学术投稿

人食管鳞癌细胞系EC109中肿瘤干细胞的分离(富集)与鉴定

崔翔;杨浪;于茜;任勇;郭政军;刘强;刘庆;崔有宏;卞修武;张成武

关键词:食管鳞状细胞癌, 肿瘤干细胞, 细胞球, EC109
摘要:目的 运用无血清成球培养法从人食管鳞癌细胞系EC109中分离/富集肿瘤干细胞,并对其“干性”特性进行鉴定.方法 将EC109细胞接种至添加1X B27的干细胞培养基(DMEM/F12 1∶1,无血清),于poly-Hema包被的培养皿或低黏附培养板中培养,获取细胞球.采用实时定量PCR方法检测其干性相关转录因子的基因表达,连续传代和平板克隆形成实验评价其自我更新能力,免疫荧光细胞化学法检测其分化前后干性相关转录因子和分化标志物的表达变化,以裸鼠移植瘤实验检测其体内成瘤能力.结果 培养5d能获得EC109细胞的细胞球.细胞球细胞高表达Oct4等干性相关转录因子,具有自我更新能力、分化潜能.裸鼠体内1×104个细胞球细胞能启动肿瘤形成,而单层培养细胞则需要1×105个细胞,且同数量级的细胞球细胞较单层培养细胞所形成的肿瘤体积大.结论 无血清成球培养法能从食管鳞癌细胞系EC109获得细胞球,细胞球富集了肿瘤干细胞.
成都医学院学报杂志相关文献
  • 高校护理学生信息素养及其相关影响因素的调查研究

    1研究背景信息素养的定义常被人提及的是1989年美国图书馆学会(American Library Association,ALA)所界定“个人能察觉到何时需要信息,且有能力找寻、评估与有效利用所需信息”.而信息素养的范围,C.R.McClure(1994)[1]认为,在网络时代包含传统素养(traditional literacy)、媒体素养(media literacy)、计算机素养(computer literacy)及网络素养(network literacy)四方面.整体而言,信息素养是将传统素养、媒体素养、计算机素养和网络素养,借助适当的教育与训练,培育人们具备了解信息的价值,在需要信息时能有效率地查询信息、评估信息、组织信息与利用信息的能力.

    作者:郑砾;丘琦;舒林;王梅 刊期: 2012年第03期

  • 正交设计优化微波消解猪肉测定铅的条件

    目的 优化微波消解猪肉测定铅的实验条件.方法 设计三因素(功率、时间和压力)三水平的正交实验方案,微波消解标准猪肉,用原子吸收仪测定消解液铅含量,计算回收率,数据采用SPSS13.0软件进行方差分析.结果 猪肉微波消解影响因素的顺序依次为功率>时间>压力,佳组合为A3B3C2(功率80%、辐射时间180s、压力1.5Mpa),该条件下猪肉微波消解铅回收率为95.7%.结论 标准猪肉在本正交设计优化条件下消解效果较为理想.

    作者:王浩臣;伍小利;陈亚菲;李长洲;廖彬利;余小平;魏敏 刊期: 2012年第03期

  • 城市社区老年性痴呆患者生活质量评价

    目的 评价社区阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患者的生活质量.方法 从南昌、吉安、宜春三地6个社区的老年人中筛选出AD患者,应用日常生活能力量表(ADL)和世界卫生组织生活质量测定量表简表(WHOQOL-BREF)对AD患者的生活质量进行评估.结果 (1)城市社区4 350名60岁以上老年人中,214例诊断为AD患者,患病率为4.92%;轻、中、重型分别占20.09%、51.40%和28.50%;(2)AD患者日常生活能力明显下降,平均得分为(37.83±11.89)分,明显高于正常人(等分<16分);(3)AD患者生活质量得分低于健康对照,生理、心理、社会关系、环境四领域得分分别为(14.25±2.41)、(11.92±2.94)、(10.37±2.07)、(24.28±3.02)分.结论 城市社区老年人AD患病率较高,且以中型AD为多,日常生活能力和生活质量下降明显,应引起社会关注.

    作者:吴磊;赖丹;唐俊;袁也丰;黄河浪 刊期: 2012年第03期

  • 论医学类高校师资创新能力评估指标体系的设计原则

    设计科学合理的评估指标体系有助于提高对医学类高校师资创新能力管理的效果和效率.本文论证了医学类高校师资创新能力评估指标体系设计应遵循的定量与定性相结合、选择具有代表性的指标、关注指标的综合性与层次性等一般性原则;并探讨了设计中应遵循的特殊性原则,如依据“创新”的概念和内涵筛选指标、明确界定各关键子系统、考虑创新能力构建的条件因素和制约因素等.

    作者:张敏;余小平 刊期: 2012年第03期

  • 三步序贯法治疗急性脑出血临床研究

    目的 评估中医三步序贯法治疗急性脑出血的临床疗效.方法 将92例急性脑出血患者随机分为观察组和对照组,观察组患者46例,采用中医三步序贯治疗,分3个阶段,有主次采用中药汤剂进行清肝息风,通腑化痰,活血化瘀治疗;对照组46例,采用西药常规治疗.比较2组患者治疗前和治疗90 d后的血肿变化,神经功能改善情况及日常生活能力(ADL).结果 观察组治疗后颅内血肿与神经功能缺损评分降低趋势明显,差异有显著性意义(P<0.05).观察组治疗90 d内患者死亡2例,对照组7例,观察组死亡率远低于对照组.同时观察组肺部感染例数与多脏器功能衰竭例数均明显低于对照组,差异均有显著性意义(P<0.05).治疗90 d后,观察组日常生活能力恢复至Ⅰ级与Ⅱ级的例数明显高于对照组患者.且观察组处于Ⅴ级植物昏迷状态的患者明显低于对照组,因此观察组患者日常生活能力恢复情况优于对照组(P<0.05).结论 中医三步序贯法治疗急性脑出血能有助于患者血肿消退,促进意识清醒,避免脑病理性损伤,加快患者日常生活能力恢复,是治疗急性脑出血的有效手段.

    作者:龙大同 刊期: 2012年第03期

  • 自噬与衰老的关系

    在正常细胞生长和发育过程中,生物大分子的生物合成和分解代谢存在一种重要的平衡.环境变化通过多种调节机制,促进机体生长和发育,终保持生物合成和分解代谢平衡.在真核细胞中,蛋白质降解主要通过泛素-蛋白酶体途径和自噬-溶酶体途径完成:蛋白酶体途径局限于胞浆和细胞核,主要参与短寿命蛋白质的降解;而溶酶体途径由囊泡状细胞器组成,其内含有多种水解酶包括蛋白酶负责物质降解.众所周知,溶酶体途径负责长寿命蛋白质的降解.其中自噬(autophagy)是溶酶体途径的主要成分,它将包括蛋白质和受损细胞器在内的胞浆成分输送入溶酶体,从而将其降解[1].

    作者:崔敬;白雪源;陈香美 刊期: 2012年第03期

  • B超引导经皮肾镜气压弹道联合超声碎石术治疗上尿路结石

    目的 探讨B超引导下经皮肾镜气压弹道联合超声碎石术治疗上尿路结石的安全性、可靠性及临床疗效.方法 2009年10月~2010年10月,对本组84例(92侧)患者行经皮肾镜气压弹道联合超声碎石清石系统治疗上尿路结石的临床资料进行分析,对一期治疗效果及手术并发症进行总结.结果 所有患者均成功建立皮肾通道并一期碎石,平均手术时间76分,一次取净结石率94.5%(87/92),5侧有结石残留,辅助施行体外冲击波碎石或排石治疗后治愈.随访1~3个月,无严重手术并发症及后遗症.结论 经B超引导下采用经皮肾镜气压弹道联合超声碎石术处理上尿路结石具有安全及疗效可靠的特点,值得临床推广应用.

    作者:李春茂;张杰;游云超;李大平;夏茂楠;杨烁;杨天 刊期: 2012年第03期

  • 间歇清洁自家导尿术在慢性尿潴留患者中的应用

    目的 探讨“慢性尿潴留”患者行清洁自家导尿(CISC)降低下尿路感染的安全性和可靠性.方法 40例“慢性尿潴留”患者随机分为两组各20例,分别行CISC术(观察组)和膀胱造瘘术(对照组),术后1月复查尿常规、尿培养,观察术后下尿路感染情况.结果 1个月后复查尿常规,观察组泌尿系感染率为10%,对照组感染率为75%.1月后查尿培养提示:清洁中断尿菌革兰阴性杆菌落计数>105个/mL,观察组泌尿系感染率为5%,对照组感染率为70%.观察组患者的下尿路感染率显著低于对照组(P<0.05).结论 CISC术治疗“慢性尿潴留”疾病,能降低患者下尿路感染、改善其生活质量,且安全性、有效性较好,但费用昂贵.

    作者:左亚丽;刘振湘;徐晓亮;蔡勇;白志明 刊期: 2012年第03期

  • 人食管鳞癌细胞系EC109中肿瘤干细胞的分离(富集)与鉴定

    目的 运用无血清成球培养法从人食管鳞癌细胞系EC109中分离/富集肿瘤干细胞,并对其“干性”特性进行鉴定.方法 将EC109细胞接种至添加1X B27的干细胞培养基(DMEM/F12 1∶1,无血清),于poly-Hema包被的培养皿或低黏附培养板中培养,获取细胞球.采用实时定量PCR方法检测其干性相关转录因子的基因表达,连续传代和平板克隆形成实验评价其自我更新能力,免疫荧光细胞化学法检测其分化前后干性相关转录因子和分化标志物的表达变化,以裸鼠移植瘤实验检测其体内成瘤能力.结果 培养5d能获得EC109细胞的细胞球.细胞球细胞高表达Oct4等干性相关转录因子,具有自我更新能力、分化潜能.裸鼠体内1×104个细胞球细胞能启动肿瘤形成,而单层培养细胞则需要1×105个细胞,且同数量级的细胞球细胞较单层培养细胞所形成的肿瘤体积大.结论 无血清成球培养法能从食管鳞癌细胞系EC109获得细胞球,细胞球富集了肿瘤干细胞.

    作者:崔翔;杨浪;于茜;任勇;郭政军;刘强;刘庆;崔有宏;卞修武;张成武 刊期: 2012年第03期

  • 靶向克隆法构建pET15b-VP3原核表达载体

    目的 探索利用PCR产物靶向克隆法构建能够表达凋亡素的pET15b-VP3原核表达载体.方法 以PGEX-6P-1/TAT-VP3质粒为模板,PCR扩增VP3基因的366 bp片段,应用靶向克隆酶,将VP3基因插入到线性pET15b,得到重组表达载体pET15b-VP3,经过筛选,挑选出阳性克隆进行Xho Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切,图谱分析和重组质粒核苷酸序列分析以鉴定所构建的原核表达载体.结果 PCR产物经过电泳鉴定可见366 bp特征性的VP3片段,重组质粒经双酶切电泳获得了一个大小为366 bp的VP3片段,重组质粒测序证实VP3 cDNA编码区成功地插入了pET15b,且其序列与GeneBank中VP3 cDNA序列完全一致.结论 靶向克隆法可快速,高效地构建pET15b-VP3原核表达载体,为进一步研究VP3药用价值奠定了基础.

    作者:邓守恒;柯贤柱;石小燕;蔡召忠;杨敬宁;黄永章;陈萍 刊期: 2012年第03期

  • 单侧多功能外固定支架固定与加压钢板内固定治疗胫骨骨折疗效对比分析

    目的 对比单侧多功能外固定支架治疗与内固定治疗胫骨骨折的临床疗效.方法 选取我院2008年3月-2010年3月间收治的114例胫骨骨折患者为治疗组,采用切开复位单侧多功能外固定支架治疗,设同期收的采用加压钢板内固定治疗63例为对照组,对比两组患者手术时间、手术切口长度,术后骨愈合情及术后并发症发生情况.结果 两组患者随访4~18mo,治疗组手术时间、手术切口长度、骨折愈合时间、并发症均低于对照组,组间比较有显著差异(P<0.05).结论 单侧多功能外固定架治疗胫腓骨新鲜骨折疗效显著,临床应推广应用.

    作者:林卓锋;杨云海;熊文华 刊期: 2012年第03期

  • 找准定位 努力建设特色鲜明、优势突出的医科院校

    办学定位是否科学、准确是办学成败的关键,是办学特色打造的基础.在全面分析影响学校办学定位因素的基础上,对学校办学定位的客观内涵进行了具体界定,并就学校未来一个时期的发展战略与特色打造进行了宏观思考.

    作者:余小平 刊期: 2012年第03期

  • 深圳市宝安区健康体检患者幽门螺杆菌感染情况分析

    目的 了解宝安区健康体检患者幽门螺杆菌(Hp)感染现状.方法 对2009年1月-2010年1月期间在我院行正常体检者1 452例进行幽门螺杆菌检测,并对所得结果进行统计学分析.结果 1 452例正常体检者中,检出Hp感染者594例,占40.90%.594例Hp感染患者中,男性感染率高于女性(P<0.05).结论 本组受检者Hp感染率与国内文献报道相符,提示我区为Hp感染高发区域,临床应指导受检人群养成良好的生活、卫生及饮食习惯,以预防因Hp感染引起的相关疾病.

    作者:陈晓芳 刊期: 2012年第03期

  • HPLC法测定清热解毒颗粒中大黄素在大鼠体内的药代动力学

    目的 研究清热解毒颗粒中大黄素在大鼠体内的药代动力学.方法 20只成年大鼠,随机分为0.1g/kg和0.2 g/kg清热解毒颗粒组,每组10只,采用HPLC法测定血药浓度,计算药代动力学参数.结果 0.1 g/kg组与0.2 g/kg组的主要药代动力学参数分别为:Cmax(μg/mL)为(10.14±0.39)与(11.42±0.64),tmax(h)为(4.08±0.37)与(4.11±0.45),AMCt(μg.h·/mL)为(4307±142)与(4632±167),AMC0∞(μg.h./mL)为(4784±183)与(4836±201).结论 HPLC法适用于清热解毒颗粒中大黄素的药代动力学研究.

    作者:徐波 刊期: 2012年第03期

  • 标准心肺复苏术与主动按压减压心肺复苏术在院前猝死救治中的应用比较

    目的 探讨标准心肺复苏术与主动按压减压心肺复苏术在院前猝死救治中的应用效果比较.方法 收集院前猝死患者200例,随机分为治疗组与对照组各100例,对照组施行标准心肺复苏术,治疗组在对照组的基础上采用特制的心脏泵进行主动按压减压心肺复苏术.结果 治疗组的抢救成功率明显高于对照组(P<0.05),死亡率少于对照组(P<0.05).治疗组和对照组在复苏前的SBP与SaO2值对比无明显差异(P>0.05),复苏后5、10 min上述指标值均有明显上升,复苏后10 min达高峰,然后逐渐下降.复苏后5、10、15 min治疗组的SBP与SaO2值明显高于对照组(P<0.05).结论 主动按压减压心肺复苏术能促进SBP和SaO2值的恢复,从而提高抢救有效率.

    作者:安庆斌;万润琴 刊期: 2012年第03期

  • 激光泪道成形术后再阻塞复治96例

    激光泪道成形术后已通畅数月或1~2年后再复泪道阻塞、溢泪;再次予以激光泪道疏通治疗,并在疏通后行泪道引流管鼻泪管置入或典必殊眼液、帕利百眼液多次、定期冲洗.疗效观察,典必殊、帕利百眼液冲洗好转,治愈达70%以上;泪道引流管置入好转、治愈达60%以上.治疗过程中各有利弊,应根据具体情况选择疏通后治疗方法.但更好的激光泪道疏通后维持泪道永久性通畅的治疗措施还待进一步完善.

    作者:何静 刊期: 2012年第03期

  • 第二趾趾端复合组织串联趾侧方皮瓣修复指端缺损

    目的 对采用第二趾趾端复合组织串联趾侧方皮瓣修复指端缺损的临床效果进行观察和探讨.方法 选择我院2009年9月至2011年9月收治的23例指端缺损患者作为观察对象,设计以趾底动脉-甲皱襞血管筋膜蒂为血管蒂的第二趾趾端复合组织,串联趾侧方皮瓣进行修复.结果 经过3个月至18个月的随访,23例患者皮瓣均存活,患者手指功能恢复均良好,外观恢复满意,色素沉着不明显;患者供区趾甲恢复满意,未出现疼痛,侧方皮瓣供区植皮均存活,未发生破溃现象.结论 应用第二趾趾端复合组织串联趾侧方皮瓣修复指端缺损,具有不影响足趾,微创手术创伤小,手术操作时间短,术后患指感觉、功能、外形恢复理想的优点,适用于临床上指端缺损的修复.

    作者:黄刚;王克列;叶碧武;刘玮;叶志辉 刊期: 2012年第03期

  • 以酮症酸中毒为首发病征的糖尿病临床特点分析

    目的 探讨以酮症酸中毒为首发病征的糖尿病的临床特点.方法 选择2010年2月份到2011年9月份于我院治疗的糖尿病酮症酸中毒患者108例,根据发病前患者是否确诊糖尿病分为两组,一组为观察组(以酮症酸中毒为首发)共37例;一组为对照组(发病前已确诊糖尿病)共51例.总结两组患者的糖尿病酸中毒时的发病诱因、2型糖尿病患者所占比例及急诊误诊率,并组间比较.结果 观察组发病的主要诱因为酒食,急诊的误诊率为32.4%,2型糖尿病比例为75.7%,均明显高于对照组患者,P均小于0.05.结论 以酮症酸中毒为首发病征的老年糖尿病患者酒食是发病的主要诱因,发病后,误诊率较高,此类患者医师在临床诊疗时应该加以重视.

    作者:李晓华 刊期: 2012年第03期

  • 白藜芦醇抗衰老研究新进展

    衰老是自然界一切生命由遗传因素和内外环境互相作用下的生物学过程,这个过程从出生、发育、成长直到死亡,是机体功能退行性下降及紊乱的综合变化,具有累积性、普遍性、渐进性、内生性、危害性5个生理特征[1].白藜芦醇是广泛存在于自然界的一种植物抗毒素,作为沉默信息调节因子1(SIRT1)强的激活剂,白藜芦醇可以模拟热量限制(CR)的抗衰老效应,参与有机生物平均生命期的调控[2,3].已有报道[4]指出白藜芦醇能增加酵母、后生动物和其他动物的寿命,其抗衰老作用的细胞学和分子生物学机制也因此成为国内外学者研究的一个新热点.本文综述了白藜芦醇的一般性质、代谢途径以及近年来白藜芦醇抗衰老机制的研究进展,展望了白藜芦醇在临床应用中的良好前景及所存在的问题,为进一步开展白藜芦醇生理药理活性研究提供参考.

    作者:楼旭丹;汪海东;夏世金;孙涛 刊期: 2012年第03期

  • 46例精神分裂症合并脑炎的临床分析

    目的 分析精神分裂症合并病毒性脑炎的临床表现、诊断、治疗,提高对精神分裂症合并脑炎的临床诊治水平.方法 对我院自2006年1月-2010年12月收治的46例精神分裂症合并病毒性脑炎患者的临床资料进行回顾性分析,探讨临床诊治方法.结果 本组46例患者给予上述治疗后痊愈34例,好转10例,死亡2例,均死于呼吸衰竭,死亡率为4.34%.结论 病毒性脑炎精神症状较常见,容易与精神分裂症本身混淆;及时进行脑电图、脑脊液、病理检查等可提高确诊率.

    作者:康忠明 刊期: 2012年第03期

成都医学院学报杂志

成都医学院学报杂志

主管:四川省教育厅

主办:成都医学院