郑芳；周新；崔天盆
目的 研究DNA循环测序中一些常见因素的影响.方法 对循环测序中模板、引物、测序反应条件及其产物的纯化等常见因素进行了比较研究.结果 测序模板浓度过低,则核苷酸曲线的信:噪比小,甚至不出现荧光信号.模板浓度过高,判读的核苷酸长度降低;引物的长度、G+C含量及Tm值对测序结果无明显影响;模板中的离子对测序反应有抑制作用;改变变性、退火及延伸温度,以及加入二甲基亚砜(DMSO)或甘油对某些DNA模板的序列测定有较好的效果;测序反应产物纯化后如有残余的荧光染料,则会干扰测序仪对核苷酸的自动判读,但序列能进行人工校正.结论 序列质量与模板的纯度、浓度有明显的关系.对一些具有特殊结构DNA,调整循环反应条件或使用添加剂能获得较好测序结果;利用70%乙醇沉淀法是首选的测序反应产物纯化方法.
作者：何云贵；房海燕；夏昆；夏家辉 刊期： 2000年第02期
为了解早幼粒白血病基因和维甲酸受体α(promyelocytic leukemia-retinoic acid receptor α,PML-RARα)的致病机理,对野生型PML基因的生物学功能的研究进展进行综述.从近年来国内外公开发表的有关报道,结合本研究所的部分研究结果,提示PML的高表达有抑制细胞生长和诱导凋亡的作用;PML可能参与基因表达的调控;且PML功能的发挥与其3个重要功能区和核内定位有关;PML与APL发病有关.表明PML具有多重生物学活性.
作者：周励；陈国强；沈志祥 刊期： 2000年第02期
家系1 先证者,女,51岁.因双侧腹股沟肿物1年余,伴右骶髂关节疼痛7个月,加重1月入院.妇科检查及B超检查发现子宫颈左后方、宫颈及宫体之间有一鸽蛋大的硬性包块,行宫颈癌根治术及双侧腹股沟淋巴结摘除术.术后病理诊断:(1)宫颈宫体交界处左后侧中肾癌;(2)双侧腹股沟淋巴结转移性中肾癌;(3)子宫体、子宫内膜、子宫颈粘膜、双侧输卵管及双侧卵巢未见异常.追溯患者之家族史发现先后有4代人患有子宫颈癌和乳腺癌.见图1.
作者：陆药丹；丁彦青；罗深秋 刊期： 2000年第02期
目的 探讨术前不同分期的胃癌p53基因突变与微卫星DNA不稳定性(microsatellite instability, MSI)的变化及其相互关系.方法 应用超声内境(endoscopic ultrasonography,EUS)对73例胃癌患者行术前分期,同时采用银染PCR-SSCP方法检测内镜活检组织标本p53基因突变及MSI.结果 p53基因总突变率为54.8%;T3期(64.3%)和T4期(67.9%)突变率明显高于T1(0)或T2期(25.0%)病例(P＜0.05);有淋巴结转移的病例突变率为67.6%,亦明显高于无转移时的41.7%(P＜0.05).MSI总检出率为37.0%;与癌的浸润深度无关,T1～T4期癌MSI的检出率分别为40.0%、33.3%、39.3%和34.5%(P＞0.05);但有淋巴结转移组MSI的检出率为51.4%,明显高于无转移的22.2%(P＜0.05).p53基因突变组,MSI检出率(42.5%)较无突变组(30.3%)有增高趋势,但两者无显著性差异(P＞0.05).结论 p53基因改变与MSI可能分别代表了胃粘膜癌变过程中的不同分子病理学机理,两者均不同程度地反映胃癌的细胞生物学恶性行为,对临床分析胃癌的预后可能有参考意义.
作者：郭文；张亚历；吴保平；张立力；周殿元 刊期： 2000年第02期
目的 探讨聚合酶链反应-单链构象多态性分析(polymerase chain reaction-single strain conformation polymorphism, PCR-SSCP)在家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemiac, FH)患者家系分析中的应用价值.方法 对于经PCR-SSCP筛查、DNA序列分析证实的4例FH患者(1例纯合子FH外显子7发生点突变,1例杂合子点突变位于外显子14,2例杂合子点突变位于外显子4的3′部分),用PCR-SSCP分析各家系成员共23例,并对基因型和表型进行比较.结果 各家系成员均从基因水平明确了诊断,23例个体中,除先证者外,还发现1例纯合子,8例杂合子.结论 PCR-SSCP可对FH先证者家系进行分析,并对其家系成员早期诊断,以便提供咨询和指导.
作者：朱大明；陈在嘉；陈保生；陆宗良；吕新跃；寇文镕；徐义枢；孙继良；曾武威；杨跃进；陈纪林；高润霖；杜怀明；马咸成；许海燕 刊期： 2000年第02期
患者 男,30岁.结婚5年,其妻自然流产2次,妊娠间隔1年,均在孕40余天时,无明显诱因发生流产.孕期妊娠反应不重,无患病、服药史及有害物质接触史.夫妻表型正常,既往健康,非近亲婚配.细胞遗传学检查:患者核型(图1)为46,XY,t(12;17)(q21;q25),其妻核型正常.
作者：丁明；焦云萍 刊期： 2000年第02期
目的 研究人白细胞介素4(human interleukin-4,hIL-4)基因转染对肝母细胞瘤细胞的诱导分化和对端粒酶活性的影响.方法 以逆转录病毒载体(PL-IL-4-SN)将hIL-4基因导入人肝母细胞瘤细胞系Hep G2细胞.台盼蓝拒染、瑞式染色、放射免疫测定、流式细胞仪细胞周期分析、原位杂交、PCR-ELISA等方法检测基因转染后细胞形态、甲胎蛋白合成、原癌基因的表达及端粒酶活性变化.结果 转染IL-4基因后Hep G2细胞生长速度减慢(P＜0.05),细胞周期发生G0/G1期阻滞,细胞形态趋于向正常肝细胞转化.甲胎蛋白分泌量(3.26±1.43ng·106cells-1·24h-1)较未转基因细胞(15.6±0.67ng·106·cells-1.24h-1)降低(P＜0.05);原癌基因表达及端粒酶活性降低(P＜0.01).结论 hIL-4基因转染可诱导肝母细胞瘤分化及下调端粒酶活性.
作者：付劲蓉；李成荣；杨锡强；李欣 刊期： 2000年第02期
阿耳茨海默病(Alzheimer's disease, AD)可分为早发性、晚发性家族性AD(familial Alzheimer's disease, FAD)和散发性AD(sporadic Alzheimer's disease, SAD).国外研究发现,70%～80%的早发性FAD与Presenilin-1(PS-1)基因突变有关[1].我们在一个FAD家系患者中发现了外显子46519nt T→A杂合性点突变,报告如下.
作者：廖瑜；顾其华；赵帆；赵伟强；张爱玉 刊期： 2000年第02期
目的 探讨脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase, LPL)基因中常见多态位点Hind Ⅲ基因多态性对单纯肥胖症儿童血脂、体重指数(body mass index,BMI)及皮下脂肪分布的影响.方法 应用聚合酶链反应和限制性内切酶片段长度多态性技术,检测了92例单纯肥胖症儿童的Hind Ⅲ-LPL基因多态性,并测定了血脂、BMI及机体3个测量部位(肱二头肌、肩胛下、腹壁)的皮褶厚度等.结果 H+H+-LPL基因型肥胖儿童的血甘油三酯(TG)、LDL-C、ApoB含量及BMI、肱二头肌皮褶厚度、肩胛下皮褶厚度、皮褶均数等,均明显高于H+H--LPL基因型肥胖儿童.结论 LPL-Hind Ⅲ基因多态性对单纯肥胖症儿童的血脂与BMI水平,总胆固醇(TC)以及皮下脂肪在机体各部位的分布具有重要影响.
作者：郭锡熔；陈荣华；莫宝庆；刘倩琦 刊期： 2000年第02期
患者 男,27岁.其妻第1胎足月顺产一男婴,面部畸形,无鼻孔.第2胎孕3个月时自然流产.非近亲结婚,身体健康.双方无化学药物及放射线接触史,表型和智力均正常,双方家族中无异常孕产史.
作者：许平；俞信忠；曾艳；雷谢东 刊期： 2000年第02期
研究表明,低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor, LDL-R)基因多态性影响血脂水平,已有报道LDL-R基因PvuⅡ、StuⅠ位点多态性影响正常人血脂水平[1],HinⅡ位点多态性影响糖尿病患者脂代谢[2].近Ahn等[3]发现LDL-R基因外显子18 NcoⅠ位点多态性与总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平有关.我们应用聚合酶反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,研究了NcoⅠ位点多态性对汉族人血脂、脂蛋白和载脂蛋白水平的影响.
作者：郑芳；周新；崔天盆 刊期： 2000年第02期
目的 分析中国汉族人群14号染色体上5个STR的基因及基因型分布情况.方法 采用PCR扩增技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对50名中国汉族人14号染色体上D14S742、D14S306、D14S606、D14S617和D14S611位点的遗传多态性进行分析.结果 在D14S742位点,共观察到5个等位片段和13种基因型,常见的等位片段为407 bp片段,频率为0.31;D14S306位点,共观察到5个等位片段和13种基因型,常见的等位片段为198 bp片段,频率为0.31;在D14S606位点,共观察到6个等位片段和13种基因型,常见的等位片段为247 bp片段,频率为0.47;在D14S617位点,共观察到9个等位片段和21种基因型,常见的等位片段为145 bp片段,频率为0.35;在D14S611位点,共观察到6个等位片段和13种基因型,常见的等位片段为155 bp片段,频率为0.29.结论 上述5个多态位点在中国汉族人群中有较好的多态性,其基因频率分布符合Hardy-Weinberg平衡.
作者：郭辰虹；龚瑶琴；陈丙玺；卢勇；魏农；邹雅群；刘晓军 刊期： 2000年第02期
目的 探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因C677T多态与神经管缺陷(neural tube defects,NTD)及先兆子痫发生的关系.方法 采用PCR/RFLP技术对27位生过NTD患儿的母亲和24位生过正常孩子的母亲,以及57例患过先兆子痫的妇女和120名正常对照妇女进行了MTHFR等位基因检测.结果 (1)正常对照母亲组中VV基因型的频率为0.13,而生过NTD患儿母亲组中VV基因型的频率为0.33,携带VV基因型的母亲生NTD患儿的危险性比非VV基因型的母亲提高3倍;(2)患过先兆子痫的妇女组中VV基因型的频率为0.31,而未患过先兆子痫的对照组中VV基因型的频率为0.15,VV基因型的妇女患先兆子痫的危险性比非VV基因型的妇女提高2.5倍.结论 MTHFR基因C677T多态与NTD及先兆子痫的发生有关.
作者：李克深；郑冬梅；薛雅丽；孙延芝；陈黎明；郭劲柏；张贵寅；李璞 刊期： 2000年第02期
目的 建立一个用于比较研究哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的突变机理的实验模型.方法 以脂质体转染法将线性化的pMCLacI/Neo质粒导入NIH3T3细胞,用G418筛选,选择一个药物抗性细胞克隆进行扩增,用基因组Southern杂交,RT-PCR及RT-PCR Southern杂交进行分子鉴定.结果 (1)在此细胞克隆的基因组中整合有pMCLacI/Neo质粒;(2)该质粒上的两个lacI靶基因中,有一个在NIH3T3细胞内处于转录表达状态;(3)可以通过酶切环化的方法从阳性细胞克隆的基因组DNA中回收出结构完整、功能正常的pMCLacI/Neo质粒.结论 建立了在基因组中整合有pMCLacI/Neo质粒的NIH3T3细胞系;两个lacI靶基因可分别模拟哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的功能状态;可以将该细胞系用作研究哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的不同突变机理的实验模型.
作者：卢洋；黎怀星；傅继梁 刊期： 2000年第02期
家系1 母亲,48岁.6年前发现骨肿块,偶有膝关节轻痛,身材矮小,下肢偏短,呈膝内翻,关节活动自如.X线片显示:双侧股骨远端和胫腓骨近端出现多个大小不等骨软骨瘤影像,呈广基底型,骨块与正常骨相连接,胫腓骨近端已骨性融合.与6年前X线片比较,骨肿块无增大.
作者：佟杰 刊期： 2000年第02期
患者 男,34岁,因其妻自然流产1次及生育1例发育迟缓儿就诊.夫妻表型和智力正常,非近亲婚配,双方均未接触有害物质.
作者：徐庭红；朱玲仙 刊期： 2000年第02期
目的 研究汉族人群中139个微卫星位点的杂合度和多态信息量(polymorphism information content,PIC).方法 应用多重PCR方法对139个位点进行扩增.聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,Gene ScanTM、GenotyperTM软件进行基因分型.结果 这些微卫星位点的杂合度为0.35～0.89,其中88%的杂合度＞0.60,PIC为0.32～0.88,94%位点的PIC＞0.50.结论 微卫星位点有较高的多态信息量,在不同群体间存在一定的差异,在遗传分析中有广泛的应用价值.
作者：袁文涛；徐红岩；赵进英；丁伟；江宏铨；顾鸣敏；薛京伦；陈家伦；方福德；陈竺；金力；黄薇 刊期： 2000年第02期
目的 评估11q23异常与恶性血液病的临床、血液学和预后的相互联系.方法 采用骨髓直接法和(或)培养法制备染色体标本,用R显带技术,对6000例恶性血液病进行核型分析.结果 6000例恶性血液病中发现28例有11q23异常,发生率为0.47%.异常类型有7种:t(4;11)(q21;q23)10例;t(11;19)(q23;p13)5例;t(9;11)(p12;q23)2例;t(10;11)(p15;q23)2例;t(6;11)(q27;q23)1例;del(11)(q23)7例;t(11;)(q23;)1例.疾病类型为急性髓细胞白血病14例(M2a3例、M42例、M5a1例、M5b8例);急性淋巴细胞白血病10例;骨髓增生异常综合征3例(RAEB 1例、CMML 2例);恶性组织细胞增生症1例.10例t(4;11)均为急性淋巴细胞白血病.随访的22例患者总完全缓解率为59.9%,中数生存期为113天.结论 11q23异常主要见于急性单核细胞系白血病和急性淋巴细胞白血病患者,其预后不良,同时伴有额外变化和缺乏正常核型细胞均对预后有不利影响,因而构成一种独特的临床-细胞遗传学联系.
作者：过宇；薛永权；谢新；吴德沛；李建勇；陆定伟；蒋复高；耿美菊 刊期： 2000年第02期
目的 检测费城染色体(Philadelphia chromosome, Ph染色体)阴性、变异型Ph染色体及伴有其它染色体异常的慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)的bcr/abl融合基因.方法 应用双色荧光原位杂交技术,检测伴有8种不同的骨髓细胞染色体畸变CML患者的bcr/abl融合基因.结果 3例变异型Ph和7例有标准型Ph的CML患者均为bcr/abl融合基因阳性;在2例Ph阴性患者中,1例核型为46,XY,t(9;18)的患者为bcr/abl融合基因阳性;另1例核型46,XY,inv(2)的患者为阴性.结论 双色荧光原位杂交技术能够可靠地检测CML的bcr/abl融合基因,在bcr/abl融合基因阴性的CML患者中可能有其它的事件引发CML.
作者：朱宝生；沈晓梅；李春华；赖洵；李永刚；史克倩；冯怀英；王瑞红 刊期： 2000年第02期
先证者(Ⅲ10) 男,18岁,学生.因发作性睡眠1年伴猝倒发作10天入院.患者于1年前无明显诱因出现白天发作性睡眠,多在白天上课时,有时会在进食中或饭后静坐时,突感睡意浓厚,随即不可克制地入睡,每次发作持续约30分钟左右,多伴自醒,偶为唤醒,每天发作3～5次.近10天前与同学笑谈时,突感双下肢无力,随即跪倒在地,无意识丧失,持续约半分钟好转.患者否认有失眠症,既往无脑炎及脑外伤史.内科查体及神经系统检查未见异常.头颅CT、脑电图均正常,空腹血糖、血清钾、钠、氯、钙、磷、T3、T4均正常,脑脊液、肝、肾功能均正常.入院后给予丙咪嗪等药物治疗20天,好转出院.
作者：徐会厂；冯美香；李松奎 刊期： 2000年第02期
中华医学遗传学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
