学术投稿

大鼠9L脑肿瘤干细胞样细胞的分离培养及鉴定

肖宗宇;陈晓娟;徐智敏;徐如祥

关键词:脑肿瘤, 肿瘤干细胞, 脑肿瘤干细胞, CD133
摘要:目的:从9L大鼠胶质瘤细胞系中培养、分离脑肿瘤干细胞样细胞,观察其生长方式和分化特征。方法:运用无血清培养基对大鼠9L胶质瘤细胞进行培养,对分离获得的悬浮生长的脑肿瘤细胞球运用免疫组织化学法和流式细胞法检测CD133和Nestin 表达情况,用血清诱导其分化,采用免疫荧光细胞化学染色方法检测分化后GFAP、NSE、Galc的表达情况。结果:9L胶质瘤细胞在无血清培养基中,呈悬浮状态生长,形成悬浮肿瘤克隆球,经免疫组织化学染色及流式细胞仪检测,大部分贴壁9L 细胞及9L 肿瘤球细胞均表达CD133和Nestin。将9L肿瘤球转入含血清培养基分化7 d 后,能产生表达神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的子代肿瘤细胞。结论:大鼠9L胶质瘤细胞系中存在具无限增殖、自我更新及多向分化潜能的肿瘤干细胞样细胞,但CD133和Nestin不能作为9L肿瘤干细胞的特异性标志物,9L脑肿瘤干细胞仅是CD133阳性细胞中的一部分。
实用医学杂志相关文献
  • 年龄和性别对椎动脉颈段扭曲的影响

    目的:探讨年龄和性别因素对椎动脉扭曲的影响。方法:选择本院住院患者,进行磁共振颅颈动脉增强扫描( CE-MRA )检查,并收集患者年龄、性别、生活习惯等信息,记录血脂、血糖、尿酸等生化指标,比较椎动脉扭曲组和对照组相关危险因素是否存在差异,并进行多因素回归分析。结果:164例患者入组,试验组55例,对照组109例。两组间年龄、性别、高血压、高密度脂蛋白、第6椎体厚度比较差异存在统计学意义,多因素回归分析显示仅有年龄、女性性别是椎动脉扭曲的独立危险因素,散点图线性拟合提示女性50岁以后椎动脉扭曲系数高于男性。结论:绝经期女性及高龄是椎动脉颈段扭曲的独立危险因素。

    作者:居克举;曹化;杜长春;程冠亮 刊期: 2014年第23期

  • 超声心动图监测在先天性心脏病介入封堵治疗中的临床价值

    目的:探讨经胸超声心动图(TTE)在导管介入治疗先天性心脏病的临床疗效。方法:术前TTE检查筛选57例先天性心脏病患者,在TTE 检查配合 X 线监测下行 Amplatzer 封堵器介入治疗术,其中23例房间隔缺损(ASD),29例室间隔缺损(VSD),4例动脉导管未闭(PDA),1例VSD合并ASD。结果:52例患者均成功封堵,封堵术后即刻、1周内、1个月、3个月、6个月、1年随访TTE观察封堵效果,封堵器位置良好,封堵器周边无残余分流。3例ASD及2例VSD 未成功封堵。结论:TTE在先天性心脏病封堵术前病例的选择、术中监测封堵器释放、术后疗效评价均有重要的临床应用价值。

    作者:邓劲松;郑权辉;邓素雅;王洁;张春丽;曾广绥;石挥扬 刊期: 2014年第23期

  • 肺癌患者胰岛素抵抗水平变化及意义

    目的:探讨肺癌患者胰岛素抵抗水平的变化及意义。方法:氧化酶法及放射免疫法测定81例肺癌患者(肺癌组)和81例健康人(对照组)的胰岛素抵抗水平。结果:肺癌组胰岛素抵抗水平高于对照组(P <0.05);不同病理类型及 TNM 分期的肺癌患者胰岛素抵抗水平比较差异无统计学意义(均 P>0.05);有远处转移肺癌患者胰岛素抵抗水平与无远处转移肺癌患者比较差异有统计学意义(P<0.05);多因素回归分析显示,高胰岛素抵抗指数与肺癌发生远处转移相关(OR=2.19,P =0.013)。结论:胰岛素抵抗是肺癌发生的一个危险因子。胰岛素抵抗水平越高提示肺癌患者具有越高的侵袭性和转移性。

    作者:赵文飞;李宏云;郭迪 刊期: 2014年第23期

  • 可疑丁二磺酸腺苷蛋氨酸相互作用引起呕吐1例

    患者男,38岁,因“发现HBV-M 阳性10余年,身目尿黄2周”于2014年2月22日入院,自觉恶心欲呕,肝区隐痛,少许腹胀,查体:全身皮肤黏膜重度黄染,腹软,轻压痛,无反跳痛,肝区无叩痛。诊断:HBeAg阳性慢性乙型肝炎(重型)。入院后完善相关检查,并予以抗病毒及对症支持治疗,具体用药见表1。

    作者:谢奕丹 刊期: 2014年第23期

  • 达托霉素治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染21例

    近年来,革兰阳性球菌成为社区、院内获得性感染的重要致病菌,尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌致病菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)的出现,给临床治疗带来较大困难,临床医生需要一种疗效肯定、安全性高的抗菌药用于治疗MRSA 感染。达托霉素(daptomycin)是一种新型的环脂肽类抗生素,主要针对多重耐药的革兰阳性病原菌,对VRE、MRSA、MRSCoN、PNSSP 均有很好的抑菌效果[1]。为此,笔者采用达托霉素治疗 MASA 菌血症,取得一定疗效,现报告如下。

    作者:徐时方;徐建国;侯赛妙;周菲美斯 刊期: 2014年第23期

  • 两种术后镇痛方式对老年髋关节置换术患者炎性因子表达的影响

    目的:研究等效视觉模拟评分下静脉自控镇痛(PCIA)及硬膜外自控镇痛(PCEA)对老年患者髋关节置换术(包括全髋关节及半髋关节,且人工髋关节的假体均为非骨水泥型关节)后血清炎性因子表达水平的影响。方法:选择髋关节置换术后老年患者(年龄>60岁),根据接受PCIA和PCEA随机分为两组,术后12 h进行视觉模拟评分(VAS)评价镇痛效果,评分≤2的患者纳入本次研究,每组30例。各组随机抽取15例,在术后12 h 留取血液标本,分别采用ELISA、RT-PCR 及 Western blot 方法检测患者血清炎性因子的mRNA 及蛋白表达水平。结果:PCEA 组患者血清 TNF-α和 IL-6的 mRNA 及蛋白表达水平低于 PCIA 组(P <0.05),IL-10的mRNA及蛋白表达水平高于PCIA组(P <0.05);TGb-β血清蛋白表达水平高于PCIA组(P <0.05);两组间IL-8 mRNA及蛋白表达水平差异无统计学意义(P >0.05)。结论:PCEA较PCIA可以更好地促进抗炎因子表达,抑制促炎因子表达,维护炎性因子平衡。

    作者:鲁义;屠伟峰;尧新华;陆建华 刊期: 2014年第23期

  • 青少年抑郁症患者脑白质的弥散张量成像研究

    目的:应用基于纤维束示踪的空间统计分析(tract-based spatial statistcs, TBSS)方法,探讨青少年抑郁症患者大脑白质的变化。方法:收集年龄、性别、教育程度匹配的35例首发青少年抑郁症患者(抑郁组)和40例健康青少年(对照组),并对其进行全脑的 DTI 扫描,应用 TBSS 的方法比较两组间各向异性分数(fractional anisotropy, FA)、轴向扩散率(axial diffusivity,AD)、径向扩散率(radial diffusivity,RD)和平均扩散率(mean diffusivity, MD)的差异。结果:抑郁组脑白质微结构异常,与对照组相比,胼胝体体部的FA值降低(P <0.01),RD、MD值升高(P <0.01),AD值无明显变化(P >0.05)。抑郁症组胼胝体体部FA值与抑郁严重程度呈负相关(P <0.01)。结论:脑白质异常参与青少年抑郁症的发生过程,这些改变发生在疾病发生过程的早期。

    作者:毛宁;王滨;徐聪;刘泉源;王光彬 刊期: 2014年第23期

  • 心脏X综合征患者运动平板试验表现及临床意义

    心脏X 综合征是指患者具有典型劳力型心绞痛症状,运动试验(TET)阳性,而冠状动脉造影(CAG)正常,麦角新碱诱发试验阴性从而排除大的冠脉痉挛,因而又称为微血管性心绞痛。客观的阳性参数主要为运动平板试验,本文分析了心脏 X 综合征患者运动平板试验表现,以探讨其临床意义。

    作者:熊望琼 刊期: 2014年第23期

  • AESKU抗dsDNA抗体检测试剂盒的临床应用

    目的:探讨AESKU抗dsDNA抗体检测试剂盒(间接免疫荧光法)的临床应用价值。方法:用AESKU试剂与欧蒙试剂对242例样本进行双盲、平行检测,计算阳性符合率、阴性符合率、总符合率、Kappa系数,并进行Kappa 一致性检验和配对卡方检验。结果:AESKU试剂与欧蒙试剂的阳性符合率为90.48%,阴性符合率为94.94%,总符合率为93.39%; Kappa =0.8541,两种试剂的检测结果高度一致(P <0.05);配对卡方检验字2=0.125,结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论:AESKU试剂与欧蒙试剂具有等效性和很高的符合率,操作简便快速、结果清晰易读,适合临床广泛应用。

    作者:吴炜霖;林德伟;陈曲波;刘瑞萍;曹楠楠 刊期: 2014年第23期

  • 细胞块在宫颈液基细胞学疑难病例中的应用价值

    目的:探讨细胞块在宫颈细胞疑难病例中的应用价值。方法:宫颈细胞标本应用液基细胞学技术(TCT)制片诊断,疑难病例制备细胞块并行HE 染色及p16INK4A、Ki67染色,将单纯TCT(TCT组)与TCT结合细胞块HE和免疫细胞化学诊断(联合组)进行比较。结果:p16INK4A、Ki67在26例反应性不成熟鳞状化生细胞中均无表达,在22例 HSIL 阳性表达分别为81.8%(18/22)、90.9%(20/22);在30例绝经的萎缩上皮中均不表达,萎缩背景中的19例HSIL/SCC均阳性表达。TCT组和联合组的符合率分别为70.1%和95.9%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:疑难宫颈TCT病例行细胞块制作、HE 染色及p16INK4A和Ki67染色,可提高宫颈癌筛查的准确性。

    作者:吴共发;郑娜芬;叶梓莹;曾宇婷;黄绮亭;区瑞章;林俊汕;李海刚 刊期: 2014年第23期

  • P-糖蛋白在大鼠癫痫持续状态表达的动态变化及其意义

    目的:研究戊四氮诱导的大鼠癫痫持续状态模型( status epilepticus , SE )中, P-糖蛋白( P-glycoprotein , P-gp )在72 h 内表达的动态变化,为下一步抑制P-gp 的表达选定佳检测时间点。方法:用免疫组化、RT-qPCR 和 Western blot 检测建模后不同时点(0、3、6、12、24、48、72 h)海马组织中 P-gp 表达的变化情况。结果:免疫组化结果:海马组织中P-gp蛋白在SE 24 h组的平均光密度值为0.3251±0.0082,比对照组增加(P <0.05),SE 48 h 组的平均光密度值为0.3963±0.0168,显著高于对照组(P <0.01);RT-qPCR 结果:MDR1a 基因在 SE 24 h 组比对照组增加(P<0.05),SE 48 h 组显著高于对照组(P<0.01);Western blot 结果:P-gp 蛋白在 SE 48 h 组比对照组增加(P <0.05)。这些结果显示,SE 模型中海马组织内P-gp 表达在24 h 后开始升高,并在48 h 达高峰。结论:SE 后48 h P-gp 的表达达高峰,此时可能为减少SE后产生耐药的佳检测时间。

    作者:余涵;邓镇;罗淼珊;赵元淑;谢柳;陈丽;朱晓琴;胡景鑫;雷水生 刊期: 2014年第23期

  • 患者吸烟情况与冠脉旁路移植术后早期结果的相关性

    目的:探讨患者吸烟情况与冠脉旁路移植术(CABG)术后早期结果的相关性。方法:对我院2010年1月至2012年12月间接受CABG的患者共489例行回顾性分析,根据患者术前是否吸烟分为吸烟组(n =276),不吸烟组(n =213)。根据术前戒烟情况将吸烟组分为戒烟亚组(n =81),未戒烟亚组(n =195)。结果:(1)吸烟组患者体质指数、高血压、高脂血症、心肌梗死病史、合并COPD史显著高于不吸烟组,吸烟组平均年龄、左心室射血分数显著低于对照组(均 P<0.05),戒烟亚组与未戒烟亚组上述指标比较无统计学差异(P >0.05)。(2)去除 COPD 患者分析发现,不吸烟组患者术后肺部并发症、呼吸机辅助时间显著低于吸烟组,戒烟亚组患者术后肺部并发症、呼吸机辅助时间显著低于未戒烟亚组(均 P <0.05)。(3)Logistic多因素分析显示患者住院期间肺部并发症与患者吸烟情况相关(P<0.05)。结论:吸烟可以影响 CABG 患者早期预后,患者术后肺部并发症增加,呼吸机辅助时间延长,应鼓励 CABG 患者术前及早戒烟,降低术后并发症。

    作者:魏利娟 刊期: 2014年第23期

  • 反复囊袋清创对经静脉途径拔除导线治疗起搏器囊袋感染的影响

    目的:探讨反复囊袋清创对起搏系统感染后经静脉途径导线拔除术的影响。方法:收集我中心2008年1月至2013年12月收治的因起搏器囊袋感染行经静脉途径导线拔除术患者共43例。根据导线拔除术前清创次数不同分为2组,其中术前清创0~1次(非反复清创组)患者23例,术前清创≥2次(反复清创组)患者20例。比较两组手术成功率、手术耗时、术后发热率、导线头端培养阳性率的差异。结果:反复清创组较非反复清创组导线完全拔除成功率低(75% vs.100%, P <0.05),手术耗时长[(3.8±1.13)h vs.(2.63±0.69)h, P<0.01],术后发热率高(35%vs.4.3%, P<0.05),导线头端培养阳性率高(50%vs.4.3%, P<0.01)。结论:导线拔除是彻底治疗起搏器囊袋感染的安全、有效方法。起搏器囊袋感染患者反复清创会增加导线拔除难度,增加感染扩散的风险。

    作者:蓝荣芳;毛丽娟;吉文庆;狄文成;李晓宏;徐标;余洪松;徐伟 刊期: 2014年第23期

  • Narcotrend的临床应用与舒适化医疗

    随着计算机和脑电分析技术的发展,无创脑电监测在临床麻醉中越来越受重视和普及,目前主要用于全身麻醉中,而在非全身麻醉,如神经阻滞麻醉中应用脑电监测指导镇静深度则不多。舒适医疗的含义是让患者在安全、无痛苦的状态下进行医学检查和治疗,已成为当今医务人员和患者一种新的追求。

    作者:秦再生 刊期: 2014年第23期

  • 肝血管瘤的治疗进展

    肝血管瘤是肝脏常见的良性肿瘤,被认为是一种先天性疾病,由肝内大量的动静脉畸形血管团组成,通常无明显临床症状[1]。肝血管瘤的发病率约0.4%~7.3%,尸检的发现率约3%~20%,影像学(超声、CT、MRI )诊断肝血管瘤的敏感性可高达97%~100%[2]。肝血管瘤可发生于任何年龄阶段,通常发生在30~50岁,约80%发生于女性[3]。约20%肝血管瘤大于4 cm,10%~29%表现为多发肝血管瘤[4]。肝血管瘤被检查出后倾向处于静止或无进展状态,在早期的一项前瞻性研究[5],47例患者首次发现肝血管瘤后1~6年间仅有1例患者出现肝血管瘤体积增大。然而,虽然是一种良性疾病,肝血管瘤可快速生长出现破裂、瘤内出血、凝血障碍等,此时需要对肝血管瘤进行干预,目前,治疗方法包括手术切除、介入栓塞、射频消融、药物治疗等[6],但目前对肝血管瘤的治疗策略尚未达成共识,缺乏各治疗方法之间的高质量比较研究,本文旨在对肝血管瘤的各种治疗方法包括手术以及新近发展的微创治疗方法进行综述,以利于临床治疗肝血管瘤的决策分析。

    作者:康振;肖恩华 刊期: 2014年第23期

  • 人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化的研究

    目的:探讨人脐带间充质干细胞在无血清培养条件下体外分化为胰岛素分泌细胞的效果。方法:分离培养人脐带间充质干细胞,在无血清培养液中添加尼克酰胺、活化素A、肠促胰岛素类似物-4、肝脏生长因子、胃泌素对其进行诱导分化,对分化后的细胞进行鉴定,检测胰岛素分泌情况。结果:分离的细胞具有典型的间充质干细胞特征,形态为成纤维状,高表达间充质干细胞标志物CD59、CD44及CD29,不表达造血干细胞标记物 CD34。经过诱导分化后,免疫细胞化学结果显示分化组细胞高表达胰岛素促进因子(PDX)-1、C肽、胰高血糖素,RT-PCR结果显示分化组高表达PDX-1与胰岛素,激素测定结果显示分化后的细胞能够分泌胰岛素,分化后的细胞具有良好的增殖活性。结论:人脐带间充质干细胞在无血清培养条件下能够分化为胰岛素分泌细胞,是细胞治疗糖尿病的良好移植来源。

    作者:柴树宏;鲍艳春 刊期: 2014年第23期

  • 腰硬联合麻醉下右美托咪定自控镇静与Narcotrend值的相关性分析

    目的:探讨右美托咪定自控镇静与Narcotrend值的相关性。方法:选择下肢择期手术患者40例,腰硬联合麻醉阻滞平面固定后,采用电子泵予患者右美托咪定自控镇静,电子泵参数为:负荷量2 mL+背景输注量1.5 mL/h+单次剂量0.5 mL+锁定时间20 s。记录患者 HR、MAP、按压次数、有效次数、OAA/S镇静评分和NI值。结果:在T4点时,患者达到适宜镇静状态,在T4~T9点OAA/S评分维持3~4分。从T5点开始,患者NI值表现出明显下降,于T7点后维持相对稳定NI值(60~70)。 OAA/S 评分和NI值达到平台期的时间分别为(7.5±1.8)、(13.1±3.4) min,OAA/S 评分的1、2、3、4分大致分别与 NI 值的95~100、90~94、65~89、40~64相对应,相关系数为0.58。年轻组和年老组的NI值出现明显下降的时间分别为(10.2±1.6)、(14.4±2.2) min。在T5~T9时间点,年轻组的NI值显著低于年老组。结论:腰硬联合麻醉下右美托咪定自控镇静深度与Narcotrend值具有相关性。

    作者:张兴安;钱传沐;邵伟栋;徐波;屠伟峰 刊期: 2014年第23期

  • 腹腔镜肾盏憩室盏颈缝扎术治疗肾盏憩室伴结石

    2006年6月至2013年6月,笔者对13例肾盏憩室伴结石患者施行超声引导下腹腔镜肾盏憩室盏颈缝扎术,效果良好,汇报如下。

    作者:陈雷;林宁殊;殷民;许建挺;张鹏 刊期: 2014年第23期

  • 大肠腺癌、溃疡性结肠炎肠黏膜组织PAR-2的表达及临床研究

    目的:研究蛋白酶激活受体2(PAR-2)在大肠腺癌、溃疡性结肠炎(UC)肠黏膜组织中的表达及在其发病机制中的作用。方法:确诊的大肠腺癌患者38例,UC患者42例,对照组46例,均内镜下活检肠黏膜组织,应用组织病理学及免疫组织化学方法分析组织中PAR-2的表达情况。结果:大肠腺癌组及 UC 重度、中度组患者病变肠黏膜中PAR-2表达高于对照组(P<0.01)。治疗前大肠腺癌组PAR-2阳性表达均高于UC中度、轻度组(P<0.01),且高于UCⅢ级~Ⅳ级组及Ⅰ级~Ⅱ级组(P<0.05);大肠腺癌组与UC组患者病变处PAR-2表达明显高于非病变处(P<0.01);大肠病变治疗前后两者表达比较差异有显著性(P<0.05);PAR-2表达与UC病变程度及病理分级呈正相关(P<0.05)。结论:PAR-2过度表达与大肠腺癌及UC的发生、发展密切相关,有望为大肠癌的早期诊疗提供新的思路。

    作者:马新;郑秀娟;李时光;张晓蕾;周平;刘彤 刊期: 2014年第23期

  • E2F1与肿瘤代谢重编程的研究进展

    细胞周期相关转录因子 E2F-1(E2F transcription factor 1)是细胞周期相关转录因子 E2F 家族成员之一, E2F1的活化可将信号传至核内,推动细胞周期由G1期进入到 S 期,是细胞周期进程中重要的转录因子。近年来研究发现,E2F1除调控细胞周期外也参与肿瘤细胞代谢重编程,在肿瘤的发生、发展中起到重要作用,本文综述了 E2F1与肿瘤代谢重编程特别是有氧糖酵解在肿瘤中的作用以及两者之间的关系的研究进展。

    作者:徐梦婕;黄耀;谢国然;陈晓婷;秦映芬 刊期: 2014年第23期

实用医学杂志

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主管:广东省卫生厅

主办:广东省医学情报研究所