差异。病理染色结果显示造模4周末，DEN处理组斑马鱼肝细胞变性坏死，30%斑马鱼肝脏网状纤维合成分泌增多；6周末，DEN处理组斑马鱼结构紊乱，80%斑马鱼肝脏纤维过度沉积，网状纤维和胶原纤维合成分泌异常增多，可见纤维结节形成。结论采用DEN诱导中毒性肝损伤方法能够成功地构建稳定的斑马鱼肝纤维模型，为进一步探讨肝纤维化的发病机制以及药物筛选奠定了实验基础。
作者：王坤元；刘莉；戴文聪；陈小辉；郑新春；侯金林 刊期： 2014年第06期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
