学术投稿

survivin基因启动子调控的HSV-tk真核表达载体的构建及在人喉癌细胞中的特异性表达

卞卡;张惠中;高萍;王燕;成诗银

关键词:Survivin基因, 启动子, 喉癌, Tk基因
摘要:目的:构建survivin基因启动子调控的人单纯疱疹病毒胸苷激酶(human simplex virus-thymidine kinase,HSV-tk)真核表达载体,检测其在人喉癌细胞中的表达.方法:PCR克隆survivin基因启动子与tk基因,双酶切后分别插入pCI-neo真核表达载体中,酶切鉴定后用脂质体法转染喉癌细胞(Hep-2)和正常细胞(7702),RT-PCR法比较两种细胞tk基因的表达情况.结果:成功构建了survivin启动子调控的tk基因真核表达载体pCI-neo/survivin-tk;并通过RT-PCR检测出survivin启动子调控的表达载体在喉癌细胞中有表达,而在正常细胞中无明显表达.结论:survivin启动子具有肿瘤特异性,有可能解决喉癌基因治疗中的特异性杀伤问题.
现代肿瘤医学杂志相关文献
  • 食管癌survivin、caspase-3表达与细胞凋亡的关系

    目的:探讨survivin mRNA、caspase-3蛋白在食管鳞癌中的表达及其与细胞凋亡的关系.方法:分别采用RT-PCR和免疫组化技术检测38例食管鳞癌及其对应的正常组织中survivin mRNA和caspase-3蛋白的表达,运用TUNEL方法检测细胞凋亡.结果:73.68%食管鳞癌组织呈survivin mRNA阳性表达,显著高于正常组织,并与食管鳞癌的分化程度、临床分期有关,与年龄、性别、淋巴结转移无关;caspase-3蛋白在食管鳞癌和正常组织中的阳性表达率分别为26.32%和89.47%,差异有显著性,并与食管鳞癌的分化程度有关,与年龄、性别、淋巴结转移和临床分期无关;在食管鳞癌组织中,survivin mRNA和Caspase-3蛋白表达呈负相关;survivin mRNA阳性的食管鳞癌组中细胞凋亡指数明显低于survivin mRNA阴性组,(P<0.01),caspase-3蛋白阳性的食管鳞癌组中平均细胞凋亡指数明显高于caspase-3蛋白阴性组(P<0.01).结论:survivin、caspase-3参与了食管鳞癌的发生、发展,可以作为食管鳞癌预后的指标,survivin通过抑制caspase-3的活性而发挥其抑制细胞凋亡的作用是其主要的分子机制.

    作者:王克文;张桂英 刊期: 2006年第05期

  • 内支架联合适形放疗治疗恶性胆管梗阻的临床研究

    目的:探讨内支架联合适形放疗治疗恶性胆管梗阻的疗效.方法:自1999年2月至2004年2月我院收治61例恶性胆管梗阻的患者,综合组34例行内支架联合适形放疗,并与同期单纯内支架置入27例对照组进行对比.结果:综合组与对照组平均生存时间分别为(353±20)天和(176±12)天(P<0.01),中位生存期分别为(350±29)天和(170±17)天(P<0.01)有显著性差异.结论:内支架联合适形放疗是治疗恶性胆管梗阻的有效方法.

    作者:沈太春;王玲;曲磊;李修磊 刊期: 2006年第05期

  • 肝细胞癌的相关血清标志物

    肝细胞癌(HCC)的早期诊断是其治疗的关键,HCC血清标志物的检测为其诊断提供了有利的方法,并且操作简单,敏感性高、特异性强.目前常用的血清标志物为AFP、AFP variants、AFP mRNA、AFU、GGT、DCP、AIF、GPC3等.这些标志物的联合使用有助于HCC的诊断及预后判断.

    作者:侯刚强;劳明;谢小薰 刊期: 2006年第05期

  • 210例老年肺癌的临床分析

    目的:了解老年肺癌的临床特征、诊治特点和生存状态.方法:对210例60岁以上肺癌患者临床资料进行回顾分析.结果:老年肺癌以男性居多,吸烟比例高;咳嗽、咳痰、咯血、低热、气短等为首发症状,15.3%合并慢性肺疾病;误诊率23.3%,以呼吸道感染、肺结核为主;纤维支气管镜检查为主要确诊手段,鳞癌居多,腺癌、小细胞癌次之;Ⅲa~Ⅳ期肺癌占65.2%;化疗、生物免疫制剂及中药治疗为主,手术仅占11.9%.结论:老年肺癌临床症状不典型,容易误诊,确诊时大多为晚期,所以对于有大量吸烟史、合并慢性肺疾病者等肺癌高危人群应定期查体、宣教,警惕久治不愈的呼吸道症状的变化.早期诊断,采取有效积极的治疗措施,可提高老年肺癌患者的生存期,改善生存状态.

    作者:任小平;王宏涛;刘延梅 刊期: 2006年第05期

  • 一例盖诺致角膜损伤病人的护理

    盖诺[1]又称去甲长春花硷或长春瑞滨,是作用于细胞周期M期的植物类抗肿瘤药,其细胞毒作用明显,发疱性能强,所致的局部皮肤组织反应严重[2],常引起静脉炎.各种资料提示溅入眼睛时可引起角膜溃疡,但未见到相关报道.本例患者在配药时将少量药液喷溅导致右侧角膜损伤,经治疗和护理后痊愈,现报告如下:

    作者:罗丽红;张亚婷;曹兰芳 刊期: 2006年第05期

  • CXCR4在VEGF-C介导的乳腺癌腋淋巴结转移中的作用

    目的:探索趋化因子受体CXCR4和VEGF-C与乳腺癌淋巴转移的关系,为研究干预乳腺癌淋巴转移的新方法提供理论依据.方法:采用RT-PCR方法检测45例原发性乳腺癌组织中趋化因子受体CXCR4mRNA的表达及VEGF-C mRNA的表达,探索其与乳腺癌腋淋巴结转移的关系;Boyden趋化小室法检测CX-CR4不同表达状态乳腺癌细胞的趋化活性和趋化抑制性.结果:45例原发性乳腺癌组织均有不同程度的CXCR4 mRNA和VEGF-C mRNA的表达.37例CXCR4 mRNA呈高表达,表达率为82.22%,73.33%的VEGF-C mRNA高表达(33/45);VEGF-C mRNA高表达组的CXCR4 mRNA的高表达率大(P<0.05);CX-CR4 mRNA的表达与乳腺癌腋淋巴结转移呈正相关(P<0.05);CXCR4的配体SDF-1对乳腺癌细胞的平均趋化率为75%,经抗CXCR4单克隆抗体处理后癌细胞的平均趋化率下降至34%,CXCR4被特异性抗体封闭前后的癌细胞趋化活性有显著性差异(P<0.05).结论:原发性乳腺癌CXCR4的表达和VEGF-C的表达与肿瘤腋淋巴结转移呈正相关;CXCR4的功能状态影响乳腺癌细胞的迁移活性.由此提示,通过干预趋化因子受体CXCR4和VEGF-C的活性可能成为阻断乳腺癌淋巴转移的新靶点.

    作者:黄俊辉;李洋;刘亮;杨怀才;海健;郭旭辉;胡铁辉 刊期: 2006年第05期

  • 乳腺癌患者皮肤放射性Ⅲ度损伤护理

    目的:探讨乳腺癌患者皮肤放射性出现Ⅲ度皮肤损伤的护理方法.方法:对68例接受钴-60γ射线照射Ⅲ度损伤的乳腺癌患者采用庆大霉素加维生素B12联合换药疗法.结果:68例患者损伤部位全部于4~6天愈合,治愈率100%.结论:庆大霉素加维生素B12联合法换药经济、见效快,保证了患者全程放疗的顺利进行,提高了患者的生活质量.

    作者:谷小燕;廖建鄂 刊期: 2006年第05期

  • 金属胆道支架植入联合介入化疗治疗恶性梗阻性黄疸的疗效

    目的:评价金属胆道支架植入联合介入化疗治疗恶性梗阻性黄疸的疗效.方法:对20例接受金属胆道支架植入联合介入化疗治疗的恶性梗阻性黄疸患者,回顾性分析血清总胆红素和谷丙转氨酶的变化,以及联合介入化疗后的生存时间和生存率.结果:术后两周,血清总胆红素和谷丙转氨酶较术前明显下降,术后四周,9例患者的血清总胆红素和谷丙转氨酶恢复正常.本组病例的中位生存时间为6个月,半年及一年生存率分别为60%及35%.结论:对于无法外科手术治疗的恶性梗阻性黄疸患者,金属胆道支架植入联合介入化疗能明显提高其生活质量及生存率.

    作者:王琼瑶;谢其根;杨章庚;华燕艳 刊期: 2006年第05期

  • 局部晚期乳腺癌新辅助化疗临床疗效及病理反应与预后的关系

    目的:探讨局部晚期乳腺癌新辅助化疗后,临床体征与病理改变相关性及对预后的影响.方法:1999年6月至2003年6月,对46例局部晚期乳腺癌患者以针吸细胞学明确乳腺癌诊断后行新辅助化疗CAF或CEF方案2周期,化疗前、后观察肿瘤大小及术后病理表现,术后对患者进行随访.结果:原发灶临床有效率为45.7%,完全缓解(CR)2.2%,部分缓解(PR)43.5%,病理有效率为54.4%,重度组织反应17.4%,中度组织反应37.0%,术后中位随访期36个月,健康生存26例,余20例中,其中有2例患者失访,18例中死亡10例,复发8例.结论:新辅助化疗后,认为病理有效的患者的无瘤生存率高于临床有效的患者、生存时间长于临床有效的患者,病理有效才能影响患者的预后.

    作者:王森;蔡四忠;谭雅琴 刊期: 2006年第05期

  • survivin基因启动子调控的HSV-tk真核表达载体的构建及在人喉癌细胞中的特异性表达

    目的:构建survivin基因启动子调控的人单纯疱疹病毒胸苷激酶(human simplex virus-thymidine kinase,HSV-tk)真核表达载体,检测其在人喉癌细胞中的表达.方法:PCR克隆survivin基因启动子与tk基因,双酶切后分别插入pCI-neo真核表达载体中,酶切鉴定后用脂质体法转染喉癌细胞(Hep-2)和正常细胞(7702),RT-PCR法比较两种细胞tk基因的表达情况.结果:成功构建了survivin启动子调控的tk基因真核表达载体pCI-neo/survivin-tk;并通过RT-PCR检测出survivin启动子调控的表达载体在喉癌细胞中有表达,而在正常细胞中无明显表达.结论:survivin启动子具有肿瘤特异性,有可能解决喉癌基因治疗中的特异性杀伤问题.

    作者:卞卡;张惠中;高萍;王燕;成诗银 刊期: 2006年第05期

  • GnRH及其受体表达与卵巢癌细胞增殖和分化的相关性研究

    目的:探讨卵巢癌中促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体(GnRHR)表达与细胞增殖调节因子之间的相互调节作用.方法:应用免疫组织化学SABC技术方法,对49例卵巢癌和15例卵巢良性肿瘤组织中增殖细胞核抗原(proliferation cells nuclear antigens,PNCA)、GnRH及其受体的表达进行相关性研究.结果:GnRH及其受体均定位于卵巢癌细胞的胞膜和胞浆,GnRH表达阳性卵巢癌的PCNA标记指数为(26.1±15.2)%,显著低于GnRH阴性卵巢癌的PCNA标记指数(45.2±28.7)%(P<0.05).GnRHR阳性卵巢癌的PCNA标记指数为(21.1±14.2)%,亦明显低于GnRHR阴性卵巢癌(38.6±29.1)%的PCNA标记指数(P<0.01).结论:GnRH可能参与卵巢癌细胞的增殖和分化的调节.

    作者:刘玉;韩良辅;辛晓燕;王德堂;郭惠铃 刊期: 2006年第05期

  • 食管癌相关基因研究进展

    食管癌的发生发展是涉及到多种因素多个步骤的病理过程,癌基因的激活和抑癌基因的失活是细胞癌变的分子基础.本文就食管癌相关基因的研究进展进行综述.

    作者:庞作良;于亮 刊期: 2006年第05期

  • 食管癌患者三维适形放疗中健康教育的应用

    三维适形放射治疗(下称放疗)是目前较为先进的放疗手段,根据肿瘤的立体形状将放射线聚焦在肿瘤靶区内,而使周围正常组织和器官免受或少受不必要的照射[1],因此具有定位准确、提高疗效、减少并发症、恢复快等优点。我们对2002年1月至2004年12月的156例食管癌患者进行了健康教育的效果观察,结果显示,健康教育对放疗的顺利进行起到了重要的作用,现将我们在这方面的体会介绍如下:

    作者:苗惠敏;王佳宏;王西玲 刊期: 2006年第05期

  • ADAR1 mRNA在肝癌及癌旁组织的表达及意义

    目的:探讨ADAR1 mRNA在肝细胞肝癌(HCC)及癌旁组织的表达及意义.方法:采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测诊断为HCC 41例患者的肝癌及癌旁组织RNA编辑酶ADAR1 mRNA的表达.结果:所有肝癌组织RNA编辑酶ADAR1均有表达,相对表达量为3.340±0.863;所有癌旁组织有RNA编辑酶ADAR1表达,相对表达量为0.801±0.209;对照的26例正常肝组织及其他肝脏疾病标本RNA编辑酶ADAR1的相对表达量为0.880±0.226.将肝癌组织和癌旁组织的ADAR 1mRNA表达量进行成组t检验,两者间存在显著性差异(t=18.30,P<0.001);肝癌组织和对照肝组织的ADAR 1mRNA表达量进行成组t检验,两者间亦存在显著性差异(t=17.65,P<0.001);将癌旁组织和对照肝组织检测到的ADAR1mRNA的表达量进行成组t检验,两者间差异无统计学意义(t=1.64,P>0.10).将从同一患者取材的肝癌组织和癌旁组织的ADAR 1mRNA表达量进行配对t检验,两者间存在显著性差异(t=18.53,P<0.001).结论:ADAR1 mRNA在肝癌组织的表达增高,可能在肝癌的发生机制中起一定的作用.

    作者:张洪涛;窦科峰;冯全新;李宝定;李军;孔亚林;张福琴;赵青川 刊期: 2006年第05期

  • 胃癌DNA甲基化差异片段的筛选与分析

    目的:筛选和分析胃癌和正常胃组织间DNA甲基化差异片段.方法:通过甲基化敏感性代表性差异分析法(methylation-sensitive-representational difference analysis,MS-RDA),筛选胃癌和正常胃组织间DNA甲基化差异片段,经克隆、测序后进行生物信息学分析.结果:获得3个甲基化差异片段CRS1308、CRS1309、CRS1310序列.其中CRS1309和CRS1310已被GenBank收录,登陆号分别为AY887106和AY887107.CRS1309序列与LOC440683基因、LOC440887基因的3端、DRD5基因均有很高的相似性;CRS1310序列与1999年Minoru Toyota在人类结肠癌中分离出的核糖体RNA上的甲基化差异性CpG岛有很高的相似性.结论:胃癌和正常胃组织间DNA甲基化存在差异,LOC440683、LOC440887、DRD5基因的异常甲基化可能与胃癌的发生相关,胃癌中CRS1310序列所在核糖体RNA上的CpG岛易发生甲基化.

    作者:王珣;廖爱军;苏琦 刊期: 2006年第05期

  • CD147在骨肉瘤中的表达及其临床意义

    目的:研究CD147在骨肉瘤中的表达情况,探讨其与临床病理及预后的关系.方法:用S-P免疫组织化学染色法对76例骨肉瘤CD147蛋白的表达进行检测,并对其与骨肉瘤临床病理及预后的关系进行统计学分析.结果:CD147在骨肉瘤中呈普遍阳性表达,对照组骨软骨瘤、骨瘤和正常骨基本不表达.CD147蛋白表达与Enneking分期和Price分级呈正相关,与软组织侵犯、WHO分型和预后相关.结论:骨肉瘤CD147蛋白的表达与肿瘤恶性程度和侵袭性密切相关,对骨肉瘤诊断和预后评估具有重要价值.

    作者:李存孝;杨彤涛;陈翔;文艳华;范清宇 刊期: 2006年第05期

  • 康莱特增强中晚期食管癌患者对放疗的耐受性

    目的:观察放疗联合应用康莱特对中晚期食管癌患者耐受情况的影响.方法:回顾31例康莱特联合放疗治疗中晚期食管癌患者白细胞计数、KPS评分、治疗间断时间、疗效,并与对照组31例进行比较分析.结果:放疗后治疗组的白细胞水平和KPS评分明显高于对照组;康莱特治疗组治疗间断时间为1.43±0.48天,显著低于对照组的3.24±1.02天,P<0.05;治疗组的1年、2年生存率为77.4%和53.3%,比对照组的58.1%和35.5%稍高,但没有显著性差异.结论:联合应用康莱特可以提高中晚期食管癌放疗患者的耐受性,减少治疗间断时间.

    作者:刘苗生;王崇宇 刊期: 2006年第05期

  • 实体肿瘤高强度聚焦超声治疗及护理

    目的:观察高强度聚焦超声治疗恶性实体肿瘤的效果及护理.方法:对30例恶性实体瘤应用HI-FUNIT-9000型超声聚焦肿瘤消融机分次逐层完全覆盖靶区组织进行治疗.结果:治疗过程中出现胸闷、气喘1例,术后出现皮肤灼伤4例,血尿加重1例,发热1例.结论:通过对30例患者的观察,应做好心理、饮食及治疗前、中、后的护理,密切配合医生完成治疗.

    作者:范晓燕;王琳;邵志坚;范丽丽;王莉娜 刊期: 2006年第05期

  • 放射治疗71例骨转移癌止痛效果分析

    目的:观察低于常规剂量的2种分割方式治疗骨转移性疼痛的疗效.方法:71例恶性肿瘤晚期骨转移患者,总计93处骨转移灶,根据疼痛程度及行动受限程度,采取2种均低于常规剂量的分割方式进行放射治疗,分别为Dm30Gy/10f/2W,Dm30Gy/6f/2W.观察疼痛缓解情况.结果:2种分割方式止痛有效率分别为88%、95%.两组间无显著差异性(P>0.05).与国内多数文献报告的结果接近.结论:低于常规剂量的分割方式对转移性骨痛疗效与常规剂量的分割方式的疗效相当,且简便易行.

    作者:杨永宏 刊期: 2006年第05期

  • 白藜芦醇抗肿瘤活性研究进展

    白藜芦醇广泛分布于各种植物及食物中,具有重要的防治肿瘤及心血管疾病的作用,深入研究白藜芦醇的活性,尤其是抗肿瘤活性机制,具有重要的临床意义.

    作者:朱青;韩苏夏;马瑾璐 刊期: 2006年第05期

现代肿瘤医学杂志

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主管:陕西省科学技术协会

主办:中国抗癌协会 陕西省抗癌协会 陕西省肿瘤防治研究所 陕西省医学会