张任飞；杨致邦；周侠；夏丽君；李昌庆；陈瀑
1 临床资料患者,女,50岁,已婚,退休干部.因渐进性四肢麻木伴无力3个月于2006年5月12日第1次住院.3个月前无明显原因感双脚阵发性疼痛.可忍受,不影响日常活动.1周后疼痛消失,但出现双下肢紧绷感及麻木.近1月感双下肢无力,左侧明显,能行走.并出现尿失禁,1周后好转.大便3 d解1次.既往身体健康,无家族遗传病史.
作者：姜剩勇；李光勤 刊期： 2009年第01期
目的:构建TGFβ1基因RNAi慢病毒载体.方法:根据人TCFβ1的mRNA序列选择3个靶序列并根据它们设计合成3对寡核苷酸序列.同时合成1对阴性对照寡核苷酸序列;将以上4对寡核苷酸序列退火后连人pRNA-U6/Lenti质粒,酶切和测序鉴定后,将以上质粒分别和包装质粒混合物共转染293FT细胞,包装产生病毒颗粒.各组病毒载体转染Hela细胞后,运用Real-Time PCR和ELISA检测TGFβ lmRNA和蛋白的表达水平.结果:酶切和测序证实目的寡核苷酸片段已被准确克隆到pRNA-U6/Lenti质粒;各质粒与包装质粒共转染293FT细胞后能产生高滴度的慢病毒载体颗粒;各组慢病毒载体感染Hela细胞后,有两组可以显著抑制TGFβ1mRNA水平及蛋白水平的表达,其中以第一组效果佳.结论:成功构建了人TGFβ1基因RNAi慢病毒载体.
作者：王翔；胡治平；卢伟；唐湘祁；张洁；李婷；曾六旺 刊期： 2009年第01期
毒草俗称毒蘑菇,因其外观与可食的无毒野生蕈相似,易被误采食用而引起中毒.由于毒草所含毒素不同,中毒后临床表现多样,故给临床诊断和治疗带来一定困难,病死率较高.我们对2006年6月我院收治的6例以肝损害为主要表现的急性毒蕈中毒(白毒伞)的诊治经过进行了分析.旨在提高广大医师对该类疾病的认识.及时采取有效的防治措施.
作者：樊霞 刊期： 2009年第01期
目的:建立测定人胆汁中结合型胆汁酸的HPLC-紫外检测法.方法:胆汁样品经固相萃取,采用Waters Nova C18色谱柱,柱温为25℃,流动相为甲醇:磷酸盐缓冲液(60mmol/L,pH3.3)(66:34,v/v),流速0.8ml/min,检测波长197nm.结果:9种结合型胆汁酸在20 min内分离完全,各胆汁酸在浓度为8～1000 μmol/L范围内线性良好,r为0.999 1～0.999 9;低检测限为1.25～3.13μmol/L;该方法日内变异在3.77%～8.20%之间,日间变异在6.73%～17.11%之间,各胆汁酸的回收率在88.23%～109.75%之间.结论:本方法准确、灵敏、快速.适用于胆汁中结合型胆汁酸水平的实验室研究和临床常规检测.
作者：王文娟；邓文平；王猛；陈耿；丁敏 刊期： 2009年第01期
目的:前瞻性、完全随机对比研究用隧道刀制作巩膜瓣在以穹窿部为基底结膜瓣小梁切除术的疗效及并发症.方法:完全随机方法将拟手术的青光眼病人分至两组,分别施行以穹窿部为基底结膜瓣,隧道刀制作巩膜瓣的小梁切除术(A组)及以角膜缘为基底结膜瓣,常规方法制作巩膜瓣的复合式小梁切除术(B组),术后观察6月,比较两组术后疗效及并发症.结果:两组的成功率分别为75%,70%,其差别没有显著性差异;两组均未出现严重并发症,其并发症发生率相近.结论:采用隧道刀制作巩膜瓣在以穹窿部为基底结膜瓣小梁切除术中可有效简化青光眼手术过程.
作者：马华锋；江兵 刊期： 2009年第01期
神经鞘膜瘤(Neurilemmoma)是起源于神经鞘膜施万细胞的良性肿瘤[1],可单发或多发于身体任何部位,发生于颈部者,其诊断与治疗易与颈部转移性肿瘤混淆,误诊率较高,临床上有研究意义,我科收治的1例颈深部神经鞘膜瘤报告如下.
作者：向银洲；魏莲枝；余林 刊期： 2009年第01期
目的:构建survivin特异性短发夹RNA(shRNA)的表达载体,并以其修饰人膀胱移行细胞癌细胞株T24,评价其在体内的抑制肿瘤生长增殖的作用.探讨其在膀胱移行细胞癌(TCCB)T24细胞中的作用.方法:设计、合成survivin特异性的短链寡核苷酸,克隆到PTZU6+1质粒载体中.构建survivin特异shRNA表达载体.转染T24细胞;通过PTZU6+1质粒载体介导.成功建立了表达survivin的膀胱移行细胞癌细胞株T24/survivin-siRNA,拟在体内研究survivin-siRNA对膀胱移行细胞癌生长、增殖的影响.建立裸鼠皮下种植瘤模型,观察肿瘤形成时间和观察肿瘤形成时间,以及计算抑瘤率;HE染色行组织学检查;SABC法测定survivin,评估survivin在PTZU6+1介导的survivin-siRNA治疗膀胱移行细胞癌后的表达.结果:未转染组、空载体组共发生肌肉侵润6例,可见肌纤维的溶解、断裂等;皮下注射含survivin-siRNA的转染组细胞所形成的种植瘤的时间显著地延长,与其它两组比较有显著性差异(P<0.01);含survivin-siRNA的转染组所形成的种植性膀胱癌的体积明显受到抑制,与未转染组、空载体组有明显差异(P<0.01);survivin-siRNA转染组的抑瘤率为68.93%,与未转染组、空载体组相比较有显著差异;survivin-siRNA转染组survivin的阳性表达率降低.结论:应用PTZU6+1质粒载体构建survivin的shRNA表达载体,成功建立了表达survivin的膀胱移行细胞癌细胞株T24/Survivin-siRNA,有效抑制了survivin蛋白的表达,在体内实验中表明可以抑制T24细胞移植瘤的生长,诱导T24细胞的坏死、凋亡.
作者：杜虎；吴小候；罗春丽；何云锋；刘川；尹志康；曾柯 刊期： 2009年第01期
目的:观察和对比电刀排龈法与二次排龈法在固定修复中的临床效果.方法:金属烤瓷冠桥修复患者36例68颗牙齿随机分为两组,分别采用二次排龈法和电刀排龈法完成排龈,制取印模,灌制工作模型.对排龈时间及排龈后的预备体肩台、牙龈状况、工作模型进行评价.结果:33颗牙齿采用二次排龈法,25颗达到满意标准,8颗未达到满意标准,满意率75.8%;35颗采用电刀排龈法,28颗达到满意标准,7颗未达到满意标准,满意率80.0%.两种排龈方法的排龈时间有显著统计学差异,排龈效果没有统计学差异.结论:电刀排龈法操作简便,易于暴露清晰的软硬组织界限,能得到满意的排龈效果,且术后恢复快,是一种较好的排龈方法,值得在临床推广和应用.
作者：谭发兵；王璐；付钢；周雯雯 刊期： 2009年第01期
目的:构建并鉴定细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)重组pCD-Eg95质粒.方法:从细粒棘球蚴包囊中分离原头节,超声粉碎后抽提总RNA,采用RT-PCR方法扩增Eg95编码基因,将该基因定向克隆到真核表达载体pCDNA3.1中构建pCD-Eg95重组质粒;电穿孔转化大肠杆菌BIA21(DE3)株,抽提质粒进行酶切及PCR鉴定.结果:电泳及测序证实471 bpEg95基因克隆成功.经酶切及PCR证实重组质粒pCD-Eg95成功转入BL21(DE3).结论:成功构建了Eg重组pCD-Eg95质粒.
作者：周辉；李文桂 刊期： 2009年第01期
目的:构建编码小鼠PGC1α基因的重组腺病毒载体.为进一步研究其蛋白功能提供工具.方法:穿梭质粒pAdTrack-CMV-PGC1α线性化后与骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183菌中完成同源重组,筛选并提取重组正确的腺病毒质粒,PacI线性化,脂质体转染293细胞包装出成熟的具有感染活力的腺病毒颗粒,TCID50法测定病毒滴度,Western bloting检测PGC1α蛋白在293细胞的表达.结果:测序及酶切鉴定表明目的基因正确插人穿梭质粒,读码框未发生移位.重组腺病毒扩增后滴度约3×1010TCID50/ml,能在293细胞中表达PGC1α蛋白.结论:利用细菌内同源重组的方法成功构建了编码小鼠PGC1α基因的重组腺病毒载体,并观察到其蛋白表达.
作者：马仕坤；钟立；程庆丰；李卫平；青华；李启富 刊期： 2009年第01期
目的:构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)致细胞空泡毒素抗原(Vauolating cytotoxin antigen A,vaeA)毒性片段与霍乱毒素(Cholerae toxin,Ctx)B亚单位(ctxB)基因的原核表达载体,为进一步表达VCTB重组蛋白,制备防治H.pylori感染的口服疫苗奠定基础.方法:通过比较国内H.pylori代表株的vacA基因毒性亚单位,找出高度同源性片段,按基因文库中提供的vacA基因和ctxB基因序列设计引物.以H.pylori基因组DNA为模板,PCR扩增vaeA毒性片段基因,克隆至质粒pQE30中,获得重组质粒pQE30-vacA.以pET32(α)+-ctxB质粒为模板PCR扩增ctxB目的基因.再将纯化的ctxB基因片段插入pQE30-vacA中,构建含双基因的表达质粒pQE-vctB,构建的表达质粒pQE-vctB转化大肠杆菌Top10,培养后,提取纯化重组质粒pQE-vctB,内切酶双酶切鉴定.结果:扩增的vacA DNA片段约为723 bp,ctxB基因的DNA片段约为372bp,与预计长度相符合.构建的表达质粒pQE-vctB酶切鉴定,与插入pQE30的目的基因片段相符.测序结果vctB融合基因由1092bp组成,编码364个氨基酸残基的多肽,与基因文库相符.结论:含vacA和ctxB融合基因的原核表达载体构建成功,为进一步表达VCTB重组蛋白奠定了基础.
作者：张任飞；杨致邦；周侠；夏丽君；李昌庆；陈瀑 刊期： 2009年第01期
目的:观察短暂延迟性酸处理对老龄大鼠心肌缺血再灌注后血流动力学的影响.方法:60只SD老龄大鼠(≥18个月),随机分为6组(n=10):(1)空白对照(C组)组;(2)缺血再灌注(I/R)组;(3)缺血后处理(IPO)组;(4)酸处理(H+)组;(5)缺血后处理+碱处理(IPO+OH-)组;(6)碱处理(OH-)对照组.采用Langendorff离体心脏灌流方法,以心率(HR)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室内压大上升速率(+dp/dtmax和左室内压大下降速率(-dp/dtmax)5项血流动力学参数为指标,观察短暂延迟性酸处理对老龄大鼠心肌缺血再灌注后收缩和舒张能力的影响.结果:与C组比较,再灌注期间I/R组、IPO组、H+组、IPO+OH-组和OH-组的LVEDP升高,HR、LVSP、±dp/dtmax降低(P＜0.05);与I/R组比较,IPO组和H+组LVEDP降低,HR、LVSP、±dp/dtmax升高(P＜0.05).结论:短暂延迟性酸处理能模拟缺血后处理对离体心脏血流动力学的保护作用,且这种保护作用对老龄大鼠同样有效.
作者：乔欣；刘新伟 刊期： 2009年第01期
目的:为子宫内膜异位症的各项研究提供实验动物模型.方法:选择6-8周龄的雌性裸鼠,收集人在位子宫内膜种植于裸鼠腹腔.分别于种植后第5 d、第15 d、第30 d断颈处死裸鼠,观察子宫内膜种植生长情况和组织形态学变化.对照组:同法置人人大网膜.结果:种植成功率可达100%.种植后第5 d见移植内膜与裸鼠盆、腹腔组织牢固粘附.光镜下见种植物与鼠间皮之间已出现新生的血管网,可见腺体,周围围绕着间质细胞.种植后第15 d见病灶与裸鼠组织呈融合状态,周围有血管生长,病灶呈实质性或囊肿样.光镜下见明显的子宫内膜腺体和间质,血液供应丰富.种植后第30天病灶萎缩变小,局部粘连较重.光镜下见纤维化严重,腺细胞不完整.对照组植人的大网膜组织部分粘连于腹壁切口,其余游离存在,并逐渐萎缩、吸收.光镜下除炎性反应外.大网膜组织结构无改变.结论:采用人在位子宫内膜构建裸鼠内异症在体模型,移植后的内膜组织仍保持原有的组织形态和生化特征,便于对子宫内膜细胞增殖、新血管形成、激素和免疫应答等机理进行充分的分析和研究.此模型性状显著且稳定,费用低、操作简单,观察周期短,是一种较理想的内异症在体模型.
作者：王佳；但阳；张光金；姚珍薇 刊期： 2009年第01期
目的:了解乙肝免疫球蛋白(Hepatitis B immune globulin,HBIG)联合乙肝疫苗阻断乙肝病毒(Hepatitis B virus,HBV)母婴传播的效果,探索佳免疫方案.方法:选择HBsAg检测阳性孕妇共99例为研究对象,按检测时期分为试验组和对照组,同时依据乙肝疫苗接种方式不同将试验组分为A组(皮内注射)和B组(肌肉注射).试验组孕妇于怀孕第28W、32W、36w分别肌注HBIG200IU;新生儿出生后分别于4 h、15 d、30 d肌注HBIG200IU,出生当日、1个月和第6个月各接种5μg基因乙肝疫苗.对照组常规接种乙肝疫苗.随访儿童至5岁,监测血液中HBsAg和抗-HBs情况.结果:试验组和对照组的乙肝病毒母婴垂直传播阻断率分别为98.36%和83.33%(P<0.05),试验A组和试验B组阻断率差异无统计学意义(P>0.05). HBsAg和HBeAg双阳性孕妇组和HBsAg单阳性孕妇组HBV母婴垂直传播阻断率分别为77.78%和97.26%(P<0.05),试验组和对照组的抗-HBs阳性率在一年时无统计学差异,但在5年时有统计学差异.结论:HBIG联合乙肝疫苗注射可明显提高HBV母婴垂直传播阻断率.对HBsAg单阳性孕妇的阻断率高于HBsAg和HBeAg双阳性孕妇.
作者：李雪梅；周晓军；王琳 刊期： 2009年第01期
目的:研究年龄、生殖道状况与已婚妇女的阴道炎、外阴白斑、宫颈糜烂患病的关系.方法:对重庆某地区2007年已婚妇女普查中确诊患有外阴白斑、阴道炎、宫颈炎疾病的1 253名女性进行妇科检查、实验室检查,应用SAS8.1软件进行数据的统计分析.结果:在1 253名患者中,阴道炎575人(45.89%),宫颈糜烂560人(44.69%),外阴白斑42人(3.35%),其它76人(6.07%).年龄、阴道清洁度、念珠菌感染为阴道炎发病的危险因素;年龄、阴道清洁度与外阴白斑和宫颈糜烂的患病有关.结论:应将阴道炎、外阴白斑、宫颈糜烂纳入以后妇女生殖道疾病重点防治内容,规范进行病原学治疗,维持生殖道微生态平衡,建立完善妇科疾病防治的监测系统.并提高妇女的卫生保健服务质量.
作者：刘毅；刘达美；关蕴良；李成志 刊期： 2009年第01期
目的:观察依达拉奉对血管性认知功能损害大鼠脑组织和血清VEGF、IL-1β和TNF-α表达的影响,探讨依达拉奉对血管性认知功能损害脑保护作用机制.方法:永久性结扎大鼠双侧颈总动脉法建立血管性认知功能损害血管性认知功能损害动物模型,Wistar大鼠随机分为假手术组(S组)、血管性认知功能损害模型组(M组)、依达拉奉治疗组(MT组).酶联免疫吸附法检测大鼠脑组织IL-1β、TNF-α.表达水平和血清水平,蛋白质免疫印迹法和酶联免疫吸附法检测大鼠脑组织VEGF,水迷宫实验和跳台实验检测行为学改变.结果模型组大鼠有明显的学习、记忆、行为障碍,经过依达拉奉治疗后血管性认知功能损伤大鼠的学习、记忆、行为功能明显改善.MT组IL-1β、TNF-α表达较M组降低(P＜0.01),MT组VEGF表达较M组增高(P＜0.01);MT组VEGF、IL-1β、TNF-α表达较S组增高(P＜0.01);M组VEGF、IL-1β、TNF-α表达较N、S组显著增高(P＜0.01).结论依达拉奉能降低血管性认知功能损害大鼠脑组织和血清IL-1β、TNF-α水平、增强VEGF表达,依达拉奉可以通过抑制血管性认知功能损害炎症反应和增强血管修复发挥脑保护作用.
作者：蔡志友；晏勇；张骏；吴芳；张建刚；王咏龙 刊期： 2009年第01期
目的:了解国人正常月骨形态,为新型生物材料腕月骨假体的设计和置人提供理论数据.方法:健康成年男60例,女61例在CT下进行双侧腕关节扫描,获取腕关节DICOM格式文件,利用MIMICS软件重建腕月骨.并根据腕月骨假体的设计要求进行测量.结果:月骨长度(15.40±1.25)mm、月骨高度(6.00±1.16)mm、月骨宽度(12.64±1.43)mm、头月关节面纵向大角度132.28.±6.76.、桡月面近端夹角79.18.±5.87..结论:腕月骨的相关参数是设计新型生物材料假体和置入的关键指标.可以根据这些数据进行适合国人假体的设计,并探讨假体的个性化设计.
作者：钦斌；黄永火；黄伟；吕发金；甘强；王仁崇 刊期： 2009年第01期
目的:构建并鉴定小鼠信号转导子和转录激活因子4(STAT4),信号转导子和转录激活因子6(STAT6)具有发夹结构小干扰RNA(shRNA)表达质粒.方法:根据STAT4和STAT6基因mRNA序列,在体外分别合成有小发夹结构的2条STAT4特异性寡核苷酸序列,2条STAT6特异性寡核苷酸序列,退火后与线性化pGenesil-3质粒连接,转化感受态细胞DH5α,扩增,纯化得到所需质粒.同时设计构建分别针对小鼠甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的干扰质粒作为阳性对照,不具有基因同源性的非特异性基因的质粒作为阴性对照序列.通过酶切后琼脂糖凝胶电泳和基因测鉴定纯化质粒分子量及插入片段的序列.结果:经限制性酶切和测序鉴定分析证实基因插入正确,与设计的序列完全相符.结论:成功构建了针对小鼠STAT4,STAT6基因的发夹结构小干扰RNA表达载体.为今后利用基因沉默技术从转录后水平抑制STAT4,STAT6的研究奠定基础.
作者：杨琴；符州；田代印；刘恩梅；王莉佳；黄英 刊期： 2009年第01期
目的:探讨纳米磁性颗粒(Magnetic nano-particles,MNP)对高强度聚焦超声(High intensity focused ultrasound,HIFU)损伤效率的影响.方法:将直径为80～90nm的磁性颗粒0.05 g和直径为200～300am的磁性颗粒0.05 g和0.10 g分别均匀分布在270 ml蛋白凝胶体模中.用同一高强度聚焦超声剂量辐照,结束后测量损伤线大剖面的长和宽.结果:含有0.05 g直径为80～90 nm的磁性颗粒的蛋白凝胶体模与对照组相比未见增效,而200～300 nm的磁性颗粒与对照组相比损伤面积增大3倍多(P<0.01).结论:直径为200～300 nm的磁性颗粒能够改变蛋白凝胶体模的声学环境,从而提高高强度聚焦超声对其损伤的效率.
作者：李全义；李发琪；秦艳 刊期： 2009年第01期
目的:利用干细胞和非干细胞生长对血清的不同要求,获取大鼠胰岛中所含的干细胞并探讨转分化前后PDX-1的表达差异.方法:将雄性SD大鼠采用胶原酶V型通过胰管对胰腺进行灌注,切取胰腺,消化、离心获得胰岛细胞沉淀物.将细胞悬液首先接种于含10%胎牛血清Ham's F-10培养液中连续培养36h;然后改用无血清Ham's F-10培养液培养14d.后以含KGF、BSA及ITS的无血清DMEM/F12(8mmol/l葡萄糖)培养液连续培养28d.在无血清Ham's F-10培养液培养第14 d以及含KGF、BSA及ITS的无血清DMEM/F12(8mmol/l葡萄糖)培养液培养第28 d分别加入双硫腙染色观察三维细胞团,同时取部分贴壁细胞应用免疫细胞化学分析所获得干细胞的胰十二指肠同源框(PDX-1)的表达.结果:经双硫腙染色,转分化培养后的部分细胞呈红色;免疫组化结果显示经转分化培养后,PDX-1在胞核表达更加明显.结论:胰腺干细胞经转分化培养后部分细胞可表现出胰岛细胞的性质;不同纯度胰岛所携带的干细胞经转分化培养后的子代细胞仍然保持干细胞的特征;KGF可能具有促进PDX-1表达的作用.
作者：王威巍；王济明；杜成友 刊期： 2009年第01期
重庆医科大学学报杂志
主管:重庆市教育委员会
主办：重庆医科大学
