学术投稿

免疫组织化学染色技术中常见问题分析及解决方法

杨旭;檀艳丽;方川

关键词:免疫组织化学染色技术, 问题分析, 肿瘤病理诊断, 免疫细胞化学, 抗原抗体反应, 特异性抗体, 组织细胞, 染色过程, 免疫组化, 辅助手段, 定量测定, 呈色反应, 新技术, 显色剂, 原位, 方法, 定位, 标记
摘要:免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术.如今,免疫组织化学染色技术已成为肿瘤病理诊断中重要的辅助手段,但免疫组化染色过程中会出现各种各样问题,现将此过程中常出现的问题及解决方法分析如下.
现代检验医学杂志相关文献
  • 清除血清中HBV-DNA的方法比较

    选择一种消除实验室DNA污染的佳消毒方法.用压力蒸汽消毒、紫外线消毒、84消毒液、过氧乙酸消毒液、次氯酸钠消毒液和2%(v/v)戊二醛消毒液,按常规方法对高浓度(5×107copies/ml)与低浓度(5×103copies/ml)HBV-DNA阳性血清标本和HBV阳性参控品进行消毒处理,然后用PCR检测技术检测HBV-DNA浓度的变化.HBV-DNA阳性血清标本经84消毒液消毒后不能检出HBV-DNA;过氧乙酸、次氯酸钠和戊二醛消毒液及紫外线照射消毒法消毒后HBV-DNA含量减少;压力蒸汽消毒法对血清标本中的HBV-DNA无作用.84消毒液能完全清除阳性血清标本中的HBV-DNA;高压蒸汽、过氧乙酸、次氯酸钠和2%(v/v)戊二醛及紫外线照射消毒法不能完全清除阳性血清标本中的HBV-DNA.

    作者:刘军权;陈复兴;张玉西 刊期: 2005年第05期

  • ELISA法和胶体金免疫层析法检测乙肝表面抗原的比较

    乙型肝炎在我国的发病率很高,是当前严重危害人们身体健康的传染病之一.乙型肝炎表面抗原(HBsAg)是乙肝的感染指标之一,因此,HBsAg的检查往往是体检的项目之一,对乙肝的预防和治疗具有重要的意义.本文采用酶联免疫吸附试验(ELISA)夹心法以及胶体金免疫层析法(GICA)对2 879例体检者血清进行了HBsAg检测,将两法作了比较,并对一些实验的影响因素作了探讨.

    作者:施纪文;徐简华;温惠萍 刊期: 2005年第05期

  • 血型抗体与新生儿溶血病

    目的探讨ABO-HDN血型不合孕妇血清IgG抗A(B)效价与ABO-HDN的关系.方法对1 632例O型孕妇血清IgG抗A(B)效价检测及抗体分型分析.结果 1 632例孕妇血清中IgG抗A(B)≥1/64者249例,占15.3%;ABO-HDN发生率随IgG抗A(B)效价升高而上升;HDN与妊娠史的频率有关,随着年龄上升,孕妇个体IgG抗A(B)抗体效价也随之上升.结论夫妇间ABO血型不合者应及时检查产前血型抗体水平;预防不良妊娠的发生;IgG抗A(B)效价的高低与HDN的发病率成正比;孕妇血清IgG抗A(B)效价≥1/64需定期检测抗体效价水平及时用药降低抗体效价,预防新生儿溶血病的发生.

    作者:宫春勇 刊期: 2005年第05期

  • 136例ENA多肽抗体谱与LE细胞检测结果的探讨

    目的探讨ENA多肽抗体谱与LE细胞(LEC)检查在SLE、ITP及肾炎之间检测结果的关系.方法对同一病人应用免疫印迹法检测ENA多肽抗体谱以及用改良血块法检查LE细胞共136例(SLE 78例、ITP 22例、肾炎36例).结果 在52例LEC阴性SLE患者中,ENA多肽抗体谱总阳性率为80.0%(42/52);在26例LEC阳性SLE患者中,ENA多肽抗体谱总阳性率为88.5%(23/26),二者比较无显著性差异(x2=2.58).78例SLE患者ENA多肽抗体谱总阳性率85.9%(67/78),而LEC阳性率为33.3%(26/78),二法比较差异极显著(x2=42.2);在22例LEC阴性ITP患者及36例LEC阴性肾炎患者中,ENA多肽抗体谱总阳性率分别为63.4%(14/22),88.9%(32/36).结论在ITP、肾炎患者中ENA多肽抗体谱检测均具有诊断意义,而LEC检查无多大价值.在SLE患者中ENA多肽抗体谱与LE细胞检查两种方法检测对SLE患者均具有重要的诊断价值;ENA多肽抗体谱免疫印迹法比LE细胞改良血块法阳性率高、敏感、方便,两种方法可互为补充,联合检测可提高阳性诊断率.

    作者:刘小平;毛和香;李胜堂 刊期: 2005年第05期

  • 运动对老年人骨质代谢水平的影响

    目的探讨运动对老年人骨质代谢水平的影响,为老年人预防骨质疏松症发生提供科学的依据.方法通过分组实验(总例数90名,其中实验组男子30名,女子20名,对照组男子20名,女子20名),测定长期从事运动的老年男女骨密度和血液中血钙、雌二醇、睾酮水平,与对照组进行比较.结果经测长期从事运动的老年男女骨密度和血液中血钙、雌二醇、睾酮水平均显著高于对照组(P<0.05).结论长期坚持运动有助于老年人骨矿含量和骨密度,有效减轻老年人骨矿含量随年龄增长而下降的幅度,而且从事运动的年限越长,这种效果越明显.

    作者:沙鹏;苍金荣;雷岐锁 刊期: 2005年第05期

  • 从一肺组织标本处理中得到的几点启示

    随着社会的发展,医疗水平不断提高,对医学检验提出了越来越高的要求,而微生物检验是控制感染性疾病的主要辅助手段,如何快速、准确、无遗漏地为临床提供信息是摆在我们面前的重要课题,它要求微生物检验人员要有丰富的检验经验,考虑问题全面、周到,对相关的临床知识也要了解.近我们遇到了这样一个病例:

    作者:王嘉;金炎 刊期: 2005年第05期

  • 康仁-560自动生化分析仪的维护与常见故障排除

    我院购进康仁-560自动生化分析仪使用已8年,该分析仪检测过程中如仪器发生故障或操作不当,仪器能自动显示信息,便于操作者找出原因及时排除,现把日常工作中的维护与常见故障排除介绍如下:

    作者:王清泉;徐涛;陈剑华 刊期: 2005年第05期

  • 急性心肌梗死患者白细胞增多的临床特点

    目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者白细胞(WBC)和中性粒细胞(N)增高的临床特点.方法将138例AMI患者按WBC和N高低分为两组:A组49例,WBC(4.0~10.0)×109/L,并N<0.75;B组89例,WBC>10.0×109/L,并N≥0.75.对比其年龄、心功能和心肌酶的高低,并分析两组男性,合并高血压病和死亡所占的比例.结果①B组较A组心功能差,天门冬酸氨基转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)高,两组之间有显著性差异(P<0.05~P<0.01);②B组较A组住院死亡率高,两组之间有高度显著性差异(P<0.01).结论 WBC和N增高的AMI患者,心肌坏死面积大,心功能差,住院死亡率高.

    作者:王归真;李建刚;郭旭昌 刊期: 2005年第05期

  • NOVA CRT 16全自动电解质分析仪常见故障排除与保养

    NOVA CRT 16全自动电解质分析仪是美国NOVA生产的用于检测人体血液、尿液、脑脊液中的尿素、肌酐、葡萄糖、钾、钠、氯、总二氧化碳、同时计算出阴离子间隙、晶体渗透压的急诊分析仪器.它具有快速、准确、稳定、重复性好等特点,越来越受到检验科和临床科室的欢迎.但该仪器使用维护、保养及其它要求较高,经过两年多的使用,现将我们工作中常见故障处理及维护介绍如下.

    作者:徐文波;山德生;冯磊 刊期: 2005年第05期

  • 免疫组织化学染色技术中常见问题分析及解决方法

    免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术.如今,免疫组织化学染色技术已成为肿瘤病理诊断中重要的辅助手段,但免疫组化染色过程中会出现各种各样问题,现将此过程中常出现的问题及解决方法分析如下.

    作者:杨旭;檀艳丽;方川 刊期: 2005年第05期

  • 复方苦参注射液对巨噬细胞内NF-kB作用的研究

    目的探讨复方苦参注射液对硫乙醇酸盐(TG)激活的巨噬细胞内NF-kB表达的影响.方法给小鼠腹腔内注射硫乙醇酸盐(TG),3 d后取小鼠腹腔巨噬细胞(macrophage),进行离体培养,于培养液中加入三个不同剂量组的复方苦参注射液,观察巨噬细胞核内NF-kB(nuclear factor kappa B)的变化.结果复方苦参注射液能显著抑制巨噬细胞内NF-kB的活化,中剂量组与模型对照(control)组间NF-kB p65核移位有显著性差异(P<0.01).结论实验证实复方苦参注射液其抗炎症作用可能与它抑制巨噬细胞内NF-kB的活化作用有关.以上结果为临床应用复方苦参注射液的抗炎治疗提供了实验依据.

    作者:孙静文;张伟 刊期: 2005年第05期

  • 血糖快速测定的对比研究及质控方法

    临床实验室血糖测定常用快速血糖仪和生化分析仪两种方法.快速法省时省力,用血量少,出结果快,能更快地为临床诊断提供资料.但在日常工作中,常出现快速血糖仪所测结果与临床观察不符或与生化分析仪所测结果不符的现象.笔者对30例患者用快速血糖仪和生化分析仪进行了血糖对照测定,观察两种方法的相关性,探讨造成结果不符的原因,并提出快速检测血糖的质控措施,现报告如下:

    作者:赵建丽;刘宗春;赵健美 刊期: 2005年第05期

  • 如何将限量试剂盒中的残液用完

    随着医院实验室进口设备的引进,进口试剂盒的应用越来越广泛.其中有些进口设备的配套试剂为限量试剂盒,即仪器本身能够记录试剂的用量,到一定数目就不能再应用,雅培公司生产的TDx血药浓度监测仪和IMx全自动免疫分析系统等仪器即属此类.

    作者:赵驻军;李亚;张翠欣 刊期: 2005年第05期

  • 81例阵发性睡眠性血红蛋白尿症实验室资料分析

    目的评价阵发性睡眠性血红蛋白尿症的实验室特点.方法对1997年7月~2003年7月我院PNH病例进行回顾性分析.结果 81例PNH患者中,常用的酸化血清溶血(Ham's)试验阳性率97.4%,蛇毒因子溶血(COF)试验阳性率为85.1%,蔗糖溶血试验阳性率为100%,微量补体溶血敏感试验(MCLST)阳性率为94.6%.结论多种溶血试验联合应用有助于PNH的诊断.

    作者:赵玉平;刘建国;徐艳;沈琳 刊期: 2005年第05期

  • 系统性红斑狼疮病人MBL基因多态性位点和血清MBL浓度的关系

    目的研究SLE病人MBL基因第54号密码子和启动子序列多态位点与血清MBL水平的关系.方法用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性位点(PCR-RFLP)分析技术和PCR技术分别分析了92名正常人和104名SLE患者的MBL基因外显子1第54号密码子及启动子的多态性位点,同时用ELISA法测定了血清MBL浓度.结果正常人和SLE病人MBL基因第54号密码子基因型分布频率GGC/GGC型和GGC/GAC型无显著性差异,但正常人组血清MBL浓度显著高于SLE病人组;两组人员MBL启动子多态性位点HY/HY型MBL血清浓度明显高于其它等位基因型,SLE病人各基因型血清浓度均低于正常组;HY/LX型(30.8%)显著高于正常人组(13.0%)(P<0.01).结论 SLE病人的血清MBL浓度明显降低与MBL基因启动子LX型增加有关,但与第54号密码子变异无相关性.

    作者:顾进;孙玲玲;范永桥 刊期: 2005年第05期

  • 改良低离子聚凝胺法配血发现1例抗-C、抗-Jka引起配血不合

    目的采用科学先进的配血法,提高输血安全性.方法 ABO血型鉴定采用常规正反定型方法,抗体效价测定和Rh血型鉴定采用抗人球蛋白法,抗体鉴定采用吸收放散试验,配血用改良低离子聚凝胺法.结果患者红细胞血型O型、ccDEE、Jk(a-b+),患者血清中有IgG性质的抗-C、抗-Jka,抗-C效价1:32.结论该患者血清与含有C、Jk(a+)抗原的试剂红细胞在抗人球蛋白和低离子介质条件下均发生反应,而在盐水介质中没有反应,通过吸收放散实验证明患者血清中有抗-C、Jka存在.

    作者:王宏 刊期: 2005年第05期

  • BT-2000 Plus生化分析仪采用钒酸盐法测定胆红素参数的设置

    工作中,在用伊利康公司的钒酸盐法测胆红素试剂时,按照该公司提供的BT-2000生化分析仪上机参数表对仪器进行设置,定标操作的结果,总胆红素(TBil)和直接胆红素(DBil)的标准曲线无法建立.在对试剂说明书和该公司提供的BT-2000生化分析仪上机参数表进行分析比较后,结合仪器的提示,对上机参数表中的有关参数做了调整后,再进行定标,终于建立了标准曲线,现将结果报告如下.

    作者:汪旭强 刊期: 2005年第05期

  • TMS-1024全自动生化分析仪的交叉污染及处理办法

    TMS-1024全自动生化分析仪是日本东京医疗株式会社生产的仪器,该仪器是在20世纪90年代初进入中国各地区,因在国内的知名度并不高,所以在国内使用的客户也不多.我院是在2003年7月购买进了一台TMS-1024全自动生化分析仪.开始的时候,我们发现该仪器在标本量不多或者测定项目较单一的情况下使用,发现它具有精密度和准确度好、操作简便、维护方便等优点.但是,当仪器总的检测项目较多并在满负荷工作情况下,我们发现有个别项目的测定结果受到严重的交叉污染,导致结果严重偏离真值,严重地影响检验质量和日常工作.在此介绍一下我们科使用该仪器时出现的交叉污染、空白错误和处理办法,以供有使用该仪器的同行们参考.

    作者:李奕才 刊期: 2005年第05期

  • 不同时间血清sCD40L水平与急性冠脉综合征患者发病风险的相关性研究

    目的研究血清sCD40L水平与急性冠脉综合征患者发病风险的相关性.方法以发生死亡或非致命性心肌梗死为试验观察终点,依据血清sCD40L水平将220例入院时胸痛时间不超过12 h的急性冠脉综合征(ACS)患者分为五组:第1组(<1.93μg/L)39例:第2组(1.93~3.50μg/L)41例;第3组(3.51~5.00μg/L)51例;第4组(5.01~6.30 μg/L)46例;第5组(>6.30μg/L)43例,观察各组患者在不同随访观察时间段内发生死亡或非致命性心肌梗死的百分率;用ELISA方法测定血清sCD40L水平.结果在初24 h内,5个组发生死亡或非致命性心肌梗死的百分率间差别无显著意义(P>0.05).在随后的72 h、1 mo和6 mo随访观察时间内,第4组和第5组患者发生死亡或非致命性心肌梗死的百分率均明显高于前3个组,差异有显著意义(P<0.05).结论血清sCD40L水平增高(>5.00 μg/L)的ACS患者,随观察时间的推移,发生死亡或非致命性心肌梗死的风险增加.

    作者:徐邦牢;王蓉;刘万里;张革 刊期: 2005年第05期

  • 血清样品放置时间与电解质测定结果的关系

    在日常工作中,对于K+、Na+、Cl-等项目的检测都是在抽血后集中检测,此时离体已有一段时间,而且每个标本之间又有时间间隔,根据日常工作的经验,K+、Na+、Cl-结果会随着时间而变化,为了定量的表述这种变化,笔者对我院一月内40例体检人员电解质进行测定,每日测定1~2名,以保证标本都是严格按规定时间测定,并对结果进行了分析.

    作者:张启友 刊期: 2005年第05期

现代检验医学杂志

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主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院