学术投稿

小鼠TERT启动子的克隆及在肿瘤细胞中的转录活性研究

司少艳;梁爽;宋淑军;冯凯;刘俊丽;张军;路浩君;张铭

关键词:小鼠端粒酶逆转录酶启动子, 靶向基因治疗, 肿瘤
摘要:目的:克隆不同长度的小鼠端粒酶逆转录酶(mouse telomerase reverse transcriptase,mTERT)启动子,研究其在小鼠肝癌细胞Hepa1-6、结肠癌细胞CT26、恶性黑色素瘤细胞B16和小鼠成纤维细胞NIH3T3中的转录活性.方法:以Hepa1-6细胞的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增不同长度的mTERT启动子片段,分别命名为mTERT1至7;然后分别克隆入荧光素酶报告基因质粒pGL3-Basic构建真核表达载体;采用脂质体Lipofectamine2000将重组质粒分别和pRL-CMV共转染Hepa1-6、CT26、B16和NIH3T3细胞,采用双荧光素酶法检测不同长度的mTERT启动子片断在细胞中的转录活性.结果:双酶切和测序鉴定均显示不同长度的mTERT启动子克隆成功及其表达载体构建成功;荧光素酶活性检测显示mTERT1至5在3种肿瘤细胞中有较高的转录活性,而在NIH3T3细胞中的活性较低,mTERT6和mTERT7在所有细胞中均很低;同一片断在不同肿瘤细胞株中活性不同.结论:mTERT核心启动子区位于ATG上游333bp内,且具有肿瘤特异性.
现代肿瘤医学杂志相关文献
  • 趋化因子受体CXCR4在乳腺癌中的表达及临床意义

    目的:探讨乳腺癌中趋化因子受体CXCR4的表达及临床意义.方法: 采用免疫组化S-P染色法检测乳腺癌、乳腺增生组织、及乳腺纤维腺瘤中CXCR4表达,分析CXCR4在乳腺癌中表达与患者淋巴结转移状态、Her2、PCNA关系.结果: CXCR4在乳腺癌组织中高表达,与乳腺增生组织及乳腺纤维腺瘤组织中表达有显著性差异,与患者淋巴结转移状态、Her2、PCNA密切相关.结论: CXCR4在乳腺癌中高表达,可以作为乳腺癌患者预后的一个指标,为寻找新的乳腺癌治疗靶点提供了依据.

    作者:李文仿;王耕;王明华;惠震;赵宗彬 刊期: 2010年第02期

  • 头颈肿瘤5-脂氧合酶及Ki-67在星形细胞瘤中的表达及其相关性研究

    目的:研究5-脂氧合酶(5-LOX)和Ki-67在星形细胞瘤中的表达及相关性.方法: 免疫组织化学法检测60例星形细胞瘤(低度恶性33例,高度恶性27例)中5-LOX和Ki-67的表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测5-LOX和Ki-67的mRNA水平,另取14例行脑外伤内减压术的脑组织作为对照.结果: 对照组中5-LOX和Ki-67不表达或低表达,星形细胞瘤中5-LOX阳性表达率66.7%(40/60),Ki-67阳性表达率71.7%(43/60);高度恶性组5-LOX和Ki-67 的阳性表达率高于低度恶性组(P<0.01);5-LOX和Ki-67表达呈正相关(γ=0.875,P<0.01).星形细胞瘤5-LOX和Ki-67的mRNA含量高于正常脑组织(P<0.01),高度恶性组5-LOX和Ki-67的mRNA含量高于低度恶性组(P<0.01),5-LOX和Ki-67在星形细胞瘤中的mRNA水平呈正相关(γ=0.781,P<0.01).结论: 5-LOX和Ki-67的表达与星形细胞瘤恶性程度有关,二者在星形细胞瘤发生发展过程中有协同作用.

    作者:雷军荣;秦军;罗杰;涂汉军;张力;王辉;黄宽明 刊期: 2010年第02期

  • 不同照射野三维适形放疗在局部晚期非小细胞肺癌中的应用

    目的:分析不同照射野三维适形放疗在局部晚期非小细胞肺癌中的应用价值.方法: 回顾性分析2005年1月至2008年6月收治的132例局部晚期非小细胞肺癌患者资料,均行三维适形放疗,依据照射野的不同,分成3野组与5野组,常规分割进行照射,5次/周,DT60Gy-66Gy/30f-33f.观察两组患者近期疗效、V30、V20、V15、V10、V5等参数以及放射性肺炎的发生,并进行比较.结果: 两组患者之间近期疗效(CR+PR)、V20、放射性肺炎的发生均无差异(P>0.05);3野组V30、V15、V10高,而5野组V5较高,V30、V10、V5具有非常显著差异(P<0.01),V15具有显著差异(P<0.05).结论: 采用3野或5野进行照射,效果相似.

    作者:孔亚梅;彭云武;李玉新;陈桂明 刊期: 2010年第02期

  • 肿瘤患者外周血淋巴细胞化疗药物敏感性检测的应用研究

    目的:探讨肿瘤患者外周血淋巴细胞对临床常用化疗药物的敏感性,筛选个体敏感的化疗药物,指导临床用药.方法:采用MTT法检测154例肿瘤患者外周血淋巴细胞对常用15种化疗药物的敏感性.结果:本方法测定的结果与临床常规化疗的结果基本一致.结论:MTT法是一种简便、快速、可行的体外药敏实验方法,可为肿瘤患者化疗提供重要的实验依据.

    作者:赵满仓;魏文青;刘晶;张艳;焦娟 刊期: 2010年第02期

  • 肠系膜下动脉的临床解剖

    目的:观察肠系膜下动脉分支情况,分析其对结、直肠手术的影响.方法:在结、直肠手术中自肠系膜下动脉根部解剖该动脉及其属支,观察该动脉及其分支、分支吻合情况并测量长度.结果:23例肠系膜下动脉均自腹主动脉发出,14例左结肠动脉单独自肠系膜下动脉发出,7例与乙状结肠动脉共干,2例左结肠动脉缺如.肠系膜下动脉平均长度为(6.8±2.36)cm.其根部至发出第一分支的长度是(3.93±2.62)cm.第一分支与第二分支之间长度为(2.03±1.75)cm.左结肠动脉干长度(2.67±2.07)cm.结论:肠系膜下动脉分支及长度变异大,在结、直肠癌手术中处理不当可能导致转移淋巴结残留,也可能致吻合口血循环不好或形成张力.用带蒂乙状结肠瓣修复阴道时可因血管束张力、血循环不良致肠瓣坏死.

    作者:匡毅;李卫 刊期: 2010年第02期

  • 胃癌淋巴结转移与预后的关系

    目的:探讨胃癌淋巴结转移与预后的关系,为胃癌的手术治疗提供依据.方法: 回顾性分析2000年-2004年间住院并行手术治疗的胃癌患者361例,建立数据库用SPSS13.0统计软件分析.结果: Logistic多因素回归分析显示胃癌肿瘤大小、浸润深度与淋巴结转移有关(P<0.01);Kaplan-Meier生存分析显示淋巴结转移与胃癌预后相关(P<0.05);而在相同浸润深度时,淋巴结转移与胃癌预后无关(P>0.05).结论: 对于浸润深度相同,而淋巴结转移程度不同的胃癌,积极手术治疗能取得同样的治疗效果.

    作者:张丹杰;车向明;刘瑞廷 刊期: 2010年第02期

  • 卡培他滨联合长春瑞滨治疗晚期乳腺癌临床观察

    目的:观察卡培他滨联合长春瑞滨对耐药的晚期乳腺癌的疗效及毒性.方法:34 例耐药的晚期乳腺癌,均接受卡培他滨 2500 mg/m2,分早晚两次餐后30分钟温开水送服,第1-14天,间隔7天;长春瑞滨 25mg/m2 加入生理盐水100ml中静脉滴注15分钟,第1、8天,21天为1周期,化疗4个周期.结果:34例患者中,CR 5例(14.71%),PR 15例(44.12%),SD 8例(23.51%),PD 6例(17.65%),有效率为58.82%,疾病控制率为82.35%.结论:卡培他滨联合长春瑞滨治疗耐药的晚期乳腺癌有较好的疗效,不良反应轻,患者可耐受.

    作者:吴涛;王晓芳 刊期: 2010年第02期

  • 胃癌腹腔灌注化疗临床进展

    局部复发和转移是导致胃癌患者死亡的主要原因.近年来,腹腔内化疗(intraperitoneal chemotherapy,IPC)作为进展期胃癌的辅助治疗手段之一已逐渐应用于临床,并取得了很好的疗效.IPC相对于全身化疗有着明显的药代动力学优势,药物是影响其疗效的主要因素.目前IPC常用的药物有5-Fu、PDD、喜树碱等,取得了一定的疗效.近年来有研究显示紫杉类药物更适用于IPC,并在临床取得了独特的疗效.IPC已在临床应用多年,其操作简单、使用安全、方便.本文就晚期胃癌腹腔内化疗的机制、特点及药物的选择和疗效等方面进行综述.

    作者:黄万中;蒋华 刊期: 2010年第02期

  • 钼靶X线假阴性乳腺癌的临床病理及分子生物学研究进展

    在众多影像学检查方法中,钼靶X线摄影是首选检查方法,技术成熟,具有诊断准确性高,早期、快速、方便、价廉的优点,对早期乳腺癌具有较高的敏感性.1 钼靶X线的作用原理及临床意义乳腺组织有腺体组织、导管、脂肪及少量结缔组织组成,这些软组织密度相似,对普通X线的衰减无明显差别,而钼靶所放射的软X线波长适用于乳腺组织投照佳波长(0.63-0.90A),对乳腺组织投照具有独特的优越性,能将乳腺组织内病变清晰地显示于胶片上.

    作者:葛怀娥;耿翠芝 刊期: 2010年第02期

  • Livin在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

    目的:探讨凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein,IAP)家族的新成员Livin 及其两种异构体Livinα和Livinβ在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与NSCLC 临床病理的关系.方法: 采用逆转录多聚酶链式反应( RT- PCR) 检测NSCLC 组织中Livinα mRNA 和Livinβ mRNA 的表达.结果: 58例NSCLC 组织中Livin mRNA 表达阳性率为74.1%,而在癌旁组织低表达(5.1% ,P<0.01) .Livin mRNA 表达与患者年龄,病理分型﹑肿瘤分化程度﹑淋巴结转移及TNM分期均无明显相关关系.结论: Livin 在非小膈、胸壁等复杂疾病的诊断和治疗.细胞肺癌组织中特异性地高表达,可能与肿瘤的发生﹑发展密切相关,可能成为诊断和治疗的新靶点.

    作者:刘俊华;吴纪祥;刘益飞;张裕东;张宏 刊期: 2010年第02期

  • 原发性胆囊癌的影像学诊断现状及进展

    原发性胆囊癌是胆道系统常见的恶性肿瘤,由于早期缺乏特异性,患者就诊多属中晚期,影像学作为其检测的主要手段,已被临床广泛应用.现就影像学诊断胆囊癌的进展作一综述.

    作者:吕校平;司芩 刊期: 2010年第02期

  • c-FLIP与凋亡、信号转导途径

    c-FLIP是一种凋亡抑制蛋白,能强效抑制Fas(CD95/APO-1)、TRAIL(肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体)-R1/R2(DR4/5)、TNFR1(肿瘤坏死因子受体)等死亡受体(DR)诱导的细胞凋亡,近年来发现其在多种凋亡、信号转导途径中发挥了凋亡抑制的作用.

    作者:宋敏;陆化 刊期: 2010年第02期

  • Gadd45α与肿瘤关系的研究进展

    生长抑制及DNA损伤诱导基因45 alpha(Gadd45α)是p53的下游靶基因,当面对各种环境应激时表达上调,例如电离辐射、紫外线照射、烷化剂等.Gadd45α的表达受多个水平的调节.Gadd45α在调节细胞周期监测点、细胞凋亡、DNA修复、维护中心体的稳定等方面扮演重要角色.它与多种肿瘤的发生发展密切相关.Gadd45α在大部分肿瘤细胞中的表达是降低的,但是在恶性胶质瘤和胰腺导管癌中表达却上调.基于Gadd45α在肿瘤研究中的作用,将来可能会是一个抗肿瘤的分子靶点.

    作者:韩敏辉;冯英明 刊期: 2010年第02期

  • 逆转录病毒介导重组CXCR4对前列腺癌细胞侵袭力的影响

    目的:构建CXCR4基因重组逆转录病毒表达载体pLEGFP-CXCR4,并转染PC-3细胞,探讨趋化因子受体CXCR4对人前列腺癌细胞体外侵袭能力的影响.方法: 分离健康人外周血单个核细胞,提取总RNA,以其为模板, RT-PCR法扩增CXCR4,获取CXCR4基因全长序列,装入带有绿色荧光蛋白(GFP)的逆转录病毒质粒pLEGFP-N1,用脂质体法转染PC-3细胞,采用实时定量PCR和Western blotting观察CXCR4表达情况,并通过体外细胞-基质粘附试验和Transwells小室检测肿瘤细胞体外侵袭能力的变化.结果: 成功构建pLEGFP-CXCR4载体,转染人前列腺癌细胞 72h后,CXCR4 mRNA及蛋白质水平明显上调,细胞的体外侵袭力明显增强,增殖活性增强.结论: CXCR4转染能够明显提高CXCR4基因mRNA及蛋白水平,提高人前列腺癌细胞体外侵袭能力.

    作者:刁鑫伟;王钦文;谢启超;陈正堂;叶明福;汤金梁 刊期: 2010年第02期

  • 新型棉酚衍生物ApoG2对人前列腺癌PC-3移植瘤生长的抑制

    目的:探讨棉酚衍生物ApoG2对前列腺癌的抑制作用,并了解其作用机理.方法:建立人前列腺癌细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,在ApoG2作用下观察其对皮下移植瘤生长的抑制作用,通过免疫组化方法检测肿瘤组织中bcl-2、PCNA及caspase-3、-8的表达.结果: ApoG2可明显抑制前列腺癌皮下移植瘤生长速度,肿瘤体积明显减小,ApoG2能增加肿瘤组织中caspase-3、8的表达,减少PCNA表达.结论: ApoG2对人前列腺癌有显著的生长抑制作用.

    作者:张献清;黄晓峰;穆士杰;易静;安群星;夏爱军;陈蕤;吴道澄 刊期: 2010年第02期

  • 肾黏液小管状和梭形细胞癌1例报告并文献复习

    目的:探讨肾黏液小管状和梭形细胞癌的临床病理特点及诊断、鉴别诊断.方法:对1例肾黏液小管状和梭形细胞癌进行临床病理学及免疫组织化学分析.结果:肾黏液小管状和梭形细胞癌患者临床无特殊表现,肿块与周围肾组织分界清楚.镜下观察:肿瘤呈不规则管状结构、间质呈黏液状,瘤细胞呈立方形或梭形、胞浆嗜酸,核形规则,核分裂少见.免疫组化染色AE1/AE3、EMA、Vimentin阳性表达,S-100、Desmin、SMA、CD34、HMB45、CD10、CD15、CgA、Syn、NSE、CD99阴性表达,Ki-67(3%).结论:肾黏液小管状和梭形细胞癌为少见肿瘤,明确该肿瘤的组织起源及病理特征,对于病理与临床诊断和鉴别诊断有重要意义.

    作者:钱震;何欣 刊期: 2010年第02期

  • MMP-2、Ki67在宫颈癌中的表达及与肿瘤增殖、转移的关系

    目的:探讨MMP-2和Ki67在宫颈癌组织中表达及与肿瘤细胞增殖侵袭、转移的关系.方法:用免疫组织化学S-P法检测125例宫颈癌,54例对照组(宫颈切缘正常组织)中 MMP-2、Ki67的表达,分析MMP-2和Ki67的表达与临床病理因素的关系.结果:宫颈癌MMP-2和Ki 67表达率分别为83.7%和79.7%(均高于正常宫颈组织,P<0.005),两者均表达97例,符合率为77.6%,两者差异无显著性(P>0.05);MMP-2和Ki67的表达与癌细胞的血管侵袭、侵袭深度、宫颈旁淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者的年龄、肿瘤大小无明显关系(P>0.05).结论:宫颈癌MMP-2和Ki67表达与肿瘤细胞的增殖以及肿瘤侵袭、转移相关,在宫颈癌的发展过程中起重要作用.MMP-2和Ki67可作为评价宫颈癌恶性潜能的生物学标志物.

    作者:肖梅 刊期: 2010年第02期

  • 胰头癌放射治疗1例

    1 临床资料患者,男,45岁,胰腺癌剖腹探查术后.患者于2006年8月出现阵发性上腹部绞痛,伴有恶心,就诊于当地医院诊断为急性胆囊炎,经抗炎对症治疗后,症状反复发作.2007年4月患者再次出现阵发性上腹部绞痛,于当地医院对症治疗疗效差,后出现巩膜、皮肤黄染,遂行上腹部B超提示胆囊结石、胰腺偏大.于2007年5月7日行剖腹探查术,术中见胰头部可触及一包块,质硬、活动度差,直径超过5厘米,考虑为胰头癌,行胆囊切除、胆总管、十二指肠吻合术.术后20余天,为求胰腺病灶放射治疗入我科.

    作者:高宏;周惠敏;吴淑娟 刊期: 2010年第02期

  • 经肝动脉热灌注化疗栓塞治疗肝转移癌

    目的:评价经肝动脉热化疗栓塞治疗肝转移癌的临床效果.方法:63例肝转移癌患者随机分为两组,热化疗组30例,经动脉超选择性热化疗栓塞,将5-氟尿嘧啶、丝裂霉素及顺铂分别与生理盐水混合,用热疗机加热至65℃后经导管缓慢注入肝动脉,注射完成后用超液化碘油栓塞肿瘤供血动脉.常温组33例,经导管将与热化疗组相同化疗药常温灌注后用超液化碘油栓塞肿瘤供血动脉.术后观察体温、肝功及有无并发症出现.所有患者每间隔1月重复1次,少完成3次治疗.每月复查CEA及肝脏CT,观察肿瘤内碘油沉积及病灶大小、数目及CEA变化并统计患者生存率.结果:热化疗组生存率:6月、12月、18月、24月分别为100%、93%、73%、60%,与常温组相比有显著性差异(P<0.01);治疗后热化疗组肿瘤数目及大小较常温组明显减少和缩小,有显著性差异(P<0.01);两组之间碘油沉积、体温、肝功能、并发症无显著差异(P>0.05).结论:经肝动脉热化疗栓塞治疗肝转移癌能显著提高疗效,延长患者生存期.

    作者:谢正强;张丽;匡黎;殷娟;李宏章;赵年 刊期: 2010年第02期

  • 三维立体培养中H460细胞MMP-2、MMP-9的表达

    目的:建立肺癌细胞的三维立体培养模型,测定肺癌细胞在三维立体培养中的基质金属蛋白酶(MMPs)的表达,研究MMPs在肺癌侵袭与转移中的作用.方法:采用非小细胞肺癌H460细胞系建立肺癌细胞三维立体培养模型,观察癌细胞的生长,同时设置平面培养对照组,用明胶酶谱法测定两组不同时间点MMP-2、MMP-9.结果:H460细胞在立体胶原内生长良好,分泌有MMP-2、MMP-9,且分泌量多于平面培养组.结论:三维立体培养肺癌细胞能清晰地表达MMPs,是研究MMPs在癌细胞的侵袭与转移作用机制的一种可行方法.

    作者:李继东;朱运奎;吴昌归;肖永久;薛庆亮;赵斌斌 刊期: 2010年第02期

现代肿瘤医学杂志

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主管:陕西省科学技术协会

主办:中国抗癌协会 陕西省抗癌协会 陕西省肿瘤防治研究所 陕西省医学会