学术投稿

人增生性瘢痕成纤维细胞的改良培养和鉴定

林尊文;徐少宏;游敏;刘德伍;钟世镇

关键词:成纤维细胞, 增生性瘢痕, 体外培养
摘要:目的:探讨并建立一种简便易行、培养周期短的成纤维细胞改良培养方法.方法:采用组织块贴壁结合胰蛋白酶消化法体外分离培养人增生性瘢痕成纤维细胞.倒置相差显微镜下观察培养的成纤维细胞形态,进行细胞鉴定,作生长曲线观察细胞增殖能力.结果:采用组织块贴壁结合胰蛋白酶消化法体外分离人增生性瘢痕成纤维细胞,细胞培养周期短.分离培养的成纤维细胞波形蛋白呈阳性表达.传代培养的成纤维细胞增殖能力强.结论:采用组织块贴壁结合胰蛋白酶消化法体外分离培养法可以较快、较好地获得稳定培养的增生性瘢痕成纤维细胞,为其形成机制及防治研究提供实验基础.
实用医学杂志相关文献
  • 成人肾先天性发育不良伴巨输尿管1例

    患者女,58岁.体检B超发现盆腔包块2周,于2011年3月21日入我院妇产科,查体下腹压痛,B超见宫后方116 mm × 24 mm,无回声区,示盆腔包裹性积液.3月24 日行腹腔镜探查见右侧腹膜后肿物约12 cm × 2 cm,直肠出血,血肿,遂转入外科,经进一步行盆腔彩超、CT及肾分泌性造影检查示:右肾未见显影;左肾积水,左输尿管扩张:右盆腔腹膜后囊性包块转入泌尿外科,于4月21日行盆腔包块切除术,术中见盆腔腹膜后蜡肠样囊性包块,下端连膀胱,上端经分离达右肾,右肾萎缩仅拇指大小.

    作者:尚士宣;肖月英;赵晓丹 刊期: 2011年第24期

  • 小肠黏膜下层复合骨髓间充质干细胞修复兔骨缺损的实验研究

    目的:探讨猪小肠黏膜下层(SIS)复合兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)在异体兔体内成骨的可行性.方法:选2月龄新西兰大白兔12只,制备双侧桡骨1.5 cm标准骨缺损模型.左侧植入复合BMSCs的SIS(实验组):右侧植入单纯SIS(对照组).术后观察动物一般情况,4周后摄双侧桡骨X线片,并截取骨缺损中段标本行HE染色观察.结果:两组动物术后饮食及日常活动基本正常;伤口无红肿、溢脓.X线片观察,实验组骨缺损处有长条状新生骨形成,密度与正常骨相同,新生骨桥接骨缺损;对照组骨缺损无骨形成征象,骨缺损处密度与周围软组织影相近.组织学观察:实验组骨缺损处有新骨形成,骨组织中可见血管腔及不规则髓腔样结构:对照组骨缺损处仅为胶原瘢痕组织,无骨组织形成.结论:SIS复合BMSCs在同种异体体内修复骨缺损是可行的.

    作者:王军胜;陈兴礼;王栓科;胡小吾 刊期: 2011年第24期

  • 梅州客家人群非饮食因素与胃癌的关系

    目的:探讨广东省梅州市客家人群非饮食因素与胃癌关系.方法:使用统一的调查问卷收集51例胃癌病例及54例对照组非饮食方面的流行病学资料,进行Logistic回归分析.结果:(1)单因素分析表明.家庭收入低、10年前饮用河水/沟塘水/水库水、情绪易低落、慢性胃炎史、家族消化道肿瘤史、被动吸烟及污染性工作与胃癌发生呈正相关,而使用抽油烟机、高文化程度则与胃癌发生呈负相关.(2)多因素非条件Logistic回归结果表明慢性胃炎病史(OR=35.329,95%CI:4.896~154.920)、污染性工作(OR=4.714,95%CI:1.853~10.480)、高文化程度(OR=0.455,95%CI:0.195~1.063)进入回归模型.结论:应进一步扩大样本量明确该结论,为因地制宜地开展针对该地区人群胃癌的病因预防提供理论基础.

    作者:杨宇辉;丘波;邹浩元;周铭;杨宇扬;赖春凤 刊期: 2011年第24期

  • miR-221在胃癌组织中的表达及其临床病理意义

    目的:分析miR-221在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征及预后的关系.方法:分别取96例胃癌手术标本及相应癌旁组织,提取总RNA,采用茎环逆转录实时定量PCR方法检测miR-221在胃癌及其癌旁正常组织中的表达量,并分析其与临床病理特征及预后的关系.结果:与癌旁组织比较,miR-221在胃癌组织中表达显著上调(P<0.001);miR-221的表达与肿块大小、微血管密度(MVD)、侵袭深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、P53及Ki-67的表达显著正相关(P<0.001);而与年龄、性别、肿瘤部位、生长方式、细胞分化程度及nm23的表达无关(P>0.05).Pearson相关分析显示.-△△Ct与肿瘤直径及MVD存在线性相关(r=0.721,P<0.001;r=0.725,P<0.001).Log-Rank检验显示miR-221表达水平与3年生存率显著相关(P<0.001).结论:miR-221在胃癌组织中表达上调,并与肿块大小、MVD、侵袭深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、P53及Ki-67的表达显著正相关.

    作者:王荣明;王胜;张文波 刊期: 2011年第24期

  • 异种脱细胞神经移植物修复坐骨神经缺损的实验研究

    目的:观察异种脱细胞神经修复坐骨神经缺损的效果,探寻修复周围神经的新型移植物.方法:分别取家犬、新西兰大白兔臂丛神经及SD大鼠坐骨神经,对其适当切修使直径、长度相近,对获取的神经进行低渗-脱细胞处理,得到脱细胞神经移植物.32只大鼠均制造人为坐骨神经缺损,随机均分为4组,A组,家犬脱细胞神经移植修复;B组,兔脱细胞神经移植修复;C组,大鼠脱细胞神经移植修复;D组,未修复组.修复后进行神经运动和感觉功能的检测.结果:修复组大鼠坐骨神经功能恢复均显著优于未修复组,而各修复组间无明显差异.结论:异种脱细胞神经可取得与同种脱细胞神经修复周围神经缺损相似的效果.

    作者:何红云;邓仪昊;朱建华;张本斯 刊期: 2011年第24期

  • 胚胎干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞的研究进展

    糖尿病是由于胰岛β细胞损坏导致胰岛素分泌不足或自身对胰岛素抵抗等原因所致的一种代谢紊乱性疾病,截止目前并没有有效的根治办法.胚胎干细胞(embryonic stems cell,ESC)是从囊胚期的内细胞团或早期胚胎的原始生殖细胞中分离得到的一种在体外具有高度增殖能力和多向分化潜能的细胞[1].在体外诱导因子的作用下可以定性诱导分化为胰岛素分泌细胞.随着胚胎干细胞技术的不断成熟,以及对其诱导分化为胰岛素分泌细胞现存问题的不断探究,糖尿病的根治将成为可能.

    作者:黄家菊;陈洋;余树民 刊期: 2011年第24期

  • 黄嘌呤氧化还原酶的表达与胃癌侵袭转移的关系

    目的:探讨胃癌中黄嘌呤氧化还原酶(XOR)的表达及其与胃癌侵袭转移的关系,评估其在胃癌中的意义.方法:采用SP免疫组化技术,检测264例胃癌组织标本中XOR的表达水平,研究XOR表达与临床病理参数以及5年生存率之间的关系.结果:XOR在胃癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁组织(P<0.01);XOR表达与肿瘤分期、浸润深度、淋巴结状况、肿瘤大小有密切关系(P<0.05).XOR高表达者5年生存率为47%,XOR低表达者为22%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.001).XOR低表达者预后不良.结论:XOR可能是胃癌具有侵袭生物学特性的一个新的标志物.

    作者:洪士开;陆云飞;陈正红 刊期: 2011年第24期

  • 早期与延迟支气管镜代胸腔镜治疗老年自发性气胸的对比研究

    目的:通过比较早期与延迟支气管镜代胸腔镜(代胸腔镜)治疗老年自发性气胸的疗效及费用,找到一种更适合老年自发性气胸的内科治疗方法.方法:对2007年6月至2010年6月南华大学第二附属医院呼吸科就诊的32例老年自发性气胸患者进行研究,分为早期组(18例)和延迟组(14例),分别于第3天及第8天进行代胸腔镜治疗,观察住院时间、费用及治疗成功率、并发症等近期疗效,并随访1年观察气胸复发次数.结果:该组无死亡病例.均治愈出院,随访1年均无复发病例.延迟组的住院时间、费用及治疗并发症均高于早期组,以上各指标在两组间的差异均有统计学意义(P<0.05).结论:早期支气管镜代胸腔镜治疗,适合有合并症的老年自发性气胸患者,可以缩短住院时间、降低住院费用及治疗并发症.

    作者:陈林;谭小武;何振华;丁罗生 刊期: 2011年第24期

  • 手汗症治疗术后心率变异性以及心脏变时性功能的观察分析

    原发性手汗症是一种植物神经功能紊乱性疾病,即支配手部汗腺的交感神经兴奋性异常升高,导致不受外界温度影响的手部汗腺的异常分泌亢进.我们观察了手汗症患者治疗中心率变异性(HRV),以及治疗前后心脏变时性功能的变化,来评估胸交感链阻滞手术治疗对患者心脏植物神经功能状态的影响.

    作者:孙小平;孙娴超;黄冰 刊期: 2011年第24期

  • 甘草酸二铵致过敏1例

    患者男,26岁.因面部、躯干及四肢反复起红斑、风团伴瘙痒1周,于2011年5月就诊.1周前,患者无明显诱因面部、躯干、四肢开始出现大小不一红斑、风片,瘙痒较明显,未诊治,近2日,瘙痒明显加重,即来就诊.查体:体温36.5℃.

    作者:周立奉;路荣;刘海峰 刊期: 2011年第24期

  • 单向可调控的放视网膜下液法在视网膜脱离手术中的应用

    目的:探讨单向可调控巩膜针孔放视网膜下液的方法的可行性及手术效果.方法:采用单向可调控巩膜针孔放液方法,与传统巩膜切开脉络膜穿刺放液法进行比较,分治疗组和对照组观察249只眼的手术效果.结果:治疗组手术的一次成功率和总成功率分别为94.56%(139眼)、98.64%(145眼).对照组手术的一次手术成功率和总成功率分别为82.35%(84眼)、88.24%(90眼).经统计学处理,两组的一次手术成功率差异有统计学意义(X2=8.331 2,P<0.01);总成功率差异有统计学意义(X2=10.4014,P<0.01).治疗组术后视力≤0.1共30眼(20.41%),≥0.2共117眼(79.59%).对照组术后视力≤0.1共32眼(31.37%),≥0.2共70眼(68.63%).两组的术后视力恢复≥0.2者差异有统计学意义(X2=3.871 3,P<0.05).结论:此方法较传统放液方法操作简便,相对安全,并发症少,效果满意.

    作者:高翔 刊期: 2011年第24期

  • 中期妊娠引产孕妇硬膜外阻滞分娩镇痛时机的探讨

    目的:探讨中期妊娠引产孕妇分娩镇痛的合适时机.方法:选取2006年1月至2011年3月于孕14~27周在我院行分娩镇痛的中期妊娠引产初产孕妇共313例,按给予分娩镇痛的不同时机随机分为宫口未开组97例、宫口开大1 cm组132例和宫17开大2 cm组84例.并选择同期拒绝分娩镇痛的中期妊娠引产孕妇154例作为对照组.观察孕妇的疼痛、总产程、出血量、产后出血等情况.结果:所有接受分娩镇痛的产妇疼痛均有明显缓解(P<0.05),分娩时疼痛感,宫口未开组较宫口开大1cm组和宫口开大2cm组明显,但低于对照组(P<0.05).宫口未开组总产程长于宫口开大1cm组、宫口开大2 cm组和对照组,比较均有统计学差异(P<0.05);宫口开大1cm组、宫口开大2 cm组和对照组之间总产程无统计学差异(P>0.05).出血量、产后出血比例宫口未开组大于宫口开大1 cm组、宫口开大2 cm组,但小于对照组(P<0.05),宫口开大1cm组、宫口开大2 cm组之间无统计学差异(P>0.05).结论:在宫口开大1cm时给予镇痛,镇痛效果满意,且不影响产程,产时出血量减少,是中孕引产的一个合适时机.

    作者:任为;肖梅;谭志华 刊期: 2011年第24期

  • 诱导升压介入时间对大鼠局灶型脑缺血的影响

    目的:探讨实验性脑缺血后诱导升压介入早晚对其疗效的影响.方法:通过线栓法制作大鼠大脑中动脉梗死模型,随机分为A组(梗死30 min后行苯肾上腺素升压治疗).B组(60 min后升压),C组(90min后升压),D组(120 min后升压)和E组(对照组,无升压).缺血2.5 h后再通闭塞动脉,应用激光多普勒血流仪记录缺血区血流变化,再灌注24 h后评定梗死体积.结果:诱导升压可显著提高缺血区血流灌注(A、B、C和D组均高于E组,P均<0.05),减小脑梗死体积(A、B、C和D组均小于E组,P均<0.05);而且梗死后,诱导升压开始时间越旱,效果越明显(脑血流.A组优于D组,P<0.05:脑梗死体积,A组小于C组和D组,C组小于D组,P均<0.05).结论:大鼠大脑中动脉急性闭死后,采用苯肾上腺素升压可显著改善缺血区血流灌注,降低脑梗死体积,且诱导升压开始时间越早,效果越明显.

    作者:张合亮;马廉亭;刘美利 刊期: 2011年第24期

  • 羟基喜树碱对人胚肺成纤维细胞增殖与凋亡的影响

    目的:探讨羟基喜树碱(HCPT)对体外培养的人胚肺成纤维细胞(HFL1)增殖与凋亡的影响.方法:常规培养HFLl细胞,以未加HCPT的HFL1为对照组,以不同浓度梯度(0.008-32 mg/L)HCPT处理的HFL1作为实验组,采用MTT法检测HCPT干预24、48、72h后HFL1的增殖情况:光学显微镜观察干预后细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;透射电镜下观察细胞凋亡的改变.结果:HCPT对HFL1有明显的抑制作用,在一定程度上呈现剂量-时间依赖性:HCPT处理组HFL]凋亡率较阴性对照组显著升高(F=399.51,P<0.01),并呈药物浓度依赖性.HCPT 0.5 mg/L作用HFL1 48h,透射电镜下可见细胞缩小,核仁消失,染色质浓聚的凋亡状态.结论:HCPT在体外通过抑制细胞增殖和促进细胞凋亡来抑制HFL1的生长.

    作者:姜瑞姣;郑洁;刘良徛;李琳;徐淑睿 刊期: 2011年第24期

  • 锁定钢板在青少年胫骨远端三平面骨折治疗中的应用

    目的:探讨锁定钢板治疗青少年胫骨远端三平面骨折的临床疗效.方法:回顾分析我院自2009年1月至2010年6月,C臂透视下采用锁定钢板内固定法治疗75例青少年胫骨远端三平面骨折患者,选择小腿前外和(或)内侧弧形小切口,通过锁定钢板楔形尾端插入式固定骨折两端,骨折部位均获得解剖复位.结果:75例患者获得9个月的随访,患肢皮缘无坏死、切口无感染、无大血管损伤,内固定无松动或断裂,关节无卡压,骨折处无畸形愈合,患肢无短缩、无关节退变等并发症发生,临床治愈率达100%.结论:胫骨锁定钢板的高度稳定性及创伤小等优点,必将提高青少年胫骨远端三平面骨折外科治疗的临床治愈率.

    作者:杨俊;白杨;聂军;蔡伟斌;叶汉深;洪加津;陈大军;郭新辉 刊期: 2011年第24期

  • 西洛他唑对强噪声所致豚鼠耳蜗血流及听阈偏移的影响

    目的:探讨在强噪声条件下,磷酸二酯-3A(phosphodiasterase-3A,PDE3A)特异性抑制剂西洛他唑(cilostazol)对豚鼠耳蜗血流及听阈偏移的影响.方法:将40只雄性豚鼠随机分为4组(每组10只):对照组、无噪声给药组、强噪声不给药组,强噪声给药组.强噪声组给予4 KHz的倍频窄带噪声(105 dB SPL)处理13 h.处理后立即腹腔注射西洛他唑(10mg/kg),分别测定处理后各组动物的耳蜗血流速度及ABR阈值.结果:与对照组相比较,强噪声不给药组的血流速度在处理后60、90、120 min时均显著性下降(P<0.01):与强噪声不给药组比较,强噪声给药组的血流速度在处理后30、60、90、120 min时均显著性增高(P<0.05).与对照组相比较,强噪声不给药组在处理后ABR阈值显著性高于对照组(P<0.05);与强噪声组不给药组相比较,强噪声组给药组ABR阔值要显著性降低(P<0.01).结论:西洛他唑能有效改善耳蜗的血流状况及恢复强噪声所致豚鼠的听阅偏移

    作者:黄敏齐;张建国 刊期: 2011年第24期

  • 全反式维甲酸治疗相关分化综合征的发生与治疗情况分析

    目的:探讨急性早幼粒细胞性白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)患者应用全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导治疗发生分化综合征(differentiation syndrome,DS)的治疗情况.方法:回顾性分析101例新诊治APL患者DS的发生、危险因素与临床结果.结果:共22例(21.8%)患者发生DS,其中轻、重度DS各11例(10.9%).重度DS患者的病死卒相对较高.DS的发生高峰为诱导治疗的第1周内.wBC>10×109/L和异常的血肌酐水平分别为轻、重度DS发生的独立危险因素.结论:早期认知DS并迅速予以糖皮质激素对于DS的治疗十分关键;重度DS病死率高,其相关危险因素值得进一步探讨.

    作者:宋奎;许晓军;黄贵年;郭子文;何慧清;刘启发 刊期: 2011年第24期

  • TFPI-2基因CpG岛甲基化与胰腺癌的关系

    目的:检测胰腺癌组织组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因CpG岛甲基化的状态,并分析甲基化改变与胰腺癌的关系.方法:应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测45例胰腺癌组织、相应癌旁组织中TFPI-2基因的甲基化状态.结果:胰腺癌组织中TFPI-2基因的甲基化阳性率为71.1%(32/45),明显高于癌旁组织的31.1%(14/45)(P<0.01).8例正常胰腺组织中均未发生甲基化.TFPI-2基因甲基化阳性率还与胰腺癌的-临床分期、组织分化程度、肿瘤直径有相关性(P<0.05).结论:TFPI-2基因在胰腺癌组织中出现异常甲基化,可能与胰腺癌的发生发展关系密切.

    作者:郑浩;汤志刚;黄强;陈炯 刊期: 2011年第24期

  • pEGFP-PTEN的构建及其在子宫内膜癌细胞HEC-1B中的表达

    目的:利用分子克隆方法构建增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)与抑癌基因PTEN(phosphatase and tensin homologue)融合表达载体,为研究PTEN对子宫内膜癌细胞生物学作用奠定基础.方法:应用RT-PCR(reversing transcription polymerase chain reaction)方法获得正常人胚肾细胞293T中PTEN片段,先克隆至pMD18-T载体,对其进行测序分析,双酶切后与pEGFP-N2载体连接构建pEGFP-N2-PTEN重组质粒,用琼脂糖凝胶电泳检测.将子宫内膜癌细胞分3组,第一组转染pEGFP-N2空载体,第二组转染pEGFP-N2-PTEN重组质粒,第三组未转染做空白对照,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白在细胞内的表达情况,采用Western blot法检测PTEN蛋白的表达.结果:pMD18-T-PTEN质粒测序与GenBank中人PTEN编码区(CDS)序列一致,pEGFP-N2-PTEN重组质粒经双酶切后用琼脂糖凝胶电泳检测到两个大小分剐为1.4 kb和4.7 kb的片段,且在子宫内膜癌中表达成功,Western blot检测出质粒转染组中PTEN蛋白质高表达.结论:成功构建了pEGFP-N2-PTEN重组真核表达质粒,在HEC-1B细胞中高表达,为子宫内膜癌的基因治疗研究提供理论基础.

    作者:黄婷婷;王萌;彭小刚;曹青 刊期: 2011年第24期

  • 置管节律冲洗联合早期肠内营养治疗重症急性胰腺炎的效果

    目的:探讨节律冲洗法联合早期肠内营养(EN),简称二联法,对于促进重症急性胰腺炎(SAP)患者早期痊愈的临床可行性.方法:2010年7月至2011年5月入院的64例SAP患者随机分为试验组(n=32)和对照组(n=32),其中对照组采用传统的一般治疗方法,试验组则在此基础上加用二联法治疗,观察两组的临床痊愈时间(d)、同期(7、14 d)营养学指标前白蛋白(PAB)和转铁蛋白(TRF)水平及ARDS、MODS等并发症的发生率(%).结果:试验组患者的平均痊愈时间、营养学指标恢复时间均早于对照组而并发症的发生率则低于对照组(P<0.05),有统计学意义.结论:二联法优于传统的治疗方法.

    作者:于颖剑;崔伟英;高鹏志;底国营;许建多 刊期: 2011年第24期

实用医学杂志

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主管:广东省卫生厅

主办:广东省医学情报研究所