李建刚；赵家宁；徐华；姚锁良
目的：探讨采用不同血管通路采集自体外周血造血干细胞的安全性及有效性。方法2012年1月～2014年11月期间行自体外周血造血干细胞采集的87例患者分为两组：外周静脉采集组43例，均采用16G 一次性内瘘针进行穿刺，进血管路选用肘部静脉，返血管路选用大隐静脉。中心静脉采集组44例，均采用双腔股静脉置管建立静脉通路。自体外周血造血的采集均选用 Cobe Spectra 血细胞分离机的 Spectra Auto PBSC 操作程序进行。观察两组患者在穿刺成功率、采集顺利程度、患者术中耐受度、采集过程中的不良反应以及终采集物中单个核细胞数和 CD34＋细胞计数的差异。结果两组患者采集的自体外周血单个核细胞数及 CD34＋细胞计数间差异无统计学显著性意义（t＝4.159，3.147，P ＞0.05），且均采集达标；采集过程中不良反应在两组患者中差异无统计学显著性意义（χ2＝0.0009，P ＞0.05）；但采用中心静脉组患者穿刺成功率高、采集顺利、患者术中耐受性均高于采用外周静脉通路的患者，差异有统计学意义（χ2＝7.944，13.7729，20.5094，P ＜0.05）。结论采用双腔股静脉置管建立中心静脉通路在自体外周血干细胞采集中具有穿刺成功率高，采集顺利，大程度减轻了患者的痛苦，且不影响采集效率和效果的优势。
作者：陈瑾；郭彩利；孙春红；刘芳；王艳；王晓宁 刊期： 2015年第04期
目的：分析深圳市珠蛋白生成障碍性贫血患者基因突变类型与基因携带率的分布特点。方法选择2012年1月～2013年12月深圳市坪山新区人民医院住院患者、门诊患者、健康体检者2500例、新生儿脐带血2500例，分别进行α珠蛋白生成障碍性贫血、β珠蛋白生成障碍性贫血基因类型及携带频率分析。结果2500例新生儿脐带血标本中，检出8种α珠蛋白生成障碍性贫血基因类型128例，检出率5.12％（128／2500），主要基因类型：-SEA／αα（54例，42.19％），-SEA／-α3.7（32例，25％）；2500例成人样本中，检出7种基因突变类型101例，检出率4.04％（101／2500）；主要基因突变类型：CD41-42（39例，38.61％），IVS-2-654（21例，20，79％），CD17（18例，17.82％），-28（13例，12.87％）。结论深圳市珠蛋白生成障碍性贫血突变类型与频率有明显的地区特点与时代特点，卫生部门应加强对流行病学的研究，制定针对性的预防和干预措施。
作者：张莉；黄伟忠；唐景云；黄国珍；叶国永 刊期： 2015年第04期
目的：制备游离血红蛋白（FHb）室内质控物，并对其性能进行评价。方法①选取5份已知血红蛋白（Hb）浓度的正常人类全血，用蒸馏水分别以1∶500，1∶1000，1∶2000，1∶4000的比例进行稀释，充分混匀后配制成20份 FHb 溶液，检测其 FHb 浓度，并与其理论浓度进行比较。②选择高值、低值溶液各1份，作为日常室内质控物，混匀分装－20℃保存，常规条件下连续检测20天，计算两组的珚x，s 和 CV 值，绘制 Levey-Jennings 质控图；之后每周测定一次，将数据依次标记在质控图上，直至更换试剂批号；计算高值、低值两种质控物整个检测周期内的总体珚x，s 和 CV 值。结果①该20份标本的 FHb 浓度理论值和实测值（-x±s）分别为125.44±93.04 mg／L 和125.22±93.08 mg／L，差异无统计学意义（t＝0．706，P ＞0.05）。②高值、低值质控物连续20天检测结果（-x±s）分别为303.55±3.70 mg／L 和69.29±1.88 mg／L，CV 值分别为1.22％和2.68％；高值、低值质控物整个检测周期内结果均未失控，总体（-x ±s）分别为302.56±3.99 mg／L 和69.04±1.88 mg／L，CV 值分别为1.32％和2.71％。结论FHb 室内质控物制备过程简单，质量可靠，稳定性好，适合在血站和临床实验室中应用和推广。
作者：马静瑶；郭滔 刊期： 2015年第04期
医学检验质量指标（quality indicators，QIs）可测量医学实验室满足用户需求的程度和所有运行过程的质量。确定可靠的质量指标是用户量化实验室服务质量的关键步骤。然而，目前有很多不同的 QIs 和相应术语都在使用，因此我们需要对提出的 QIs 进行一致化。按照国际临床化学和检验医学联合会工作组启动的计划，一组临床实验室共同地建立质量指标模型。此模型包括57个与关键过程相关的（35个检验前，7个检验中和15个检验后阶段）和3个与支持过程相关的QIs。建立的质量指标模型和收集的数据提供了一致化当前可得到 QIs 计划的可行性证据，但是仍然需要进一步的努力来纳入更多的临床实验室和收集更加一致的数据。
作者：费阳；王薇；王治国 刊期： 2015年第04期
目的：应用受试者工作特征曲线（ROC）确定血清人附睾蛋白4（HE-4）对卵巢癌的佳诊断界点，为卵巢癌的早期诊断提供依据。方法采用电化学发光免疫分析法（ECLIA）检测68例卵巢癌患者、42例卵巢良性肿瘤患者和30例健康妇女血清中 HE-4的水平，绘制 ROC 曲线，运用统计软件分析。结果血清 HE-4水平在卵巢癌组、卵巢良性肿瘤组和健康对照组中均呈非正态分布。卵巢良性肿瘤组和健康组 HE-4水平无显著差异，而卵巢癌组血清 HE-4水平与卵巢良性肿瘤组、健康对照组两者差异均有统计学意义（P ＜0.01）。血清 HE-4值为108 pmol／L 时，正确诊断指数（Youden’s in-dex）大（0.713），敏感度和特异度分别为77.9％和93.1％，阳性预测值为91.4％，阴性预测值为81.7％，阳性似然比为11.6，阴性似然比为0.2，优势比（odds ratio）为47.3。结论 HE-4检测是卵巢癌诊断和排除诊断的较理想指标，选择108pmol／L 作为卵巢癌诊断界点比较合适。
作者：顾益凤；朱自力；张金业；张小霞；史跃燕 刊期： 2015年第04期
目的回顾过去一年汕头地区女性人群的人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）的感染状况。方法收集2013～2014年某院妇科门诊就诊的3664例女性患者的宫颈脱落细胞，行 HPV 基因扩增及分型诊断，检测 HPV 各亚型的感染率；并按年龄分为五组，探讨各组间 HPV 的感染状况。结果 HPV 阳性标本805例（22％，805／3664），其中单一感染和多重感染均可见。单一型较常见分别为16，52，43，58和56型；双重感染较常见分别为16＋52，16＋33和43＋52型。经统计，各年龄组间 HPV 感染率差异有统计学显著性意义（χ2＝27.08，P ＜0.01），以第一组（＞25岁）、第二组（25～34岁）和第五组（＜55岁）为 HPV 感染的高发组。结论汕头地区女性 HPV 感染以16，52，43，58和56型多见，且＜35岁及＞55岁为该地区 HPV 感染的高发人群。研制针对以上型别的疫苗有利于减少该地女性 HPV 的感染率和预防宫颈癌的发生。
作者：王妍；黄钦贤；林章礼；郭少君 刊期： 2015年第04期
目的：研究 IL-3在 BALB／c 小鼠肺炎支原体（MP）感染模型肺泡灌洗液和血清中的表达，阐明其与 MP 感染的关系。方法36只 BALB／c 裸鼠，随机分为3组，分别为对照组、MP 感染组和克拉霉素组，每组12只。用 PPLO 肉汤培养基 MP，将成功培养的 MP 鼻腔滴入裸鼠建立 MP 感染模型。治疗组用克拉霉素连续治疗8天，收集并分离血清，取其肺组织，收集肺泡灌洗液，采用 ELISA 法测定小鼠血清和肺泡灌洗液中 IL-3水平，肺部组织用中性甲醛固定 HE 染色，观察MP 感染小鼠肺的病变程度。结果成功建立 MP 感染小鼠模型，病理组织学观察结果显示，MP 感染 BALB／c 小鼠后炎症明显，克拉霉素治疗 BALB／c 小鼠炎症逐渐减轻。模型组血清和肺泡灌洗液中 IL-3分别为96.4±8.3 ng／L 和60.9±6.5 ng／L，与对照组比较（203.1±14.5 ng／L，96.3±12.6 ng／L），MP 感染组小鼠血清和肺泡灌洗液中 IL-3水平明显降低（t 血清＝19.50，t 肺泡＝17.20，P 值均＜0.01），用克拉霉素治疗后，小鼠血清和肺泡灌洗液中 IL-3明显升高，分别为175.6±12.5 ng／L 和85.6±10.2 ng／L，差异有统计学意义，t 血清＝17.41，t 肺泡＝14.62，P 值均＜0.01）。结论肺炎支原体感染使小鼠 IL-3水平降低，克拉霉素治疗有一定疗效，IL-3表达可能与 MP 肺炎严重程度有关。
作者：许有才；赵世元 刊期： 2015年第04期
目的：探讨广西地区瑶族冠心病患者血清中脂联素（APN）水平及其基因位点＋276 G／T 和-11377 C／G 的多态性。方法瑶族、汉族冠心病患者、瑶族和汉族正常人各100例纳入研究。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测研究对象血清中 APN 水平，聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测 APN 基因位点＋276G／T 和-11377C／G 的多态性。结果①两组冠心病组血清中 APN 水平明显低于两组正常组，差异有统计学意义（t ＝10.311，8.642；均 P ＝0.000）。瑶族冠心病组和汉族冠心病组血清中 APN 的差异无统计学意义（t ＝1.792，P ＝0.076）；②在 H-W 平衡检验中，四组中 APN 基因位点＋276G／T 和-11377C／G 均具有群体代表性（均 P ＞0.05）；③四组 APN＋276G／T 位点的主要型别是野生型。4组间 APN＋276G／T 位点的等位基因频率均无显著差异（均 P ＞0.05）；④冠心病组 ANP-11377C／G 基因型和等位基因频率与同民族正常组的差异有统计学意义（χ2＝8.908，P ＝0.012；χ2＝17.275，P ＝0.000）；瑶族冠心病组APN-11377C／G 基因杂合程度略低于汉族冠心病组，但差异无统计学意义（χ2＝0.363，P ＝0.834）。结论同汉族冠心病一样，血清低 APN 水平和 APN-11377C／G 位点是瑶族冠心病患者的危险因素。
作者：刘运端；林世恒 刊期： 2015年第04期
目的：观察替加环素（TGC）、米诺环素（MH）和多黏菌素 B（PB）对泛耐药鲍曼不动杆菌（PDR-Ab）的体外抗菌活性，为临床治疗和控制感染提供参考依据。方法对2013年10月至2014年3月陕西省人民医院住院及门诊患者临床标本分离并鉴定的非重复计数的76株泛耐药鲍曼不动杆菌进行替加环素、米诺环素和多黏菌素 B 的纸片扩散法（K-B）药敏试验。结果泛耐药鲍曼不动杆菌分布多的是 ICU，占总数的44．7％，其次是呼吸内科，占总数的22．4％。标本来源多的是痰液，占总数的85．5％，其次是灌洗液，占总数的9．2％，尿液、脑脊液、关节液和腹腔积液各占总数的1．3％。76株泛耐药鲍曼不动杆菌，对替加环素和多黏菌素 B 的敏感率均为100％，对米诺环素敏感率和中介率分别为67．11％和27．63％。结论替加环素、米诺环素和多黏菌素 B 对泛耐药鲍曼不动杆菌具有良好的体外抗菌活性，可为临床泛耐药鲍曼不动杆菌引起的感染性疾病的治疗提供参考依据。
作者：张华；詹颉；苍金荣；付子；归巧娣；刘英；陈苗；宫艳艳 刊期： 2015年第04期
目的：建立淋洗液发生器电导抑制离子色谱测定饮用水中溴酸盐的方法。方法应用美国 Dionex ICS-2100型离子色谱仪、EGC-III 淋洗液自动发生器行离子色谱梯度淋洗法测定饮用水中溴酸盐，IonPac AS19（4×250 mm），淋洗液发生器在线产生 KOH，梯度淋洗，流速：1.0 ml／min。结果该法线性范围Y ＝－0.0006097＋0.0008731X ，r＝0.9999，精密度高（CV％＜1.5），样品加标平均回收率为99.5％～100.8％，低检出限0.50μg／L。结论离子色谱梯度淋洗法测定饮用水中溴酸盐操作简单、快速、灵敏，可适用饮用水中溴酸盐的测定。
作者：许珺；梁卫玖；程韶光；陈玉兰 刊期： 2015年第04期
目的：研究肺癌患者在化疗前后的血清癌胚抗原（CEA）、铁蛋白（Ferritin）、血浆 D-二聚体（D-D）的水平变化，评估其对于判断肺癌患者化疗效果的应用价值。方法选择2011年9月～2014年9月确诊的120例肺癌患者，根据 WHO制定的实体瘤疗效评价标准进行疗效判定。另选120例健康体检者作为对照组，分别检测肺癌组和对照组的血清 CEA， Ferritin 和血浆 D-D 的含量，分析肺癌化疗前后及不同化疗疗效分期患者的结果变化规律。结果肺癌患者化疗前血清CEA，Ferritin 和血浆 D-D 的含量均明显高于化疗后和对照组，差异具有统计学意义（t＝4.123～14.224，P ＜0.05）；疗效为完全缓解（CR）期的肺癌患者血清 CEA，Ferritin 和血浆 D-D 含量低于部分缓解（PR）期、稳定（SD）期和进展（PD）期，差异具有统计学意义（t＝4.230～12.336，P ＜0.05）。结论检测肺癌患者化疗前后的血清 CEA，Ferritin 和血浆 D-D 等项目有一定的临床价值，其水平变化可以作为肺癌化疗疗效的参考指标。
作者：朱晶；翟海军 刊期： 2015年第04期
目的：探讨联合检测曲霉菌半乳甘露聚糖、真菌（1-3）-β-D 葡聚糖及血液培养在非 HIV 感染儿童马尔尼菲青霉病的临床应用价值。方法对1例非 HIV 感染儿童马尔尼菲青霉病患儿静脉血进行曲霉菌半乳甘露聚糖及真菌（1-3）-β-D葡聚糖定量检测，同时对患儿静脉血进行血液培养，血培养仪阳性报警后对培养液进行真菌双相培养，肉眼观察菌落形态，显微镜下观察菌体特征。结果曲霉菌半乳甘露聚糖检测结果14.45μg／L；真菌（1-3）-β-D 葡聚糖检测结果77.14 pg／ml；血液培养检出马尔尼菲青霉菌，培养液25℃菌落为菌丝相，沙保氏培养基上有水溶性酒红色色素产生，35℃为酵母相，菌落可见脑回样皱褶，显微镜下菌体见典型的扫帚状分枝和分隔菌丝。结论曲霉菌半乳甘露聚糖、真菌（1-3）-β-D 葡聚糖定量检测联合血液培养，有助于马尔尼菲青霉病的早期诊断及治疗。
作者：何维娜；苏丹虹；吕东月；丁华；华建江；何玥；梁鸿 刊期： 2015年第04期
目的：探讨直接抗人球蛋白试验（DAT）阳性患者的交叉配血方法。方法采用 DAT 法筛查红细胞表面的不规则抗体，微柱凝胶法进行血型鉴定，凝聚胺法和抗人球蛋白法交叉配血。结果共计5例 DAT 阳性的疑难配血患者，其血型分别为 A-DCcEe，O-DCCee，O-DCcee，A-DCCee 和 A-DCcee。选择相应血型抗原阴性的供者血样进行交叉配血，凝集强度均弱于自身对照，建议观察输注洗涤红细胞，患者未发生不良反应。结论对于 DAT 阳性的患者，可配合性输注相应血型抗原阴性的洗涤红细胞。
作者：李建刚；赵家宁；徐华；姚锁良 刊期： 2015年第04期
目的：观察和分析老年慢性阻塞性肺病（COPD）患者外周血单核细胞 TLR2，TLR4等 Toll 样受体（TLRs）的表达情况及其与炎症因子的关系。方法选取80例老年 COPD 患者，根据其病情将其分为 COPD 稳定期组和 AECOPD 组，分别为43例和37例患者。选取80例健康老年人，根据其是否吸烟分为吸烟组和不吸烟组，分别为41例和39例。对各组研究对象的外周血单核细胞表面 TLR2，TLR4表达水平和血清白细胞介素-6（IL-6），白细胞介素-8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平进行检测和比较。结果从 AECOPD 组、不吸烟组到 COPD 稳定期组，研究对象的外周血单核细胞表面 TLR2，TLR4表达水平依次显著升高，且 COPD 稳定期组患者的外周血单核细胞表面 TLR4表达水平显著高于吸烟组（q＝2.815～3.754，P ＜0.05）；从 AECOPD 组，COPD 稳定期组、吸烟组到不吸烟组，研究对象的血清 IL-6，TNF-α水平依次显著降低且 AECOPD 组患者的血清 IL-8水平显著高于其他三组（q＝5.247～8.175，P ＜0.05）；COPD 患者外周血单核细胞表面 TLR2的表达水平与血清 IL-6水平（标化回归系数＝0.458）、血清 IL-8水平（标化回归系数＝0.622）和血清TNF-α水平（标化回归系数＝0.562）具有相关性（P ＜0.05），TLR4的表达水平与血清 IL-6水平（标化回归系数＝0.478）、血清 IL-8水平（标化回归系数＝0.569）和血清 TNF-α水平（标化回归系数＝0.352）具有相关性（P ＜0.05）。结论老年COPD 患者的外周血单核细胞表面的 TLR2，TLR4等 TLRs 呈现过表达状态，这与患者血清炎症因子水平的上升具有密切的相关性，TLRs 的过表达参与了 COPD 发生和进展的过程。
作者：谢圆媛；杨丹芬 刊期： 2015年第04期
目的：统计并分析2014年3月同型半胱氨酸室内质量控制（internal quality control，IQC）数据，了解目前全国检验科开展 IQC 工作的情况。方法采用基于 Web 方式的室间质量评价（external quality control，EQA）软件系统。收集参加全国同型半胱氨酸室间质量评价292家实验室的 IQC，包括2014年3月和长期累积室内质控在控数据的变异系数。依据1／3室间质量评价限（TEa），1／4TEa 和基于生物学变异导出的低、适当和佳允许不精密度这5个评价标准，计算同型半胱氨酸两个批号的室内质控变异系数的通过率。统计参加实验室使用的仪器并将其分为6个仪器组，然后按照5个评价标准计算各仪器组的通过率。结果有292家实验室上报了同型半胱氨酸第一个浓度水平（批号1）的数据，其中有106家上报了第二个浓度水平（批号2）的数据。按照不同标准进行评估，变异系数通过率各不相同。按照1／3TEa 标准和按照生物学变异导出的允许不精密度中的低标准，实验室的通过率接近，为63.36％～76.42％，按照1／4TEa 和按照生物学变异导出的允许不精密度中的适当标准，实验室的通过率接近，为34.25％～57.55％，按照生物学变异导出的允许不精密度中的佳标准，实验室通过率仅为10.62％～16.98％。统计实验室使用的仪器，结果显示参加实验室使用的仪器主要有日立（77／292）、奥林巴斯（61／292）、罗氏（19／292）、贝克曼（14／292）、雅培（10／292）和西门子（10／292）。除了西门子仪器组，其它仪器组通过率间的差异并不大。结论目前，大多数实验室可以满足1／3TEa 标准和按照生物学变异导出的允许不精密度中的低标准，但只有一半以下的实验室能满足1／4TEa 和按照生物学变异导出的允许不精密度中的适当标准和佳标准，说明全国实验室在同型半胱氨酸检测的精密度性能上还需进一步提高。
作者：张路；王薇；何法霖；钟堃；王治国 刊期： 2015年第04期
目的：制备鼠抗重组半乳糖凝集素7（Galectin-7）多克隆抗体及其在膀胱癌组织中特异性鉴定。方法PCR 法从人包皮组织中扩增 Galectin-7基因，并构建到 pET28a 表达载体中，使用 IPTG 诱导重组蛋白的表达，通过镍柱亲和层析纯化获得 Galectin-7蛋白。以纯化的 Galectin-7蛋白混合福氏完全佐剂免疫 Balb／C 小鼠制备抗体，并用 ELISA，Western blot 及免疫组织化学法检测抗体。结果成功表达、纯化了 Galectin-7重组蛋白，ELISA 检测 Galectin-7蛋白免疫的小鼠血清效价为1∶32000，Western blot 显示该抗体能与天然的 Galectin-7特异结合，免疫组织化学法检测结果表明该抗体识别人膀胱肿瘤组织的天然 Galectin-7。结论通过制备重组 Galectin-7蛋白为免疫原，免疫家兔，成功地制备了效价高、特异性好的抗 Galectin-7多克隆抗体。
作者：黄震；迟秀文；韦庆文；束振华；孙俊生；王前 刊期： 2015年第04期
目的：探讨中国汉族人群细胞色素氧化酶 P4502C9（CYP2C9）基因以及维生素 K 环氧化物还原酶复合体1（VKORC1）基因多态性对华法林用药的影响。方法首先抽取无抗凝障碍的汉族人群受试者200例利用基因测序法进行CYP2C9和 VKORC1基因分型（正常对照组）。并收集临床使用华法林稳定维持剂量的汉族人群患者114例（服用华法林药物组），记录患者年龄、性别、身高、体质量以及体表面积等，检测基因型并结合体征差异及临床稳定剂量进行分析。结果正常对照组的 CYP2C9基因型检测有 CYP2C9*1／*1型186例（93％），未发现 CYP2C9*1／*2型，CYP2C9*1／*3型14例（7％）；VKORC1-1639A／G 基因型：AA 型179例（89.5％），GA 型21例（10.5％），未发现 GG 型（0.0％）；服用华法林药物组的 CYP2C9*1／*1型104例（91.2％），CYP2C9*1／*3型10例（8.8％），CYP2C9*1／*1型患者华法林平均维持剂量高于 CYP2C9*1／*3型患者[（2.13±0.83）mg／d vs （1.61±1.17）mg／d，P ＜0.05]。VKORC1（-1639G＞A）基因型检测有102例患者为突变纯合子 AA 型（89.5％），12例患者为杂合子 GA 型（10.5％），未发现纯合子 GG 型患者，GA型患者华法林平均维持剂量明显高于 AA 型[（3.34±1.07）mg／d vs （1.63±0.45）mg／d，P ＜0.01]。正常人群组与服用华法林药物组基因型在 CYP2C9*3（1075C／A）（P ＝0.926）和 VKORCl-1639A／G 突变上的差异无统计学意义（P ＝0.812）。结论中国汉族人群存在 CYP2C9*3 A／C 和 VKORC1-1639G／A 的基因多态性，且不同基因型患者间华法林用量存在差异。
作者：王欣俞；王德辉；刘淑娟；黄丹 刊期： 2015年第04期
目的：以健康人咽部菌群密度为参考[1]，研究呼吸道感染在治疗过程中咽部菌群密度的变化和临床症状改变的相关性分析，探讨以咽部菌群的密度变化来评估分析呼吸道感染患者的治疗和预后。方法采集102例上呼吸道感染患者（其中62例咽部菌群正常，60例咽部菌群异常）和219例下呼吸道感染患者的咽拭子进行细菌培养，研究咽部菌群密度的变化与临床症状改变的相关性。结果62例咽部菌群正常的上呼吸道感染患者其治疗与不治疗在症状改善和痊愈上差异无统计学意义（P ＞0.05），60例咽部菌群异常的上呼吸道感染患者其治疗组和不治疗组的 CPIS 评分差异有统计学意义（P ＜0.05）；对于219例下呼吸道患者（其中121例细菌性肺炎、74例重症肺炎及24例肺脓肿患者）的治疗观察，发现当咽部菌群在治疗过程中恢复正常时，与患者的临床病理改变符合率分别为92.6％，86.5％和87.5％。结论咽部菌群密度在健康人群之间保持着一定菌群种类和数量的稳定，但广谱抗生素的应用会导致咽部菌群失调；如何合理有效地治疗呼吸道感染应结合咽部菌群密度的变化来评估，这样可减少患者使用抗生素的天数，同时避免诱发耐药菌的产生和呼吸道菌群的失调。
作者：詹颉；李小侠；胡淑玲；李亚娥；孙莉；杨淑梅；张利侠 刊期： 2015年第04期
目的：构建人羧基肽酶 H 不同区段抗原的原核表达载体，诱导表达获得重组蛋白，初步验证人羧基肽酶 H 不同抗原区段在羧基肽酶 H 自身抗体检测中的应用价值。方法应用 RT-PCR 方法调取目的基因，构建相应的原核表达质粒，转化大肠埃希氏菌诱导表达重组蛋白，用重组蛋白作为包被抗原建立人羧基肽酶 H 自身抗体的间接 ELISA 方法，评价羧基肽酶 H 抗原在检测新诊断2型糖尿病患者抗羧基肽酶 H 自身抗体中的应用价值。结果获得了羧基肽酶 H 三种不同区段抗原，其中42～476氨基酸区段为较理想的抗原。以该全长抗原作为包被抗原检测95例新诊断2型糖尿病患者，羧基肽酶 H 自身抗体阳性率为8.42％。结论原核克隆表达的人羧基肽酶 H 42～476氨基酸区段抗原具有良好的抗原性，可作为成人隐匿性自身免疫性糖尿病鉴别诊断的候选抗原。
作者：胡纪文；杨锡琴；宗克亮；郭兰芹；宋晓国；王国华；刘喜明；朱翠侠；赵琰枫；冯晓燕；张贺秋 刊期： 2015年第04期
目的：探索 miRNA-148a 在膀胱癌发生发展中的作用。方法收集35例膀胱癌组织和16例非癌组织，采用荧光定量 PCR 方法检测 miRNA-148a 的相对表达量，并分析其与临床特征的相关性；采用生物信息学分析，预测 miRNA-148a的靶基因和转录因子，构建 TF-miRNA-148a-靶基因调控网络图，并对其靶基因进行 GO 富集和 KEGG Pathway 分析。结果miRNA-148a 在膀胱癌中的相对表达量（0.0008±0.0002）明显低于非癌组织（0.0021±0.0005）（t＝2.46，P ＜0.05），其相对表达量在不同性别、年龄、病理分级、临床分期、淋巴结转移组的差异无统计学意义（P ＞0.05）。3个软件都预测到的 miRNA-148a 靶基因268个；预测到 miRNA-148a 的转录因子60个，结合评分＞80的结合位点657个；对268个靶基因进行 GO 富集分析，发现其靶基因主要涉及神经细胞分化、发育、增殖、mRNA 合成，蛋白连接等众多的生物学过程（P ＜0.001，相对于背景具有统计意义）；KEGG Pathway 分析发现268个靶基因参与 p53，恶性肿瘤、前列腺癌、PI3K-AKT 等信号通路（P ＜0.05，相对于背景具有统计意义）；根据构建的 TF-miRNA-148a-靶基因调控网络图，挖掘出可能调控 miRNA-148a 的转录因子有 SP1，ESR1，AP1，MYC，BRCA1等；可能受 miRNA-148a 调控的基因有 IGF1，P27 kip1，NCOA1，PTEN， SERPINE1等。结论miRNA-148a 在膀胱癌中表达下调，可能参与膀胱癌的发生发展，生物信息学分析为后续研究提供一定的思路。
作者：谢小娟；朱娜；潘晶晶；魏力强；陈葳 刊期： 2015年第04期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
