黄桂芳;黄进军;王鉴清
目的观察已构建的基因重组质粒pcDNA3-pacA和pcDNA3-pacP作为防龋疫苗的防龋效果.方法分别将基因重组质粒pcDNA3-pacA、pcDNA3-pacP和pcDNA3-pacA+pcDNA3-pacP联合使用作为基因疫苗注入免疫定菌鼠颌下腺区皮下,以Keyes龋齿计分法评估免疫后定菌鼠磨牙的患龋情况.结果重组质粒单独免疫组和联合免疫组大鼠的龋齿计分均明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05);联合免疫组和pcDNA3-pacA组的龋齿记分均明显低于pcDNA3-pacP组(P<0.05).结论重组基因质粒pcDNA3-pacA和pcDNA3-pacP均可有效的控制龋损的发生,降低龋坏程度,有望成为防龋基因疫苗.
作者:曹福娴;刘天佳;杨德琴 刊期: 2002年第03期
目的研究芦荟多糖的抗突变作用.方法采用小鼠骨髓细胞微核试验、人外周血淋巴细胞染色体畸变试验及小鼠精子畸形试验,观察芦荟多糖在体内和体外的抗突变作用.结果芦荟多糖高、中、低三个剂量组的微核率(分别为17.6‰、21.8‰、31.4‰)和精子畸形率(分别为30.42‰、32.15‰、41.33‰)均显著低于阳性对照组(环磷酰胺组,P<0.005).体外淋巴细胞染色体的畸变率在高、中、低三个剂量组分别为22.5%、14.8%、10.25%,与阳性对照组(丝裂霉素组)相比差异有显著性(P<0.01),但在低剂量组其作用为明显,抑制率达到78.5%.结论芦荟多糖可有效抑制环磷酰胺、丝裂霉素所诱导的突变性,具有一定的抗突变作用.
作者:董彩婷;杨青;肖元梅;岑小波;王莉 刊期: 2002年第03期
目的研究Losartan对肾小球系膜细胞(MCs)结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.进一步探讨Losartan延缓肾纤维化的机制.方法将体外培养的MCs分为3组:①正常对照组,未加任何刺激因素;②浓度为10-5mol/L 的AngⅡ组;③AngⅡ中加入10-5mol/L的Losartan组.分别刺激MCs 72小时后,提取细胞RNA,采用逆转录-聚合酶链反应技术测定MCs CTGF mRNA水平变化.结果 Losartan干预72小时后,MCs CTGF mRNA表达水平较AngⅡ组下降25.1%,但仍高于对照,为对照组的1.95倍.结论 Losartan通过部分抑制AngⅡ对CTGF mRNA表达的诱导而有益于延缓肾纤维化的进展,这可能是Losartan延缓肾纤维化的机制.
作者:刘芳;黄颂敏;刘小菁;刘瑞;徐勇 刊期: 2002年第03期
目的 评价通窍鼻炎胶囊治疗急性鼻炎的临床疗效及其安全性.方法 160例急性鼻炎中层得随机分为通窍鼻炎胶囊治疗组和鼻舒品服液治疗组,每组80例.剂量为各年龄组常规用量,一日3次.疗程7-10天.结果 通窍鼻炎胶囊和鼻渊舒口服液的总有效率分别为91.2%及86.3%,两组患者的不良反应均轻微.通窍鼻炎胶囊还显示出一定的抗过敏作用.结论 通窍鼻炎胶囊具有不低于鼻渊舒口服液的临床疗效和安全性.
作者:周开源;梁传余;刘四喜;柳曦 刊期: 2002年第03期
目的在比较质粒型HSV-1载体包装系统(pHSVlac/helper) 和无辅助病毒的载体包装系统(pHSVlac/helper virus-free)导致的特异性免疫应答的基础上,进一步选择LCA、Mac-1和GFAP等标记抗原,探讨载体引入后引起的非特异性炎性反应.方法采用免疫组化技术结合细胞计数,观察载体引入后引起的非特异性炎性反应以及星形胶质细胞的反应.结果免疫组化结果显示,LCA的反应高峰出现在基因转移后第4天,pHSVlac/helper引起的反应强度显然大于pHSVlac/helper virus-free组(P<0.001).与LCA不同, Mac-1对pHSVlac/helper virus-free的反应在第4天达到峰值,并高于pHSVlac/helper引起的反应.两种载体系统及PBS均使注射侧纹状体内GFAP阳性细胞增多、增大,突起变粗,反应增强,而非注射侧半球内GFAP阳性细胞数量少,突起细长.结论无辅助病毒载体包装系统仅引起较弱的炎性反应.
作者:章为;Alfred Geller 刊期: 2002年第03期
目的探讨人脐血造血细胞在严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠体内植入、分化及造血调控.方法采用流式细胞技术及克隆形成细胞体外培养方法观察了移植后受鼠体内的造血细胞植入情况、造血生长因子对其的影响及移植物抗宿主反应.结果①静脉输注1~5×107个脐血单个核细胞(MNC)/只鼠可使受鼠体内表达嵌合体,而经腹腔注射不能建立人-鼠移植模型.②人脐血细胞移植SCID小鼠:可以重建造血功能并在小鼠骨髓微环境中分化表达,其表达水平与外源细胞因子的使用无关;可引起受鼠移植物抗宿主反应,并与输入细胞剂量有关.结论脐血造血干细胞不仅可以在受鼠骨髓微环境中存活,还可进一步分化为各系特异细胞,重建造血.
作者:潘小玲;彭芝兰;刘兴会;姚先莹 刊期: 2002年第03期
目的了解成人成骨细胞瘦素受体(Ob-R)的表达及其结合特性.方法体外传代培养成人成骨细胞并经细胞学特性鉴定;以Ch-T法标记和长柱PAGE分离纯化制备125I-leptin,建立成骨细胞瘦素受体放射分析法,并用Scatchard法计算瘦素受体的结合参数.结果成骨细胞经体外传代培养后,其细胞形态、碱性磷酸酶和骨钙素免疫组化染色均呈阳性,并可形成矿化小结;其与125I-leptin的结合具可饱和性,且可被过量未标记瘦素竞争取代(P<0.01);Scatchard分析结果示其结合具单位点特性,平衡解离常数为0.11±0.06 nmol/L,大结合容量为 1.7±0.3 nmol/105细胞.结论成人成骨细胞上存在可与瘦素特异性结合的Ob-R蛋白;成骨细胞可能是瘦素作用的靶细胞,瘦素可通过与相应受体结合而对成骨细胞的生长、分化和功能产生调控作用.
作者:李双庆;赵红莉;李晓佳;魏松全;安振梅;熊中云;谢秦 刊期: 2002年第03期
目的探讨原癌基因c-myc、c-jun、Ki-67、细胞核增殖性抗原(PCNA)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)在银屑病发病中的作用.方法采用免疫组化方法,检测了32例寻常型银屑病皮损区及5例正常人表皮中c-myc、c-jun、Ki-67、PCNA、VEGF的表达及分布特点.结果银屑病皮损区c-myc、c-jun、Ki-67、PCNA、VEGF表达均较正常表皮中的表达明显增强,分布于除角质层以外的表皮各层,而正常表皮表达阴性或仅在基底层有弱阳性表达.结论 c-myc、c-jun、Ki-67、PCNA在银屑病皮损中过度表达,提示其与银屑病的表皮细胞过度增殖、分化异常有关;VEGF过度表达,提示VEGF与银屑病的真皮乳头毛细血管增生扩张、炎症细胞浸润有关.
作者:张敏;张谊之;李俸媛 刊期: 2002年第03期
目的探讨血管紧张素Ⅱ的1型受体(AT1R)基因变异是否与妊娠高血压综合征(简称妊高征)有关联.方法采用AT1R基因限制性片断长度多态性方法,对成都地区81例中国人汉族妊高征及205例正常孕妇对照进行了检测.结果妊高征及正常孕妇等位基因的频率分别为:AT1R573 C为0.300、0.285;AT1R1166 C为0.014、0.043.两组之间各等位基因频率分布无显著差异;与白种人相比,AT1R573 C及AT1R1166 C等位基因频率白种人均高于中国人(P<0.001);日本人在这两个位点中仅AT1R1166C的频率高于中国人(0.101与 0.043,P<0.001).此外,还发现妊高征患者AT1R1166位点A/C基因型携带者其收缩压及舒张压均较A/A基因型者有增高趋势,但无显著性差异.结论本研究未发现AT1R基因的变异与中国人(成都地区)妊高征发病有关联.
作者:白怀;刘瑞;刘兴会;刘宇;李敏淑;刘秉文 刊期: 2002年第03期
目的探讨冠心病患者载脂蛋白(apo)AⅠ基因MspⅠ酶切位点变异频率及其对血脂水平的影响.方法应用多聚酶链反应对成都地区汉族178例正常人和118例冠心病患者apoAⅠ基因启动子(-78bp)及内含子Ⅰ(+83bp), MspⅠ限制性片段多态性进行分析.结果冠心病组及对照组apoAⅠ基因MspⅠ的多态性以G/G基因型占优势.apoAⅠ基因启动子区MspⅠ酶切位点A等位基因频率冠心病组与对照组比较有升高趋势,但无显著性差异(0.331 vs. 0.270,P=0.067),+83bp T等位基因频率冠心病组较对照组显著升高(0.072 vs. 0.034,P<0.05).在所研究对象中具有A/A基因型者血清TG水平较具有G/G基因型者显著升高(P<0.05).结论 apoAⅠ基因内含子Ⅰ(+83bp)MspⅠ酶切位点的突变与中国人冠心病有一定关联,apoAⅠ基因A/A基因型对血清甘油三酯的升高有一定影响.
作者:刘瑞;邓珏琳;白怀;刘宇;朱红;刘秉文 刊期: 2002年第03期
目的通过计算机辅助设计,获得具有高活性的新型抗菌肽分子序列,为合成这类抗菌肽和通过基因工程方法生产新型药物提供理论依据.方法通过互联网和计算机软件比较和分析了大量有关抗菌肽的序列和空间结构,根据分析结果,设计了可能具有很好抗菌活性的抗菌肽分子,并用空间结构分析软件观察其可能的结构,进行三维结构的计算和预测,与已知的抗菌肽分子进行比较.结果分析发现抗菌肽一般在肽分子的两头分别形成螺旋,螺旋趋势强弱与抗菌肽的活性呈一定的正相关.根据这些资料和分析结果,设计了一些抗菌肽序列.其中一个序列为: GWLRKIGKRIKRIGQYFSDAALEVLGVA.经一级结构分析和空间构象分析显示,这一设计的抗菌肽分子可能具有较强的抗菌活性.结论随着各种数据库和分子生物学软件的完善和丰富,充分利用它们进行新分子的设计成为可能.
作者:蔡青松;张艳;翟朝阳 刊期: 2002年第03期
目的观察经γ-刀照射不同时间的正常肝组织病理改变.方法将正常新西兰大白兔分为6个实验组,分别为γ-射线照射后4小时,8小时,12小时,18小时,24小时和48小时组,照射剂量为单次200Gy.用常规HE染色方法观察经γ-射线照射后肝组织的病理变化.结果照射后4~12小时,照射野内肝组织出现小灶性轻度肝细胞浊肿和轻度脂肪变性;照射后18~48小时,照射野内出现肝组织坏死.结论在本实验照射剂量下,γ-射线照射肝组织后18小时引起肝细胞死亡,其死亡方式主要是细胞坏死,而不是凋亡,造成细胞死亡机理可能和电离辐射引起的脂质过氧化有关.
作者:程薇波;李红兵;程滔;王文冬 刊期: 2002年第03期
目的研究H2O2影响内皮细胞与中性粒细胞的粘附机理.方法采用流式细胞仪检测了H2O2(250 μmol/L)对培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)表面粘附分子ICAM-1、VCAM-1、E-selectin表达影响的时程变化,和不同浓度H2O2(50、150、250、350、450 μmol/L )作用下内皮细胞粘附分子ICAM-1、VCAM-1、E-selectin表达的变化.结果①用浓度为250 μmol/L的H2O2处理内皮细胞,三种粘附分子表达的时间过程不完全相同,ICAM-1表达持续上调,VCAM-1表达在3小时达到峰值,而后随着时间的延长逐渐下降;E -selectin表达在3小时才开始显著上调,5小时达到峰值,然后随着时间的延长逐渐下降;②用不同浓度的H2O2处理内皮细胞3小时后,介导三种粘附分子表达达到峰值的浓度不完全相同.ICAM-1和VCAM-1表达在浓度为250 μmol/L时达到峰值,而E-selectin表达的峰值在浓度为350 μmol/L时,当浓度继续增高时,其表达明显下调.结论 H2O2能引起内皮细胞表面粘附分子表达上调,在中性粒细胞对内皮细胞的粘附过程中起着重要作用,H2O2可能通过激活粘附分子的表达而加重炎症过程.
作者:陈槐卿;陈友琴;张文胜;刘肖珩;雷松;毛咏秋 刊期: 2002年第03期
目的探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)在缺血性急性肾功能衰竭(IARF)中的作用机制.方法将32只大鼠夹闭双肾动脉45分钟建立IARF模型,并随机分为:IARF组,IGF-Ⅰ组(16只,每日皮下注射rhIGF-Ⅰ 250ng/kg 1次.另16只大鼠为假手术对照组.观察大鼠内生肌酐清除率(Ccr),24小时尿蛋白,β2-微球蛋白(β2-MG),血、尿IGF-Ⅰ,表皮生长因子(EGF),血栓素B2(TXB2),6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)水平及肾脏组织形态学改变.结果缺血后IARF组Ccr 显著下降,24小时尿蛋白,β2-MG,血、尿TXB2及肾重/体重增高,血、尿EGF,6-keto-PGF1α及尿IGF-1水平降低,与对照组相比差异显著.IGF-Ⅰ组Ccr升高,且较快恢复到对照水平;24小时尿蛋白,β2-MG及血尿TXB2下降,血、尿EGF,6-keto-PGF1α及尿IGF-Ⅰ水平增高;肾组织学观察肾小管损伤程度减轻,肾小管上皮再生恢复快.结论 IGF-Ⅰ可改善IAFR肾功能,减轻肾小管损伤程度,具有促进肾小管上皮再生恢复的作用.
作者:马行一;杨立川;樊均明;冀玲;陈海燕 刊期: 2002年第03期
目的研究肝细胞性肝癌(HCC)与乙肝病毒感染的关系.方法制作包含40例肝细胞性肝癌及相应的癌旁和非癌组织的组织芯片.以免疫组织化学方法(SP法)检测40例肝癌组织及其相应的癌旁组织及非癌组织中的HBsAg和HBcAg表达情况.结果 40例肝癌组织及其相应的癌旁组织和非癌组织中的HBsAg检出率分别为7.5%、40%和45%;HBcAg的检出率分别为20%、52.5%和67.5%;HCC肿瘤组织中的HBsAg和HBcAg的表达率明显低于癌旁及非癌组织(P<0.01).结论 HCC的发生与HBV感染有密切关系,随着HCC的发展,HBV抗原的表达降低.组织芯片技术是可高效进行肿瘤分子病理研究的技术平台,能够在严格、均一的实验条件下,高通量、快速、平行地检测大批量组织样本中的一个或多个实验指标.
作者:何煦;刘凯;赵连三;周思亮;刘丽;刘聪 刊期: 2002年第03期
目的了解低氧性肺动脉高压时肺内血管内皮生长因子(VEGF)与肺血管重建的关系.方法将20只雄性Wistar大鼠分为低氧性肺动脉高压组(n=10)和对照组(n=10)两组,肺动脉高压组以常压低氧建立大鼠肺动脉高压模型.以微导管法测定各组大鼠肺动脉压,采用免疫组织化学染色法检测模型大鼠肺内VEGF的表达,对肺组织切片进行图象分析.结果低氧3周后,肺动脉高压组大鼠形成明显的肺动脉高压,肺小动脉壁细胞数增多,管壁增厚和管腔狭窄,管壁厚度占外径的百分比(WT%)为31.4%±2.6%,管壁面积占血管总面积的百分比(WA%)为52.8%±3.4%,分别与正常对照组16.0%±1.8%和28.7%±2.3%相比明显升高(P<0.01);肺小动脉内膜的VEGF免疫阳性染色在低氧大鼠组为2.51±0.25,与正常对照组1.27±0.15相比明显增强(P<0.01),低氧大鼠组VEGF免疫阳性染色强度与WT%和WA%呈明显正相关(r分别为0.792和0.785,P<0.01).结论低氧所致VEGF的合成增多在低氧性肺血管重建和肺动脉高压的发病过程中起一定的作用.
作者:肖欣荣;程德云;陈文彬 刊期: 2002年第03期
目的验证激光共聚焦显微镜(CLSM)可否作为研究微球结构的工具,并用以获取微球内部结构的信息.方法微球用复凝聚法制备,牛血清白蛋白(BSA)为模型蛋白药物和聚合物(明胶与阿拉伯胶)为成球材料,在制备微球前均共价标记了荧光物.应用CLSM将微球在不同荧光通道下呈像,并将微球切割成一系列平行切面分别成像,对微球进行三维重建和图像分析.结果在CLSM下微球中BSA与聚合物均呈均匀分布,加入BSA不影响聚合物的分布.结论 CLSM可观察载药微球的内部结构,而不需事先破坏样品即可获得被包裹药物的定位和成球材料所构成微球的结构资料.
作者:谭丰苹;陆彬;杨勋 刊期: 2002年第03期
目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ)在下颌牵张成骨过程中的表达及意义.方法对12只成年山羊行双下颌骨牵张成骨术,在牵张结束后的第1、2和4周分别处死4只动物,取牵张区新骨组织用免疫组化检测bFGF和IGF-Ⅰ的表达.另选2只同龄山羊作为正常对照.结果下颌骨牵张后bFGF与IGF-Ⅰ均呈高水平表达,bFGF定位于间充质或成纤维样细胞、成骨细胞以及新骨基质,而IGF-Ⅰ则主要定位于成骨细胞.结论 bFGF与IGF-Ⅰ可能在下颌骨牵张后的新骨生成中起着重要的调控作用.
作者:邹淑娟;胡静;高占巍;李继华;王大章 刊期: 2002年第03期
目的总结胰十二指肠切除治疗高龄患者壶腹周围癌的临床疗效.方法回顾性分析 1997~2001年间胰十二指肠切除治疗16例70岁以上壶腹周围癌患者的临床资料.结果高龄壶腹周围癌患者发病隐匿,并存疾病多(87.5%),施行该术后其生活质量和生存率得到明显改善和提高.结论胰十二指肠切除是目前治疗高龄壶腹部周围癌患者好的方法,但应慎重选择患者,有效的预防和治疗术后并发症是提高疗效的关键.
作者:李寿柏;侯捷;张肇达 刊期: 2002年第03期
目的了解部分呼气流量-容积(PEFV)曲线的临床意义.方法用FJD-80型及LR-80型肺功能仪测定了吸烟者、慢性阻塞性肺疾病(COPD,慢阻肺)和肺心病患者的PEFV曲线和大呼气流量-容积(MEFV)曲线.结果代表PEFV曲线指标的(·V)FRC及(·V)FRC/FVC,与(·V)75、(·V)50、(·V)25的实/预(%)的变动,具有相同的倾向,都是被动吸烟组>轻度吸烟组>重度吸烟组>慢支组>肺气肿组>肺心病组;且全部(·V)FRC、(·V)FRC/FVC以及(·V)50、(·V)25的实/预(%),在重度吸烟组都已降到71%~76%,而(·V)75在重度吸烟组和慢支组仍然大于80%.结论与MEFV曲线相比,(·V)FRC、(·V)FRC/FVC仍然是检查小气道功能的敏感指标,其下降的程度可反映疾病严重的程度.由于操作PEFV曲线处于生理状态,易为患者接受,宜于临床推广应用.
作者:黄桂芳;黄进军;王鉴清 刊期: 2002年第03期