学术投稿

miR-9-3在慢性淋巴细胞白血病中的功能与调控机制

宫琦玉

关键词:慢性淋巴细胞白血病, miR-9-3, 甲基化特异性聚合酶链反应, 5-氮杂-2’-脱氧胞苷
摘要:目的:探讨 microRNA-9-3(miR-9-3)在慢性淋巴细胞白血病中的作用及调控机制。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)技术检测8例正常人骨髓组织和外周血、78例新确诊慢性淋巴细胞性白血病患者骨髓组织和7种白血病细胞系的甲基化水平;采用 Western blot 技术检测甲基化阳性白血病细胞株的 NF-κB1信号转导通路活化水平。结果正常对照组 miR-9-3启动子呈非甲基化状态;7种白血病细胞株中只有 I83-E95和 WAC3CD5+两种细胞株种呈非甲基化状态(MSP 阳性率为28.6%);78例慢性淋巴细胞性白血病患者中65例发生 miR-9-3甲基化(MSP 阳性率为83%)。去甲基化药物5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza2’Dc)处理后的 I83-E95和 WAC3CD5+细胞株 miR-9-3均处于去甲基化状态。结论慢性淋巴细胞性白血病患者存在 miR-9-3异常甲基化,可能导致癌细胞异常增生;miR-9-3去甲基化可抑制 NF-κB1信号通路活化,表明 miR-9-3可能可以通过该通路抑制癌细胞凋亡,引发患者疾病恶化;甲基化的白血病细胞株可被去甲基化药物抑制,因此 miR-9-3可以作为治疗慢性淋巴细胞白血病的新基因靶点。
现代检验医学杂志相关文献
  • 病毒性脑炎患儿脑脊液人类鼻病毒检测的价值

    目的:了解儿童病毒性脑炎的病原体,建立快速、特异检测鼻病毒的方法,探讨病毒性脑炎与鼻病毒的相关性。方法收集2012年1月~12月全年期间收住在汕头大学医学院第二附属医院儿科重症监护室出现发热、惊厥症状的患儿脑脊液标本169份,应用巢式 RT-PCR 扩增脑脊液标本的鼻病毒核酸,对阳性结果进行核酸序列测定和同源性分析。结果巢式 RT-PCR 总共检测出39份鼻病毒阳性样本,总阳性检出率为23.1%;人类鼻病毒(HRV)感染的儿童中年龄在5岁以下的占87.6%;7~9月份 HRV 阳性检出率较高;序列分析显示39例 HRV 检测阳性标本中 HRV-A 型18例(46.1%,18/39),HRV-B 型7例(17.9%,7/39),HRV-C 型14例(35.9%,14/39);28例病毒性脑炎有 8例检出 HRV,其中3例为HRV-C。结论建立的巢式 RT-PCR 可以检测到脑脊液标本中的鼻病毒片段,并且 HRV-A,B 和 C 三型均有检出,结合临床症状可认为 HRV 可能是病毒性脑炎的病原体之一。

    作者:高珺;王琼;林广裕;陈洁玲;陆学东 刊期: 2015年第02期

  • 锰超氧化物歧化酶9 Ala/Val 基因多态性对冠心病的影响

    目的:研究锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)9 Ala/Val 基因多态性与 T-SOD 和 Mn-SOD 活性的关系以及对冠心病(CHD)的影响。方法共82例冠心病患者和57例正常人参与研究,应用测序法检测两组的 Mn-SOD 9 Ala/Val 基因多态性的基因型,应用比色法检测两组的血清 T-SOD 和 Mn-SOD 活性。结果冠心病组的血清 T-SOD 和 Mn-SOD 活性低于对照组(t=4.83,6.57,P 均<0.05),冠心病组的 Mn-SOD 9 VV 基因型和 V 等位基因频率高于对照组(χ2=4.75,P <0.05),Mn-SOD 9 VV 基因型的血清 T-SOD 和 Mn-SOD 活性低于 Mn-SOD 9 AA 基因型(t=2.96,3.11,P 均<0.05)。结论冠心病患者的血清 T-SOD 和 Mn-SOD 活性降低,Mn-SOD 9 Ala/Val 基因多态性通过影响 Mn-SOD 的活性进而参与冠心病的发病。

    作者:姚创利;赵佳;黎阳;黎波;陆华;白妮;刘琳;辛渭川;姜小建 刊期: 2015年第02期

  • 基础血尿酸水平与糖负荷后胰岛素分泌相关性研究

    目的:研究不同血尿酸水平人群糖负荷后胰岛素分泌差异,分析胰岛素分泌和血尿酸(SUA)的关系。方法对877例符合要求对象进行生化检查行 OGTT 试验。将研究对象分为尿酸正常组(NUA)和高尿酸组(HUA),比较两组糖负荷后胰岛素(INS)0,30,60,120和180 min(INS0,INS30,INS60,INS120,INS180)分泌差异。以血尿酸水平为因变量行多因素逐步回归分析,分析血尿酸水平影响因素。结果 HUA 组男性女性0,30,60,120和180 min 胰岛素分泌均高于NUA 组(P 均<0.05);糖负荷后各时段 INS 分泌与 SUA 水平 Pearson 相关系数分别为0.107,0.154,0.195,0.157和0.112(P <0.01)。多因素逐步回归分析显示 SUA 的影响因素有女性,INS60,TC,HDL(β值-0.214,0.194,0.253和-0.119,P <0.01)。结论糖负荷后的 HUA 组各时段 INS 分泌高于 NUA 组,INS 分泌与 SUA 水平正相关;INS60,TC 与SUA 水平正相关,性别(女性)、HDL 与 SUA 负相关。提示或可将空腹 SUA 作为 INS(尤其是 INS60)分泌潜在标志物运用于临床。

    作者:李国春;曹娜;王忆;巫开文;袁辉 刊期: 2015年第02期

  • 缺血性脑卒中患者血浆脂蛋白相关磷脂酶 A2测定的临床意义

    目的:探讨血浆脂蛋白相关磷脂酶 A2(Lp-PLA2)测定在缺血性脑卒中(ICS)诊治中的价值。方法选择2011年1月~2014年6月期间十堰市东风花果医院124例 ICS 患者(ICS 组)、50例出血性脑卒中患者(出血组)作为研究对象,并选择同期体检者50例作为对照组,比较三组血浆 Lp-PLA2水平,并比较有无颈动脉粥样硬化斑块、不同病情 ICS 患者血浆 Lp-PLA2水平。结果ICS 组、出血组和对照组血浆 Lp-PLA2水平分别为58.4±9.6μg/L,30.5±9.2μg/L 和18.7±8.3μg/L,组间差异有统计学意义(F =16.741,P =0.000);血浆 Lp-PLA2水平有斑块组高于无斑块组(66.3±9.7μg/L vs 54.1±10.3μg/L,t=5.775,P =0.000),不稳定型斑块组高于稳定型斑块组(72.4±9.5μg/L vs 62.8±10.1μg/L,t=4.797,P =0.000);轻型、中型、重型 ICS 患者血浆 Lp-PLA2水 平 分 别 为48.4±9.2μg/L,60.9 ±9.6μg/L 和74.5±10.3μg/L,三组间差异有统计学意义(F =13.629,P =0.000),血浆 Lp-PLA2水平与 ICS 患者 NIHSS 评分呈正相关(r=0.716,P <0.05);Lp-PLA2诊断 ICS ROC 曲线下面积为0.904,佳临界值为45.2μg/L,敏感度、特异度分别为81.5%和80.2%。结论血浆 LP-PLA2检测对 ICS 具有良好的诊断效能,其血浆水平可反应 ICS 患者病情程度和动脉粥样硬化斑块的稳定性。

    作者:高宏娥;李荫桂;黄海云;梁伟 刊期: 2015年第02期

  • PCR-SBT 与 IMS-ELISA 法在强直性脊柱炎患者 HLA-B27检测中的比较

    目的:比较聚合酶链反应-直接测序法(polymerase chain reaction sequence-based typing,PCR-SBT)和磁珠酶联免疫法(immunomagnetic separation and enzyme-linked immunosorbent assay,IMS-ELISA)检测人类白细胞抗原 B27(human leukocyte antigen B27,HLA-B27)在强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)临床诊断中的价值。方法应用 PCR-SBT法和 IMS-ELISA 法对120例疑似 AS 患者外周血进行 HLA-B27检测。以 SPSS17.0软件的配对χ2检验和受试者工作特征曲线下面积对两种方法检测 HLA-B27在 AS 诊断中的价值进行评价。结果120例疑似 AS 患者中,PCR-SBT 和 IMS-ELISA 法 HLA-B27检测阳性率分别为45.83%(55/120)和37.50%(45/120)。两种方法检测 HLA-B27差异有统计学意义(χ2=59.455,P =0.000)。PCR-SBT 法敏感度和特异度分别为96.36%和96.92%;IMS-ELISA 法的敏感度和特异度分别为69.09%和89.23%。两者的 AUC 分别为0.966和0.792。结论与 IMS-ELISA 法相比,在 AS 的临床诊断中PCR-SBT 法检测 HLA-B27的敏感度和特异度更高,方法更优。

    作者:孙灵迪;梅传忠;王平均;武晓茜;邵先安 刊期: 2015年第02期

  • 银屑病患者血清中 IL-10与 IL-21水平监测的临床应用

    目的:通过检测银屑病患者血清中 IL-10与 IL-21表达水平,探讨其在银屑病病情进展程度及治疗效果中的意义。方法按照赵辨主编的临床皮肤病学诊断标准,选择2014年3月~9月期间皮肤科就诊的门诊和住院寻常型银屑病患者65例,其中进行期25例(A 组),稳定期20例(B 组),恢复期20例(C 组),并选择正常对照组25例(D 组)。ELISA 法检测各组血清中 IL-10与 IL-21表达水平,并对各组患者进行银屑病皮损面积和严重程度(PASI)评分。结果A 与 B 两组血清中 IL-21表达水平分别为127.59±16.09 pg/ml 和105.74±21.08 pg/ml,均明显高于 D 组85.46±14.25 pg/ml,差异有统计学意义(t 值分别为5.174,4.863,P 值均<0.01),而两组 IL-10表 达 水 平 分 别 为10.64±3.23 pg/ml 和12.27±2.18 pg/ml,均低于 D 组20.29±2.51 pg/ml,差异有统计学意义(t 值分别为2.031,2.027,P 值均<0.05)。C 组血清中IL-21表达水平94.03±8.90 pg/ml 高于 D 组,差异有统计学意义(t=2.033,P <0.05)。A 组血清中 IL-21表达水平高于C 组,差异有统计学意义(t =2.352,P <0.05),IL-10表达水平低于 C 组19.69±1.54 pg/ml,差 异 有 统 计 学 意义(t =2.071,P <0.05)。银屑病患者血清中 IL-21表达水平与 PASI 评分值正相关(r=0.508,P =0.027),而血清中 IL-10表达水平与 PASI 评分为负相关(r=-0.413,P =0.039)。结论银屑病的病情进展与患者血清中 IL-21升高或 IL-10降低有关,检测细胞因子 IL-21和 IL-10水平有助于判断其病情严重程度及疗效评估。

    作者:汤雯剑;罗浩;赵金涛 刊期: 2015年第02期

  • 慢性乙型肝炎患者血清 HBV DNA,HBeAg 和ALT 滴度与恩替卡韦疗效的关系

    目的:通过检测血清 HBV DNA,ALT 和 HBeAg 滴度变化来预测恩替卡韦(ETV)治疗慢性乙型肝炎的临床疗效。方法60例慢性乙型肝炎患者接受 ETV 0.5 mg/d,采用实时荧光定量 PCR 法检测服药后3,6和12个月时 HBV DNA,ALT 阴转率;采用免疫化学发光法检测血清治疗前后 HBeAg 滴度的变化。结果治疗12个月时,血清 ALT 复常率,HBeAg 阴转率,HBeAg 转换率分别为91.7%,86.7%和16.7%;患者基线 HBeAg 滴度与疗程3个月时 HBeAg 滴度下降幅度与远期的 HBeAg 转换率明显相关,HBeAg 的基线滴度越低,HBeAg 血清转换越高,与其他各组差异有统计学显著性意义;HBeAg 滴度下降幅度≥90%的患者的 HBeAg 转换率明显高于<90%的患者,与其他各组差异有统计学显著性意义。结论通过检测 HBeAg 滴度下降幅度可以早期预测 ETV 治疗 HBeAg 阳性 CHB 患者的 HBeAg 血清转换率。

    作者:褚小慧 刊期: 2015年第02期

  • 泛素结合结构域与泛素化信号的识别

    泛素化(Ubiquitylation,UB)是目前为复杂为多元的翻译后修饰,几乎参与胞内所有的生物学过程。其通过改变底物的分子景观(landscape)、三维结构、位置、活性、影响底物蛋白与其他蛋白的相互作用等方法,从时间和空间上调节底物所参与的生物学过程。而泛素化底物功能的发挥依赖于特异性的泛素结合结构域(Ubiquitin binding domains, UBDs)。UBDs 的表面功能基团特异性识别具有不同修饰类型的泛素化底物,并决定其功能的特异性。已知的20多种UBDs 超家族对泛素化信号网络的有序调节是人们开启泛素化网络的一把钥匙,同时了解 UBD-ubiquitin 的特异性识别是认识泛素化蛋白质组学“ubiquitome”的基础。

    作者:王京伟 刊期: 2015年第02期

  • 产β-内酰胺酶大肠埃希菌的临床分布及耐药性分析

    目的:分析医院2012年1月~2014年12月分离的产β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌临床分布与耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法住院患者中分离1587株大肠埃希菌进行回顾性分析,采用珠海迪尔公司微生物鉴定仪进行鉴定和药敏试验,用表型确证实验检测 ESBLs。结果1587株 大 肠 埃 希 菌 中 检 出 产 ESBLs 菌株为901株(56.8%),主要分布科室为泌尿外科、内分泌科、呼吸科;标本来源主要分布为尿液609株(47.3%),痰液411株(31.9%),血液83株(6.5%);产 ESBLs 菌株大肠埃希菌对亚胺培南耐药率为0;对青霉素类、头孢菌素类的耐药性>90.0%,对左旋氧氟沙星、环丙沙星耐药性>70.0%;对阿莫西林/克拉维酸、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星耐药率较低<7.7%。结论近3年医院临床分离的大肠埃希菌耐药性呈逐年增高趋势,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌检出率逐年升高,表现为多耐药,因此,加强耐药性检测和监测,对指导合理使用抗菌药物非常重要。

    作者:谈昀;丁晓勇;白晓 刊期: 2015年第02期

  • 血清免疫固定电泳、蛋白电泳、免疫球蛋白及轻链定量在诊断多发性骨髓瘤中的临床应用

    目的:探讨血清免疫固定电泳(IFE)、蛋白电泳(SPE)和免疫球蛋白定量在多发性骨髓瘤(MM)诊断中的作用。方法选择2012年6月~2013年12月北京积水潭医院符合 MM 诊断标准的 MM 患者192例为研究对象,选择同期健康体检者30例为对照组,对 MM 患者进行免疫固定电泳、血清蛋白电泳和免疫球蛋白及轻链定量检测并对结果进行分析。结果192例 MM 患者有120例血清蛋白电泳检出 M 带,检出率为62.5%;免疫固定电泳174例检出 M 带,检出率为90.6%;分型结果显示以 IgG 型多(106例,55.2%),其中 IgG-λ型66例(34.4%);IgA 型次之(36例,18.8%),轻链型低(24例,12.5%)。免疫球蛋白、轻链定量测定结果显示,在各型 MM 患者血清中出现相应免疫球蛋白及轻链的变化,与正常对照组比较差异具有统计学意义(P <0.05),检出率为67.7%(130/192)。无论是κ型还是λ型 M 蛋白,κ/λ比值均具有明显差异(P <0.05),检出率为85.4%(164/192)。结论免疫固定电泳、免疫球蛋白及轻链定量、κ/λ比值测定等免疫学检测在 MM 诊断中有较好的检出率,能及时为临床提供有效的诊疗指标,减少误诊和漏诊的发生率。

    作者:邱爽;孟瑞芳;蒋筱漪;张会英 刊期: 2015年第02期

  • 重组葡激酶-水蛭素融合蛋白在体外循环抗凝溶栓中的应用比较

    目的:探讨与比较抗凝溶栓重组葡激酶-水蛭素融合蛋白在体外循环中的应用优势。方法2013年2月~2014年7月,选择镍钛合金片分成未包被组(A 组)、基础包被组(壳聚糖,B 组)、壳聚糖/葡激酶(C 组),壳聚糖/水蛭素(D 组)、壳聚糖/重组葡激酶-水蛭素融合蛋白(E 组),纳入新鲜全人血中进行溶血实验,计算溶血率与血细胞状况。同时健康新生儿脐静脉内皮细胞植入各组别的镍钛合金片,进行细胞相容性实验。结果5组样品溶血率在1.5%左右,5组的红细胞、白细胞和血小板数量均在正常范围内,各组比较差异均无统计学意义(P <0.05)。E 组的增殖程度与黏附程度都明显低于其他4组,对比差异明显(P <0.05);A 组与 B 组的相关比较差异无统计学意义(P >0.05)。随机双盲法细胞计数结果示 C,D 与 E 组与 A,B 组比较差异有统计学显著性意义(P <0.05),同时 E 组与 C,D 组对比差异也有统计学意义(P <0.05)。结论相对于葡激酶与水蛭素的单独应用,重组葡激酶-水蛭素融合蛋白在体外循环中的应用能发挥更强的抗凝、抗血栓作用,安全性好,从而确保心血管疾病介入治疗的有效性。

    作者:李春华;赵年;陈武 刊期: 2015年第02期

  • 阴道分泌物对女性尿液干化学白细胞酯酶测定的影响

    目的:探讨阴道分泌物对女性尿液干化学白细胞酯酶测定的影响。方法收集正常阴道分泌物Ⅰ,Ⅱ度标本21份和30份,并测定其中的白细胞酯酶和鳞状上皮细胞;再收集正常阴道分泌物标本,从中分离出鳞状上皮细胞,并配制成20个/μl 和60个/μl 两个浓度的鳞状上皮细胞混悬液。将其加入正常女性尿液后进行干化学白细胞酯酶测定;对于干化学白细胞酯酶测定强阳性而尿沉渣白细胞计数正常的患者做外阴清洗后再取中段尿做尿常规检验。结果正常阴道分泌物中有66.7%的白细胞酯酶结果呈阳性,且均有~的鳞状上皮细胞(镜检);正常尿液组和加入低浓度(20个/μl)及高浓度(60个/μl)鳞状上皮细胞尿液组的尿液干化学白细胞酯酶测定差异无统计学意义(P >0.05);再次中段尿的鳞状上皮细胞和白细胞干化学阳性率及强度较第一次尿明显降低,差异有统计学意义(P <0.05),而白细胞计数无明显区别,差异无统计学意义(P >0.05)。结论阴道鳞状上皮细胞不会对尿液干化学白细胞酯酶的测定产生影响。但女性自身阴道分泌物中的白细胞酯酶对其尿液中的白细胞酯酶的测定有很大影响。

    作者:吴跃军;季明德;刘淑杰 刊期: 2015年第02期

  • 医学检验危急值管理评估分析

    目的:分析医学检验危急值管理现状,提出相应的对策。方法采用回顾性分析法,对内江市第二人民医院2014年9月506例医学危急值报告,利用软件统计出危急值项目构成比以及不同时间段危急值发生频率,危急值发生周期,不同临床科室危急值报告量等。结果检验医学危急值出现率高的项目是血小板(PLT),占危急值总数的16.80%,其次:白细胞(WBC)13.24%、血肌酐(Cr)12.25%;危急值报告量集中在9:00~11:00,占全天的34%左右;周二和周四危急值报告量较多,周日较少;危急值报告量多的是:重症监护病房(ICU)占危急值总数的24.70%,其次是肾内科21.15%,血液科19.57%。结论检验科室人员必须认真执行检验医学危急值报告制度,各临床科室认真执行危急值报告登记制度。每年根据情况对医学检验危急值进行评估,确保医疗质量安全。

    作者:袁平宗 刊期: 2015年第02期

  • 2型糖尿病肾病患者外周血 IL-17和 IL-22 mRNA 水平

    目的:研究2型糖尿病(T2DM)患者肾脏不同病变时期外周血 IL-17和 IL-22 mRNA 水平,探索糖尿病肾病(DN)患者 IL-17和 IL-22基因表达水平与肾脏病变的关系。方法实验包括60名2型 T2DM 患者和20名正常对照者(NC),其中糖尿病患者包括:无蛋白尿组(NA,n=22)、微量清蛋白尿组(MA,n=18)和糖尿病肾病组(DN,n=20)。采用实时荧光定量 PCR 方法检测 IL-17和 IL-22 mRNA 水平,分析各组外周血 IL-17和 IL-22 mRNA 水平差异。结果DN 组 IL-17和 IL-22 mRNA 水平显著高于 MA 组,NA 组和 NC 组差异有统计学意义(P <0.01);MA,NA 和 NC 三组之间 IL-17和IL-22 mRNA 差异无统计学意义(P >0.05)。结论在2型糖尿病肾病外周血中 IL-17和 IL-22 mRNA 水平升高,IL-17和 IL-22可能在 DN 病变中发挥作用。

    作者:沈红艳;邓演超;徐湛;鹿璐;梁军 刊期: 2015年第02期

  • 吡格列酮对膀胱癌患者机体炎症因子抑制作用的分析

    目的:研究吡格列酮对膀胱癌患者机体炎症因子的抑制作用。方法连续选择2012年2月~2014年2月来湖北医药学院附属东风总医院并诊断为膀胱癌的患者共100例,随机将其分为试验组和对照组各50例,所有患者根据病理分型和分期选择手术、化疗等方案,试验组患者同时接受吡格列酮治疗,15 mg/d×12周;对照组接受常规的治疗方案。对比分析两组患者治疗前后的炎症因子的表达水平,高敏 C 反应蛋白(hs-CRP),肿瘤坏死因子α(TNF-α),白介素(IL-6)以及HOMA-IR 水平,MCP-1和 MIP-1因子的水平的差异性。结果治疗后两组患者的 hs-CRP,TNF-α和 IL-6水平均降低,差异均有统计学意义(P <0.05),且试验组降低的更明显,差 异 均 有 统 计 学意义(P <0.05)。两组患者的 HOMA-IR, MCP-1和 MIP-1水平均降低,差异均有统计学意义(P <0.05),且试验组降低的更明显,差异均有统计学意义(P <0.05)。两组患者不良反应率的比较,差异无统计学意义(P >0.05)。结论吡格列酮可能通过降低膀胱癌患者的炎症因子如 hs-CRP,TNF-α,IL-6,HOMA-IR,MCP-1和 MIP-1水平提高临床效果,改善预后。

    作者:刘毅;张旋;李虎宜;张栩亮;权伟合;吴振启 刊期: 2015年第02期

  • 基于 EP12-A2文件评价尿蛋白定性检测性能

    目的:评价 AX-4030与 Cobas U411尿干化学分析仪在尿蛋白定性检测的分析性能,探讨定性试验性能评价方法。方法参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP12-A2文件推荐方法,对日本京都 AX-4030和罗氏 Cobas U411尿干化学分析仪两检测系统尿蛋白定性检测做偏倚和不精密度分析,比较两检测系统的 C50,C5~C95区间以及不精密度区间。两系统同时检测310份临床尿标本蛋白,统计分析与评价两者结果的一致程度。结果尿干化学分析仪 AX-4030检测系统检测尿蛋白的 C50小于 CobasU411系统,AX-4030系统的 C5~C95区间比 U411系统的窄,AX-4030系统的不精密度曲线较 U411系统曲线陡峭;两套系统检测临床标本尿蛋白结果方法学的比较,一致性百分率为96.8%,阳性一致率为82.7%,阴性一致率为99.6%;95%CI 为94.2%~98.16%,Kappa 值为0.88。结论AX-4030检测系统在尿蛋白 C50临界值处的灵敏度及不精密度较 Cobas U411系统稍优,二者在临床标本检测中的尿蛋白结果一致性程度极强。EP12-A2推荐的定性试验性能评价方法可行、有效。

    作者:龙一飞;林冬玲;陈富;许振杰;陈中华;刘建平;李松;李有强;王丽娜 刊期: 2015年第02期

  • 空肠弯曲杆菌中喹诺酮类抗生素耐药基因检测与耐药性研究

    目的:建立一种检测人粪便样本中,空肠弯曲杆菌含喹诺酮类抗生素耐药基因情况的实时荧光 PCR 方法,并对空肠弯曲杆菌对喹诺酮类抗生素耐药性与耐药基因的相关性进行初步研究。方法根据空肠弯曲杆菌对喹诺酮类抗生素耐药基因 gyrA 和 gyrB 序列设计引物,建立对应的实时荧光 PCR 方法,对79例空肠弯曲杆菌进行检测,基因扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定。以药敏试验结果作为参照标准,对两种检测方法的结果进行统计学分析,计算实时荧光 PCR 的主要技术指标。结果22例(27.8%)空肠弯曲杆菌的实时荧光 PCR 出现特异性扩增曲线,扩增产物电泳结果显示其中13例携带 gyrA 基因(59.1%),7例携带 gyrB 基因(31.8%),2例同时携带 gyrA 和 gyrB 基因(9.1%)。药敏试验显示26例空肠弯曲杆菌为环丙沙星耐药型(32.9%)。统计学分析显示,两种方法的检测结果差异无统计学意义(χ2=1.125,P >0.05),一致性较好。实时荧光 PCR 法的灵敏度和特异度分别为76.9%和96.2%,总符合率为89.9%。结论实时荧光PCR 法能够检测空肠弯曲杆菌耐药基因 gyrA 和 gyrB。耐药基因与耐药型之间有所关联,需要进一步研究。

    作者:陈云鹏;林雯;邓建平 刊期: 2015年第02期

  • 血清凝集、基因测序联合检测群霍乱弧菌的应用

    目的:避免霍乱弧菌检测假阳性,提高检测正确率。方法随机选取2013年1~7月,全国各省市 CDC 送往中国CDC 霍乱初筛阳性菌株14株;用 LB 营养琼脂培养12 h,挑取单菌落进行霍乱弧菌血清凝集,同时水煮模板法提取菌株的DNA。针对弧菌属16SrDNA 序列设计引物,进行弧菌16SrDNA PCR 检测,电泳观察16SrDNA 产物,将16SrDNA 阳性产物送测序公司测序,测序结果在 NCBI 网站上进行 Blast 比对,分析比较血清凝集和 Blast 比对结果。结果共选取14株菌进行实验,血清凝集阳性12株,2株未凝。经弧菌16SrDNA 扩增,电泳观察14株菌均扩增出相应的片段,说明所选菌株均为弧菌属。将14株菌的16SrDNA 阳性产物测序,并将测序结果进行 Blast 比对:2株血清未凝集菌均是哈维氏弧菌;12株血清凝集阳性的菌中,1株是需钠弧菌,其余11株是霍乱弧菌。结论血清凝集和基因测序联合检测群霍乱弧菌,可避免霍乱弧菌检测假阳性,提高检测正确率。

    作者:刘万静;王多春;唐倩 刊期: 2015年第02期

  • 化学发光微粒免疫分析技术检测输血四项的性能评估

    目的:验证和评价雅培 ARCHITECT-i2000SR 化学发光分析仪检测乙肝表面抗原(HBsAg)、抗人类免疫缺陷病毒(HIV)、抗梅毒螺旋体(TP)、抗丙型肝炎病毒(HCV)抗体的性能。方法对 ARCHITECT-i2000SR 的精密度、污染携带、参考区间、分析测量范围进行验证;化学发光微粒免疫分析(CMIA)和 ELISA 法检测相同标本,进行方法学比对。结果HBsAg,HIV,TP,HCV 抗体的精密度、携带污染和 HBsAg 参考区间均符合 ARCHITECT-i2000SR 的性能标准;HB-sAg 线性回归:Y =1.102X -6.6786(r=0.9955,P <0.05),HBsAg 线性范围为:1.08~208.6 IU/ml;两种方法检测输血前四项结果的一致性为优。结论ARCHITECT-i2000SR 检测输血前四项的主要性能验证结果与厂家声明的范围基本一致,可用于临床样本的检测。

    作者:刘立民;李钰;蒙雨明;戴盛明 刊期: 2015年第02期

  • 慢性阻塞性肺疾病患者血清胞浆型磷脂酶A2α基因和表达水平检测的临床意义

    目的:探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者检测胞浆型磷脂酶 cPLA2α(cPLA2α)基因表达水平的临床意义。方法选取收治的 COPD 患者90例,按照 COPD 严重程度分级标准分为轻度组30例,中度组35例和重度组25例,以同期90例肺功能正常的健康体检者为对照组。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测受试者血清中 cPLA2α含量,同时用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测同组患者 cPLA2α基因表达水平。结果 COPD 轻度组 cPLA2α的含量为(0.0392±0.0051)pg/ml,表达为(0.68±0.01);中度组含量为(0.049 8±0.0074)pg/ml,表 达为(0.92±0.02);重度组含量为(0.0554±0.0081)pg/ml,表达为(1.35±0.02);而对照组含量为(0.0102±0.0066)pg/ml,表达为(0.11±0.01)。无论是 cPLA2α血清学水平还是基因表达水平,四组之间差异均有统计学意义(F =8.643,12.415,P <0.05)。且 COPD 各组随着病变程度加重 cPLA2α的水平逐渐增加,且三组彼此比较差异有统计学意义(t=3.013~5.817,5.039~11.667,P 均<0.05)。结论血 cPLA2α水平可预示 COPD 严重程度,cPLA2α是诊疗 COPD 及分级的新靶标。

    作者:徐岩;阿依吐兰·买买提;丁剑冰 刊期: 2015年第02期

现代检验医学杂志

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主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院