学术投稿

转化生长因子β3联合肝素在人乳牙牙髓干细胞向成牙本质样细胞分化中的作用

任飞;周慧;刘建平;章锦才;徐平平;杨勤;陈晓春

关键词:人乳牙牙髓干细胞, 转化生长因子β3, 肝素, 成牙本质样细胞
摘要:目的:探讨转化生长因子β3(TGF-β3)诱导人乳牙牙髓干细胞(SHED)向成牙本质样细胞分化的能力。方法:采用酶消化法将人乳牙牙髓分离培养,获得SHED;对体外培养的第3代SHED 分别单独加入25 ng/mL 的重组 TGF-β3,或与肝素联合进行培养;通过 Q-PCR 和 Western-blotting 方法,分别观察SHED 表达成牙本质细胞特异性标志物-牙本质涎磷蛋白( DSPP )基因及其基因表达产物-牙本质涎蛋白( DSP )的情况;通过碱性磷酸酶( AKP )试剂盒检测 SHED 的 AKP 活性的改变;细胞爬片行免疫化学染色和茜素红染色。结果:SHED 在诱导体系中生长状态良好。25 ng/mL TGF-β3联合10 U/mL 肝素作用组的AKP 活性明显增强,与 TGF-β3单独作用组、肝素单独作用组以及对照组相比差异具有统计学意义( P <0.01);TGF-β3联合肝素作用组的茜素红染色呈强阳性,Q-PCR 和 Western-blotting 结果均显示,该组的DSPP表达在mRNA水平和蛋白质水平上均明显升高。结论:在TGF-β3与肝素联合作用的诱导下,可促进SHED分化为成牙本质样细胞。
实用医学杂志相关文献
  • 短期和长期的埃索美拉唑对SD大鼠胃黏膜的影响

    目的:研究短期和长期应用埃索美拉唑对Sprague-Dawley(SD)大鼠胃黏膜的影响。方法:54只成熟雄性SD大鼠随机分为3组:空白对照组(安慰剂,2%甲基纤维素)、常规剂量组[埃索美拉唑10 mg/(kg· d)]、大剂量组[埃索美拉唑50 mg/(kg·d)]。显微镜下观察苏木素-伊红染色切片并测量胃体黏膜厚度,酶联免疫吸附实验测血清胃泌素(gastrin, GAS)浓度,通过聚合酶链反应测各种基因 mRNA 的表达情况如胃泌素受体( CCK-BR )、生长抑素( SST )、胃蛋白酶原( PC )、组氨酸脱羧酶( HDC )及质子泵( H+、K+-ATPase )。结果:胃体黏膜厚度在第1周时3组分别为(592.54±28.86)μm、(643.12±46.76)μm、(786.02±44.25)μm,大剂量组较其他两组增厚(P<0.05),第6周时,常规剂量组(841.03±48.03)μm、大剂量组(968.83±147.18)μm 均较对照组(658.40±49.13)μm 增厚(P<0.05);GAS 在第1周时3组分别为(113.50±57.99) pg/mL、(188.20±101.37)pg/mL、(317.55±145.34)pg/mL,大剂量组较对照组升高(P=0.00),第6周大剂量组(599.39±18.17)pg/mL、常规剂量组(553.02±195.46)pg/mL 较对照组(261.01±42.28)pg/mL 均升高(P 分别=0.049、0.03),CCK-BR mRNA 在大剂量组实验期间表达量均高于其他两组(P <0.05),常规剂量组在第6周表达量较对照组也升高(P =0.01),HDC mRNA 在大剂量组表达量较对照组升高(P <0.05),H+、K+-ATPase mRNA在用药第6周表达量用药组高于对照组(P<0.05),大剂量组 SST mRNA和PC mRNA表达量均较对照组低(P<0.05)。结论:埃索美拉唑对大鼠胃黏膜的影响可能是通过影响血清 GAS实现的,而且具有一定的时间和剂量依赖性。

    作者:李聪;唐文;戈弋巾;胡可伟 刊期: 2014年第12期

  • 脉冲染料激光联合咪喹莫特治疗鲜红斑痣的临床研究

    目的:对脉冲染料激光联合咪喹莫特治疗鲜红斑痣的疗效进行临床分析。方法:15例受试者,每例设计4个区,同一解剖部位的鲜红斑痣上设计3个区:A区为空白对照区;B 区为脉冲染料激光联合咪喹莫特治疗区,C区为脉冲染料激光治疗区。对侧正常皮肤为D区。治疗后2个月随访分析其临床疗效。结果:色度值评估中,红型鲜红斑痣9名患者B 区和C区的褪色率间存在显著差异,1名患者无效;紫型鲜红斑痣B区和C区的褪色率不存在显著差异,1名患者无效。医生主观评估中,红型鲜红斑痣B 区和C区的平均评分分别为(1.9±1.5)分,(1.5±0.8)分;紫型鲜红斑痣B 区和C 区的平均评分分别为(1.3±0.9)分, C区为(1.3±0.8)分。结论:联合疗法疗效优于单纯的脉冲染料激光治疗,具有与单纯的脉冲染料激光疗法相当的短期安全性,具有较为理想的发展前景。

    作者:张桃花;苑凯华;苗勇;胡志奇 刊期: 2014年第12期

  • 关于作者填写通信地址的通知

    邮局有规定,所有通过邮局的信件,一定要写清详细地址(详细的门牌号),否则邮局一律退回。比如,以前我们寄信、寄杂志、寄版面费发票给北京协和医院消化科张某某,只需在信封上写“100730北京协和医院(东院区)消化内科张某某收”就行了。可是,现在邮局的要求是,一定要写为“100730北京市东城区王府井帅府园1号北京协和医院(东院区)消化内科张某某收”。

    作者:本刊编辑部 刊期: 2014年第12期

  • T140体外阻断SDF-1/CXCR4信号通路阻止人关节软骨Ⅱ型胶原蛋白降解的研究

    目的:探讨T140体外阻断基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor 1,SDF-1)/趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)信号通路对人关节软骨细胞降解Ⅱ型胶原蛋白的影响,明确 T140的作用机制。方法:取144块膝关节置换OA患者软骨(OA软骨组)和144块创伤性截肢患者正常软骨(正常软骨组)组织,Mankin评分均为0或1,加入SDF-1(100 ng/mL)。每组再分为A、B、C三个亚组,分别加入浓度为1000 nmol/L 的 T140、MAB310和 SDF-1,分别于体外培养2、4 d 后,采用 RT-PCR 检测软骨组织Ⅱ型胶原蛋白mRNA表达。结果:相同软骨组在相同时间点,A组Ⅱ型胶原蛋白mRNA表达均显著高于B组和C组(P<0.05)。相同时间点,OA 软骨组同一亚组Ⅱ型胶原蛋白 mRNA 表达均显著低于正常软骨组(P<0.05)。结论:SDF-1通过 SDF-1/CXCR4信号通路诱导人关节软骨降解Ⅱ型胶原蛋白;T140阻断 SDF-1/CXCR4信号通路,缓解软骨细胞降解Ⅱ型胶原蛋白。

    作者:马珂;李晓林;李彦林;朱晓松;赵沣凯 刊期: 2014年第12期

  • IGF-1R基因沉默对L02细胞过氧化损伤时Caspase12表达的影响

    目的:成功构建稳定沉默表达IGF-1R基因质粒,并转染至L02细胞(人正常肝细胞),观察 IGF-1R基因沉默对L02细胞过氧化损伤时经内质网途径特异性凋亡蛋白Caspase12表达的影响。方法:构建针对 L02细胞 IGF-1R 基因的短发夹状 RNA (shRNA),将4种不同序列的 Sh-H-IGF1R-1108、Sh-H-IGF1R-2797、Sh-H-IGF1R-3215、Sh-H-IGF1R-3787质粒(设为实验组)以及含与IGF-1R无关序列的Sh-H-IGF1R-V1质粒(设为阳性对照组)和空白质粒 Sh-H-IGF1R-V2(设为阴性对照组)分别转染 L02细胞,24 h 后用 RT-PCR 方法检测IGF-1R 表达水平,筛选出稳定沉默IGF-1R基因的质粒。随后进行下一步实验分组:空白对照组(A组)、过氧化损伤组(B组)、阴性质粒转染组(C组)、目的基因转染组(D组)。12 h后收集细胞,采样待测,用Western Blot 法检测各组 Caspase12表达。结果:各实验组与 Sh-H-IGF1R-V1组及 Sh-H-IGF1R-V2组比较扩增倍数均降低(P<0.05),其中 Sh-H-IGF1R-3215组(0.02±0.01)与Sh-H-IGF1R-3787(0.05±0.05)沉默效果稳定,但后组重复性更好。 B 组(2.41±0.03)、C 组(2.45±0.02)、D 组(3.60±0.06) Caspase12表达均较A组(0.34±0.02)升高(P<0.01),C组较B 组略升高(P>0.05),D 组较B、C组显著升高(P<0.01)。结论:4种针对 IGF-1R 基因沉默质粒均构建成功,并成功转染至人 L02细胞(人正常肝细胞),沉默效果理想的质粒为Sh-H-IGF1R-3787。IGF-1R靶向shRNA质粒可通过沉默L02细胞IGF-1R表达加重细胞凋亡,间接验证了IGF-1/ IGF-1R 信号通路对L02细胞过氧化损伤时经内质网途经的细胞凋亡程序活化有一定的调控作用。

    作者:徐建华;卢绮萍 刊期: 2014年第12期

  • 《实用医学杂志》编辑部作者校对稿校对注意事项

    为进一步提高期刊的编校质量和效率,我刊自2012年第1期起停止邮寄纸质版校对稿,改为使用E-mail 将PDF格式校对稿发送至第一作者或通信作者在我刊投稿系统中所登记的E-mail邮箱中。请各位作者收到邮件后自行打印PDF校对稿并仔细校对,核对无误后由第一作者签名,并争取于收到PDF校样后2天内将校对好的纸质版校对稿寄回给本部(地址:510180广州市越秀区惠福西路进步里2号之6《实用医学杂志》编辑部)。

    作者:本刊编辑部 刊期: 2014年第12期

  • 上皮性卵巢癌组织中MEG3基因异常甲基化状态及其临床意义

    目的:研究在上皮性卵巢癌组织中母系表达基因(MEG3)基因启动子异常甲基化状态与其临床病理特征的关系。方法:运用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)法,检测47例卵巢癌组织(蜡块标本)及15例正常卵巢组织(蜡块标本)中MEG3基因启动子甲基化状态,分析其甲基化状态与临床病理特征的关系。结果:MEG3基因甲基化发生率在卵巢癌组织(42.6%)中高于正常卵巢组织(13.3%),差异有统计学意义(P=0.035);年龄>60岁患者MEG3基因甲基化发生率略高于年龄≤60岁,差异无统计学意义(P>0.05);临床Ⅲ~Ⅳ期患者MEG3基因甲基化的发生率低于临床Ⅰ~Ⅱ期,差异无统计学意义(P>0.05);MEG3基因甲基化阳性率在卵巢癌不同病理分级和组织学类型间未见明显差异(P>0.05)。结论:MEG3基因异常甲基化可能与上皮性卵巢癌发生相关,与其临床病理无关。

    作者:赵琴;李剑琦;周艳清;谭琳玉;李娟;生秀杰 刊期: 2014年第12期

  • 眼眶木村病1例

    患者男,62岁,因发现左眼眶部肿物1年于2013年10月23日入院,患者于1年前无明显诱因下发现左眼眶有一肿块,无明显疼痛,伴双侧颌下、左侧颈部淋巴结肿大。病程中无皮肤红肿,无眼胀、眼痛,1年来肿块逐渐长大,全身情况良好。查体:左眼上睑不能完全抬举,眼球向鼻下方移位,眼球活动轻度受限,眼球外上方可触及一肿块,质软,边界不清,无压痛,双侧颌下各触及一肿大淋巴结,左侧颈前可触及数个小肿大淋巴结。

    作者:朱海平;邓德勇 刊期: 2014年第12期

  • 乌司他丁提前给药对H9c2细胞氧化应激损伤的影响

    目的:观察乌司他丁(ulinastatin,UTI)提前给药对过氧化氢(H2O2)诱导H9c2心肌细胞损伤的影响。方法:采用体外培养的H9c2心肌细胞进行实验,通过500μmol/L H2O2与细胞共孵育24 h 建立心肌细胞氧化应激损伤模型。实验分为正常对照组(NC组)、氧化应激模型组(H组)、乌司他丁组(U组)和乌司他丁提前给药组(UH 组)。实验处理后,吉姆萨染色倒置显微镜观察各组细胞形态差别,MTT 法测定细胞活力,流式细胞技术检测细胞凋亡情况,测定各组细胞超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA),及检测培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)活力。结果:与NC组比较,H组细胞出现明显损伤,细胞存活率显著降低、细胞凋亡率升高,SOD活力降低,MDA含量增加,培养液上清中LDH活力明显升高(P<0.01)。而与H组比较,UH组细胞存活率升高,细胞凋亡率降低,SOD活力升高,MDA含量及LDH 活力降低(P<0.01)。结论:乌司他丁提前给药对H2O2诱导性H9c2细胞氧化应激损伤有一定的保护作用。

    作者:欧阳惠碧;屠伟峰;郄文斌;曹明;张宏斌;戴建强 刊期: 2014年第12期

  • 腹腔镜下保留盆腔自主神经广泛子宫切除术的疗效

    目的:探讨腹腔镜下保留盆腔自主神经广泛子宫切除术(laparoscopic nerve sparing radical hysterectomy,LNSRH)的可行性及其临床疗效。方法:选择60例宫颈癌(Ⅰb1~Ⅱa1)患者,分为研究组(LNSRH)和对照组(LRH),各30例。观察术中出血量、手术时间、手术范围、住院时间以及术后膀胱、直肠、性生活恢复情况等指标。结果:60例患者手术均顺利完成,LNSRH组手术时间为(264.8±48.8)min,住院时间为(13.2±3.8)d,与LRH组(218.9±28.6)min,(18.5±6.2)d 比较,差异有统计学意义(P<0.05);两组术中出血量、切除淋巴结数目、宫旁及阴道切除范围、术中术后并发症等比较,差异无统计学意义(P>0.05);LNSRH组术后近期和远期膀胱、直肠功能恢复显著好于 LRH 组(P<0.05),性生活功能恢复方面没有显著差异(P>0.05)。术后随访平均(18.4±4.6)个月,无失访病例。结论:LNSRH是安全、可行、疗效肯定的术式,对促进术后膀胱、直肠功能恢复具有重要意义。

    作者:邓丽;韦业平;邵世清;张丽滢 刊期: 2014年第12期

  • 本刊对如何鉴定重复发表论文的声明

    近年来,学术论文主要研究内容重复发表的现象越来越多。这里说的重复发表指的是将同一研究的课题的结果总结成多篇论文,先后投寄到多个杂志发表的现象。在我们日常的来稿中,有一部分论文属于这种情况。国外学者将这种稿件称为“腊肠切片”(salami slicing),而国内学者将这类论文叫做“变相重复发表”。实际上这也是属于一稿多投的一种。本刊结合国内外学会及专家的意见,将“重复发表”稿件定义为:(1)作者单位相同,或大部分作者相同,包括第一作者相同或者不同、作者排名顺序相同或者不同;(2)主要的研究方法相同;(3)半数以上内容(包括资料或讨论部分)相同;(4)结论类似。

    作者:本刊编辑部 刊期: 2014年第12期

  • 请选用规范医学名词(二)

    自1985年正式成立了全国自然科学名词审定委员会后,先后公布了多批医学名词,但不少作者在来稿中仍采用已淘汰的旧名。请作者在投稿时注意选用正名。

    作者:本刊编辑部 刊期: 2014年第12期

  • 脐血血红蛋白电泳在新生儿地中海贫血筛查中的应用

    目的:对新生儿脐血进行血红蛋白电泳分析,探讨血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的临床应用价值。方法:收集2012年1月至2013年12月广东省21个地市妇幼保健院送检新生儿脐带血标本14032例。采用全自动毛细管电泳分析系统进行血红蛋白电泳检测。血红蛋白电泳筛查结果阳性的标本进一步进行基因检测。结果:血红蛋白电泳共检出异常例数为1445(11.07%),其中检出疑似α-地中海贫血1075例(7.66%),疑似β-地中海贫血478例(3.41%),疑似异常血红蛋白127例(0.91%)。α-地中海贫血基因诊断确诊为967例,与血红蛋白电泳筛查符合率为89.95%;β-地中海贫血基因诊断确诊为404例,与血红蛋白电泳筛查符合率为82.96%。通过PCR结合反向斑点杂交法或DNA测序后,疑似异常血红蛋白标本中确诊124例,其中Hb E 38例、Hb Q 28例、Hb D 21例、Hb New York 19例、Hb J 13例、Hb G 5例。结论:脐血血红蛋白电泳是新生儿地中海贫血及异常血红蛋白病有效的筛查方法。

    作者:郭浩;杜丽;唐斌;骆明勇;秦丹卿;王奕霞 刊期: 2014年第12期

  • 不同注射方法对罗库溴铵恢复时相的影响

    目前临床麻醉中罗库溴铵的应用越来越广泛,但对其研究多集中于全麻插管时的效能[1],而关于不同给药方法对其恢复时相影响的报道仍然较少。本研究通过比较TCI ,持续泵注及单次给药的方法对罗库溴铵恢复时相及残余作用的影响,探索佳的给药途径,为进一步提高麻醉质量,增加麻醉安全性提供参考。

    作者:张益;王钊;朱宇航;刘德行;张鸿磊 刊期: 2014年第12期

  • 本刊优秀作者可升格为本刊审稿专家

    本刊审稿专家主要通过以下几个主要渠道组建:1.由本刊编辑部向有关医院科研管理部门发出公函,请医院科研管理部门按本刊限定名额推荐,后由本刊核定相关资料。2.在知名医学网站(如:丁香园,各医学院及医院的院内论坛)发贴报名,然后,本刊对网上报名的人员进行严格审察,特别是对报名者以往发表论文的情况进行逐一核实。

    作者:本刊编辑部 刊期: 2014年第12期

  • 降钙素原在小儿急性阑尾炎诊治中的临床应用

    目的:评价血清降钙素原(procalcitonin, PCT)在小儿急性阑尾炎诊断与治疗中的应用。方法:对206例急性阑尾炎患儿与41例非感染性疾病患儿,采用免疫荧光法定量检测血清PCT。结果:阑尾炎组的PCT值高于与非感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。急性阑尾炎按病理分为穿孔组、化脓组和单纯组,两两比较,组间差异均有统计学意义(P <0.05);但单纯性阑尾炎组与非感染组间差异无统计学意义(P >0.05)。PCT指导组与经验指导组患儿年龄、阑尾炎类型、术前及术后4 d PCT浓度、住院时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:PCT对小儿急性阑尾炎及其类型的术前诊断有较高的价值,并对临床合理选择治疗方案有指导价值。采用PCT指导治疗小儿急性阑尾炎可以降低抗生素等级,并取得与传统经验治疗相似疗效。

    作者:雷斌;戚雯琰 刊期: 2014年第12期

  • 急诊使用中心静脉导管治疗原发性自发性气胸的疗效

    目的:评价在急诊科使用中心静脉导管胸腔闭式引流治疗原发性自发性气胸的临床疗效。方法:2009年1月至2011年10月在我院急诊科留观的原发性自发性气胸患者80例,随机分为中心静脉导管接水封瓶闭式引流组(水封瓶组,n =39)和中心静脉导管接负压瓶闭式引流组(负压瓶组,n =41)。比较两组治疗的有效率、肺复张时间、平均住院时间、平均治疗费用、并发症等指标。电话随访2年内患者复发情况并比较两组复发率。结果:负压瓶组治疗有效率、复发率、并发症发生率(分别为90.2%、26.8%、14.6%)与水封瓶组(分别为92.3%、23.1%、15.4%)相比,均无统计学差异(P>0.05);负压瓶组肺复张时间、平均留院时间、平均治疗费用[分别为(33.4±8.5)h、(38.7±10.1)h、(1047.5±98.7)元]均明显低于水封瓶组[分别为(49.5±10.3)h、(56.2±12.6)h、(1356.3±109.6)元](均P<0.05)。结论:在急诊科使用中心静脉导管闭式引流治疗原发性自发性气胸疗效满意,中心静脉导管接负压瓶治疗更能缩短疗程,降低治疗费用,适合在临床推广。

    作者:郑常龙;符永玫;周伟雄;张永标 刊期: 2014年第12期

  • 腭侧阻生尖牙闭合式助萌与开放式助萌后牙周状况的差异分析

    目的:探讨腭侧阻生尖牙开放式助萌和闭合式助萌后,尖牙及邻牙牙周状况的差异。方法:选择30例单侧上颌腭侧阻生尖牙患者,将其随机分为两组,每组15例,一组采用开放式助萌法,另一组采用闭合式助萌法。去除矫治器3~6个月后进行牙周状况的检查。结果:开放组与闭合组的阻生尖牙及邻牙的牙周袋深度、龈退缩量、牙龈出血指数、角化龈宽度和骨支持量的差异均无统计学意义。但是开放组阻生尖牙的牵引萌出时间及正畸治疗时间要短于闭合组,差异有统计学意义。结论:开窗方法的选择对助萌后腭侧阻生尖牙和邻牙的牙周状况影响不大。

    作者:李玉如;杨雅娴;乔爱丽;姚海亮;宋宇宁 刊期: 2014年第12期

  • 妊娠期高血压疾病的病因分析

    妊娠期高血压疾病[1](hypertensive disorders complicating pregnancy,HDCP)是妊娠期妇女特有的疾病。据报道国外此病的发病率为7.0%~12.0%,我国的发病率为9.4%。HDCP 以妊娠晚期妇女(20周后)出现高血压、蛋白尿、水肿等特征并伴有全身多脏器的功能损害,严重者可以出现抽搐、昏迷、脑血管出血、胎盘早剥、心力衰竭及 DIC ,甚至死亡,但多数患者病理改变在分娩后随即消失。 HDCP 是产科常见的合并症之一,严重影响孕产妇及围产儿的健康。是孕产妇和围产儿发病及死亡的主要原因之一。近年来,国内外专家对 HDCP 的病因和发病机制做了大量研究。迄今为止该病的病因及明确的发病机制仍然不明,是多因素相互共同作用所致[2]。包括免疫损伤、胎盘浅着床、胎盘血管重铸障碍、血管内皮细胞受损、营养缺乏、遗传因素及胰岛素抵抗等。许多资料表明内分泌的生物活性物质各种细胞因子如瘦素、内皮素、性激素等都参与血压的调节。

    作者:李迎春;郭遂群;张易;万波;陈天萌;马从顺 刊期: 2014年第12期

  • 合肥地区不同类型乙型肝炎病毒感染者病毒基因型和基因亚型分布及其临床意义

    目的:研究合肥市不同类型乙型肝炎病毒(HBV)感染者血清中 HBV 基因型和亚型分布情况及其临床意义。方法:收集192例合肥市HBV感染者血清,提取HBV 基因组DNA ,通过对PCR 扩增的HBV产物电泳及其酶切后电泳片段大小确定其基因型及其基因亚型。结果:192份血清中,82例B型,其中57例为Ba亚型,8例为Bj亚型,17例为非Ba/Bj亚型;99例为C 型,其中8例为C1亚型,56例为C2亚型,35例为非C1/C2亚型;11例为B型与C型混合感染,其中6例为Ba与C2亚型混合感染,2例为Bj与C2型混合感染,2例为Ba与非C1/C2亚型混合感染,1例为非Ba/Bj亚型与C2亚型混合感染。不同类型HBV感染者中基因型分布有差异,在肝硬化和肝细胞癌患者中C 型所占比例较高,无症状携带者中B型所占比例较高。在HBeAg 阳性和阴性感染者中,HBV基因型分布差异也有统计学意义。结论:该市HBV感染者中,以Ba和C2亚型占优势,C基因型可能与肝硬化和肝细胞癌的发生有关。

    作者:徐素仿;徐元宏 刊期: 2014年第12期

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主办:广东省医学情报研究所