学术投稿

两种核酸提取方法对 HBV DNA 定量检测结果的影响

孙嘉峰;王建伟;黄毅

关键词:乙型肝炎病毒, 磁珠法, 煮沸法, 灵敏度
摘要:目的:研究磁珠法和煮沸法两种核酸提取方法对血浆乙型肝炎病毒(HBV)DNA定量检测结果的影响。方法采用磁珠法和煮沸法同步处理106例“小三阳”或“大三阳”乙型肝炎患者血浆,通过荧光定量聚合酶链反应(PCR)定量检测,比较两种方法的阳性率、定量检测结果并分析两者的关系。结果106例乙型肝炎患者血浆经磁珠法和煮沸法处理后的 HBV DNA阳性率分别为81.1%和71.7%,其中“小三阳”患者的 HBV DNA阳性率分别为76.9%、66.7%,“大三阳”患者的阳性率分别为92.8%、85.7%;磁珠法中HBV DNA荧光定量 PCR测得其载量为(3.93±2.43)log10 copies/mL ,而煮沸法为(3.35±2.76) log10 copies/mL ,且“小三阳”和“大三阳”患者标本经磁珠法提取均明显高于煮沸法提取的PCR检测结果;上述结果经统计学分析差异均有意义(P<0.05);此外,两种核酸提取方法处理条件下的HBV DNA载量呈较好的线性关系(R2=0.8693,P<0.05)。结论磁珠法提取核酸阳性率高,检测灵敏度高,值得实验室推广,可用于临床诊断。
国际检验医学杂志相关文献
  • 科玛嘉念珠菌培养基鉴别念珠菌的系统评价

    目的:评价科玛嘉念珠菌培养基鉴别常见致病性念珠菌的准确性。方法检索MEDLINE、EMBase、中国生物医学文献数据库(CBM )、中文科技期刊全文数据库(CSJD)、中国期刊全文数据库(CJFD)等数据库,并通过其他途径全面收集文献,采用诊断性试验准确性质量评价工具(QUADAS)标准评价文献质量,用Meta‐Disc软件制作综合受试者工作特征(SROC)曲线,评价科玛嘉显色培养基鉴别常见致病性念珠菌的准确性。结果纳入符合标准的文献7篇。7篇文献均报道了科玛嘉念珠菌培养基检测白色念珠菌的准确性,总灵敏度和总特异度分别为98.3%、98.8%,SROC曲线下面积(AUC)为0.9980;6篇文章报道了科玛嘉念珠菌培养基检测热带念珠菌的准确性,总灵敏度和总特异度分别为92.5%、99.8%,A U C为0.9983;5篇文章报道了科玛嘉念珠菌培养基检测光滑念珠菌的准确性,总灵敏度和总特异度分别为98.3%、98.7%,A U C为0.9968。结论科玛嘉培养基能快速鉴定临床常见念珠菌,鉴定结果准确可靠。

    作者:邢献国;刘辉;孟岩 刊期: 2015年第18期

  • 利用室间质量评价结果提高医学实验室检验质量

    室间质量评价(EQA )是判定实验室能力的活动,实际上是指为确保实验室维持较高的检测水平而对其效能进行考核、监督和确认的一种验证活动[1]。在EQA中出现EQA成绩小于80%时,要求实验室尽快寻找和分析出现不满意结果的原因,开展有效的整改活动,并将整改活动的材料保存[2]。但实验室对EQA结果的分析与利用并不理想[3],为分析而分析,只停留在对EQ A成绩不满意的分析上,后续的整改措施并没有跟进。对成绩大于或等于80%,但整体偏离靶值一侧的结果,实验室往往不进行分析,查找偏离的原因。本文通过对EQA成绩小于80%、成绩大于或等于80%,但整体偏离靶值一侧的结果(以下称 EQA成绩不满意)进行分析,查找原因,然后针对原因制定了合适的改进措施,达到提高临床标本检验结果准确性的目的。

    作者:董家书 刊期: 2015年第18期

  • 神经外科病原菌分布与抗菌药物敏感性分析

    目的:分析神经外科病原菌分布和抗菌药物敏感性,为抗菌药物的合理使用提供实验室参考依据。方法选取西安交通大学第一附属医院2012年1月至2014年9月神经外科送检标本进行病原菌分离、培养,采用全自动微生物分析仪进行菌种鉴定,采用仪器法和纸片法检测其对抗菌药物的敏感性,用WHONET5.6软件进行统计分析。结果共分离非重复病原菌1319株,其中革兰阳性菌482株(36.6%),革兰阴性菌797株(60.4%),真菌40株(3.0%)。病原菌主要分离自痰液、脑脊液、尿液和血液标本,以金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌为常见。分离的革兰阳性菌与革兰阴性菌均呈不同程度的耐药,金黄色葡萄球菌仅对利奈唑胺、万古霉素敏感率为100.0%,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率已高于80.0%,肺炎克雷伯菌出现对碳青霉烯类抗菌药物的耐药现象。尚未发现耐碳青霉烯类抗菌药物的大肠埃希菌,铜绿假单胞菌对哌拉西林/他唑巴坦敏感率达到90.0%以上。结论神经外科感染以革兰阴性菌为主,但金黄色葡萄球菌为常见,多重耐药菌与泛耐药菌日趋增多,临床合理使用抗菌药物进行抗感染治疗至关重要。

    作者:答嵘;王伟;雷金娥;马晨 刊期: 2015年第18期

  • 重症医学科针对五年制检验专业学生教学改革与学科建设中存在的问题与对策

    重症医学科是医学院校急危重症抢救教学的临床培训基地,急危重症抢救的理论知识来自实验,对学生后续的相关临床课程学习具有重要的影响[1]。医学检验专业在教学内容和课时设置中对临床专业理论与实验课时安排较少,导致检验专业学生在重症医学科学习过程中存在理论知识不足,实际工作能力较薄弱等问题。重症医学教学改革目的是通过培养学生严谨的思维方式和独立解决问题的能力,使检验专业学生充分掌握重症医学抢救的操作技能,巩固危重症急救的理论知识,将理论与实际工作进行充分结合。重症医学教学工作随着国外新理念和新技术的引进,过去教师为主、教材为主的教学模式对当前快速发展的急危重症抢救教学已显得明显落后,重症医学科为了能探索出将临床工作与教学更紧密结合的新的教学模式,现结合本科室近10年带教检验专业学生临床教学工作经验,讨论对重症医学教学工作的改革与思考。

    作者:贾民;胡兰英;王学涵 刊期: 2015年第18期

  • 妊娠晚期孕妇肝功能检测指标参考区间的初步探讨

    目的:探讨妊娠晚期孕妇血清肝功能指标的变化及正常参考区间,并分析其临床意义。方法选取该院2013年7月至2014年6月妊娠晚期孕妇4659例,健康非孕女性3089例,采用全自动生化分析仪检测血清谷氨酸氨基转移酶(ALT )、丙氨酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TP)、清蛋白(Alb)、前清蛋白(PA)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)、γ‐谷氨酰基转移酶(GGT)、总胆汁酸(TBA)、天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶(m‐AST)、碱性磷酸酶(ALP)水平。结果与健康非孕女性比较,妊娠晚期孕妇血清ALT、AST、TP、Alb、PA、TBIL、DBIL、IBIL、GGT水平均降低,而血清ALP、m‐AST、TBA水平均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论妊娠晚期孕妇肝功能指标明显不同于非妊娠女性,各临床实验室应建立妊娠各期肝功能指标参考区间,有助于评价产妇营养及肝功能状态,做好孕期保健工作。

    作者:冯强;李德明;陈淑琴;张月香 刊期: 2015年第18期

  • 两种胃蛋白酶原检测方法比较及偏倚评估

    目的:探讨在胃蛋白酶原(PG)定量检测方法中,化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)试剂和乳胶颗粒增强免疫比浊法(PETIA)试剂对标本检测结果的一致性,为证实采用PETIA试剂检测PG的可靠性提供实验依据。方法参考美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9‐A2文件的要求,以PETIA为待评方法,CMIA为参比方法,挑选出已经通过胃镜确诊的不同胃萎缩状态下的患者标本96份,分别用CMIA和PETIA试剂盒双向检测,并记录胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、PGⅠ与胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)比值(PGⅠ/PGⅡ)的检测结果,对两组结果进行方法比对和偏倚估计。结果 CMIA和PETIA试剂检测PGⅠ与PGⅠ/PGⅡ的预期相对偏倚在方法的线性范围内可以被接受。结论应用PETIA试剂检测标本PGⅠ、PGⅡ的结果可以被接受。

    作者:李萌;吴诗琴 刊期: 2015年第18期

  • 血清淀粉样蛋白 A 与C反应蛋白在小儿手足口病早期诊断中的临床应用价值

    目的:探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)、C反应蛋白(CRP)在小儿手足口病(HFMD)早期诊断的临床应用价值。方法采用胶体金渗滤法对81例HFMD患儿(HFMD组)和125例健康儿童(健康对照组)血清/血浆标本进行SAA、CRP检测,同时收集血细胞检测参数进行比较分析,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析诊断效能。结果 HFMD组血清SAA、CRP水平、SAA/CRP比值及白细胞(WBC)计数均高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。SAA的ROC曲线下面积(AUC)为0.921,高于SAA/CRP比值(0.846)、CRP(0.728)和WBC计数(0.721),差异均有统计学意义(P<0.05)。SAA对小儿 HFMD的早期诊断效能较CRP、WBC计数和SAA/CRP比值高。结论 SAA作为新的感染指标可以更有效地筛查出HFMD ,为临床医生提供更敏感的早期辅助诊断依据,值得临床广泛应用。

    作者:赵学芹;梁绮华;黄家良;杨红玲 刊期: 2015年第18期

  • 原发性肝癌患者 ABO血型分布相关性分析研究

    目的:探讨原发性肝癌(PLC )患者ABO血型的分布情况。方法选取该院2014年1月1日至12月31日确诊为PLC并行血型鉴定的5570例患者纳入PLC组,另选取同期体检行血型鉴定的健康者856例纳入健康对照组,对血型分布进行比较分析。结果 PLC患者ABO血型分布中男性和女性均以A型为主,分别占31.93%、32.54%;男女ABO血型构成比较,差异无统计学意义(χ2=0.537,P>0.05);健康对照组与 PLC组 ABO血型分布比较,差异有统计学意义(χ2=8.133,P<0.05)。结论 PLC患者的血型分布主要以A型为主。

    作者:杨孝亮;张晓峰;王坤;童林;周小琴;王爱华;高春芳 刊期: 2015年第18期

  • 安阳地区首次无偿献血志愿者与互助献血者血液检测结果分析

    目的:分析安阳地区首次无偿献血志愿者与互助献血者的血液检验结果,以提高临床对不同类型献血者特点的认知,提高输血安全性。方法选取2013年1~12月安阳地区31363例首次无偿献血志愿者(首次献血组)及1046例互助献血者(对照组),比较血液检测情况,并分析影响献血者血液质量的相关因素。结果首次献血组不合格1160例,不合格率为3.70%;对照组不合格17例,不合格率为1.62%;两组不合格率比较差异有统计学意义( P<0.05)。不合格血液检验结果比较显示,首次献血组中不合格献血者丙氨酸氨基转移酶(ALT)、丙型肝炎病毒抗体(抗‐HCV)、人类免疫缺陷病毒抗体(抗‐HIV)、乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)及梅毒阳性的构成比分别为37.67%、12.59%、8.79%、31.38%、9.57%,而在互助组中分别为29.41%、17.65%、5.88%、35.30%、11.76%,且两组ALT 阳性献血者构成比比较差异有统计学意义( P<0.05)。两组不合格献血者性别、年龄、工种分布上比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论首次无偿献血志愿者血液检验不合格发生率较高,需要加强输血前的筛查和管理,以保证输血安全。

    作者:陈艳萍;武丽娟 刊期: 2015年第18期

  • 2014年某院铜绿假单胞菌的分布及耐药情况

    目的:分析汕头市中心医院铜绿假单胞菌的分布及耐药情况,为医院临床合理选用抗菌药物和控制院内感染提供建议。方法以铜绿假单胞菌ATCC27853作为标准菌株,按照《全国临床检验操作规程》通过Phoenix‐100型全自动细菌鉴定药敏系统对2014年该院送检的各类标本分离菌进行鉴定及药敏试验,使用WHONET5.6软件分析铜绿假单胞菌的分布、分离率及药敏结果。结果临床共分离铜绿假单胞菌240株,主要分离自痰液标本,共187株,占78.1%;主要来自重症监护室,共41株,占17.1%;抗菌药物中氨曲南耐药率高,其次为替卡西林/克拉维酸、环丙沙星,未发现对多黏菌素E耐药的菌株。结论该院铜绿假单胞菌耐药情况较为严重,对不同抗菌药物存在耐药,应尽量减少抗菌药物的使用,根据细菌的药敏情况慎重给药。

    作者:周文虹;陈金连;官煜彬 刊期: 2015年第18期

  • 大肠埃希菌致新生儿感染分析

    目的:分析新生儿感染大肠埃希菌的耐药性及治疗效果,探索预防措施。方法选取2011年1月至2013年12月该院收治的大肠埃希菌感染新生儿20例,对分离的20株大肠埃希菌进行药物敏感性分析,并依据药物敏感性分析结果进行治疗。结果20株大肠埃希菌医院内感染占80.0%;对多数第3代头孢类抗菌药物高度耐药,对第4代头孢类抗菌药物的敏感率达70%以上,对碳青霉烯类亚胺培南、美洛培南高度敏感,敏感率均为100.0%;超广谱β‐内酰胺酶(ESBLs)阳性率为60.0%;经治疗后16例痊愈,4例死亡,治愈率为80.0%。结论医院内感染是新生儿期大肠埃希菌感染的主要途径,病死率高,应引起临床高度重视,且临床还应严格消毒灭菌,减少侵袭性操作以减少医院内感染的发生。

    作者:刘婧;扈会整;任超杰;汪建军;吴斌艳;任伟娟;文杏 刊期: 2015年第18期

  • 《临床血液学检验》实验教学改革初探

    临床血液学检验是本科检验教学中的一门重要的专业课程,它是以血液学的理论为知识体系,以检验的实验方法为手段,重点针对血液病检验诊断的理论与实践联系密切的学科[1]。作为一门实践性很强的课程,本门课程的实验课教学在整个教学中也就成为了学生掌握专业理论知识,提高实践技能,培养创新能力的重要基础。由于现代医学的发展,对从事血液学检验的检验医师有了更高的要求,要求他们不仅要具备全面和扎实的临床与检验基础知识,还要配合临床医生完成血液病诊治[2]。为了提高教学质量,培养出合格的医学检验人才,笔者在多年实验教学工作的基础上,结合课程的性质,对《临床血液学检验》实验课程的教学内容和方法等进行了初步的改革探索,取得了良好的效果。

    作者:吴韦铷;赵宸;潘静;张晓丽;司维柯;杨忠 刊期: 2015年第18期

  • 2012~2014年某院烧伤患者易感病原菌及耐药性分析

    目的:了解烧伤患者感染病原菌的常见种类及其对常用抗菌药物的耐药性,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法回顾性分析2012年1月至2014年12月140例烧伤患者创面分泌物分离培养病原菌的分布及药敏结果。结果共分离病原菌152株,其中革兰阴性菌占59.2%,以铜绿假单胞菌、奇异变形杆菌及鲍曼不动杆菌为主;革兰阳性菌占34.2%,以金黄色葡萄球菌、溶血葡萄球菌及粪肠球菌为主;真菌占6.6%。药敏结果显示,分离的病原菌绝大多数呈多重耐药。结论对烧伤患者进行病原菌培养、鉴定及相应的药敏分析有助于指导临床合理使用抗菌药物,有效控制感染。

    作者:方小敏;宫娜娜;郭兆旺;陈红涛;李克学;曾涛 刊期: 2015年第18期

  • 中性粒细胞CD64在儿童获得性肺炎中的表达及临床意义

    目的:分析中性粒细胞表面标志物CD64和C反应蛋白(CRP)水平在儿童获得性肺炎诊断中的意义。方法选取2013年3月至2014年12月该院儿科收治细菌感染患儿43例(细菌组)和支原体感染患儿42例(支原体组),采集患儿血液标本进行CD64和CRP检测,并进行比较分析。结果细菌组患儿CD64指数及CRP水平均高于支原体组,差异均有统计学意义(t=9.325,P=0.018;t=9.097,P=0.019)。结论儿童细菌感染后,体内中性粒细胞表面标志物CD64明显升高,可以作为小儿细菌感染的诊断依据,同时CRP也能够起到辅助诊断的作用。

    作者:张洪福;何洲;邱振华;黄之文 刊期: 2015年第18期

  • 间接免疫荧光与实时荧光 PC R检测小儿支原体肺炎

    目的:对比间接免疫荧光(IFA)与实时荧光聚合酶链反应(PCR)检测小儿支原体肺炎的效果。方法选取137例临床诊断的肺炎支原体(M P )感染患儿,按年龄划分为<1岁(35例)、1~<5岁(69例)、5~15岁(33例),采集血液标本和咽拭子,分别采用IFA和实时荧光PCR进行检测。同时对纳入的所有患儿行支原体肺炎的常规治疗,以治疗有效为判断M P感染的标准,按年龄段统计分析两种方式检测的阳性符合率。结果<1岁和1~<5岁患儿实时荧光PCR检测阳性符合率高于IFA ,5~15岁患儿IFA检测阳性率高于实时荧光PCR ,差异均有统计学意义(P<0.05);而两种方式检测总阳性符合率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IFA与实时荧光PCR都可作为检测MP的有效方式,但检测效果在不同年龄段存在一定的差异,建议对5岁以下患儿采用实时荧光PCR进行检测,5岁及以上患儿则可选择IFA检测,以提高检测的准确度,更好地为临床用药提供指导。

    作者:王健容;何旭;饶福光;朱春婵 刊期: 2015年第18期

  • 甲胎蛋白变异体L2在唐氏综合征筛查中的应用

    目的:探讨甲胎蛋白(AFP)变异体 L2(AFP‐L2)在孕妇唐氏综合征筛查中的意义,为其在临床应用提供依据。方法选取250例健康孕妇及22例唐氏综合征孕妇采集血清标本,采用功能磁球分离捕获AFP‐L2,采用时间分辨荧光免疫法检测AFP及AFP‐L2水平并计算AFP‐L2百分率(AFP‐L2%)。结果唐氏综合征孕妇血清AFP水平[(20.2±4.2)ng/mL]低于健康孕妇血清AFP水平[(46.7±19.9)ng/mL],差异有统计学意义(P<0.05);唐氏综合征孕妇血清AFP‐L2%高于健康孕妇,差异有统计学意义(P<0.05)。结论检测孕妇血清AFP水平及AFP‐L2%的变化可作为唐氏综合征筛查的一项指标。

    作者:俞菁;何丽梅;胡荷宇;章莉;陈复华;龚波 刊期: 2015年第18期

  • 万古霉素相关肾毒性的主动监测研究

    目的:探讨万古霉素相关肾毒性主动监测的可行性和关键性。方法选取2010年7月至2013年7月经静脉注射万古霉素的住院患者139例,采取相关药品不良事件主动监测和评估警示体系,对提示有万古霉素阳性事件患者进行评价。结果139例患者中共有9例出现肾损害,肾功能不全代偿期、肾功能不全失代偿期、肾衰竭期、肾衰竭终末期的发生率分别是44.44%、22.22%、22.22%、11.11%。且血清肌酐在133μmol/L以上、血清肌酐较基线增加50%、血肌酐较基线增加44μmol/L的阳性预警率分别为55.56%、22.22%、22.22%,其在人工关联性评价结果中分别为19.18%、19.18%、56.54%。结论应根据患者病情等进行个体化万古霉素使用设置。

    作者:孙春琼;晏梅红 刊期: 2015年第18期

  • 双糖铁试验改良安瓿法试验研究

    目的:对鉴定细菌常用的克氏双糖铁琼脂(KIA)培养基试管法进行改良,为实验室鉴定肠杆菌科细菌提供方便、准确的鉴定方法。方法配制试剂,分装至安瓿管中,高压灭菌备用;对标准菌株、质控菌株、临床分离菌株共534株进行试验,与试管法进行对比,根据常规方法判断结果。结果安瓿法与试管法结果完全一致。结论用安瓿法进行K IA试验,简单方便,结果准确,试剂用量小,且能室温长期保存,该方法可以推广应用。

    作者:刘刚;魏莲花;邹凤梅;杨永清 刊期: 2015年第18期

  • 2007~2013年苏州地区住院儿童肺炎支原体感染流行特点

    目的:了解苏州地区2007~2013年呼吸道感染住院儿童肺炎支原体(M P )感染情况及流行病学特点。方法采集2007~2013年苏州大学附属医院34332例呼吸道感染住院患儿的痰液标本,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测痰标本中M P。结果2007~2013年苏州地区呼吸道感染患儿的 M P总感染率为19.01%,年检出率分别为5.45%、6.95%、14.06%、18.51%、4.85%、25.94%、28.68%,其中2012、2013年M P感染率高于其他年度,差异有统计学意义( P<0.05)。女性患儿M P感染率(21.01%)高于男性患儿(17.81%),差异有统计学意义( P<0.05)。<1岁、1~<4岁、4~<7岁、7~14岁患儿M P感染率分别为8.88%、18.05%、35.28%、52.39%,差异有统计学意义( P<0.05)。春季、夏季、秋季、冬季M P感染率分别为15.96%、28.38%、21.71%、11.01%,差异有统计学意义( P<0.05)。结论 M P是导致儿童呼吸道感染的常见病原体,其感染具有性别、年龄和季节差异。夏、秋季节,尤其在7、8月,7~14岁儿童为M P感染高危人群,应着重做好M P感染的预防工作。

    作者:花盛浩;邵雪君;何萍;金莹;季健;徐俊 刊期: 2015年第18期

  • 868例β2-微球蛋白结果分析

    目的:分析β2‐微球蛋白(β2‐MG)在心脑血管等疾病中的表达,及其与同型半胱氨酸(Hcy)的相关性。方法回顾性分析2012年1~12月收治的127例明确诊断的患者标本,按标本来源患者的年龄、病种比较分析β2‐M G水平,同时分析β2‐MG与 Hcy的相关性。结果随着年龄的增加,血清β2‐MG水平逐渐增高,各年龄段患者β2‐MG水平不完全相同,差异有统计学意义(F=9.49,P=0.0001)。糖尿病、心脑血管疾病患者β2‐MG水平均有高表达,不同疾病患者β2‐MG水平不完全相同,差异有统计学意义( F=0.33,P=0.8946)。β2‐M G 升高患者 Hcy 也明显升高,112例β2‐M G 升高患者血清β2‐M G 水平为(3264.2±1278.8)ng/mL ,其Hcy水平为(18.63±13.42)μmol/L ,但β2‐MG与Hcy无明显相关性,r=0.0848(t=0.8936,P=0.37)。结论心脑血管疾病患者β2‐MG水平明显升高,可与Hcy等指标联合应用,提高心脑血管疾病的诊断效率。

    作者:李冬 刊期: 2015年第18期

国际检验医学杂志

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主管:重庆市卫生局

主办:重庆市卫生信息中心