学术投稿

Her2/ECD-sf162/TM融合杆状病毒表达及鉴定

李谨革;龙敏;王希;董柯;林芳;刘冲;张惠中

关键词:Her2/neu, 胞外区, SIV, 杆状病毒
摘要:目的:获得融合表达的Her2/ECD-sf162/TM杆状病毒,为后续基于SIV Gag蛋白的Her2病毒样颗粒疫苗的制备奠定实验基础。方法:将Her2胞外段基因与猴免疫缺陷病毒( simian immunodeficiency virus, SIV)包膜蛋白sf162跨膜区基因融合的Her2/ECD-sf162/TM PFastBac重组表达载体,转座大肠杆菌E. coli DH10Bac菌株,获得重组杆粒,在昆虫细胞中表达获得重组杆状病毒,Western blot方法对该病毒进行鉴定。结果:构建的Her2/ECD-sf162/TM杆状病毒表达载体经PCR鉴定正确,转染昆虫细胞后获得了重组杆状病毒,该融合杆状病毒蛋白可与抗Her2抗体发生免疫反应。结论:成功构建的Her2/ECD-sf162/TM杆状病毒可用于Her2病毒样颗粒疫苗的制备。
现代肿瘤医学杂志相关文献
  • 口咽鳞癌组织中HPV16感染和P16蛋白表达的临床意义

    目的:检测口咽鳞癌中HPV16感染及P16表达率,并分析临床意义。方法:采用原位杂交法检测60例口咽鳞癌组织中HPV16的表达,免疫组化法检测95例口咽鳞癌组织P16的表达情况,分析HPV16与P16的相关性,总结上述两种蛋白在口咽癌中的临床意义。结果:口咽鳞癌组织中HPV16感染率为48.3%(29/60),P16阳性表达率为52.6%(50/95),60例标本中HPV16感染与 P16表达显著相关(P<0.001),用P16表达预测HPV16感染的正确率可达90%(54/60),跟国内外报道一致。P16阳性组相比P16阴性组,吸烟、饮酒、非嚼槟榔、T3+T4、有淋巴结转移、III-IV临床分期和高分化者所占比例更低,但不具有统计学差异( P>0.05)。平均随访时间38个月,随访率65.3%(62/95),62例口咽鳞癌病人中P16阳性组和P16阴性组的3年总体生存率和无瘤生存率分别为70.4%对比40.0%(P=0.008)和63.0%对比25.7%(P=0.004)。总体生存率多因素分析提示,P16阴性病人死亡风险是 P16阳性病人的2.12倍(HR 0.471,95%CI 0.201-1.103,P=0.083),无瘤生存率多因素分析提示,P16阴性病人死亡风险是 P16阳性病人的2.36倍(HR 0.432,95%CI 0.201-0.891,P=0.024),P16与口咽癌的预后密切相关。结论:P16表达和HPV16表达存在紧密相关性,P16可以替代HPV16来预测预后,P16蛋白阳性口咽癌患者具有非吸烟、非饮酒、嚼槟榔和肿瘤分化程度低的趋势,检测P16表达对口咽癌病人预后判断有重要的提示意义。

    作者:崔湘凝;张欣;徐婧;黄东海;唐瑶云;田勇泉;范松青;刘俊文 刊期: 2015年第13期

  • 乳腺癌合并高血压患者术后伤口愈合不良分析

    目的:分析乳腺癌合并高血压患者行改良根治术后伤口愈合不良的原因,探寻促进伤口愈合的方法。方法:随机选取我院2012年8月-2014年8月收治的76例乳腺癌患者的临床资料,按是否并发高血压分为两组,对照组无并发症37例;并发高血压组39例,对比两组患者伤口愈合情况。结果:对照组平均置管时间(19.1±7.0)天,并发高血压组平均置管时间(29.3±18.3)天,引流量增多。与对照组比较,并发高血压组患者伤口愈合迟缓,两组患者术后伤口愈合情况比较差异有统计学意义( P<0.01)。结论:并发高血压组乳腺癌患者行改良根治术后引流管留置时间较长,伤口愈合较迟缓。积极调控血压,维持血压平稳,术中术后正确医护,将有效促进患者伤口愈合,明显提高患者术后生活质量。

    作者:张萍;马涛;宋卫;丁云;陆肖玮 刊期: 2015年第13期

  • 围手术期早期应用振动排痰机对降低食管癌肺部感染的效果观察

    目的:探讨围手术期早期应用振动排痰机对食管癌患者术后肺部感染发病状况的影响。方法:将2013年1月-2013年12月期间148例食管癌患者进行随机分组。分为干预组(共74例)及对照组(共74例),比较两组患者术后肺部感染的发生情况。结果:比较两组排痰效果显示:肺部感染率为9.46%(14/148),其中干预组为4.05%(3/74),显著低于对照组14.86%(11/74)(P=0.025)。干预组咳嗽持续时间(2.4±1.20)d,显著短于对照组(4.07±3.30)d(P=0.023)。排痰量干预组为(16.1±1.24)ml,显著高于对照组(12.67±1.02)ml(P=0.014)。比较呼吸功能监测指标显示:干预组术后呼吸频率、血氧饱和度、氧合指数、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、临床肺部感染评分(CPIS)均优于对照组,有统计学差异(P<0.05)。结论:围手术期早期应用振动排痰机排痰,可减少食管癌患者肺部感染的发生。

    作者:刘雅;郭萍利;郝楠;李静;李芬 刊期: 2015年第13期

  • 三氧化二砷联合塞来昔布对上皮性卵巢癌细胞的抗肿瘤效应及相关机制研究

    目的:研究对上皮性卵巢癌采用三氧化二砷( Arsenic Trioxide,AS2 O3)与环氧化酶-2( Cyclooxygen-ase-2,COX-2)抑制剂塞来昔布( Celecoxib)联合用药的有效性及其机制。方法:以上皮性卵巢癌细胞株OVCAR-3为研究对象,采用MTT体外药敏试验、Hoechest33258凋亡染色、流式细胞仪检测凋亡及细胞周期、蛋白质印迹法检测环氧化酶-2、凋亡相关蛋白等方法在细胞水平检验AS2 O3和Celecoxib的单药及联合用药的有效性及可能的分子机制。结果:AS2 O3和Celecoxib对OVCAR-3细胞株均具有剂量依赖性的生长抑制作用,两种药物单药的IC50值分别为4.72μmol/L和42.58μmol/L。两药联合后呈现明显的协同抗肿瘤效应,联合后的增殖抑制率和细胞凋亡率均大于任一单药作用,P<0.05,联合用药组的q值分别为3.59和2.16,联合用药具有明显的G2/M期阻滞效应。蛋白质印记法结果显示,两药联合作用后,COX-2、bcl-2表达均低于单药组,bax和casPase-3表达均高于单药组。结论:AS2 O3和COX-2抑制剂Celecoxib对上皮性卵巢癌细胞株单药有效,联合后具有显著的协同抗肿瘤效应。

    作者:高克非;曾根 刊期: 2015年第13期

  • MACC1和C-met蛋白在食管癌中的表达及意义

    目的:观察结肠癌转移相关基因( MACC1)和肝细胞生长因子受体( C-met)蛋白在食管癌中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学EnVinsion法检测88例食管癌组织中MACC1和C-met蛋白的表达情况,分析两者与食管癌病理分级、临床分期的关系及两者在食管癌组织中表达的相关性。结果:MACC1和C-met在食管癌组织中的阳性率分别为88.64%和75.00%。在食管癌中MACC1和C-met蛋白高表达与临床分级、分期显著相关( P<0.001)。进一步分析显示食管癌组织中MACC1和C-met蛋白表达具有相关性。结论:食管癌组织中MACC1、C-met及其蛋白表达水平增高,C-met通路的激活和MACC1过表达可能与食管癌的发生、发展有关,MACC1和C-met具有作为食管癌分子标志物的潜在价值。

    作者:杨锋;王磊;钟代星;黄立军;姜涛;张志培 刊期: 2015年第13期

  • 宫颈癌患者根治术后院内感染的细菌学培养及抗菌药物应用

    目的:探讨宫颈癌患者根治术后院内感染的细菌培养病原菌种类及其对抗菌药物的耐药性。方法:分析2003年3月-2013年5月10年间治疗的110例行宫颈癌根治术患者资料,观察院内感染及合理使用抗菌药物状况。结果:在110例宫颈癌根治术患者中,28例感染泌尿系统疾病,占25.5%;尿潴留感染者37例,占33.6%;其他并发症感染者为5例,占4.5%。分离出99株病原菌,其中革兰阳性菌34株,占34.3%;革兰阴性菌50株,占50.5%;其他菌种15株,占15.2%。感染的病原菌以粪肠球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌以及真菌为主。大肠埃希菌对大部分药物耐药性强,其次是铜绿假单胞菌对抗菌药物耐药性强。所有病原菌对庆大霉素耐药性强,对去甲万古霉素耐药性低,尤其是革兰阴性菌。结论:宫颈癌根治术患者易发生院内感染,应正确掌握病原菌的感染分布状况,合理使用抗菌药物。

    作者:张宇靖;辛志泳;马媛媛 刊期: 2015年第13期

  • 下调ZEB-1表达对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移与侵袭的影响

    目的:探讨ZEB-1对非小细胞肺癌细胞株A549生物学行为的影响。方法:构建干扰ZEB-1的质粒,转染至A548细胞株,运用体外增殖、迁移、侵袭实验来观察ZEB-1表达下调后对非小细胞肺癌细胞株A549生物学行为的影响。结果:下调ZEB-1的表达可降低A549细胞株的增殖、迁移和侵袭能力。结论:ZEB-1表达水平与非小细胞肺癌侵袭转移的能力显著相关。

    作者:牛玉捷;信波;庞海林;刘乐乐;申炜炜;张贺龙 刊期: 2015年第13期

  • 外阴癌局部扩大切除联合个体化修复的疗效

    目的:对比外阴癌局部扩大切除+个体化外阴缺损修复术与传统外阴广泛切除术的临床疗效,研究外阴癌外科治疗的优化方案。方法:自1997年6月至2012年6月共行外阴癌根治性手术35例,其中25例行标准外阴广泛切除术创面直接缝合(对照组),10例行外阴癌扩大局部切除+个体化Ⅰ期修复(研究组)。观察对比两组切口愈合、术后外阴外形和功能状态及无复发生存率。结果:研究组皮瓣均完全存活。1例菱形皮瓣出现切口部分哆开,经保守治疗后20天愈合。对照组切口延迟愈合21例,占84%。研究组术后外阴形态和质地、排尿、性生活优于对照组。对照组和研究组的3年无复发生存率分别为66.6%和80.0%,无统计学差异,P=0.476。结论:相对于传统外阴广泛切除,外阴局部扩大切除+个体化修复能降低术后切口延迟愈合率,改善外阴形态和功能,而不降低肿瘤控制率,是值得推荐的外阴癌治疗模式。

    作者:李燕;彭汉伟;关明飞;朱安娜;黄萍 刊期: 2015年第13期

  • 膀胱癌组织中DNMT蛋白表达水平与肿瘤增殖和凋亡程度的相关性

    目的:探讨膀胱癌组织中DNMT蛋白表达水平与肿瘤增殖和凋亡程度的相关性。方法:收集膀胱癌组织标本80例和正常膀胱组织标本80例进行DNMT蛋白免疫组化分析。同时选择ABS-1膀胱癌细胞分为空白组、对照组、实验组。空白组加入常规培养基,对照组转染50nmol/L的空载体,实验组转染50nmol/L DNMT1 siRNA载体,然后进行肿瘤的增殖与凋亡分析。收集细胞进行DNMT蛋白表达检测。结果:DNMT1蛋白在膀胱癌组织中的阳性表达率为42.5%,在正常膀胱组织中的阳性表达率为2.5%,对比差异明显( P<0.05)。转染后 DNMT1在空白组、对照组、实验组中的相对表达量分别为0.512±0.014、0.485±0.037和0.100±0.034,对比差异明显(P<0.05)。实验组增殖性明显低于空白组和对照组,而细胞凋亡率明显高于空白组和对照组,组间对比差异均有统计学意义( P<0.05)。结论:膀胱癌组织与膀胱癌细胞中存在DNMT1蛋白过表达,抑制DNMT1蛋白表达能有效抑制肿瘤细胞的增殖和促进凋亡。

    作者:王全玉;何炜;蔺强;李莉蕊;吴振启 刊期: 2015年第13期

  • Sema3 A在胃癌中的表达及意义

    目的:探讨Sema3A在胃癌中的表达及意义。方法:利用酶联免疫吸附法( ELISA)检测正常健康人及胃癌患者血清中Sema3A表达的差异性。应用实时荧光定量聚合酶链反应( Real time PCR)检测胃癌细胞系、人正常胃黏膜细胞中Sema3A mRNA的表达差异。应用免疫印迹法( Western Blot)检测胃癌细胞系、人正常胃黏膜细胞中Sema3A 蛋白的表达差异。结果:与正常健康对照者相比,Sema3A在胃癌患者血清中表达下降(P<0.001),且与胃癌患者的年龄、肿瘤分化程度相关(P<0.05)。人转移潜能胃癌细胞株MKN-28M、MKN-28NM中Sema3A mRNA和蛋白表达量明显低于人正常胃黏膜细胞( P<0.05),且在高转移潜能MKN-28M细胞中表达量低( P<0.05)。结论:与正常对照组相比,Sema3A在胃癌患者血清、人胃癌细胞株中均表达下降,且在胃癌高转移潜能MKN-28M细胞中表达低,提示Sema3A在胃癌的发生发展中具有重要作用,可能扮演着抑癌基因的作用。

    作者:骞佩;崔兆勋;王亚芳;庞海林;聂娜;张贺龙;刘理礼 刊期: 2015年第13期

  • EGFR、CEA、P53在胃癌组织中的表达及意义

    目的:探讨EGFR、CEA和P53在胃癌组织中的表达与临床病理特征之间的关系,并分析其临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测90例胃癌组织中EGFR、CEA和P53的表达,分析EGFR、CEA和P53的表达与临床病理特征的关系。并对64例中晚期胃癌患者进行生存分析。结果:90例胃癌组织标本中EG-FR、CEA和P53阳性表达率分别为45.6%、74.4%和53.3%。EGFR的表达与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移和病理分期密切相关( P<0.05);CEA阳性表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移密切相关( P<0.05);P53蛋白表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移和病理分期密切相关( P<0.05)。EGFR、CEA的高表达与患者术后生存期<3年相关(均P<0.05)。EGFR的表达与CEA和P53均呈正相关( r=0.280,P=0.008;r=0.230,P=0.030)。单因素分析显示EGFR、CEA和P53均为影响中晚期胃癌患者预后的重要因素,多因素分析表明EGFR和CEA是影响中晚期胃癌患者预后的独立危险因素。结论:联合检测EGFR、CEA和P53在胃癌组织中的表达有助于胃癌的临床诊断、治疗及预后评估。

    作者:高文华;付勇;谷翠华;卢宁 刊期: 2015年第13期

  • 12例孤立性纤维性肿瘤临床病理分析

    目的:探讨孤立性纤维性肿瘤( solitary fibrous tumor,SFT)的临床病理特点、免疫表型、鉴别诊断、生物学行为及预后。方法:收集12例孤立性纤维性肿瘤的临床病理资料和免疫组化染色,并结合文献进行分析讨论。结果:12例孤立性纤维性肿瘤平均发病年龄为40.2(29-70)岁,多发生于胸腔、腹腔,其中1例为恶性SFT。镜下肿瘤细胞多为梭形细胞,少细胞区和多细胞区相间,两者间隔以瘢痕样透明变性粗胶原纤,可见分枝状的血管外皮瘤样区。免疫表型:梭形细胞Vimentin、CD34和CD99弥漫强阳性,不同程度表达Bcl-2、SMA、EMA、Desmin、S-100。结论:SFT属于中间生物学行为的肿瘤,可复发或转移。少数SFT虽然具有实体富于细胞纤维肉瘤样模式,但其生物学行为仍然相对良性。一些组织学良性的SFT在术后10年也可复发和转移,“去分化SFT”预后差。

    作者:马丽梅;曾林华 刊期: 2015年第13期

  • 青年胃癌患者临床病理资料的回顾性分析

    目的:分析青年胃癌患者临床病理特点与预后之间的关系。方法:分析2007年1月至2009年6月本院手术治疗的653例胃癌患者资料,比较青年胃癌患者与老年胃癌患者临床病理特征及预后。结果:两组相比,青年组胃癌患者以女性多见,易累及全胃,Borrmann Ⅲ、Ⅳ型和印戒细胞癌的比例更高,分化程度更低,浸润程度更深,易出现腹痛,具有遗传因素( P<0.05)。青年组和老年组胃癌患者术后5年生存率分别为39.1%和56.6%,差异有统计学意义( P<0.05)。单因素和多因素预后分析显示,TNM分期和手术方式是影响青年胃癌患者预后的独立因素。结论:青年胃癌以高度恶性弥漫性为主,与遗传关系密切,易误诊漏诊,确诊时多为进展期,故应注重其早期筛查,早期诊断、根治性手术及相关治疗是提高其预后的关键。

    作者:叶春;吴国强;李瑾;蒋会勇;张成;张雪峰 刊期: 2015年第13期

  • Luteolin抑制血管生成的机制研究

    目的:探讨luteolin对血管的抑制机制。方法:采用不同浓度luteolin处理人微血管内皮细胞,观察luteolin对内皮细胞生长,乳腺癌细胞MDA-MB 231培养液介导的内皮细胞趋化抑制作用。并探讨luteolin对内皮细胞中IL-8信号激活的抑制作用,及luteolin对血管生成抑制作用机制。结果:Luteolin对人微血管内皮细胞细胞增殖抑制作用明显( P<0.01)。Luteolin可抑制乳腺癌细胞MDA-MB 231培养液介导的内皮细胞趋化作用( P<0.01),并明显抑制IL-8对内皮细胞ERK及AKT的激活。结论:Luteolin可抑制人微血管内皮细胞增殖及乳腺癌细胞MDA-MB 231培养液介导的趋化作用,并可抑制IL-8对人微血管内皮细胞的信号激活作用,luteolin抗血管生成作用在预防恶性肿瘤复发及转移中可能有重要的作用。

    作者:李文仿;欧琴;王耕;赵宗彬 刊期: 2015年第13期

  • 低浓度乙醇诱导人胰腺癌细胞凋亡的实验研究

    目的:探讨低浓度乙醇对胰腺癌细胞凋亡的诱导作用。方法:用含不同浓度乙醇(0%、2%、4%和6%)培养液培养胰腺癌细胞。CCK8法检测不同浓度乙醇对胰腺癌细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞的凋亡。实时荧光定量PCR法检测凋亡相关基因casPase-8 mRNA、casPase-9 mRNA的表达水平变化,West-ern blot检测casPase-3蛋白表达水平的变化。结果:低浓度乙醇可抑制胰腺癌细胞的增殖,随着浓度的增加,细胞存活率明显下降,与对照组(0%组)相比均有统计学差异(P<0.05)。流式细胞仪检测显示2%、4%和6%乙醇组均可诱导细胞凋亡,与对照组(0%组)相比均有统计学差异( P<0.05)。casPase-8 mRNA在2%、4%和6%乙醇组的表达与对照组相比未见明显增加( P>0.05),而casPase-9 mRNA在2%、4%和6%乙醇组中的表达均增加,且与对照组相比均有统计学差异( P<0.05)。活性casPase-3蛋白在2%、4%和6%乙醇组中均有表达,而对照组未见活性casPase-3蛋白的表达。结论:低浓度乙醇可诱导胰腺癌细胞凋亡。

    作者:张文颖;伊庆强;袁海花;刘峰;王美玲 刊期: 2015年第13期

  • NDRG1与MMP-7在胰腺导管腺癌中的表达及意义

    目的:检测胰腺导管腺癌中NDRG1及MMP-7的表达,探讨其与临床病理特征的关系,并分析二者在胰腺癌诊断及治疗中的意义。方法:胰腺导管腺癌标本86例,胰腺导管腺癌癌旁正常胰腺组织86例,应用免疫组化法检测NDRG1和MMP-7蛋白的表达情况,检测其表达水平与临床病理特征的关系及二者的统计学相关性。结果:NDRG1和MMP-7表达于胰腺导管腺癌导管内皮细胞膜及细胞质,平均光密度值分别为0.1934±0.0327及0.1876±0.0249,在癌旁正常胰腺组织中NDRG1、MMP-7平均光密度值分别为0.1323±0.0243及0.1156±0.0297,二者差异有统计学意义( P<0.01;P<0.05)。NDRG1高表达与肿瘤直径、肿瘤TNM分期、淋巴结转移呈正相关性( P<0.05;P<0.01;P<0.05)。MMP-7高表达与肿瘤直径、肿瘤TNM分期、淋巴结转移呈正相关性( P均<0.05)。SPearman rank相关分析结果显示,NDRG1及MMP-7呈统计学正相关性( r=0.267,P<0.05)。结论:NDRG1和MMP-7蛋白表达增高与胰腺导管腺癌的发生、发展及侵袭转移有关。NDRG1和MMP-7在胰腺导管腺癌组织中的表达相关,二者联合检测可作为胰腺癌预后判断及治疗的靶向候选基因。

    作者:张小薄;高峰;谭晓冬;周磊;王怀涛;任宇鹏 刊期: 2015年第13期

  • miR-21作用于PTEN与肿瘤耐药关系的研究进展

    miRNA( microRNA)是一类非编码的微小RNA,其成熟体通过与靶mRNA 3ˊ端非编码区特异性结合,可在翻译和转录后水平调控靶基因的表达。有研究表明miRNA与细胞的发展、分化、凋亡和增殖有着密切的关系。miR-21(microRNA-21)作为miRNA的一个重要分子,在肿瘤的形成和耐药中发挥着重要作用。在众多耐药肿瘤细胞中,miR-21通过下调靶基因PTEN从而抑制肿瘤细胞的凋亡,增加肿瘤细胞的生长、转移和侵袭。本文就miR-21通过作于其靶基因PTEN与肿瘤耐药的关系作一综述。

    作者:陈彭;刘利 刊期: 2015年第13期

  • 人附睾蛋白4的临床应用进展

    人附睾蛋白4( HE4)是一种新型肿瘤标志物,本文从HE4的结构、表达、功能在妇科肿瘤应用,包括其对卵巢癌早期诊断,监测,预后及复发,进行综述,同时对其在肺癌肾纤维化,泌尿系统移行细胞癌中的表达亦进行了综述。后对目前检测HE4的两种方法酶联免疫吸附法与电化学发光法进行比较。

    作者:黄津;杨宏伟;王毅 刊期: 2015年第13期

  • 胆囊癌的常规超声与超声造影检查对比分析

    目的:探讨常规超声检查及超声造影在胆囊癌诊断中的对比分析。方法:回顾性分析29例经手术及病理证实为胆囊癌的常规超声及超声造影声像图特征及误诊分析。结果:常规超声误漏诊8例,3例误诊为胆泥,2例误诊为慢性胆囊炎胆结石,2例误诊为胆囊息肉,1例胆囊癌伴肝转移仅诊断为肝占位。超声造影误诊1例胆囊腺瘤局灶性癌变为胆囊腺瘤。与常规超声比较超声造影对胆囊癌诊断的符合率从72.4%上升到96.6%。结论:超声造影与常规超声检查相比可提高早期胆囊癌的检出率,对胆囊癌的诊断具有较高的临床价值。

    作者:杨伟;司芩;夏炳兰 刊期: 2015年第13期

  • STAT3与子宫内膜癌关系及分子靶向治疗的研究进展

    STAT3( signal transducer and activator of transcriPtion 3)是一种存在于细胞质中的转录因子,是多条致癌信号转导通路的汇集点。在各种细胞外信号作用下STAT3在多种肿瘤中呈异常激活,通过修饰靶基因的表达,调节细胞增殖、分化及凋亡,与子宫内膜癌的发生、发展、侵袭、转移及预后密切相关,可作为早期诊断及判断预后的指标。近年来子宫内膜癌研究中针对STAT3通路的分子靶向治疗取得了很大进展。

    作者:闫晶晶;崔玉兰;尚秀敏 刊期: 2015年第13期

现代肿瘤医学杂志

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主管:陕西省科学技术协会

主办:中国抗癌协会 陕西省抗癌协会 陕西省肿瘤防治研究所 陕西省医学会