学术投稿

大鼠胰岛的分离纯化方法改进与功能鉴定

袁宇;丛聪;张静;魏玲玲;李胜富;金熙;麦刚;李幼平;程惊秋;陆燕蓉

关键词:胰岛, 分离, 纯化, 胰岛素, 大鼠
摘要:目的 通过改进胰腺消化和分离的技术条件,提高成年大鼠胰岛分离纯化产率和质量. 方法 用胶原酶Ⅺ液灌注消化成年SD大鼠胰腺,对胰岛分离纯化方法加以改进:以 4 种比重的 Euro- Ficoll (F1∶D=1.132,F2∶D=1.108,F4∶D=1.069) 和 Hank's 液(F5∶D=1.023) 不连续密度梯度离心,以离心半径 15 cm,2 000 r/min 于4℃缓慢升降离心 20 min,收集位于F1 和 F2界面的胰岛.双硫腙特异染色法鉴定胰岛纯度;二醋酸酯荧光素/碘化丙啶染色法计算胰岛成活率;放射免疫分析法检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌量,计算刺激指数.将胰岛当量(islets equivalent quantity,IEQ) 为 1000 的胰岛移植于同品系糖尿病大鼠肾包膜下,9d 内隔日观察动物血糖的变化,评价胰岛功能.比较分离条件优化前后收获胰岛的产率和质量. 结果 改进纯化方法后每只大鼠胰岛收获量为(920±122) IEQ,胰岛纯度> 90%,胰岛细胞成活率为 91%±2%.胰岛细胞功能良好,在低糖和高糖刺激后培养液中胰岛素浓度分别为(18.25±0.32) mU/L 和(36.70±3.57)mU/L,刺激指数为 2.01±0.15.1000 IEQ 胰岛移植于糖尿病大鼠肾包膜下,观察期内可维持动物血糖水平正常. 结论 改进后的胶原酶灌注消化和不连续梯度离心方法提高了胰岛的产率,保证了胰岛的高纯度及高成活率.
中国修复重建外科杂志相关文献
  • 髁间闭合式和开放式人工膝关节假体对全膝关节置换术后出血量的影响

    目的 全膝关节置换术(total knee replacement,TKR)出血量大,探讨股骨髁间闭合式人工膝关节假体有无减少TKR手术出血量的作用. 方法 2005年6月- 2006年12月,对108例原发性膝关节骨性关节炎患者施行单、双膝 TKR 术.患者全身状况良好,无手术禁忌证.采用髁间闭合式膝关节假体54例(A组),男7例,女47例;年龄 41~76岁,病程4~16年;其中单膝TKR组(A1组)27例,双膝TKR组(A2组)27例.采用髁间开放式膝关节假体54例(B组),男8例,女46例;年龄59~81岁,病程8~26年;其中单膝TKR组(B1组)27例,双膝TKR组(B2组) 27 例.患者均在相同麻醉下由同一组医生完成手术,比较A、B两组术后出血量和手术总出血量.结果 术后出血量:A1、A2、B1 及 B2组分别为(890±352)、(1694±528)、(1068±386) 及 (2065±622)mL:A1 与 B1组比较,差异无统计学意义(P>0.05);A2组与B2组比较,差异有统计学意义(P>0.05).手术总出血量:A1、A2、B1及B2组分别为( 1095±329)、(2082±594)、(1274±415) 及 (2459±734)mL;A1 组与 B1 组比较,差异无统计学意义(P>0.05);A2组与B2组比较,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 髁间闭合式膝关节假体对减少TKR术后出血量有一定作用,但不是主要影响因素,术中彻底止血是关键.

    作者:姜军;吕厚山;朱靖有 刊期: 2008年第01期

  • 膝关节镜下松解术治疗膝关节功能障碍

    目的 总结膝关节功能障碍行关节镜下松解,以及术后康复方法及疗效.方法 2002年10月-2006年2月,采用膝关节镜下松解术治疗膝关节功能障碍15例,男11例,女4例;年龄25~56岁.左侧9例,右侧6例.髌骨骨折7例,胫骨平台骨折 4 例,前交叉韧带断裂3例,化脓性关节炎1例.病程6个月~3年,平均 1.5 年.膝关节功能障碍程度:伸膝0~10°,屈膝30~60°;膝关节活动范围30~50°.术后行关节腔冲洗,早期 CPM 机功能锻炼,手法屈膝按摩. 结果 患者术后切口Ⅰ期愈合,无并发症.获随访 1~3 年半,平均2年.膝关节活动度:屈 110°~伸 0°者4例,屈100°~伸0°者7例,屈90°~伸0°者3例,屈70°~伸0°者1例.按KSS评分标准,优11例,良3例,可1例,优良率为 93.3%. 结论 关节镜下行膝关节内松解,术后关节腔冲洗,为早期行膝关节功能锻炼创造了条件,有利于膝关节功能康复.

    作者:张爱民;和玉芹;韩立业 刊期: 2008年第01期

  • 重建髁部治疗肱骨髁上髁间严重骨缺损性骨不连

    目的 探讨肱骨髁部骨不连伴严重骨缺损的重建方法及临床效果.方法 1998年9月-2005年9月,收治肱骨髁部骨不连伴严重骨缺损18例.男12例,女6例;年龄18~60岁.原始骨折按 AO/ASIF肱骨髁部骨折分型:A3 型5例,B1 型2例,C2 型4例,C3 型7例.术前影像学检查证实肱骨髁部骨不连,髁部内外侧柱和/或髁间骨缺损,缺损骨量 1~4 cm2.肘关节活动度:伸 5~65°,平均 21.5°;屈 85.0~123.5°,平均95.8°.根据改良 Cassebaum 评分系统,肘关节功能优1例,良4例,优良率为 27.8%.受伤至本次手术时间为7~52个月,平均22.8个月.手术均采用尺骨鹰嘴截骨入路,取自体髂骨对缺损髁部进行重建,综合运用形状记忆加压接骨器、克氏针张力带、加压空心钉、解剖钢板、重建钢板等多种方式进行固定. 结果 术后切口均Ⅰ期愈合.18 例获随访12~86个月,平均27.6个月.未见骨块移位、植入物松动及内固定断裂.X 线片检查示骨不连端于术后4~8个月骨性愈合,平均5.7个月.1 例术后4个月肘关节前方发现异位骨化.18 例术后 1 年肘关节活动度:伸 0~44.5°,平均 11.4°;屈 105.5~144.5°,平均 128.6°.采用改良Cassebaum 评分系统评定肘关节功能:优8例,良6例,中3例,差1例,优良率 77.8%. 结论 自体髂骨可有效重建肱骨髁部的解剖形态,利用成骨力值的概念进行骨块间的加压固定可有效促进骨折愈合.髁部骨块的良好复位和有效固定,配合术后早期积极的功能锻炼,可使肘关节的功能得到明显改善.

    作者:牛云飞;张春才;禹宝庆;许硕贵;王家林;苏佳灿;张鹏;管华鹏;刘欣伟;李卓东 刊期: 2008年第01期

  • 计算机辅助手术系统与关节镜下前交叉韧带重建

    目的 针对近年多种导航系统用于前交叉韧带的重建手术,探讨计算机辅助手术系统如何改善前交叉韧带重建. 方法 广泛查阅近年国内外相关文献,分析目前较常用的计算机辅助系统(Otho Pilot 系统、Bone Morphing系统及透视导航系统)在术中的应用. 结果 计算机辅助系统通过三维的可视化定位装置,提高了隧道定位的精确度,按照解剖和等距参数,避免移植腱与股骨髁间窝切迹的撞击,实现了患者个体化前交叉韧带的准确定位植入. 结论 计算机辅助手术系统能更好地评估手术的精确度和可行性,满足了术者手术优化的要求,改善了手术的临床结果.

    作者:吴昊;Plaweski Stephane;Merloz Philippe 刊期: 2008年第01期

  • 32 例髋臼骨折手术疗效

    目的 总结髋臼骨折的手术治疗适应证、手术入路、术后处理及并发症防治. 方法 1998年5月-2006年7月,收治32例髋臼骨折患者.男21例,女11例;年龄18~67岁,平均42岁.车祸伤20例,砸压伤4例,坠落伤8例.按 Letournel 分类:后壁骨折6例,后壁及后柱骨折3例,前壁骨折、前壁及前柱骨折各2例,双柱骨折7例,双柱伴横行骨折、髋关节脱位伴髋臼骨折各 4 例,股骨颈骨折伴内壁粉碎性骨折、伴髋臼后壁骨折、伴后柱骨折、伴前壁骨折各1例.术前常规牵引1~2周后行手术复位内固定30例,全髋关节置换2例. 结果 患者术后切口均Ⅰ期愈合.全部获随访6个月~7年,平均28个月.X 线片示骨折于术后12~16 周愈合.3 例发生异位骨化;1 例发生髋关节骨性关节炎,股骨头坏死,二期行全髋关节置换;1 例坐骨神经损伤8个月后基本恢复.参照美国矫形外科研究院评价髋关节功能的方法:优25例,良2例,可2例,差3例,优良率 84.4%. 结论 术前明确骨折分类、手术时机适当、合适入路、可靠内固定及满意复位是提高髋臼骨折治疗效果的关键,重建钢板技术是一种较好的治疗方法,螺钉的植入方向是技术关键.

    作者:宋锡刚;张惠萍 刊期: 2008年第01期

  • 固定一侧前肢后对犬后肢负重的影响

    目的 建立三足负重犬模型,模仿人的髋关节应力,观察其双后肢的动力学参数变化. 方法 选用10 只健康成年 Beagle 犬,雌雄不限,体重20~25 kg,一侧腕关节屈曲90°位固定,建立三足负重犬模型.于固定前后(分别为对照组和实验组)行步态分析,比较双后肢的触地时间和地面反力变化. 结果 犬固定一侧前肢后,可三足行走,步态发生明显变化,呈前半身抬起的跳跃状行走,双后肢交替负重前行.实验组双后肢的站立相时间均有不同程度增加,同侧后肢为 (0.48±0.04)s,对侧后肢为(0.46±0.06)s,但与对照组犬的(0.43±0.05) s 比较无统计学意义(P>0.05).实验组双后肢峰值垂直地面反力明显增加,与对照组(3.26±0.48)倍体重比较差异有统计学意义(P<0.05).实验组同侧后肢的峰值加速力为 (0.80±0.30)倍体重,与对照组犬(0.72±0.13)倍体重比较差异有统计学意义(P<0.05);对侧后肢为(0.68±0.22)倍体重,与对照组比较无统计学意义(P>0.05);实验组双后肢的峰值减速力明显减小,同侧后肢为- (0.26±0.14)倍体重,对侧后肢为- (0.13±0.05) 倍体重,与对照组- (0.43±0.13) 倍体重比较差异有统计学意义(P<0.05).对照组犬的主要负重肢体为前肢,前肢承担体重的 62.8%±2.4%,后肢承担 37.2%±1.8%,实验组犬的主要负重肢体为后肢,承担体重的59.1±6.7%. 结论 三足负重犬可作为一个负重动物模型用来研究生物力学因素在髋关节相关疾病中的作用.

    作者:李鸿帅;张长青;白跃宏;周俊;曾炳芳 刊期: 2008年第01期

  • BrdU 标记家兔脂肪组织来源干细胞的体外研究

    目的 通过采用 BrdU 标记连续培养的家兔脂肪组织来源干细胞(adipose-derived stromal stem cells,ADSCs),检测其佳标记时间、标记剂量及毒性作用,探讨其作为干细胞标记示踪方法的可行性. 方法 8~12 周龄健康新西兰大白兔 6 只,雌雄不限,体重 1.5~2.0 kg.切取腹股沟皮下 1~2 mL 脂肪组织,采用贴壁法体外分离培养ADSCs,并进行鉴定.取第 3 代细胞以终浓度分别为5、10、15 和 20 μg/mL 的 BrdU 进行标记,分别记为A、B、C及 D 组;另 1 孔不含 BrdU,作为空白对照(E 组).标记12、24、48 和 72h后,采用免疫组织化学检测各组细胞阳性率,苔盼蓝排染法行细胞计数观察标记后细胞活性. 结果 原代培养的ADSCs形态主要为宽大、扁平、短梭形细胞;传代后细胞形态主要为长梭形;第3代 ADSCs经诱导均能向成骨细胞和脂肪细胞分化.免疫组织化学观察:第3代 ADSCs 经 BrdU 标记后,在荧光显微镜下胞核呈绿色荧光.孵育 12h,A、B、C、D 组细胞标记阳性率逐渐增高,分别为 30.6%±2.3%、32.4%±1.9%、45.8%±1.8%、50.8%±3.1%,C、D组与 A 组比较,差异有统计学意义(P<0.01);24 h,A、B、C及D组标记率分别为45.9%±2.0%、87.9%±3.3%、90.6%±2.9% 及 91.7%±3.2%;48 h 和 72 h,A、B、C、D 组标记情况与24 h 相似;E 组各时间点细胞标记阳性率为 0.孵育 24、48及72 h,B、C及D组细胞阳性率与 A 组比较,差异均有统计学意义(P<0.01).孵育12、24、48 及 72 h细胞计数,各组细胞活性均在90%以上,A、B、C、D组与E组比较,差异无统计学意义(P>0.05). 结论 BrdU 标记 ADSCs 的佳时间为 48 h,佳浓度为 10μg/mL;BrdU 对细胞标记率及安全性高.

    作者:黎洪棉;高建华;鲁峰;李华 刊期: 2008年第01期

  • 全膝关节置换术中胫骨假体旋转对线新技术

    目的 比较全膝关节置换术中确定胫骨假体旋转对线的参照方法,以提高手术效果,减少术后并发症. 方法 2006 年5月 -2007年4月,对60例膝内翻患者行旋转平台全膝人工关节置换,其中男27例,女33例;年龄55~78岁.随机分为两组,每组30例.术中胫骨假体定位方法:A组采用胫骨结节中内1/3线作为解剖标志;B组膝内翻0~9°患者采用胫骨结节内侧缘作为解剖标志,10~19°患者以胫骨结节内侧缘至胫骨结节中内1/3线区间的中线为准,≥20°的患者以胫骨结节中内1/3 线为准.测量术后两组聚乙烯半月板垫片的旋转角度. 结果 术后聚乙烯半月板垫片旋转角度测量,A 组内旋(5.6±2.8)°,其中膝内翻 0~9°患者为(8.4±3.8)°,10~19°患者为(3.5±2.7)°,≥20°患者为(0±2.4)°;B 组内旋(0±1.9)°,其中膝内翻0~9°患者为(0±2.1)°,10~19°患者为(0±2.0)°,≥20°患者为(0±1.7)°.A 组组内比较及与 B 组比较差异均有统计学意义(P<0.05),B 组组内比较差异无统计学意义(P>0.05). 结论 胫骨结节内侧缘至中内 1/3 线是较理想的胫骨假体旋转定位区间,线性的定位应根据患者膝关节内外翻畸形程度而定.

    作者:肖瑜;张福江;于建华;阚世廉 刊期: 2008年第01期

  • 三种组织工程鼓膜的构建

    目的 构建3种不同材料的组织工程鼓膜,并对其进行生物学特性检测. 方法 体重 30 kg 健康雄性小白猪1只,制备脱细胞硬脑膜及脱细胞真皮,并从牛皮中提取液态胶原,将第3代豚鼠鼓膜成纤维细胞 1×106个/mL,各 0.2 mL 种于3种材料表面进行培养,倒置相差显微镜下观察成纤维细胞的生长状态.培养1周后,将3种材料分别进行扫描电镜及HE染色观察,测定材料厚度及其张力. 结果 成纤维细胞在3种材料表面生长良好,呈束状平行排列,其中以胶原与脱细胞真皮表面成纤维细胞生长情况较佳.HE 染色及扫描电镜下可见成纤维细胞呈单层于3种材料表面连续生长.胶原膜、脱细胞真皮及脱细胞硬脑膜的平均厚度分别为 9.4、10.0 及 10.4 μm.张力强度测定,复合成纤维细胞的胶原组织工程鼓膜张力 (1.417±0.030) N/mm2,复合成纤维细胞的脱细胞真皮张力为 (24.500±2.040)N/mm2,复合成纤维细胞的脱细胞硬脑膜张力为(53.300±2.600)N/mm2;复合成纤维细胞的脱细胞真皮张力与正常豚鼠鼓膜张力26.700 N/mm2接近. 结论 脱细胞猪真皮为支架复合成纤维细胞构建的组织工程鼓膜,其张力与厚度均与正常豚鼠鼓膜相接近,是构建组织工程鼓膜的理想材料.

    作者:邓志宏;田勇胜;王锦玲;邱建华;刘源;赵宇;金岩 刊期: 2008年第01期

  • 异体锁骨移植重建锁骨肿瘤切除后骨缺损

    目的 评价异体锁骨移植重建锁骨肿瘤切除后骨缺损的方法及效果. 方法 2000年1月-2006 年1月,对9例锁骨肿瘤患者行肿瘤瘤段切除、异体锁骨联合钢板修复重建术.其中男4例,女5例;年龄12~68岁.良性肿瘤和瘤样病变2例,Campanaeci 影像学分级均为Ⅲ级;原发性恶性和转移瘤共7例.病变位于锁骨外侧端3例、胸骨端2例、骨干4例,2例合并病理性骨折.根据Enneking功能评价标准,术前患肢功能优3例,良3例,可1例,差2例;术前疼痛等级评定 (visual analogue scale,VAS) 示:中度以上静息痛 4 例,活动时中度以上疼痛3例,重度疼痛2例.肿瘤采用全切除方式,原发性恶性肿瘤和转移瘤术后分别局部辅助放疗和化疗,随访评价肿瘤控制、疼痛缓解、植骨愈合和肩关节功能等情况. 结果 9 例患者均获随访12~70个月,平均 34.6 个月.随访期内未发现局部肿瘤复发,原发性恶性肿瘤未见远隔转移.术后外形良好,未见明显排斥反应,无深部感染发生.8例患者异体骨与自体骨间Ⅰ期愈合,愈合时间3.2~6.8个月,平均5.4个月,其中1例患者取内固定后因外伤造成异体骨骨折,再次行钢板内固定治疗,4个月后骨折愈合;另1 例术后出现钢板松动、骨不连,经再次植骨后6个月愈合.Enneking 功能评价:术后3个月优6例,良3例;6例患者随访24个月时,优4例,良1例,可1例.VAS 评定示术后3个月仅2例上肢活动时出现轻度疼痛:术后12个月,7例无疼痛,活动时中度和轻度疼痛各1例. 结论 异体锁骨是锁骨肿瘤切除后残留骨缺损的一种良好重建材料,重建后患肩的外形和功能满意,疼痛减少,生活质量提高.

    作者:郭征;王臻;王哲;张涌泉 刊期: 2008年第01期

  • 纳米仿生组织工程血管体外构建的实验研究

    目的 利用静电纺丝 (electrospinning,ELSP) 技术构建具有纳米结构的纳米仿生组织工程血管 (nano-biomimetic-tissue engineered blood vessel,NBTEBV). 方法 6 月龄新西兰雄性家兔 30 只,体重 2.15~3.10 kg.制备兔血管内皮细胞 (vascular endothelial cell,VEC) 体外培养育种管型模具:采用多排喷头ELSP混纺兔平滑肌细胞(vascularsmooth muscle cell,VSMC)悬液及仿 ECM (mimic ECM,MECM) 溶液构建 NBTEBV. NBTEBV 用生物反应器体外培养,MTT 检测静置 24 h和动态培养7 d后NBTEBV 上 VECNSMC 的成活和增殖能力,行 HE 染色、扫描电镜观察及大抗张力检测. 结果 动态培养第7天的 NBTEBV 长 57 mm,外径 4 mm,壁厚 0.4 mm,色乳白,质地均匀,具有良好的柔韧性及弹性.静置孵育 24 h MTT 检测血管上成活细胞相对数为 3.5×105/mg,动态培养7 d 后为 8.9×106/mg.扫描电镜及 HE染色观察示NBTEBV与天然血管有相似的纳米结构及组织学特点;电镜结构呈现由100 nm 支架纤维构成的孔径约600 nm的网状结构;HE 染色示VEC 和 VSMC分层构建成血管状.动态培养第7天组织工程血管大静水压为950 mmHg,拟生理血压下(110/70 mmHg) 管径顺应变化率 3.0%;20 mm × 5 mm 组织片大抗张强度为 18.5 MPa. 结论 利用 ELSP技术可以将VSMC 和 MECM的支架材料同步构建成具有与天然血管相似纳米结构的组织工程血管.

    作者:郑晓兵;乔彤;冉峰;刘长建 刊期: 2008年第01期

  • 关节镜下平行丝线法治疗前交叉韧带撕脱骨折

    目的 总结和分析关节镜下套管针引导平行丝线固定法修复前交叉韧带胫骨止点撕脱骨折的手术方法和疗效. 方法 2001年1月-2005年12月,收治前交叉韧带胫骨止点撕脱骨折17例,其中男12例,女5例;年龄11~48岁.新鲜骨折14例,陈旧骨折3例.按 Meyers-Mckeever 分型,Ⅱ型5例,Ⅲ A型8例,ⅢB型4例,术前Lysholm 膝关节功能评分57.3 分.术后在支具保护下行功能锻炼,定期随访,摄X线片,观察、测量关节活动度及关节稳定性,术后行Lysholm膝关节功能评分. 结果 全部获随访6~28个月,平均12.7个月.膝关节活动度恢复正常者 13 例;不同程度受限 3 例,但关节活动度均超过 100°,为伴内侧副韧带损伤者;1 例陈旧骨折患者,术后过早去除支具功能锻炼,骨折未愈合,关节不稳,1年后二次行前交叉韧带重建术,效果满意.16例术后6个月复查,X 线片示均解剖复位并骨折愈合,无关节不稳;Lysholm 评分 97.8 分. 结论 关节镜下利用2条平行线固定法治疗前交叉韧带胫骨止点撕脱骨折,对前交叉韧带及骨块损伤小,骨折复位简便,固定范围广且可靠,应力承载面积大,受力均匀,能防止骨折块碎裂、旋转或上撬.

    作者:白伦浩;王佳时;田野;李洪瀛;李田;付勤;傅永慧 刊期: 2008年第01期

  • 盐酸氨基葡萄糖治疗膝退行性骨性关节炎的临床观察

    目的 评价盐酸氨基葡萄糖治疗膝退行性骨性关节炎 (degenerative osteoarthritis,DOA) 的临床疗效. 方法 2006 年2月-2007 年1月,采用盐酸氨基葡萄糖治疗60例膝DOA患者.男15例,女45例;年龄 41~67岁,平均 57.5 岁.病程6个月~3年.每日2次,每次750 mg,6周为1个疗程,4个月后重复1个疗程.所有患者经过2个疗程治疗后,采用国际 DOA 的评分标准 --Lequesne 指数评定膝关节休息痛、运动痛、压痛、关节活动度、晨僵及行走能力. 结果 治疗期间3例患者产生不良反应,发生率为5%,未作特殊处理后恢复.60 例患者均获随访 8~11个月,平均9.6个月.经治疗后,31例DOA各种临床症状完全消失,治愈率为 51.7%;27 例临床症状有不同程度减轻,好转率为45.0%;总有效率为 96.7%.膝关节休息痛、运动痛、压痛、关节活动度、晨僵及行走能力治疗后评分分别为(0.5±0.2)、(0.7±0.4)、(0.8±0.3)、(0.9±0.4)、(0.6±0.3)及(0.9±0.4) 分,治疗前各项评分为( 1.6±0.5)、(2.1±0.4)、(2.2±0.5)、(1.8±0.6)、(1.7±0.4)及(2.0±0.4)分,治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.01). 结论 盐酸氨基葡萄糖对治疗膝 DOA 具有缓解临床症状,改善关节功能的作用.

    作者:江相保;高李侠 刊期: 2008年第01期

  • 大鼠胰岛的分离纯化方法改进与功能鉴定

    目的 通过改进胰腺消化和分离的技术条件,提高成年大鼠胰岛分离纯化产率和质量. 方法 用胶原酶Ⅺ液灌注消化成年SD大鼠胰腺,对胰岛分离纯化方法加以改进:以 4 种比重的 Euro- Ficoll (F1∶D=1.132,F2∶D=1.108,F4∶D=1.069) 和 Hank's 液(F5∶D=1.023) 不连续密度梯度离心,以离心半径 15 cm,2 000 r/min 于4℃缓慢升降离心 20 min,收集位于F1 和 F2界面的胰岛.双硫腙特异染色法鉴定胰岛纯度;二醋酸酯荧光素/碘化丙啶染色法计算胰岛成活率;放射免疫分析法检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌量,计算刺激指数.将胰岛当量(islets equivalent quantity,IEQ) 为 1000 的胰岛移植于同品系糖尿病大鼠肾包膜下,9d 内隔日观察动物血糖的变化,评价胰岛功能.比较分离条件优化前后收获胰岛的产率和质量. 结果 改进纯化方法后每只大鼠胰岛收获量为(920±122) IEQ,胰岛纯度> 90%,胰岛细胞成活率为 91%±2%.胰岛细胞功能良好,在低糖和高糖刺激后培养液中胰岛素浓度分别为(18.25±0.32) mU/L 和(36.70±3.57)mU/L,刺激指数为 2.01±0.15.1000 IEQ 胰岛移植于糖尿病大鼠肾包膜下,观察期内可维持动物血糖水平正常. 结论 改进后的胶原酶灌注消化和不连续梯度离心方法提高了胰岛的产率,保证了胰岛的高纯度及高成活率.

    作者:袁宇;丛聪;张静;魏玲玲;李胜富;金熙;麦刚;李幼平;程惊秋;陆燕蓉 刊期: 2008年第01期

  • 三维骨建模系统在人工全膝关节置换时旋转对位的作用

    目的 为了进行人工全膝关节置换时假体旋转对位的量化研究,探讨三维骨建模的计算机辅助手术系统对量化操作的精确性和有效性. 方法 2002年11月 - 2003年6月,采用三维骨建模 Ceravision 系统对 21 例 21 膝保守治疗无效的三间隔骨性关节炎患者行人工全膝关节置换术.男5例5膝,女16例16膝;年龄64~79岁,平均 72.4 岁.左膝10例,右膝11例.主要临床表现为膝关节疼痛和活动受限.病程2~10年.14例膝内翻,7例膝外翻.根据相关的临床体检、影像学和导航系统资料,对术中假体旋转对位量值,并对术后3个月膝关节活动度、膝关节松弛度和髌骨稳定性进行分析. 结果 全部患者术后切口均Ⅰ期愈合.21 例患者均获随访12~16个月,平均13.3个月.术中股骨假体旋转对位内旋 1°~外旋 5°,胫骨假体旋转对位内旋 0°~外旋5°.其中膝内翻患者,股骨假体旋转对位外旋 1°~外旋5°,胫骨假体旋转对位外旋2°~外旋5°:膝外翻患者,股骨假体旋转对位内旋1°~外旋4°,胫骨假体旋转对位内旋0°~外旋 4°.术后3个月膝关节活动度,大屈膝度为 105~130°,平均 115°;膝关节额面松弛度,内侧 0.2~0.5 cm,平均 0.27 cm,外侧 1.0~2.5 cm,平均 1.7 cm.无膝痛、髌骨失稳和脱位等并发症发生. 结论 应用三维骨建模的计算机辅助手术系统,可针对患者个体精确地进行假体旋转对位.

    作者:吴昊;van Driessche Stephane;Goutallier Daniel 刊期: 2008年第01期

  • 人工全踝关节置换术围手术期并发症

    目的 针对全踝关节置换术(total ankle replacement,TAR)治疗终末期踝关节炎的围手术期并发症,分析出现原因并提出治疗对策. 方法 1999年3月-2006年11月,采用非限制活动负重型假体( scandinavian totalankle replacement,STAR)对35例患者行TAR.男19例,女16例;年龄27~68岁,平均50.5岁.左侧20例,右侧15例.创伤性关节炎12例,骨性关节炎8例,类风湿性关节炎15例.患者踝关节均有疼痛、不同程度肿胀及活动受限.病程9~64个月.按Kofoed踝关节评分系统对患者疼痛程度、关节功能、活动度进行综合评分.术前Kofoed总评分:6~48分,平均29分;疼痛评分0~35分,平均18.3分;功能评分6~18分,平均11.7分;活动度评分3~12分,平均9.2分.结果 术后2例切口感染经换药后延迟愈合,33例切口Ⅰ期愈合.28例获随访3~80个月,平均43.5个月.术中出现内踝骨折2例,踝关节内翻不稳定2例,踝关节背伸范围不足1例,均对症处理.术后足背中部及3~5趾相对缘皮肤感觉减退1例,无明显运动功能障碍,未作特殊处理.28例踝关节Kofoed总评分58~95分,平均85.5分;疼痛评分35~50分,平均48.3分;功能评分18~30分,平均20.7分;活动度评分16~20分,平均17.2分;与术前比较差异均有统计学意义(P<0.01).术后28例获优16例,良9例,中3例;X 线片检查均未见假体松动或下沉. 结论 采用STAR的TAR术虽然是治疗终末关节炎的有效手段,但存在特有的并发症,应严格控制手术适应证,掌握手术原则及技术并完善围手术期处理,减少并发症的发生.

    作者:廖翔;高志增;黄山虎;杨述华 刊期: 2008年第01期

  • 腓肠内侧动脉穿支带蒂皮瓣手术方法改进

    目的 总结腓肠内侧动脉穿支带蒂皮瓣修复髌前和胫骨上端软组织缺损的临床应用效果,并介绍皮瓣切取手术方法的改进. 方法 2003年5月- 2005年8月,在利用腓肠内侧动脉的肌皮穿支带蒂皮瓣修复的基础上,改进穿支皮瓣切取方法治疗16例髌前或胫骨上端伴骨或肌腱外露软组织缺损的创面.其中男11例,女5例;年龄24~59岁.髌前区9例,合并骨折4例;胫骨上端7例,合并骨折2例.软组织缺损范围 4.5 cm×3.0 cm~6.5 cm×5.5 cm.先从皮瓣近侧显露血管蒂,顺行向下分离至皮瓣的穿支血管,以其为中心切取皮瓣.皮瓣切取范围 5.5 cm×4.0 cm~7.5 cm ×6.5 cm. 结果 术后皮瓣全部成活,14例伤口Ⅰ期愈合,2例有小的皮缘表浅感染,经换敷料2周左右逐渐愈合.全部获随访 11个月~3年半,平均 2.1 年.局部骨折均在 14~18 周愈合,皮瓣质地、厚薄及颜色均较好,功能恢复较满意.取得了较满意的治疗效果.供区愈合良好,未见明显功能障碍. 结论 采用顺行法先显露血管蒂再找穿支的方法,较逆行法先切开皮瓣找穿支再显露血管蒂的方法操作更为简便,避免了先切皮瓣对穿支血管的误伤.

    作者:张功林;章鸣;郭翱;张灵芝;荆浩;凌爱军;何继华;彭俊洋 刊期: 2008年第01期

  • 头皮恶性肿瘤外科切除后的修复

    目的 总结不同手术方法修复与重建头皮恶性肿瘤术后缺损,评价其临床效果. 方法 1995 年1 月-2004 年9月,对70例头皮恶性肿瘤患者行手术治疗,其中男41例,女29例;年龄30~85岁,平均50.3岁.病程2周~3年,平均 3.5 个月.基底细胞癌 31 例,鳞状细胞癌24例,恶性黑色素瘤8例,纤维肉瘤4例,脂肪肉瘤2例,血管肉瘤 1 例.病变范围 1.0 cm×0.5 cm~10.0 cm×8.0 cm.根治性切除肿瘤后缺损3 cm×3 cm~12 cm × 11 cm,采用中厚皮片移植 51 例,邻近头皮瓣移位12例,颈肩随意皮瓣移位2例,斜方肌肌皮瓣移位3例,桡动脉逆行岛状皮瓣2例,切取范围 5 cm×4 cm~18 cm × 12 cm. 结果 67 例皮片及皮瓣成活,伤口Ⅰ期愈合;2例皮瓣远端坏死,经过换药后Ⅱ期愈合;1 例桡动脉逆行岛状皮瓣感染,对症处理后愈合.供区均Ⅰ期愈合.55例患者获随访 1~5年,5例复发.植皮患者中鳞状细胞癌患者和纤维肉瘤患者各1例,分别于术后1年及2年半复发,均再次行根治性切除后采用皮瓣移位修复刨面;皮瓣移位患者中血管肉瘤患者及鳞状细胞癌患者各1例于术后6个月及3个月复发放弃治疗,1 例纤维肉瘤患者术后2年复发,再次根治性切除后采用皮瓣移位修复创面.余患者均存活良好. 结论 头皮恶性肿瘤应早期诊断、及时治疗,广泛彻底切除并进行合理的创面修复是有效的治疗方法.

    作者:卿勇;岑瑛;王怀胜;刘勇 刊期: 2008年第01期

  • 特制假体置换在邻关节骨巨细胞瘤治疗中的应用

    目的 回顾性分析21例骨巨细胞瘤患者行广泛切除、特制人工假体置换术,总结近关节部位骨巨细胞瘤切除后功能重建中使用特制假体的作用及效果. 方法 1999年10月-2006年8月,对21例骨巨细胞瘤患者行广泛切除、特制人工假体置换术.男12例,女9例;年龄19~42岁,平均31.4岁.肱骨上段4例,肱骨远端1例,髋骨体2例,股骨近端2例,股骨远端9例,胫骨近端3例.按 Campanacci Ⅹ线分类:Ⅱ级9例、Ⅲ级12例.Enneking 外科分期均为3期. 结果 患者术后切口均Ⅰ期愈合.21例获随访8~70个月.1 例髋骨体肿瘤术后14个月因肺转移死亡,余患者无局部复发和转移,无骨折及假体松动.肢体功能按Enneking肢体肌肉骨骼肿瘤外科治疗重建术后功能评估标准进行评估:ISOLS 综合评分优14例,良4例,差2例,死亡1例,优良率85.7%. 结论 特制假体置换治疗近关节部位骨巨细胞瘤能减少复发,提高患者生存质量,是一种疗效可靠的手术方法.

    作者:郭世炳;冯卫;贾燕飞 刊期: 2008年第01期

  • 椎板回植及纤维蛋白封闭剂在椎管内肿瘤治疗中的应用

    目的 介绍在治疗原发椎管内肿瘤时联合应用椎板棘突回植及纤维蛋白封闭剂的手术方法,并评价其疗效. 方法 2003年6月-2005年12月,采用椎板棘突回植术及纤维蛋白封闭剂治疗椎管内肿瘤16例,男7例,女9例;年龄26~55岁.病程1个月~2年.肿瘤位于胸段8例,胸腰段3例,腰段5例.主要表现为腰背部疼痛及下肢不全瘫.所有患者均行MRI检查为椎管内髓外硬脊膜内占位性病变.其中单发神经鞘瘤9例,脊膜瘤5例,多发神经鞘瘤、胶质瘤各1例. 结果 手术过程顺利,无术中并发症.术后行X线及CT检查,复合体回植物位置良好,无螺钉突破椎板压迫硬脊膜.术后全部获12~42个月随访,疼痛及瘫痪程度明显改善,恢复了生活及工作能力.3例患者复查MRI示硬脊膜结构清晰,无明显粘连及压迫征象.14例患者复查CT未见骨不愈合及回植的复合体移入椎管,椎板内侧缘骨质未因过度增生而对硬脊膜产生新的压迫. 结论 在行椎管内肿瘤摘除术的同时联合应用纤维蛋白封闭剂及椎板棘突回植术可维持脊柱的稳定性,保持椎管的完整性,避免继发性椎管狭窄的发生,提高手术效果.

    作者:王旭;刘寿坤;袁翠华;温保军;吴锦清 刊期: 2008年第01期

中国修复重建外科杂志

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主管:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会

主办:中国康复医学会,四川大学