徐勇;张妮;黄颂敏;付平;刘小菁;张海燕;强欧
目的探讨红毛五加多糖-Ⅰ的抑癌机制.方法采用DNA电泳和流式细胞术检测红毛五加多糖-Ⅰ对胃癌细胞的影响.结果该多糖作用36小时后,电泳可见胃癌细胞DNA的梯状图谱,流式图上出现凋亡峰.结论表明红毛五加多糖-Ⅰ可能通过诱导胃癌细胞凋亡而起到抑癌作用.
作者:吕晓英;曾令福;蔡亚南;李由;刘新华 刊期: 2002年第02期
目的制备葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)脂质体,研究其在体内的分布特性,为SEA脂质体治疗肝癌提供依据.方法用125I标记SEA,逆相蒸发法制备SEA脂质体,考察其包封率及粒径,观察125I-SEA及SEA脂质体静脉注射后不同时间小鼠体内的分布.结果 5批SEA脂质体样品平均粒径为505±34 nm,平均包封率为44.4%±4.8%.SEA脂质体主要分布于肝、脾,尤以肝脏中分布多,而在血中清除加快,在其他组织中分布显著减少,与游离SEA比较具有显著差异(P<0.05).结论逆相蒸发法制备SEA脂质体简单、重复性好,可获得较高的包封率和符合肝靶向要求的脂质体;SEA脂质体具有一定的肝靶向性,可为减轻SEA的毒副作用以及肝癌的治疗提供新途径.
作者:李志宇;何生;薛华;苏敏;汪现 刊期: 2002年第02期
目的探讨血管紧张素原(AGT)和血管紧张素I转化酶(ACE)基因变异是否与妊娠高血压综合征(简称妊高征)有关联. 方法采用ACE基因PCR扩增片断长度多态性及AGT基因限制性片断长度多态性方法, 对成都地区81例汉族妊高征及205例正常孕妇对照进行了检测.结果妊高征及正常孕妇等位基因的频率分别为:AGT235T为0.856、0.846;ACE D为0.333、0.364.两组之间各等位基因频率分布无显著差异;与白种人相比,白种人ACE D等位基因频率均高于中国人(P<0.001),而AGT235T等位基因频率白种人(0.350~0.482)及其它非白种人(0.620~0.739)均较中国人(0.846)为低(P<0.01,P<0.001).结论本研究未发现AGT及ACE基因的变异与中国人(成都地区)妊高征发病有关联.
作者:白怀;刘兴会;刘瑞;刘宇;李敏淑;刘秉文 刊期: 2002年第02期
目的研究甲状腺功能正常型Graves 眼病患者外周血单核细胞糖皮质激素受体表达类型变化.方法用半定量RT-PCR 方法检测患者及正常对照组外周血单个核细胞hGRα/GRβmRNA比值,同时检测两组晨8:00血浆总皮质醇水平.结果两组的hGRα/GRβ mRNA比值分别为 7.58±5.42和14.65±8.30,两组间比较有统计学差异(P<0.05);皮质醇分别为304.23±92.06和313.73±111.05,两组间比较无统计学差异(P<0.05).hGRα/GRβ mRNA与血浆总皮质醇水平之间无相关关系.结论 hGRα/GRβ mRNA可能在Graves眼病发病中起着一定作用.
作者:安振梅;余南;魏松全;夏庆杰;李双庆;谢秦 刊期: 2002年第02期
目的为结核病新型疫苗研制提供靶基因和靶抗原.方法根据结核杆菌H37Rv株免疫保护性抗原Ag85A的基因序列自行设计一对寡核苷酸引物,以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得具有完整开架读码框(ORF)的Ag85A抗原基因,并将其正向插入真核和原核穿梭表达型载体pBK-CMV构建重组质粒,重组质粒转入大肠杆菌后IPTG诱导表达,并对其表达产物进行Western-blotting分析.结果 PCR扩增获得了具有完整开架读码框的Ag85A抗原基因;构建了Ag85A抗原基因真核和原核穿梭表达型载体;Ag85A抗原基因在大肠杆菌中实现了稳定表达.结论成功地对结核杆菌免疫保护性抗原Ag85A进行了基因克隆与表达,为进一步研究其在结核病新型疫苗研制中的应用奠定了基础.
作者:谢勇恩;鲍朗;胡昌华;张万江;陈炜 刊期: 2002年第02期
目的建立结核杆菌检测基因芯片的制备技术.方法制备和标记靶基因,用点样仪将靶基因点于玻片介质上,并经点样后处理制成基因芯片,用扫描仪测定处理前后芯片上荧光强度的变化,计算DNA固定率,同时测定和比较两种不同玻片、不同点样液和三种不同点样后处理方法的DNA固定率.结果制备结核杆菌检测基因芯片,用醛基修饰玻片作为介质,用DMSO溶液作为点样液,点样后芯片处理以水合1小时再干燥30分钟为佳. 结论本研究所建立的结核杆菌检测基因芯片制备技术具有较高的效率和可靠的实用性能.
作者:张万江;鲍朗;王晓樱;谢勇恩;陈玮;张会东;于向华 刊期: 2002年第02期
目的探讨猪血清白蛋白检测的常规分析方法.方法利用溴甲酚紫(BCP)法、蛋白电泳法和溴甲酚绿(BCG)方法同时测定猪和人血清标本中白蛋白含量并进行比较;用紫外可见分光光度计检测BCG法和BCP法测定猪和人血清白蛋白的吸收曲线.结果 BCG法、BCP法与电泳法对人血清白蛋白检测结果无显著差异;后二法对猪血清白蛋白测值与BCG法测结果间虽有正相关关系(r分别为0.9503和0.9533),但显著低于BCG法(P<0.05);吸收曲线显示,BCP法吸收峰明显低于BCG法吸收峰.结论在猪血清白蛋白绝对含量的测定中推荐使用BCG法.
作者:张璘;蒋红梅;李萍;彭志英;赵清江;李幼平 刊期: 2002年第02期
目的比较糖尿病大鼠成模后的系膜细胞与高糖刺激下的系膜细胞在功能上的异同,并探讨用体外培养的成模后系膜细胞研究糖尿病肾病的可行性及优越性.方法将20只Wistar大鼠随机分成糖尿病成模组和正常组,每组各10只.糖尿病成模组先采用链脲佐菌素复制糖尿病模型,然后再进行系膜细胞体外培养;正常组大鼠的系膜细胞又分为高糖组和正常对照组两个亚组,高糖组采用高糖刺激系膜细胞,正常对照组为常规培养基培养.分别对三组细胞用3H-TdR摄入法测定细胞增殖,ELISA法测定纤维连接蛋白(FN)分泌,用共聚焦显微镜检测胞内[Ca2+] i及对血管紧张素Ⅱ的反应.结果糖尿病成模组系膜细胞3H-TdR 掺入率高于正常对照组,高糖组系膜细胞3H-TdR 掺入率低于正常对照组(P<0.05);糖尿病成模组及高糖组系膜细胞分泌FN量均较正常对照组增加(P分别<0.01和<0.05),且糖尿病成模组系膜细胞分泌FN量虽高于高糖组,但无统计学意义(P>0.05);糖尿病成模组及高糖组系膜细胞胞内[Ca2+]i对血管紧张素Ⅱ的反应都减弱,且前者更为明显.结论先建立糖尿病模型再培养的系膜细胞在功能和生物学性状方面更接近于糖尿病体内系膜细胞.
作者:徐勇;张妮;黄颂敏;付平;刘小菁;张海燕;强欧 刊期: 2002年第02期
目的探讨用游离兔耳廓软骨修复广泛气管前壁缺损的可行性,并观察自体移植与异体移植的差异.方法取新西兰大耳白兔20只,分为自体移植组(n=10)与异体移植组(n=10),取右耳游离耳廓软骨行自体或异体移植修复8~10环气管前壁缺损,术后1、2、4、8和12周每组分别处死1~2只行内窥镜检查、生物力学测试及组织学观察.结果 18只兔存活,内窥镜发现气管狭窄不明显,以瘢痕增生为主.生物力学测试发现,移植软骨单位大应力在0、4、8、12周分别为2.54±0.19、1.31±0.21、1.72±0.22和1.96±0.08kPa/mm.组织学观察发现移植软骨部分发生变性和坏死,但存活软骨、新生软骨在术后12周时分别占62.0%±3.45%、65.8%±9.48%(自体移植组),60.1%±3.98%、55.2%±7.57%(异体移植组).自体移植与异体移植的炎性反应差异不大,免疫排斥反应较轻.结论游离耳软骨可用来修复广泛的气管前壁缺损,也可用作同种移植.
作者:张瑞林;梁传余;秦廷武;李秀群;刘军 刊期: 2002年第02期
目的对比研究3月龄与12月龄大鼠骨髓基质细胞(rMSCs)增殖能力和成骨、成脂肪分化能力.方法体外培养3月龄、12月龄大鼠骨髓基质细胞,用血球计数板描绘生长曲线比较增殖能力;培养液中分别加成骨、成脂肪诱导剂,在不同时间行细胞化学染色,观察两组细胞成骨与成脂肪能力的变化.结果 12月龄rMSCs第4代(P4)及第9代(P9)较3月龄rMSCs同代细胞生长数量均下降.12月龄rMSCs P9较P4生长数量下降.3月龄rMSCs P4、P9之间生长数量无显著差异.成骨诱导1周后,12月龄rMSCs对照与诱导组碱性磷酸酶(ALP)表达阳性率均低于3月龄rMSCs的同组细胞.成骨诱导12天后,3月龄rMSCs先于12月龄rMSCs组有钙化形成.成脂肪诱导第二天12月龄rMSCs先于3月龄rMSCs有脂滴生成.结论 12月龄rMSCs生长能力和成骨能力较3月龄rMSCs降低,成脂肪能力较3月龄rMSCs增高.
作者:药蓉;陈槐卿;邓力;李良 刊期: 2002年第02期
目的评价胃癌术前介入治疗、术中区域性动脉灌注化疗及全身化疗的疗效.方法对97例经病理学确诊的胃癌患者进行回顾性分析,其中术前经介入插管化疗33例,术中经供应肿瘤的区域动脉行插管化疗40例,术中全身性化疗24例.所用药物为氟尿嘧啶脱氧核苷(FuDR)、阿霉素和丝裂霉素.结果采用前两种方法治疗后,病理检查结果显示原发灶中的癌细胞均有不同程度地变性坏死,其近期有效率为95%,而后一种方法的有效率仅为41.67%(P<0.05).术中区域性动脉灌注化疗选择性强,近远期抗癌效果好,且较第一种方法更能减少和防止术中癌细胞的医源性扩散、种植及术后复发,同时毒副作用更小,患者住院费用更低. 结论术中区域性动脉灌注化疗具有更多的优点,值得推广.
作者:彭兵;肖乾虎;王向东;赖毅;程中;庄文;张尚福;陈代云 刊期: 2002年第02期
目的探讨不同的熔融渗透时间和温度下,玻璃在氧化铝中的渗透深度.方法制作Vita In-Ceram Alumina 和GI-Ⅱ氧化铝预烧体,分别用A2和IG2色玻璃进行渗透.按渗透时间不同分为30、60、90、120、150和180分钟组,渗透温度1100℃;按渗透温度不同分为1060、1080、1100、1120和1140℃温度组,渗透时间1小时.用带标尺体视镜(×10)分别测量各组的渗透深度.结果渗透深度和时间的平方根呈线性关系,Vita和GI-Ⅱ组相关系数分别为0.9886和0.9932,回归方程分别为d2=0.1122t-0.4955和d2=0.1638t+0.5873;随渗透温度的升高,Vita的渗透速率增加,高于1100℃后下降,GI-Ⅱ的趋势则相反.结论 GI-Ⅱ型玻璃具有较好的渗透性能,在1100℃的渗透温度下,推荐单冠和前牙桥体的渗透时间分别为1小时和3小时.
作者:牟雁东;巢永烈;廖运茂;孟玉坤 刊期: 2002年第02期
目的确定酶解消化法牙髓细胞原代培养的合适条件与时间.方法选取年轻患者因正畸拔除的完整和无龋坏牙齿,取出牙髓,分别采用胶原酶一步法消化牙髓组织30分钟及1、2、3小时,胶原酶分步消化法,组织块法和组织块酶解法进行原代培养.倒置显微镜台盼蓝染色观察细胞解离及存活状况,免疫组化法鉴定细胞来源.结果胰酶消化2小时后,组织块基本未解离.用0.1%胶原酶一步法消化1、2、3小时后组织块均彻底解离为单细胞,基本无残余. 0.1%胶原酶消化30分钟后组织块解离不完全.0.1%胶原酶分步法消化1小时后组织解离彻底.台盼蓝染色表明经胶原酶一步法消化获得的牙髓细胞被台盼蓝着色的比例随消化时间减短而下降.分步法消化细胞着色率低于一步法.组织块酶解法的组织块解离、贴附和细胞游出状况均优于组织块法.结论Ⅰ型胶原酶在37℃,持续振荡条件下消化1小时是彻底酶解消化人牙髓的短时间.分步酶解法能获得比一步酶解法更高的活细胞数量.而从效果、操作难易和耗时多少等多方面因素综合考虑,组织块酶解法是人牙髓组织原代培养的佳方法.
作者:赵瑚;陈治清;白薇 刊期: 2002年第02期
目的观察急性胰腺炎时炎症性细胞因子和抗炎症性细胞因子的分泌变化,并探讨生长抑素(思他宁)对急性胰腺炎的治疗机理.方法实验选用SD大鼠,分为正常对照组(n=6)、急性胰腺炎组(采用开腹胰管注射5%牛黄胆酸钠1.0ml/kg诱导急性胰腺炎,不治疗)和生长抑素治疗组(胰腺炎诱导成功后0.5小时静脉注射思他宁20μg/kg).后两组动物分别在术后2小时(n=6)、6小时(n=6)和24小时(n=8)处死抽血,用Bioassay法检测血中炎症性细胞因子IL-1、TNFα和IL-6;用ELISA检测血中抗炎症性细胞因子IL-10和TGF-β;作血清淀粉酶及胰腺湿重测定.结果对照组血中IL-1为0.56±0.06ng/ml,TNFα为23.50±1.871 IU/ml,IL-6为69.0±6.40 IU/ml,IL-10为32.05±14.87 pg/ml,TGF-β为66.4±13.20 pg/ml.急性胰腺炎组成模后24小时其血中IL-1为1.15±0.13ng/ml,TNFα为55.33±12.79 IU/ml,IL-6为127.17±13.91 IU/ml,IL-10为68.13±19.90 pg/ml,TGF-β为103.77±28.95 pg/ml,与正常对照组比较明显升高(P<0.05).生长抑素治疗组在生长抑素治疗后24小时,其血中IL-1为0.83±0.12ng/ml,TNFα为33.00±7.40 IU/ml,IL-6为71.83±6.34 IU/ml,IL-10为42.2±14.55 pg/ml,TGF-β为45.98±18.10 pg/ml,与胰腺炎组比较,其各种细胞因子均明显下降(P<0.05),血清淀粉酶和胰腺湿重均明显好转.结论急性胰腺炎时血中炎症细胞因子和抗炎症细胞因子均升高,提示急性胰腺炎病程中免疫过激和免疫抑制并存,而生长抑素对这一免疫异常有双向调节作用.
作者:陈晓理;吴浩;黄兴兰;吴晓娟 刊期: 2002年第02期
目的研究Fluor Protector对饮料导致牙釉质脱矿的抑制作用.方法将牛牙齿标本分成实验组和对照组,实验组在Fluor Protector预处理釉质后用不同种类饮料处理,对照组不经Fluor Protector处理而直接用饮料处理.饮料的处理为5分钟/次,10次/天,处理7天以后,分别用肉眼和扫描电镜观察牙釉质表面发生的改变.结果肉眼观察发现无论是实验组还是对照组,有色饮料均能导致牙釉质表面颜色发生改变,均能使牙釉质脱矿,表现为釉质呈不同程度的白垩色改变.扫描电镜观察发现,对照组除去离子水外,牙釉质的超微结构均发生改变,表现为牙釉柱中心晶体、釉柱间隔有不同程度的溶解,而实验组则表现出较明显的抑制作用.结论 Fluor Protector具有明显的抑制饮料脱矿的作用.
作者:刘兴容;周学东;郭斌;靳淑凤;张萍 刊期: 2002年第02期
目的用B型超声检查探讨无临床症状胆囊结石的预后.方法 217例健康体检中发现的无临床症状的胆囊结石患者,用B型超声对其追踪观察16年,并将胆石的声像图表现与其发生的临床并发症进行对照分析.结果Ⅰ型胆石症47例中仅2例(4.3%)出现需择期手术切除的临床并发症;Ⅱ型胆石症98例中36例(36.7%)出现各类临床并发症,其中19例(19.4%)出现了需急诊手术治疗的严重临床并发症;Ⅲ型结石症45例中25例(55.5%)出现各类临床并发症,但仅2例(4.4%)属于需急诊手术治疗的严重并发症;Ⅳ型结石症27例中仅6例(22.2%)因一般临床症状而择期手术切除治疗.结论 B型超声通过对无临床症状胆囊结石的大小、数量和胆结石在胆汁中的比重等分析,可初步推导这类胆石症的预后.
作者:赵元全 刊期: 2002年第02期
目的探讨CD86 mRNA反义肽核酸(peptide nucleic acid, PNA)阻断树突状细胞CD86表达和第二信号传递的可能作用.方法采用激光共聚焦显微镜研究生物素化PNA 的细胞内化;利用流式细胞术、荧光细胞组织化学以及RT-PCR研究CD86反义PNA对CD86分子表达的抑制作用. 结果①激光共聚焦显微镜光学细胞切片证明,培养的人未成熟树突状细胞能够有效内化生物素化PNA.②流式细胞术和荧光细胞组织化学证实CD86反义PNA在蛋白质水平上对CD86分子表达有抑制作用.③RT-PCR证明反义PNA能够抑制DC CD86 mRNA水平.结论 CD86反义PNA能够抑制人树突状细胞CD86 mRNA的表达, 从而为进一步利用反义PNA阻断第二信号传递,诱导免疫耐受奠定了基础.
作者:冯刚;李胜富;李幼平;步宏;杨宇如;卢一平 刊期: 2002年第02期
目的研究不同天然药物对粘性放线菌生长及产酸的影响,为筛选能有效调理口腔菌群生态平衡的药物奠定基础.方法选用粘性放线菌标准株ATCC 19246作为实验菌株.测定川芎、血藤和五倍子等十一种天然药物的低抑菌浓度(MIC).再以低于MIC的4个浓度配制含药的TPY液体培养基,调定其初始pH为7.4,接种粘性放线菌,厌氧培养后测定其终末pH.结果当药物浓度低于或等于8.000mg/ml时,除三七外,其他药物对粘性放线菌的生长都有一定的抑制作用,且以槟榔和蜂房较强.茶多酚、三七、大黄、蜂房和血藤对粘性放线菌的产酸具有一定的抑制能力,而黄芩、槟榔、川芎、五倍子、白芷和儿茶没有明显的抑制作用.结论茶多酚、大黄、蜂房和血藤对粘性放线菌的生长和产酸都有一定的抑制作用.
作者:肖悦;刘天佳;黄正蔚;周学东;李罡 刊期: 2002年第02期
目的探讨内皮细胞缺血再灌注损伤及中药益生注射液对其的拮抗机理.方法用无糖培养基在无氧条件下培养使人脐静脉内皮细胞株ECV304缺氧1.5小时,然后以含糖培养基,在5%CO2和37℃条件下给氧培养5小时,建立内皮细胞缺氧再给氧模型,以模拟体内缺血再灌注对血管内皮细胞的损伤,并用益生注射液干预其缺氧再给氧过程,荧光染色显示胞内钙离子与线粒体,细胞化学染色显示胞内琥珀酸脱氢酶(SDH)和乳酸脱氢酶(LDH)活性,并检测细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)浓度.结果缺氧再给氧使ECV304细胞变圆、收缩、脱落,细胞内钙离子含量增高,线粒体膜电位减弱,SDH活性下降,LDH活性增高,培养液中SOD与NO含量减少,而MDA浓度增高;用益生注射液干预后,ECV304细胞形态基本恢复正常,上述多项检测指标的改变得以逆转.结论缺氧再给氧导致ECV304细胞发生脂质过氧化,胞内钙离子超载、SOD活性及NO水平降低、线粒体功能受损,益生注射液可使上述变化得以逆转,从而拮抗内皮细胞缺氧再给氧损伤.
作者:李胜富;蒋红梅;李幼平;吴大蓉;张立;张璘;程惊秋 刊期: 2002年第02期
目的探讨内源性高甘油三酯血症(HTG)患者血脂及载脂蛋白含量改变是否与对氧磷酶 (PON)基因变异有关.方法应用多聚酶链反应(PCR)对128例HTG患者及129例正常对照PON基因酶切位点的限制性片段长度多态性(RFLP)进行鉴定.血脂用酶法测定,血清apoAⅠ、AⅡ、B100、CⅡ、CⅢ及E用本校载脂蛋白研究室研制的RID试剂盒测定.结果 HTG患者和正常对照组PON基因均以QR基因型为主,其频率分别为0.581和0.515.正常对照组和HTG组PON基因R等位基因频率分别为0.52和0.56,两者无显著差异(P>0.05).正常对照组PON基因具有QQ基因型者其血清apoAⅠ水平较RR基因型者显著为高,而apoB水平则显著降低(P<0.05);HTG组具有QQ基因型者其血清apoAⅠ及AⅡ水平则较RR基因型者显著为低(P<0.05),而apoE水平则显著为高(P<0.05).结论 HTG患者血清HDL-C及apoAⅠ的降低及apoE 的升高可能与PON基因Q型等位基因有关联.
作者:刘瑞;白怀;刘宇;黄明慧;范萍;刘秉文 刊期: 2002年第02期