万沛;李妍;李飞;马天骏;蓝开健;陈炜;陈三三;何成武;谭万龙
目的 观察正反义人TIMP-1转染和酶抑制剂干预HKC细胞对PTEN、VEGF/Flk-1的表达的影响,为研究TIMP-1对肾脏器官衰老的影响机制提供参考.方法 将正义和反义人TIMP-1基因转染至人近端肾小管上皮细胞(HKC),同时用与正义转染组细胞酶抑制活性相当的MMP-2/MMP-9抑制剂(MMP-2/MMP-9 InhibitorⅢ,100 μmol/L)干预24 h,RT-PCR;间接免疫荧光法检测各组细胞PTEN、VEGF和Flk-1的表达.结果 研究显示,与未转染和空载体转染组相比,正义TIMP-1转染组中PTEN表达上调(P<0.05),明胶酶活性降低(P<0.05),VEGF和Flk-1表达下调(P<0.05),而反义TIMP-1转染组则相反(P<0.05);MMP-2/MMP-9 inhibitorⅢ 100 μmol/L(酶抑制剂组)组PTEN、VEGF和F000000000000000000lk-1表达与未转染和空载体转染组相比无显著差异.结论 肾脏器官衰老过程中高表达的TIMP-1,通过上调PTEN(非MMP依赖途径),进而下调VEGF、Flk-1表达,提示PTEN在TIMP-1介导肾脏衰老微血管生成障碍中起重要作用,为揭示TIMP-1参与肾脏器官衰老分子机制提供了新的理论依据.
作者:陈俊香;蔡广研;卓莉;马强;师锁柱;陈香美;刘伏友 刊期: 2013年第05期
目的 研究血浆及心肌局部炎细胞髓过氧化物酶(MPO)及炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在大鼠肢体缺血再灌注后心血管系统损害中的动态变化及意义.方法 应用止血带结扎构建大鼠双下肢缺血再灌注模型,按照缺血及再灌注不同时间点随机分为9组:①正常对照组(C);②缺血2、4h组(I2,I4);③缺血4h再灌注0.5、2、4、6、12、24 h组(R0.5,R2,R4,R6,R12,R24).观察各组大鼠血浆及心肌MPO、TNF-α水平的变化,以免疫组化法观察心肌组织TNF-α的表达.结果 与C组比较,I2组血浆及心肌MPO、TNF-α即开始明显上升;与I4组比较,血浆及心肌MPO分别于再灌注R0.5、R2组明显升高;R4组血浆TNF-α明显上升,R12组心肌TNF-α明显下降;R24组血浆MPO、TNF-α明显下降(P<0.05).R4血浆MPO、TNF-α及心肌TNF-α达到峰值;R6组心肌MPO达到峰值.TNF-α免疫组化提示I4组大鼠心肌胞浆即可见较多棕色染色颗粒,R4组浆棕色染色颗粒继续增多,R24组明显减少.结论 炎细胞在心肌组织的聚集活化、全身及心肌局部炎性细胞因子的激活是肢体缺血期及再灌注期心肌损伤的重要病理学基础,其中再灌注期心肌损伤与全身性炎性细胞因子激活关系更大.
作者:陈雯;刘宁;齐迎春;张颖;邓昭阳;杨靖;谢晓华 刊期: 2013年第05期
目的 针对轮状病毒、诺如病毒、星状病毒和扎如病毒四种常见腹泻病毒,建立基于同源加尾(Homo-Tag Assisted Non-Dimer,HAND)系统的一步法四重RT-PCR检测方法.方法 根据4种病毒基因组保守序列设计引物并在5'端加上同源尾巴序列.通过优化通用尾巴引物和特异性加尾引物的浓度等PCR参数构建四重RT-PCR反应体系,并系统评价其稳定性、特异性和灵敏度.结果 成功建立基于HAND系统的4种腹泻病毒一步法多重RT-PCR检测方法.特异性分析显示四种病毒间无交叉反应,灵敏度分析显示轮状病毒、诺如病毒、星状病毒和扎如病毒的检测下限分别达到48、9.6、1.92和48 pg.结论 所建立的基于HAND系统的4种腹泻病毒多重RT-PCR检测方法简便快速、灵敏特异稳定、成本低廉,非常适用于基层医学实验室.
作者:滕勇勇;莫秋华;王琪;唐明慧;赵德坚;谭华;涂承宁;杨泽;陈清 刊期: 2013年第05期
目的 观察机械法准分子激光上皮瓣下角膜磨镶术(epi-LASIK)术中上皮瓣去留对术后角膜上皮下雾状混浊(haze)和泪液中haze形成的主要调控因子转化生长因子β1(TGF-β1)的影响.方法 将30例(60眼)接受epi-LASIK的患者分为两组,右眼(30眼)术中保留上皮瓣为留瓣组,左眼(30眼)术中弃上皮瓣为去瓣组,采用酶联免疫反应吸附实验双抗体夹心法测定两组术后1、3、7d泪液中TGF-β1的水平,并观察两组术后1、3、6个月haze的情况.结果 术前等效球镜留瓣组(-4.98±2.28 D)与去瓣组(-5.20±4.02 D)比较无统计学意义(P=0.80).两组术后1、3、6个月haze程度的比较无统计学意义(P分别为0.98,0.52,0.72).两组术前及术后1、3、7天泪液中TGF-β1的水平比较亦无统计学意义(P分别为0.11,055,0.45,0.19).观察期间两组术后泪液中TGF-β1水平不断下降,但始终高于术前水平.结论 上皮瓣去留对epi-LASIK术后haze及泪液中TGF-β1水平无明显影响,术后泪液中TGF-β1可能在角膜伤口愈合反应中起一定作用.
作者:陈静;陈艺;韩苏宁;邹玉平;邹秀兰 刊期: 2013年第05期
目的 确定α-毒素诱导脐静脉内皮细胞(HUV-EC-C)的凋亡在金葡菌L型垂直感染中的作用.方法 在培养的HUV-EC-C细胞中加入不同浓度(0、10、30、90、270 ng/ml)的金葡菌α-毒素,处理不同时间(0、2、4、6、8h)后经Annexin V-PI染色,流式细胞仪检测HUV-EC-C细胞的凋亡率.通过ELISA检测α肿瘤坏死因子(TNF-α)、caspase-3与caspase-8的表达量,并观察加入TNF-α中口抗体、caspases-3抑制剂zDEVD-FMK、caspase-8抑制剂zIETD-fmk对α-毒素诱导HUV-EC-C细胞凋亡的影响.结果 α-毒素能够诱导HUV-EC-C细胞凋亡并表现为时间、剂量依赖性,明显增加HUV-EC-C细胞中TNF-α、caspase-3与caspase-8的表达;在加入TNF-α中和抗体、zDEVD-FMK、zIETD-fmk后可部分阻断α-毒素能够诱导的HUV-EC-C细胞凋亡.结论 α-毒素通过TNF-α及caspase-8介导的外源性死亡途径诱导HUV-EC-C细胞凋亡,表明α-毒素诱导内皮细胞凋亡是金葡菌L型垂直感染影响胎儿发育的主要机制之一.
作者:管俊昌;朱翔;余峰玲;杨文选;刘婷婷;张涛;林娜;刘勇;刘从森 刊期: 2013年第05期
目的 筛选不同致龋性变形链球菌临床分离株差异ssDNA配基并对其进行鉴定.方法 利用完整细胞为靶子的消减SELEX技术筛选不同致龋性变形链球菌临床分离株差异ssDNA配基,通过放射性同位素、流式细胞术、基因克隆测序、MEME在线软件和RNA structue分析软件分析配基的一、二级结构并对筛选得到的配基进行鉴定.结果 经过9轮消减SELEX筛选,放射性同位素检测文库已富集;流式细胞术检测经过测序和分析得到12条配基中的H1、H16、H4、L1、L10和H19与高致龋变形链球菌临床分离株特异结合,不与低致龋变形链球菌临床分离株特异结合,其中,H19的特异性结合程度强,解离常数为69.45±38.53 nmol/L.结论 筛选获得特异识别高致龋变形链球菌临床分离株的ssDNA配基.
作者:王成龙;胡丹阳;刘佼佼;李少华;苏东华;席庆;储冰峰;夏伟;赵强 刊期: 2013年第05期
目的 研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱγ(CaMKⅡγ)体内外促进结直肠癌细胞增殖的作用并探讨其机制.方法 半定量RT-PCR法测定5种结直肠癌细胞系及20对结直肠癌组织及其配对癌旁组织中CaMKⅡγmRNA表达水平.用慢病毒载体pLenti6.3-MCS-IRES2-eGFP制备慢病毒颗粒Lenti-CaMKⅡγ,转染SW620细胞,建立稳定表达CaMKⅡγ结直肠癌细胞系SW620-CaMKⅡγ.测定SW620-CaMKⅡγ细胞的生长曲线及克隆形成能力.Western blotting检测SW620-CaMKⅡγ细胞IKKα、IKKβ、IKKγ、p-IKKα/β、p-IκB和IκB表达水平.免疫荧光检测SW620-CaMKⅡγ细胞NF-κB p65核浆及核内的表达情况.检测裸鼠移植瘤的瘤体积.结果 CaMKⅡγ在5种结直肠癌细胞系中的mRNA水平均高,在20对组织中有18对癌组织mRNA水平比癌旁组织高.慢病毒转染的CaMKⅡγ过表达细胞系增殖能力增强(P<0.05).CaMKⅡγ能够激活细胞内的NF-κB 信号通路,促进NF-κB p65进核.CaMKⅡγ过表达细胞的裸鼠移植瘤瘤体积大于阴性对照(P<0.05).结论 CaMKⅡγ体内外均能促进结直肠癌细胞的增殖,并激活NF-κB通路.
作者:徐菲;齐海燕;于晓方;徐荣臻 刊期: 2013年第05期
目的 构建含有登革Ⅱ型病毒(DENV-2)前膜蛋白(prM)基因反向重复序列(irRNA)的重组质粒,评价其抑制病毒复制的效果.方法 DENV-2接种乳鼠,提取总RNA,在正义和反义引物两端分别加上XhoⅠ和EcoR Ⅰ的识别位点,将经RT-PCR扩增的prM全长基因片段插入pcDNA3.1(+)中,形成含有prM反向序列的重组质粒pcDNA-asprM;于另一对正义和反义引物两端引入酶切位点Nhe Ⅰ和BglⅡ,经RT-PCR扩增prM全长基因片段插入pMD18-T-vector中,形成含有正向序列的重组质粒pMD 18-T-prM.限制性内切酶Nhe Ⅰ和Kpn Ⅰ分别酶切重组质粒pMD18-T-prM和重组质粒pcDNA-asprM,得到片段prM和线性化载体pcDNA-asprM,连接构建成含有prM反向重复序列的重组质粒pcDNA-irRNA.筛选的阳性重组质粒pcDNA-irRNA用脂质体法转染至BHK-21细胞中,半定量PCR和实时荧光定量PCR分析评估该质粒抑制登革病毒复制的效果.结果 成功构建具有prM反向重复序列的重组质粒pcDNA-irRNA.经转染pcDNA-irRNA的实验组与未转染质粒阳性对照组相比,半定量PCR结果显示DENV-2攻击96 h后NS3的mRNA表达水平下降28%;实时定量PCR分析显示,DENV-2攻击72 h后实验组病毒拷贝数比阳性对照组少1.44倍,攻击96 h后实验组的NS1表达量明显低于阳性对照组(P<0.05).结论 DENV-2 prM反向重复序列具有干扰病毒复制的效果,为登革病毒基因疫苗的研究提供理论依据.
作者:朱娉婷;潘京;郑学礼 刊期: 2013年第05期
目的 探讨MALAT1在鼻咽癌细胞细胞株中的表达及生物学功能.方法 通过Real-time PCR检测MALAT1基因在鼻炎癌细胞株5-8F、C666-1、CNE-1、CNE-2、HONE-1、6-10B及永生化鼻咽上皮细胞NP69株中的表达;采用RNAi技术和RNA激活技术,构建MALAT1慢病毒干扰载体和激活载体载体并稳定转染鼻咽癌细胞株CNE-1,采用CCK8、平板克隆、划痕等试验分析MALAT1基因对CNE-1细胞生物学行为的影响.结果 MALAT1在高转移的鼻咽癌细胞株中高表达,在正常鼻咽上皮细胞低表达;经激活过表达MALAT1后,CNE-1细胞的上皮性标志物E-Cadherin的表达显著下调,间质细胞标志物Vimentin表达上调,侵袭转移能力明显增强(P<0.05).结论 MALAT1基因上调能够促进鼻咽癌CNE-1细胞的增殖、侵袭和转移能力.
作者:谢林英;胡志燕;王晓燕;李祖国 刊期: 2013年第05期
目的 应用meta分析的方法对各项研究进行系统分析以研究鱼的摄入与肾癌发病风险关系.方法 在PubMed,Embase,CNKI,CA中检索有关鱼及其产品的摄入与肾癌关系的病例对照研究以及队列研究的文献.通过meta分析方法研究鱼的摄入与肾癌的关系.运用I2检验各项研究的异质性,并使用漏斗图检验发表偏倚.结果 共纳入17篇文献,采用随机效应模型合并分析后的结果未发现鱼的摄入与肾癌的发病风险相关(RR=0.90;95% CI,0.78~1.02)且异质性明显(P=0.003,I2=52.3%),针对研究类型、研究地区以及发表时间进行亚组分析,同样没有明显的证据证明两者相关,但在性别亚组的分析中发现,男性增加鱼的摄入可降低肾癌的发病率,而在女性中则没有关系.结论 meta分析结果提示增加鱼的摄入未发现有预防肾癌发病的作用.
作者:万沛;李妍;李飞;马天骏;蓝开健;陈炜;陈三三;何成武;谭万龙 刊期: 2013年第05期
目的 观察年轻恒牙牙髓血管再生治疗的临床疗效,以评价氢氧化钙糊剂介导牙髓感染的年轻恒牙血管再生治疗的可行性.方法 2011年1月~2012年12月于广州市妇女儿童医疗中心口腔科就诊的34例均为外伤、龋病或非龋病等因素导致的牙髓感染、坏死、根尖周炎或根尖脓肿的年轻恒牙,分为试验组和对照组,各17例.试验组局麻下将患牙进行常规开髓引流,冲洗消毒,并内封氢氧化钙糊剂以行血管再生治疗,对照组行传统的根尖诱导成形术.术后随访并观察两组疗效.结果 试验组4例分别于术后6~18个月复诊发现,根尖周病变愈合,根管腔变小,牙根形成,根尖孔闭合,10例术后12~18个月,根尖周病变愈合,牙根有延长,根管壁有增厚,根尖孔缩小,1例术后2个月出现疼痛和肿胀,2例分别于术后7个月和8个月出现疼痛,有牙龈瘘管形成,牙根发育停止.对照组1例根尖诱导12个月后根尖区病变消失,根端闭合,11例术后6~18个月后根尖孔有硬组织形成,根尖区病变区域缩小,但均未见牙根长度有明显改变;5例在诱导12~18个月后仍无明显的根尖屏障形成.两组治疗有效率的差异无统计学意义(P>0.05).结论 通过内封氢氧化钙糊剂的血管再生治疗能够有效促进患有牙髓炎或根尖周炎的年轻恒牙的继续发育,具有广阔的临床应用前景.
作者:黄义彬;陈柯;张颖;熊华翠;刘彩奇 刊期: 2013年第05期
目的 探究hsa-miR9在伯基特淋巴瘤细胞株EBV+Raji/EBV-Ramous中差异表达及其与BCL-6的关系.方法 荧光定量PCR检测hsa-miR9和BCL-6在EBV+Raji和EBV-Ramous细胞中的表达;利用Oligofectamine 2000脂质体法将化学合成的hsa-miR9-inhibitor和随机序列转染高表达hsa-miR9的EBV+Raji细胞(Raji-miR9-inhibitor组和Raji-CON组),hsa-miR9-mimics和相应的随机序列转染低表达hsa-miR9的EBV-Ramous细胞(Ramous-miR9-mimics组和Ramous-CON组);运用实时荧光定量PCR、Western blotting检测转染前后BCL-6的表达,AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡率和观测凋亡细胞形态.结果 hsa-miR9和BCL-6在EBV+ Raji细胞的表达水平显著高于EBV-Ramous细胞(P<0.01);EBV+ Raji细胞经转染hsa-miR9-inhibitor 48 h后,BCL-6基因和蛋白水平的表达量均降低,而EBV-Ramous细胞经转染hsa-miR9-mimics 48 h后,BCL-6基因和蛋白水平的表达量均升高,与相应的随机序列组相比均有显著性差异(P<0.05);转染48 h后Raji-miR9-inhibitor组凋亡率明显低于Raji-CON组,Ramous-miR9-mimics组凋亡率明显高于Ramous-CON组,差异具有统计学意义(P<0.05);Raji-CON组和Ramous-miR9-mimics组可见明显凋亡细胞.结论 hsa-miR9正向调控伯基特淋巴瘤细胞株EBV+Raji/EBV-Ramous细胞BCL-6的表达和凋亡.
作者:代新珍;陈少红;葛娟;韩西群;周新华;吴自勍;赵彤 刊期: 2013年第05期
目的 在炎症氧化应激细胞模型中筛选参与Nox1启动子活化的相关调控蛋白.方法 TNF-α激A549细胞建立炎症氧化应激细胞模型,运用DNA pull-down技术筛选出Nox1启动子区结合蛋白,再用二维凝胶电泳技术分离pull-down后的结合蛋白,然后在2D凝胶上选取与对照组表达差异大于1.5倍的蛋白质点进行切胶,后经基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定,筛选出Nox1启动子区差异结合蛋白.结果 2D凝胶上共筛选出1.5倍以上差异蛋白点7个,均为表达上调蛋白,鉴定出GLE1 、DDX19A,KRT1、KRT10四种蛋白质.结论 GLE1、DDX 19A,KRT1、KRT10参与了TNF-α诱导的A549细胞Nox1活化的基因调控,为研究炎症氧化应激细胞模型的Nox1启动子区调控蛋白的生物学功能奠定了实验基础.
作者:邱娴;胡水旺;徐俊;李理;黄文杰 刊期: 2013年第05期
目的 明确甲状腺激素能否减少慢性脑缺血大鼠海马的细胞凋亡,及其作用是否通过上调Bcl-2的表达实现.方法 将50只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、双侧颈总动脉永久性结扎术(2VO)组与缺血后T3干预组,分别于术后7d与14d处死,对脑组织切片行Nissl染色观察海马CA1区的组织结构,TUNEL染色计算凋亡指数,Western Blotting检测Bcl-2的表达情况.结果 Nissl染色可观察到缺血后海马CA1区的细胞排列杂乱和神经元数量减少,三碘甲腺原氨酸(T3)干预组较之结构完整性强,神经元数量多.缺血7d三组齿状回的细胞凋亡指数从高到低依次为2VO组(20.868土2.090)、T3组(20.365士1.055)及假手术组(17.714±2.553),但差异无统计学意义(P=0.060);此时海马Bcl-2的表达量从高到低依次为T3组、2VO组及假手术组.缺血14 d齿状回的细胞凋亡指数以2VO组高(66.532士3.249,P<0.001),T3组明显降低(56.153土4.556,P=0.001);此时Bcl-2的表达量以T3组多,2VO组低.结论 甲状腺激素可以减少缺血海马的细胞凋亡,其作用可能与上调海马Bcl-2的表达有关.
作者:席蕾;汪槿;郑卉;王群 刊期: 2013年第05期
目的 从菌群总体角度分析和比较健康育龄期女性和细菌性阴道病(BV)患者阴道菌群差异.方法 采集临床Amsel标准及Nugent评分筛选的37例BV患者及37例健康育龄期女性阴道穹窿分泌物标本,提取总基因组DNA,对16S rRNA V6区基因进行扩增,所有扩增的PCR产物经Illumina测序后,通过BIPES、UCHIME、TSC、GAST终得到样品的物种信息.结果 健康育龄期女性阴道分泌物乳酸杆菌占95%以上,单独以惰性乳酸杆菌或卷曲乳酸杆菌为主,或者两者比例相当,同时存在少量加德纳氏菌属,颗粒链球菌属,链球菌属,普氏菌菌属,埃希氏杆菌属和其它菌属;30例BV患者阴道菌群Alpha多样性明显增加(P<0.001),Beta多样性也发生了明显变化,表现为乳酸杆菌明显减少,其相对比例从45%到1%(24例),以惰性乳酸杆菌为主,部分患者(6例)甚至未检出,同时加德纳氏菌属,普氏菌菌属,颗粒链球菌属,厌氧球菌,微单胞菌属,Peptoniphilus.harei,消化链球菌属,戴阿李斯特杆菌属等相对丰富度增加,不同于既往研究的是7例BV患者以少见的格氏乳杆菌,嗜酸乳杆菌为优势菌群,约占75%~50%.结论 健康育龄女性阴道菌群以乳酸杆菌占绝对优势,单独以惰性乳酸杆菌或卷曲乳酸杆菌为主,或者两者相当,并与多种微生物并存;大部分BV患者阴道菌群表现为乳酸杆菌显著减少甚至缺失,小部分BV患者以少见的格氏乳酸杆菌、嗜酸乳酸杆菌为优势菌群.
作者:许苏容;宗利丽;刘木彪;何彦;黄雪梅;周宏伟 刊期: 2013年第05期
目的 探讨早期乳腺癌原发灶B细胞与临床病理特征以及预后的关系.方法 回顾性收集2000年1月~2002年12月在解放军总医院手术的130例Ⅰ~Ⅲ期乳腺癌患者的临床资料及石蜡切片,用免疫组织化学法检测乳腺癌原发灶间质中CD20阳性B淋巴细胞的浸润情况并分析其与CD8和CD4阳性淋巴细胞密度的关系,以及分析CD20阳性细胞浸润与乳腺癌临床病理特征及预后的关系.结果 在部分乳腺癌(37.69%,49/130)间质可见CD20+B细胞聚集分布,并可观察到CD3+T细胞聚集在CD20+B细胞聚集区的周围形成淋巴滤泡样结构.总体分析时,CD20+细胞聚集与预后不相关.在激素受体阴性(雌激素受体和孕激素受体均为阴性)患者的COX多元分析中,CD20+细胞聚集与较好的DDFS (HR=0.251,95%CI=0.071-0.894,P=0.033)、OS(HR=0.325,95%CI=0.103-1.028,P=0.056)相关.而在激素受体阳性(雌激素受体和孕激素受体至少有一个阳性)患者,CD20+细胞聚集与DFS(P=0.997)、DDFS(P=0.759)、OS(P=0.700)均不相关.在激素受体阳性患者,术后辅助内分泌治疗可显著改善CD20+细胞聚集阴性患者的OS(P=0.001).结论 CD20+细胞聚集在激素受体阴性乳腺癌患者有预后预测价值.术后辅助内分泌治疗的远期疗效与乳腺癌原发灶CD20+细胞聚集相关,并进而影响CD20+细胞聚集与乳腺癌预后的关系.
作者:于海明;杨俊兰;焦顺昌;王建东 刊期: 2013年第05期
目的 建立一种可用于后续双向电泳研究的细胞骨架及相关蛋白的提取方法.方法 采用亚细胞组分蛋白分步提取方法,根据提取过程中细胞形态变化,提取后组分蛋白电泳图谱等优化提取条件.用双向凝胶电泳、免疫印迹分析、蛋白质点质谱鉴定等方法验证该提取方法的重复性和各组分蛋白提取纯度.结果 各组分蛋白的双向电泳蛋白图谱差异明显,具备各自特征性的蛋白点分布,各组分标志蛋白FAK、Integrin-β1、Histone Hl和cytokeratin 19分别只表达在细胞浆、细胞膜、细胞核和细胞骨架组分.细胞骨架蛋白组分中约90%以上的蛋白质点经质谱鉴定为细胞骨架及相关蛋白.结论 亚细胞组分蛋白顺序提取方法具有较好的重复性,提取组分选择性较高,并且能够有效提高低丰度蛋白的检出效率,是一种比较理想的进行蛋白质组学研究的样本预处理方法.
作者:蔡贞;熊石龙;周园;籍会彩;向春艳;郑磊 刊期: 2013年第05期
目的 探索硫酸氨基葡萄糖溶液能否在超声作用下透过离体兔皮肤,并筛选超声辅助透皮条件.方法 自制简易Franz扩散池,使用超声辅助硫酸氨基葡萄糖溶液体外经皮渗透.通过紫外分光光度法测定接受夜中硫酸氨基葡萄糖的浓度,计算透过量和透过速率.分析不同功率和辐照时间、溶液浓度、对透过量和透过速率的影响.结果 声强为0.2 W/cm2的超声辐照辅助硫酸氨基葡萄糖透皮的透过量和透过速率大.超声辐照5 min组的接受液中未检测出硫酸氨基葡萄糖;辐照时间组的透过量和透过速率随时间增加而增大.透过量和透过速率均随硫酸氨基葡萄糖的浓度增大而增大.背部和侧部的皮肤厚度分别为2.0士0.1 mm和1.2±0.1 mm,对超声辅助的透过量和透过速率无显著影响(P>0.05);对照组的接受液未检测到硫酸氨基葡萄糖.结论 硫酸氨基葡萄糖不能自行透过皮肤,1.0 MHz超声辐照超过5 min,硫酸氨基葡萄糖方能透过兔皮肤,透过量和透过速率随时间增加而增大,透过量和透过速率均随原液浓度增加而增大,不同部位皮肤厚度变化不会明显影响超声辅助硫酸氨基葡萄糖溶液效果.
作者:曾凡强;乔海;佘朝堃;王智彪 刊期: 2013年第05期
目的 探讨下调microRNA-221 (miR-221)表达对人结直肠癌细胞的放射敏感性的影响及其分子机制.方法 常规培养人结直肠癌Caco2细胞系,以脂质体转染反义miR-221 (anti-miR-221)后,应用实时荧光定量PCR(Real-time Q-PCR)检测Caco2细胞中miR-221和PTEN mRNA表达水平,应用Western-blot分析肿瘤细胞中PTEN蛋白表达变化;不同处理组的肿瘤细胞经照射后,流式细胞仪检测各处理组细胞的死亡情况.结果 Real-time Q-PCR显示转染anti-miR-221后miR-221的表达水平明显下调(P<0.05),同时PTEN蛋白表达增高(P<0.05);流式细胞仪检测可见anti-miR-221转染组及anti-miR-221转染联合照射组死亡细胞比例均明显增多(P均<0.01),转染anti-miR-221可明显提高Caco2细胞的放射敏感性,且此效应能被PTEN-siRNA部分但不完全阻断.结论 Anti-miR-221可通过上调PTEN蛋白表达增加结直肠癌细胞的放射敏感性.
作者:张晓槟;孙凯;雷尚通;钟育波;邓海军;区文弢;吴承堂 刊期: 2013年第05期
目的 探讨载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽3G(APOBEC3G)基因rs185983011位点在人群中的多态性分布,并研究其与慢性乙型肝炎易感性的关系.方法 分别收集186例HBsAg和HBeAg皆阴性的健康者、159例慢性乙型肝炎患者的血液样本.应用Sanger测序方法检测该研究对象APOBEC3G基因rs185983011位点的多态性,确定其基因型及等位基因分布情况.并将该位点的多态性与慢性乙型肝炎的易感性之间的关系进行统计学分析.结果 SNP rs185983011位点存在于检测人群中的基因型只有C/C和C/T,其中以C/C为主(97.7%).SNP rs185983011位点的基因型频率和等位基因频率在慢性乙型肝炎患者组和健康者组中的分布无统计学差异(P>0.05).结论 研究人群APOBEC3G基因中rs185983011位点的基因型主要是C/C,未发现该位点的多态性与慢性乙型肝炎易感性存在相关性.
作者:游志毅;周福元;王雄虎;陈楚明;周军华;赵德坚;胡贵方 刊期: 2013年第05期