代富英;周金燕;钟娟;谭红
目的研究重庆地区临床分离的粘质沙雷菌E121编码超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因.方法PCR扩增ESBLs编码基因片段,克隆入pUCm-T载体,双脱氧链终止法测定核苷酸序列并确定亚型,等电聚焦测定β-内酰胺酶的等电点(pI).结果PCR扩增结果显示粘质沙雷菌E121产生的ESBLs为SHV型,其基因片段含756个核苷酸,GenBank查询其核苷酸序列与SHV-28型ESBLs完全相同.该耐药株至少含有等电点pI约为5.4和8.2的两种β-内酰胺酶.结论重庆地区粘质沙雷菌E121所产ESBLs亚型为SHV-28.
作者:陈勇川;朱卫民;钱元恕 刊期: 2005年第09期
将克隆自卡波霉素产生菌的4″-O-异戊酰基转移酶基因整合到螺旋霉素产生菌Streptomyces spiramyceticus F-21的染色体上,构建成一株稳定的生物工程菌WSJ-1-195,它产生的一组以4″-O-异戊酰螺旋霉素为主要成分的多组分基因工程新型抗生素命名为必特螺旋霉素.针对目前没有适合必特螺旋霉素产生菌的合成培养基,所以本文顺序通过部分因子析因设计法、速上升实验、中心组合实验,并利用统计学软件SAS V8对实验数据进行分析,确定了必特螺旋霉素合成培养基的组成,为以后对必特螺旋霉素生理生化特性的研究提供基础.经过优化后必特螺旋霉素的发酵效价从173μg/ml提高到1880μg/ml.
作者:付启伟;王永红;庄英萍;储炬;张嗣良 刊期: 2005年第09期
采用液体稀释法、菌丝生长抑制法和孢子萌发抑制法研究抗真菌多肽捷安肽素对疫霉、灰霉、辣椒炭疽病菌、棉花枯萎病菌的抑菌性能.结果表明,捷安肽素对疫霉的抑制作用强,MIC和MFC分别为3.92×104和7.84×104μg/ml.捷安肽素对供试真菌的孢子萌发和菌丝生长具有强烈的抑制作用,而且这种抑制作用随捷安肽素浓度和预处理时间的增加而增强.显微形态观察表明,经捷安肽素处理后,供试真菌呈现球形膨胀,而且随着捷安肽素浓度的增大和作用时间延长,球形膨胀的程度和发生频率也增加.
作者:代富英;周金燕;钟娟;谭红 刊期: 2005年第09期
目的研究耐氟康唑热带念珠菌临床株Fc30的外排泵耐药机制.方法运用半定量RT-PCR技术研究外排泵基因mdr1 mRNA水平与耐药的相关性.结果耐药株Fc30的mdr1基因mRNA灰度比值约为敏感株Fc17的2.3倍.结论与敏感株相比,耐氟康唑热带念珠菌Fc30外排泵基因mdr1过度表达与耐药相关.
作者:李劲松;宋诗铎 刊期: 2005年第09期
目的探讨多重耐药淋病奈瑟菌的耐药基因.方法应用KB法与琼脂稀释法测定35株淋病奈瑟菌对抗生素的敏感性,煮沸法提取菌株DNA,PCR扩增blaTEM基因、tetM基因、erm基因和mefA基因.结果35株淋病奈瑟菌的敏感性测定结果显示多重耐药blaTEM耐药基因的检出率为88.6%,tetM基因的携带率为11.4%,首次在国内从35株淋病奈瑟菌中检出mef、erm耐药基因,其中2株mefA基因阳性,1株erm基因阳性.结论淋病奈瑟菌的多重耐药与各耐药基因型之间密切相关.
作者:李国明;陈群;樊翌明 刊期: 2005年第09期
目的建立茜素红荷移分光光度法测定阿奇霉素片溶出度的方法.方法采用中国药典附录XC第三法,以250mlpH5的磷酸盐缓冲液为溶剂,转速为100r/min,经45min取样,茜素红荷移分光光度法在538nm处测定阿奇霉素的溶出度,限度为标示量的75%.结果阿奇霉素在51~255μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9996),平均回收率为99.2%.结论该方法准确、简便,可用于阿奇霉素片溶出度的测定.
作者:田书霞;蒋晔;谢赞;蔡太梅;赵兴茹 刊期: 2005年第09期
目的研究盐酸林可霉素两种晶型晶体结构中不同分子构象及氢键对其中、近红外光谱行为的影响.方法单晶X-射线衍射法、红外吸收光谱法、近红外光谱法.结果盐酸林可霉素两种晶型分属不同晶系,它们在晶格中的分子构象与分子内、分子间氢键均不同,从而造成它们中、近红外光谱行为的显著差异.结论可用中、近红外光谱法鉴别盐酸林可霉素两种晶型并可实现工业结晶中的离线和原位监控.
作者:张敏;杨梁;鹿颐;庞国勋 刊期: 2005年第09期
目的评价美罗培南和亚胺培南治疗老年重度医院内肺炎的有效性和安全性.方法共分析132例(53例美罗培南,79例亚胺培南;两药均为500mg,bid,ivgtt,疗程5~16d)老年重度医院内肺炎的临床疗效、细菌清除率、安全性和临床分离菌体外药敏试验.结果美罗培南和亚胺培南治疗老年重度医院内肺炎的总有效率分别为94.3%(50/53)和88.6%(70/79),痊愈率为88.6%(47/53)和75.9%(60/79).治疗前共分离细菌123株,美罗培南和亚胺培南对细菌的体外总敏感率为95.9%(118/123)和93.5%(87/93),细菌清除率为92.3%(48/52)和90.1%(64/71),不良反应发生率为9.4%(5/53)和12.6%(10/79),反应轻微(P>0.05).结论美罗培南和亚胺培南治疗老年重度医院内肺炎疗效确切且安全.
作者:蒋丽娟;王涤非;王莉;阮媛 刊期: 2005年第09期
采用RP-HPLC法测定氯霉素耳栓中氯霉素的含量.用C18色谱柱,以甲醇:乙腈:0.8%冰乙酸溶液(12 : 25 : 63)为流动相,检测波长278nm.氯霉素的线性方程C=2.57×106A-7.72×104,r=0.9999;范围为10~120μg/ml;回收率为99.8%,RSD=0.65%.该方法操作简单,灵敏度高,定量准确.
作者:张晓明;王锐 刊期: 2005年第09期
目的研究金葡菌耐药率的变迁.方法回顾分析1999~2003年住院患者共352株金葡菌药敏数据,药敏试验采用KB纸片扩散法.结果MRSA分离率较高,并呈逐年增高趋势.金葡菌对青霉素和氨苄西林呈高度耐药,对头孢唑林的耐药率迅速上升,由1999年的18.6%上升到2003年的75.0%.结论青霉素类、头孢菌素类和喹诺酮类抗菌药物在临床的大量应用,抗菌药物使用方法的不合理,对药敏实验重视不够以经验用药代替靶向用药等是金葡球菌耐药性迅速增长的主要原因.
作者:范春;牛其昌;施永新 刊期: 2005年第09期
目的研究产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum beta-lactamases,ESBLs)肠杆菌科细菌对氨基糖苷类抗生素的耐药分子机制.方法采用PCR方法对耐氨基糖苷类抗生素的产ESBLs菌株进行氨基糖苷类耐药机制研究,并同时对钝化酶基因DNA测序,进行网上基因相似性检索.结果20株耐氨基糖苷类的产ESBLs肠杆菌科细菌中存在氨基糖苷钝化酶基因,分别有aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅱ、ant(2″)-Ⅰ和aph(3′)-Ⅵ,以aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ和aac(6′)-Ⅰ为主.部分菌株同时可含有多种钝化酶基因.DNA测序分析结果与国外报道已知相应氨基糖苷钝化酶DNA测序结果一致.结论产ESBLs肠杆菌科细菌中普遍存在氨基糖苷钝化酶,四川大学华西医院分离得到的氨基糖苷类耐药的产ESBLs肠杆菌科细菌的钝化酶基因型主要是aac(6′)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(3)-Ⅰ和ant(2″)-Ⅰ.
作者:段建春;吕晓菊;赵燕;冯萍;俞汝佳;宗志勇;高燕渝;熊亚莉 刊期: 2005年第09期
建立用反相高效液相色谱(RP-HPLC)检测红霉素发酵液中S-腺苷甲硫氨酸(SAM)的方法,观察其在发酵过程中的变化.样品经离心、超声等处理,进行RP-HPLC分析,梯度洗脱.实验结果说明,该方法可以使SAM与发酵液中其它复杂组分得到较好的分离.红霉素发酵过程中SAM量随时间呈曲线变化,高峰值出现在96h左右.
作者:李京艳;王勇;王以光 刊期: 2005年第09期
建立力达霉素效价测定的微生物检定法,检定菌为枯草芽孢杆菌.当力达霉素的浓度为1.85~13.51μg/ml时,其抑菌圈直径与反应剂量呈线性关系,并与HPLC法进行比较,测定结果基本一致.
作者:赵春燕;王玉凤;炼润梅;高瑞娟;李电东 刊期: 2005年第09期
氨基糖苷类抗生素是目前临床上重要的抗感染药物,本文对该类抗生素生物合成的调控机理及有关菌种选育工作的进展进行了综述.
作者:范铭琦;赵敏 刊期: 2005年第09期
目的了解单剂量头孢克洛缓释片和常释胶囊的药动学特点,评价其生物等效性.方法22名健康男性受试者随机口服头孢克洛缓释片或常释胶囊750mg,定时采集血标本,HPLC法测定血药浓度,按照佳拟合的方法求算两种药物的药动学参数,评价生物等效性.结果头孢克洛缓释片和常释胶囊的Cmax分别为(7.44±2.77)和(10.11±3.887)mg/L;tmax分别为(3.80±0.87)和(1.42±0.53)h;t1/2β分别为(0.74±0.46)和(0.74±0.19)h;AUC0~n分别为(22.94±5.19)和(23.14±5.41)mg·h/L;AUC0~∞分别为(23.11±5.17)和(23.33±5.497)mg·h/L;CL/F分别为(4.4±1.98)和(6.05±7.49)L/h.F为(101±17.5)%.AUC的双向单侧t检验结果显示两药为生物等效制剂,Cmax和tmax的结果显示头孢克洛缓释片的达峰时间明显滞后于常释胶囊(P<0.05),血药浓度也明显低于常释胶囊(P<0.05).结论头孢克洛缓释片和常释胶囊为生物等效制剂,且头孢克洛缓释片在体内确有缓慢释放的特点.
作者:吕媛;康子胜;魏敏吉;李曼宁;刘燕;李天云;肖永红 刊期: 2005年第09期
目的从对植物疫病有拮抗作用的嗜线虫致病杆菌北京变种(Xenorhabdus nematophilus var.pekingensis)CB6菌株的发酵产物中分离纯化抗菌组分,并鉴定其结构.方法采用多种层析方法对其进行分离,并采用UV、IR、MS和NMR对其进行结构鉴定.结果分离到一个主要组分CB6-1,并鉴定其结构为3,4-二氢-8-羟基苯并吡喃衍生物.结论主要抗菌组分CB6-1与文献报道的Xencoumacin 1相同.
作者:黄武仁;朱昌雄;杨秀芬;杨怀文;许鸿章;解云英;简恒 刊期: 2005年第09期
目的建立金黄色葡萄球菌耐药转运蛋白NorA免疫检测方法.方法利用琼脂稀释法测定诺氟沙星(NFLX)对临床分离的6株金葡菌和标准菌株ATCC25923的MIC.对norA基因进行克隆、表达,提取表达产物包涵体,并进行了纯化.将纯化的表达蛋白作为免疫原免疫家兔,获取NorA蛋白的抗体血清.利用制得的抗体通过Western blotting检测临床分离的6株金葡菌的NorA蛋白表达水平.结果氟喹诺酮类药物耐药水平较高的临床分离金葡菌菌株的NorA蛋白表达水平一般较高,敏感菌株的耐药水平较低且接近.结论免疫检测方法可用于检测金葡萄菌耐药转运蛋白NorA的表达水平.
作者:邓旭明;李乾学;于录;周学章;张艳萍 刊期: 2005年第09期
目的研究液化沙雷菌超广谱β-内酰胺酶的特性.方法超声破碎法提取临床分离液化沙雷菌CR04的β-内酰胺酶,等电聚焦(IEF)测定其等电点(pI);硫酸铵反抽提、Sephadex G-75凝胶过滤和DE-52阴离子交换层析进行酶的纯化;SDS-PAGE法测定分子量和紫外分光光度法测定酶动力学参数.结果液化沙雷菌超广谱β-内酰胺酶的pI为7.5,分子量为28.77ku,动力学分析显示,该酶能水解头孢他啶、头孢噻肟和氨曲南,对舒巴坦(ICs0为77nmol/L)和三唑巴坦(IC50为17nmol/L)敏感.结论液化沙雷菌产生的超广谱β-内酰胺酶对酶抑制剂敏感.
作者:李苌清;凌保东;周歧新;雷军;余娴 刊期: 2005年第09期
目的探讨特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑体外联合抗白念珠菌的作用.方法采用微量液体稀释法测定特比萘芬、氟康唑、伊曲康唑对生殖器部位分离的36株白念珠菌药敏试验,应用棋盘微量稀释法测定特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑对36株白念珠菌的联合药敏试验.结果白念珠菌菌株对氟康唑、伊曲康唑、特比萘芬耐药株分别为3株(8.33%)、4株(11.11%)、6株(16.67%).特比萘芬和氟康唑联用MIC几何平均数较其单独应用均显著降低(t=3.590,P<0.05;t=3.252,P<0.05),15株有协同作用(42%),18株有相加作用(50%),3株无关作用(8%);特比萘芬和伊曲康唑联用后的MIC几何平均数较其单独应用均显著降低(t=3.849,P<0.001;t=2.409,P<0.05),表现为协同作用有14株(39%),相加作用的有17株(47%),无关作用的有5株(14%);均未发现拮抗作用.结论特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑联合应用对大部分白念珠菌能产生协同作用和相加作用,提示特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑联合应用能增强抗白念珠菌的作用.
作者:江惟苏;陈荣;谭升顺;陈庆秀 刊期: 2005年第09期