傅淑宏;魏开华;李晓霞;张拓;龚美亮;周玉;李燕燕;白洁
医学检验质量指标(quality indicators,QIs)可测量医学实验室满足用户需求的程度和所有运行过程的质量。确定可靠的质量指标是用户量化实验室服务质量的关键步骤。然而,目前有很多不同的 QIs 和相应术语都在使用,因此我们需要对提出的 QIs 进行一致化。按照国际临床化学和检验医学联合会工作组启动的计划,一组临床实验室共同地建立质量指标模型。此模型包括57个与关键过程相关的(35个检验前,7个检验中和15个检验后阶段)和3个与支持过程相关的QIs。建立的质量指标模型和收集的数据提供了一致化当前可得到 QIs 计划的可行性证据,但是仍然需要进一步的努力来纳入更多的临床实验室和收集更加一致的数据。
作者:费阳;王薇;王治国 刊期: 2015年第04期
目的:了解医疗机构中半胱氨酸蛋白酶抑制剂 C 和β2微球蛋白这两个肾功能指标参考区间的应用现状。方法通过互联网向2014年参加卫生部临床检验中心特殊蛋白室间质量评价计划的单位发送半胱氨酸蛋白酶抑制剂 C 和β2微球蛋白的参考区间调查表,收到反馈结果后使用 Microsoft Excel 2007和 SPSS 13.0进行统计分析。内容包括:参考区间来源、统计学分析、正态性检验、不同检测系统与总体结果的比较,以及参考区间应用前的验证情况。结果分别有106和127家实验室上报了半胱氨酸蛋白酶抑制剂 C 和β2微球蛋白的结果,分别覆盖了24和29个省、自治区和直辖市。只有5家和2家实验室进行了参考区间的性别分组,有3家实验室进行了参考区间的年龄分组。约75%的实验室采用试剂厂家说明书所给出的参考区间。所有组的组中位数和众数基本一致。所有项目和分组第2.5和第97.5百分位数差异较大。半数以上的实验室都未进行参考区间的验证。参考区间下限和上限的中位数分别为(血清中):半胱氨酸蛋白酶抑制剂 C (mg/L)0.55和1.09;β2微球蛋白(μg/ml)1.00和2.80。结论目前半胱氨酸蛋白酶抑制剂 C 和β2微球蛋白检验项目所应用的参考区间有一定的差异,所用仪器试剂和检测系统多样,建议建立适用于我国,并且较为规范和统一的参考区间。该次调查所得两个项目参考区间为:半胱氨酸蛋白酶抑制剂 C:0.55~1.09 mg/L;β2微球蛋白:1.00~2.80μg/ml。
作者:钟堃;王薇;何法霖;张妍;赵彦;李国华;王治国 刊期: 2015年第04期
目的:探讨采用不同血管通路采集自体外周血造血干细胞的安全性及有效性。方法2012年1月~2014年11月期间行自体外周血造血干细胞采集的87例患者分为两组:外周静脉采集组43例,均采用16G 一次性内瘘针进行穿刺,进血管路选用肘部静脉,返血管路选用大隐静脉。中心静脉采集组44例,均采用双腔股静脉置管建立静脉通路。自体外周血造血的采集均选用 Cobe Spectra 血细胞分离机的 Spectra Auto PBSC 操作程序进行。观察两组患者在穿刺成功率、采集顺利程度、患者术中耐受度、采集过程中的不良反应以及终采集物中单个核细胞数和 CD34+细胞计数的差异。结果两组患者采集的自体外周血单个核细胞数及 CD34+细胞计数间差异无统计学显著性意义(t=4.159,3.147,P >0.05),且均采集达标;采集过程中不良反应在两组患者中差异无统计学显著性意义(χ2=0.0009,P >0.05);但采用中心静脉组患者穿刺成功率高、采集顺利、患者术中耐受性均高于采用外周静脉通路的患者,差异有统计学意义(χ2=7.944,13.7729,20.5094,P <0.05)。结论采用双腔股静脉置管建立中心静脉通路在自体外周血干细胞采集中具有穿刺成功率高,采集顺利,大程度减轻了患者的痛苦,且不影响采集效率和效果的优势。
作者:陈瑾;郭彩利;孙春红;刘芳;王艳;王晓宁 刊期: 2015年第04期
目的:研究 IL-3在 BALB/c 小鼠肺炎支原体(MP)感染模型肺泡灌洗液和血清中的表达,阐明其与 MP 感染的关系。方法36只 BALB/c 裸鼠,随机分为3组,分别为对照组、MP 感染组和克拉霉素组,每组12只。用 PPLO 肉汤培养基 MP,将成功培养的 MP 鼻腔滴入裸鼠建立 MP 感染模型。治疗组用克拉霉素连续治疗8天,收集并分离血清,取其肺组织,收集肺泡灌洗液,采用 ELISA 法测定小鼠血清和肺泡灌洗液中 IL-3水平,肺部组织用中性甲醛固定 HE 染色,观察MP 感染小鼠肺的病变程度。结果成功建立 MP 感染小鼠模型,病理组织学观察结果显示,MP 感染 BALB/c 小鼠后炎症明显,克拉霉素治疗 BALB/c 小鼠炎症逐渐减轻。模型组血清和肺泡灌洗液中 IL-3分别为96.4±8.3 ng/L 和60.9±6.5 ng/L,与对照组比较(203.1±14.5 ng/L,96.3±12.6 ng/L),MP 感染组小鼠血清和肺泡灌洗液中 IL-3水平明显降低(t 血清=19.50,t 肺泡=17.20,P 值均<0.01),用克拉霉素治疗后,小鼠血清和肺泡灌洗液中 IL-3明显升高,分别为175.6±12.5 ng/L 和85.6±10.2 ng/L,差异有统计学意义,t 血清=17.41,t 肺泡=14.62,P 值均<0.01)。结论肺炎支原体感染使小鼠 IL-3水平降低,克拉霉素治疗有一定疗效,IL-3表达可能与 MP 肺炎严重程度有关。
作者:许有才;赵世元 刊期: 2015年第04期
目的:以健康人咽部菌群密度为参考[1],研究呼吸道感染在治疗过程中咽部菌群密度的变化和临床症状改变的相关性分析,探讨以咽部菌群的密度变化来评估分析呼吸道感染患者的治疗和预后。方法采集102例上呼吸道感染患者(其中62例咽部菌群正常,60例咽部菌群异常)和219例下呼吸道感染患者的咽拭子进行细菌培养,研究咽部菌群密度的变化与临床症状改变的相关性。结果62例咽部菌群正常的上呼吸道感染患者其治疗与不治疗在症状改善和痊愈上差异无统计学意义(P >0.05),60例咽部菌群异常的上呼吸道感染患者其治疗组和不治疗组的 CPIS 评分差异有统计学意义(P <0.05);对于219例下呼吸道患者(其中121例细菌性肺炎、74例重症肺炎及24例肺脓肿患者)的治疗观察,发现当咽部菌群在治疗过程中恢复正常时,与患者的临床病理改变符合率分别为92.6%,86.5%和87.5%。结论咽部菌群密度在健康人群之间保持着一定菌群种类和数量的稳定,但广谱抗生素的应用会导致咽部菌群失调;如何合理有效地治疗呼吸道感染应结合咽部菌群密度的变化来评估,这样可减少患者使用抗生素的天数,同时避免诱发耐药菌的产生和呼吸道菌群的失调。
作者:詹颉;李小侠;胡淑玲;李亚娥;孙莉;杨淑梅;张利侠 刊期: 2015年第04期
目的:比较 Vitek2 Compact 和 Walkaway 40全自动微生物鉴定系统在布鲁菌鉴定中的应用。方法临床分离菌株,采用 Vitek2 Compact 和 Walkaway 40全自动微生物鉴定系统进行鉴定,并将鉴定结果和16S rRNA 基因序列检测的结果进行比较。结果临床分离菌株经 Vitek2 Compact GN 鉴定卡鉴定为马耳他布鲁菌,Walkaway 40 NC31鉴定卡鉴定为动物溃疡威克斯菌、莫拉菌属等。16S rRNA 基因序列分析表明,该临床分离菌株的16S rRNA 基因序列与布鲁菌匹配,排除动物溃疡威克斯菌、莫拉菌属等的可能,确定该菌株为马耳他布鲁菌。结论Vitek2 Compact 可以准确的鉴定出布鲁菌,经 Vitek2 Compact 鉴定为布鲁菌后,可采用分子生物学方法进行佐证,大大地提高了布鲁菌的检出率,降低误诊的可能性。Walkaway 40无法准确的鉴定出布鲁菌,误鉴定会导致错误的治疗并使工作人员处于实验室获得性感染的危险之中。建议使用 Walkaway 40的实验室在鉴定出动物溃疡威克斯菌或莫拉菌属等细菌时应谨慎报告,并使用 Vitek2 Com-pact 或分子生物学方法进行复查。
作者:徐鸣皋;丁进亚;徐娟 刊期: 2015年第04期
目的回顾过去一年汕头地区女性人群的人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)的感染状况。方法收集2013~2014年某院妇科门诊就诊的3664例女性患者的宫颈脱落细胞,行 HPV 基因扩增及分型诊断,检测 HPV 各亚型的感染率;并按年龄分为五组,探讨各组间 HPV 的感染状况。结果 HPV 阳性标本805例(22%,805/3664),其中单一感染和多重感染均可见。单一型较常见分别为16,52,43,58和56型;双重感染较常见分别为16+52,16+33和43+52型。经统计,各年龄组间 HPV 感染率差异有统计学显著性意义(χ2=27.08,P <0.01),以第一组(>25岁)、第二组(25~34岁)和第五组(<55岁)为 HPV 感染的高发组。结论汕头地区女性 HPV 感染以16,52,43,58和56型多见,且<35岁及>55岁为该地区 HPV 感染的高发人群。研制针对以上型别的疫苗有利于减少该地女性 HPV 的感染率和预防宫颈癌的发生。
作者:王妍;黄钦贤;林章礼;郭少君 刊期: 2015年第04期
目的:观察子宫内膜癌组织中趋化因子 CXCL12及其受体 CXCR4表达水平,探讨其与子宫内膜癌患者临床病理特征相关性。方法收集2012年1月~2014年12月间入院接受手术的子宫内膜癌患者52例病理标本,年龄55.6±19.2岁,以正常子宫内膜26例为对照组,年龄52.3±16.5岁。采用免疫组化技术检测趋化因子 CXCL12及其受体 CX-CR4在子宫内膜癌组织中的表达情况,并分析它们与 FIGO 分期、细胞分化程度、淋巴结转移和病理类型等临床病理特征的关系。结果CXCL12和 CXCR4在子宫内膜癌组织中阳性表达率分别为76.92%和69.23%,而在正常子宫内膜组织中则分别为34.62%和30.77%,差异具有统计学意义(χ2=11.826,P <0.01)。CXCR4的表达与子宫内膜癌细胞分化程度存在差异,有统计学意义(均 P <0.05),且与分化高低呈正相关(r=0.386,P <0.05)。在子宫内膜癌组织中,除 CXCR4表达与细胞分化程度呈正相关外,CXCL12和 CXCR4表达与临床分期、淋巴结转移和病理类型无相关性(P >0.05)。结论CXCL12和 CXCR4在子宫内膜癌组织中表达明显升高,这可能在子宫内膜癌发生发展过程中发挥重要生物学作用。
作者:郑福利;党淼;张淼芳;王建 刊期: 2015年第04期
微小 RNA(miRNAs)是一种非编码的内源性 RNA 分子,miRNAs 的异常表达与疾病,尤其与恶性肿瘤的发生、发展存在密切的关系。研究证明,miRNAs 可以作为结直肠癌(colorectal cancer,CRC)早期诊断、治疗、预后的新的分子生物学标志物,同时,miRNAs 可作为体内 CRC 治疗的靶点。该文旨在对与 CRC 相关的 miRNAs 的表达、功能、作用机制、靶基因等及其在临床应用前景等方面作一综述。
作者:王钦君;张红春;申娴娟;鞠少卿 刊期: 2015年第04期
目的:探讨与分析结核感染 T 细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)与结核抗体试验在诊断骨关节结核中的临床应用价值。方法选取2012年1月~2014年12月在无锡锡山人民医院接受诊治的324例疑似骨关节结核病患者为研究对象,采取随机方法将入选者分为 T-SPOT.TB 试验组和结核抗体试验组,每组162人,T-SPOT.TB 试验组患者采取结核感染 T 细胞酶联免疫斑点试验,结核抗体试验组则采取结核抗体试验,对比分析两组诊断方式的灵敏度与特异度。结果T-SPOT.TB 试验组的灵敏度和特异度分别为93.43%和84.00%,结核抗体试验组的灵敏度和特异度分别为40.44%和53.85%,组间相比差异有统计学显著性意义(χ2=184.62,P <0.05;χ2=7.86,P <0.05)。T-SPOT.TB 试验组的假阳性率、假阴性率分别为16.00%和6.57%,结核抗体试验组的假阳性率、假阴性率分别为26.92%和59.56%,组间相比差异有统计学显著性意义(χ2=7.86,156.18,均 P <0.05)。此外,T-SPOT.TB 试验组的阳性预测值和阴性预测值分别为96.97%和70.00%,结核抗体试验组的阳性预测值和阴性预测值分别为88.71%和14.74%,组间相比差异有统计学显著性意义(χ2=20.27,73.06,均 P <0.01)。结论与结核抗体试验相比,结核感染 T 细胞酶联免疫斑点试验在诊断骨关节结核时具有灵敏度高、特异度高等特点,值得推广使用。
作者:钱晨 刊期: 2015年第04期
目的:研究肺癌患者在化疗前后的血清癌胚抗原(CEA)、铁蛋白(Ferritin)、血浆 D-二聚体(D-D)的水平变化,评估其对于判断肺癌患者化疗效果的应用价值。方法选择2011年9月~2014年9月确诊的120例肺癌患者,根据 WHO制定的实体瘤疗效评价标准进行疗效判定。另选120例健康体检者作为对照组,分别检测肺癌组和对照组的血清 CEA, Ferritin 和血浆 D-D 的含量,分析肺癌化疗前后及不同化疗疗效分期患者的结果变化规律。结果肺癌患者化疗前血清CEA,Ferritin 和血浆 D-D 的含量均明显高于化疗后和对照组,差异具有统计学意义(t=4.123~14.224,P <0.05);疗效为完全缓解(CR)期的肺癌患者血清 CEA,Ferritin 和血浆 D-D 含量低于部分缓解(PR)期、稳定(SD)期和进展(PD)期,差异具有统计学意义(t=4.230~12.336,P <0.05)。结论检测肺癌患者化疗前后的血清 CEA,Ferritin 和血浆 D-D 等项目有一定的临床价值,其水平变化可以作为肺癌化疗疗效的参考指标。
作者:朱晶;翟海军 刊期: 2015年第04期
目的:建立淋洗液发生器电导抑制离子色谱测定饮用水中溴酸盐的方法。方法应用美国 Dionex ICS-2100型离子色谱仪、EGC-III 淋洗液自动发生器行离子色谱梯度淋洗法测定饮用水中溴酸盐,IonPac AS19(4×250 mm),淋洗液发生器在线产生 KOH,梯度淋洗,流速:1.0 ml/min。结果该法线性范围Y =-0.0006097+0.0008731X ,r=0.9999,精密度高(CV%<1.5),样品加标平均回收率为99.5%~100.8%,低检出限0.50μg/L。结论离子色谱梯度淋洗法测定饮用水中溴酸盐操作简单、快速、灵敏,可适用饮用水中溴酸盐的测定。
作者:许珺;梁卫玖;程韶光;陈玉兰 刊期: 2015年第04期
目的:探讨血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平变化对糖尿病周围神经病变(DPN)早期诊断的应用价值。方法收集160例2013年1月~2014年12月的糖尿病患者,依据2009年的 DPN 诊断诊疗规范,分为并发周围神经病变者(DPN 组)120例,未并发周围神经病变者(DM 组)40例,并以多伦多临床评分系统(TCSS)评分进行神经病变严重程度的分级,分为轻度、中度、重度 DPN,另选健康对照组160例。采用化学发光免疫法测定血清 NSE 含量,分析 DPN 组患者NSE 水平与 DM 组、对照组的关系,以及不同血糖水平分组、不同 TCSS 评分分级的 DPN 患者之间 NSE 的含量关系。结果DPN 组、DM 组、对照组血清 NSE 水平(μg/L)分别为23.5±3.0,12.4±2.3和11.3±1.6,DPN 和其他两组差异有统计学意义(t=12.312,14.523,P <0.05);血糖水平3.9~6.1,6.1~8.0和≥8.0 mmol/L,三组 DPN 患者的 NSE 水平(μg/L)依次为22.1±1.6,23.6±1.2和25.0±1.5,差异有统计学意义(t =4.021~7.534,P 值均<0.05);TCSS 评分对 DPN组神经病变分级后,轻度、中度、重度 DPN 患者血清 NSE 水平(μg/L)分别为21.6±1.1,23.1±1.5和25.2±1.3,差异有统计学意义(t=3.320~5.526,P 值均<0.05);NSE 水平与 TCSS 分值呈正相关(r=0.572,P <0.05)。结论血清 NSE水平高低和糖尿病患者周围神经病变密切相关,可作为 DPN 早期诊断的重要指标。
作者:翟海军;朱晶 刊期: 2015年第04期
目的:分析临检急诊标本危急值报告是否达到预期目标,并实施质量改进措施,以期达到质量改进的目的。方法回顾分析2014年华西医院临检急诊标本的危急值结果,统计危急值通知率并分析未通知原因,于下半年开始通过培训、继续教育和每月通报危急值通知情况进行质量改进。结果2014年临检急诊标本共有危急值2648例,电话通知1950例,上半年总通知率为61.4%,下半年总通知率为81.4%,12月通知率为全年高,达97.72%。结论加强危急值通知的管理,有助于提高实验室服务质量,增强检验工作者的责任心和服务临床的意识。
作者:曾婷婷;邓山鹰;黄茜;粟军 刊期: 2015年第04期
目的:统计并分析2014年3月同型半胱氨酸室内质量控制(internal quality control,IQC)数据,了解目前全国检验科开展 IQC 工作的情况。方法采用基于 Web 方式的室间质量评价(external quality control,EQA)软件系统。收集参加全国同型半胱氨酸室间质量评价292家实验室的 IQC,包括2014年3月和长期累积室内质控在控数据的变异系数。依据1/3室间质量评价限(TEa),1/4TEa 和基于生物学变异导出的低、适当和佳允许不精密度这5个评价标准,计算同型半胱氨酸两个批号的室内质控变异系数的通过率。统计参加实验室使用的仪器并将其分为6个仪器组,然后按照5个评价标准计算各仪器组的通过率。结果有292家实验室上报了同型半胱氨酸第一个浓度水平(批号1)的数据,其中有106家上报了第二个浓度水平(批号2)的数据。按照不同标准进行评估,变异系数通过率各不相同。按照1/3TEa 标准和按照生物学变异导出的允许不精密度中的低标准,实验室的通过率接近,为63.36%~76.42%,按照1/4TEa 和按照生物学变异导出的允许不精密度中的适当标准,实验室的通过率接近,为34.25%~57.55%,按照生物学变异导出的允许不精密度中的佳标准,实验室通过率仅为10.62%~16.98%。统计实验室使用的仪器,结果显示参加实验室使用的仪器主要有日立(77/292)、奥林巴斯(61/292)、罗氏(19/292)、贝克曼(14/292)、雅培(10/292)和西门子(10/292)。除了西门子仪器组,其它仪器组通过率间的差异并不大。结论目前,大多数实验室可以满足1/3TEa 标准和按照生物学变异导出的允许不精密度中的低标准,但只有一半以下的实验室能满足1/4TEa 和按照生物学变异导出的允许不精密度中的适当标准和佳标准,说明全国实验室在同型半胱氨酸检测的精密度性能上还需进一步提高。
作者:张路;王薇;何法霖;钟堃;王治国 刊期: 2015年第04期
目的:通过对广东地区8家三甲医院的2459例受试对象的血清淀粉样蛋白 A(SAA),超敏 C 反应蛋白(hs-CRP)和降钙素原(PCT)检测数据进行多中心分析,探讨联合检测三个参数在不同人群感染中的诊断效力。方法受试对象按照年龄和感染类型分组,通过 SAA 和 hs-CRP 的年龄趋势性分析、年龄组间病毒和细菌感染组的配对 t 检验,通过 ROC 曲线和参数进行3个指标的感染判断效率分析,感染病原判断的二元 Logistic 回归分析以及与细菌培养在阳性感染判断吻合性分析,确认联合诊断效力。结果SAA 和 hs-CRP 在低龄阶段的病毒和细菌组差异有统计学意义(P <0.001);低龄组 SAA 的 AUC 高为0.824,敏感度71.8%,特异度82.6%,高龄组 hs-CRP 的 AUC 高为0.806,敏感度84%,特异度65.1%;在低龄组能鉴别诊断细菌和病毒感染的准确率可达到78.8%,而高年龄组只达到65.1%;对细菌培养阳性病例的判断 SAA 的 AUC 高为0.883,敏感度只有71.2%,但特异度达到90.7%,鉴别诊断准确率达到95.2%。结论SAA和 hs-CRP 有明显的年龄趋势,SAA,hs-CRP 和 PCT 3个指标可单独和联合用于感染鉴别诊断,尤其是对低年龄人群有价值,SAA 是单独鉴别诊断好的指标,SAA/hs-CRP 比值作为感染诊断指标的价值不大。
作者:罗强;刘振杰;徐宁;张伟红;黄艳芬;马东理;张鹏;龙燕;吴学朕;薛雄燕 刊期: 2015年第04期
目的:旨在探讨深圳市乙肝患者 HBV-DNA 与免疫球蛋白(IgA,IgG,IgM)和补体(C3,C4)的关系。方法首先采用实时荧光定量 PCR 技术检测210例乙肝患者的 HBV-DNA,按检测结果10n copies/ml 进行分组,可分为102~108 copies/ml 7组实验组。然后对7组实验组和对照组同时进行 IgA,IgG,IgM 及 C3,C4检测,分析乙肝患者 HBV-DNA 与IgA,IgG,IgM 及 C3,C4的相关性。结果乙肝患者 HBV-DNA 为105~108 copies/ml 时,均出现了 IgA,IgG,IgM 的增高(U =12.43,10.96,6.42,P <0.01)及 C3,C4的降低(U =8.37,6.0,P <0.01),而在102~104 copies/ml 只出现 IgA 和 IgM的增高(U =2.36,2.04,P <0.05),其他指标差异均无统计学意义。在7组实验组的两两比较中,只有104组与105组出现了显著性的变化(IgA,IgM 增高,C4降低;U =2.39,2.46,2.09,P <0.05,IgG 增高,U =3.25,P <0.01),而其他低载毒量组之间和高载毒量组之间均无显著性差异。结论乙肝患者体内不同的 HBV 载量会引起 IgA,IgG,IgM 及 C3,C4相应的改变,特别是当 HBV 载量为105~108 copies/ml 的4个实验组,伴随着 HBV-DNA 的增高均出现 IgA,IgG,IgM 增高及C3,C4降低,严重的影响了机体免疫功能,两者呈正相关(r =0.967,P <0.01)。104组与105组各指标出现显著性改变,提示对乙肝患者的抗病毒护肝治疗中,要尽量将 HBV 载量控制在104 copies/ml 以下,才能达到小程度损伤免疫功能的疗效。
作者:何涛君;吴正林;钟小强;聂署萍;陆学东 刊期: 2015年第04期
“血小板卫星现象”是指在乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝血中血小板黏附于白细胞表面周围,形成花环的一种现象。一般认为更换抗凝剂可消除此现象的发生,与疾病和药物无关。我们在工作中遇到一例血小板卫星现象病例,患者终死亡,提示这一现象可能与疾病关联,现报道如下。
作者:沈文艳;顾怡;邵康;沈薇;李敏 刊期: 2015年第04期
目的:探讨直接抗人球蛋白试验(DAT)阳性患者的交叉配血方法。方法采用 DAT 法筛查红细胞表面的不规则抗体,微柱凝胶法进行血型鉴定,凝聚胺法和抗人球蛋白法交叉配血。结果共计5例 DAT 阳性的疑难配血患者,其血型分别为 A-DCcEe,O-DCCee,O-DCcee,A-DCCee 和 A-DCcee。选择相应血型抗原阴性的供者血样进行交叉配血,凝集强度均弱于自身对照,建议观察输注洗涤红细胞,患者未发生不良反应。结论对于 DAT 阳性的患者,可配合性输注相应血型抗原阴性的洗涤红细胞。
作者:李建刚;赵家宁;徐华;姚锁良 刊期: 2015年第04期
目的:构建人羧基肽酶 H 不同区段抗原的原核表达载体,诱导表达获得重组蛋白,初步验证人羧基肽酶 H 不同抗原区段在羧基肽酶 H 自身抗体检测中的应用价值。方法应用 RT-PCR 方法调取目的基因,构建相应的原核表达质粒,转化大肠埃希氏菌诱导表达重组蛋白,用重组蛋白作为包被抗原建立人羧基肽酶 H 自身抗体的间接 ELISA 方法,评价羧基肽酶 H 抗原在检测新诊断2型糖尿病患者抗羧基肽酶 H 自身抗体中的应用价值。结果获得了羧基肽酶 H 三种不同区段抗原,其中42~476氨基酸区段为较理想的抗原。以该全长抗原作为包被抗原检测95例新诊断2型糖尿病患者,羧基肽酶 H 自身抗体阳性率为8.42%。结论原核克隆表达的人羧基肽酶 H 42~476氨基酸区段抗原具有良好的抗原性,可作为成人隐匿性自身免疫性糖尿病鉴别诊断的候选抗原。
作者:胡纪文;杨锡琴;宗克亮;郭兰芹;宋晓国;王国华;刘喜明;朱翠侠;赵琰枫;冯晓燕;张贺秋 刊期: 2015年第04期