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肝细胞癌差异表达基因P-02反义寡核苷酸抑瘤作用的体外实验研究

韩娜;段芳龄;朱武凌;高天慧;陈香宇;王晓;李蔚;颜伏归;李文晰

关键词:癌, 肝细胞/遗传学, 肝肿瘤, 实验性/遗传学, 基因表达, 寡核苷酸类, 反义
摘要:目的:通过全硫代修饰的肝细胞癌差异表达基因P-02反义寡核苷酸对人肝癌细胞系SMMC-7721增殖活性的影响,探讨P-02基因的功能.方法:以脂质体为载体,采用MTT法、RT-PCR、流式细胞术检测P-02 AS-ODN(antisense oligonucleotide)对SMMC-7721细胞生长、增殖、细胞周期的作用.结果:脂质体介导的P-02基因反义寡核苷酸可抑制SMMC-7721增殖,RT-PCR结果显示P-02基因的扩增条带明显减弱,流式细胞术显示G1期细胞增多,M期及S期细胞数减少.结论:脂质体介导的AS-ODN可抑制SMMC-7721的恶性表型,证实P-02基因在肝细胞癌的发生发展中可能有重要作用.
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    目的:探讨<30岁青年乳腺癌的PCNA和p53蛋白表达的意义及与临床各指标和预后的关系.方法:采用免疫组化S-P法对66例<30岁的青年乳腺癌进行检测,用有关统计学方法结合随访资料进行分析.结果:<30岁青年乳腺癌的PCNA阳性率为63.6%,p53表达率为43.9%;PCNA蛋白表达阳性与月经初朝年龄(P=0.028)、临床分期(P=0.016)、核组织分级(P<0.05)、腋淋巴结转移(P<0.000 1)、雌孕激素受体(P<0.01)及预后(P<0.01)有密切关系;p53蛋白表达仅与核组织分级(P=0.038)、腋淋巴结转移(P=0.018)及预后(P<0.01)有关.结论:1)PCNA可以反映青年乳腺癌细胞的增殖活性,并与预后有关.2)p53为预测青年乳腺癌预后的一个有价值的客观标记物.3)<30岁青年乳腺癌细胞增殖活性强、预后差,其细胞增殖活性可能与激素水平有关.

    作者:耿翠芝;王小玲;王桂兰;杨会钗;林梅;吴祥德 刊期: 2003年第10期

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    作者:南克俊;李春丽;魏永长;隋晨光;景昭;秦海霞;赵利军 刊期: 2003年第10期

  • 多发性肝占位的鉴别诊断--附肝脓肿2例报道

    影像学证实存在多发性肝占位的患者,临床上往往首先考虑为原发或转移性肝癌,有时甚至接受抗肿瘤综合治疗,给患者身心健康及经济造成损失.2002年8月-2002年11月,2例多发性肝占位中年患者经肿瘤科等科室会诊终确诊为肝脓肿并治愈,报道分析如下.

    作者:邹征云;刘宝瑞 刊期: 2003年第10期

  • 小肠平滑肌肿瘤的诊断--附33例分析

    小肠平滑肌肿瘤属临床少见病,因症状不典型且缺乏特异性的检查手段,往往延误诊断和治疗.回顾我院1990年1月-2000年12月收治的 33 例患者,总结分析其临床特点及诊断,总结报道如下.

    作者:李绍琼 刊期: 2003年第10期

  • p16及PCNA在膀胱移行细胞癌中的表达及其相关性

    目的:探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)中 p16 蛋白及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达与 BTCC 病理分级、临床分期、预后的关系及其二者的关系.方法:采用免疫组织化学 S-P 法检测 p16 蛋白及 PCNA 在 59 例 BTCC 标本中的表达.结果:1) p16 蛋白在 BTCC 中的阳性率为 52.54%,PCNA 阳性率为 66.10%.2) p16 蛋白阳性表达随膀胱肿瘤病理分级的升高而降低,P<0.05,而 PCNA 阳性率随肿瘤分级升高而上升,P<0.05.3)p16蛋白阳性表达随膀胱肿瘤的临床分期升高而降低,P<0.05,PCNA 随临床分期升高而升高,P<0.05.4)p16蛋白及PCNA在未复发组与复发组中的阳性表达差异有显著意义,P<0.05.5)在未复发组,p16蛋白表达与PCNA的表达呈负相关关系,r=-0.430 8,P<0.05.结论:p16 蛋白、PCNA 的检测与 BTCC 患者的预后有关,二者同时检测可以作为膀胱肿瘤恶性程度判断及预后估计的参考指标.p16 蛋白低表达与 PCNA 高表达者肿瘤易于复发.

    作者:李永生;陈坚;莫曾南;陈仕平 刊期: 2003年第10期

  • 人脑胶质瘤中PTEN基因突变和蛋白表达的研究

    目的:研究人脑胶质瘤中PTEN蛋白表达和PTEN基因突变情况.方法:应用免疫组化技术和聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术,检测102例人脑胶质瘤中PTEN蛋白表达及PTEN基因突变.结果:PTEN阳性染色主要定位于细胞质中.102例中PTEN蛋白表达55/102(53.9%),高分化组(Ⅰ级和Ⅱ级)32/39(82.1%)与低分化组(Ⅲ级和Ⅳ级)23/63(36.5%)之间差异有极显著意义,P<0.01;42例胶质母细胞瘤中共有11例发生PTEN基因突变,突变率为26%(11/42);60例其他胶质瘤中仅1例发生突变,胶质母细胞瘤突变率显著高于其他胶质瘤,χ2=11.62,P<0.01.结论:PTEN基因突变或缺失在人脑胶质瘤的发生发展中起重要作用,与肿瘤恶性分化程度密切相关.

    作者:陈卫国;陈新军;袁先厚;文志华;曹长军 刊期: 2003年第10期

  • 食管癌相关基因NGAL四种融合表达载体的构建及其蛋白表达产物的比较分析

    目的:筛选出能高效表达且可溶性好的NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)融合表达载体.方法:将NGAL cDNA全长片段分别定向克隆到表达载体的BamHI+EcoRI位点,构建NGAL基因的4种融合表达载体,然后分别转化大肠杆菌并进行IPTG诱导小样表达,监测各NGAL融合蛋白在不同诱导时间内的表达量及其可溶性等.选择pHis-NGAL 和 pDsbA2.0-NGAL进行IPTG诱导大样表达,通过SDS-PAGE比较表达产物的量与可溶性.结果:成功构建出4种NGAL融合表达载体.经IPTG诱导小样表达后,4种载体的表达水平及其可溶性明显不同,DsbA2.0-NGAL、His-NGAL和 Trx-NGAL融合蛋白表达量分别占菌体总蛋白的33.3%、32.3%、28.7%,而它们的可溶性部分分别占各自总NGAL融合蛋白的96.8%、95.3%和63.0%.对pDsbA2.0-NGAL和pHis-NGAL进行IPTG诱导大样表达后发现,DsbA2.0-NGAL融合蛋白的表达量与可溶性较好.结论:pDsbA2.0-NGAL表达载体是能高效表达且可溶性好的NGAL融合蛋白表达载体.

    作者:王朝阳;许丽艳;荣举;韩溟;吉坤美;沈忠英;李恩民 刊期: 2003年第10期

  • 局部晚期和晚期非小细胞肺癌的治疗新观点--来自第39届ASCO年会的报告

    局部晚期和晚期非小细胞肺癌一直是治疗上的难点.对2003年ASCO大会有关这一方面的进展作概要性的综述.

    作者:吴一龙 刊期: 2003年第10期

  • 血管内皮生长因子表达水平与非小细胞肺癌的预后

    目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在非小细胞肺癌(NSCLC)表达水平及与预后的关系.方法:应用 SABC 免疫组化方法检测 58 例 NSCLC 中 VEGF 表达情况,并结合随访资料进行分析.结果:NSCLC 中 VEGF 阳性率为 75.86%,明显高于癌旁正常肺组织(20.00%),P<0.01.NSCLC 中 VEGF 表达与组织分化程度、临床分期及淋巴结转移情况显著相关.VEGF 表达阴性组 1、3、5 年生存率分别为 92.8%、85.7%、71.4%,弱阳性组分别为 87.5%、62.5%、41.6%,强阳性组分别为 85.0%、35.0%、15.0%,经 Log-Rank 时序检验,差异有显著意义.COX 回归多因素分析提示,VEGF 表达水平是死亡的危险因素,即表达水平越高,预后越差.结论:VEGF 可作为临床上预测 NSCLC 预后的可靠指标,是影响预后的独立因素.

    作者:崔言刚;王潍博 刊期: 2003年第10期

  • 乳腺癌BRCA1基因突变及其蛋白表达研究

    目的:探讨散发性乳腺癌的BRCA1基因突变及其蛋白表达与临床病理因素的关系.方法:收集乳腺癌患者外周血102份、新鲜肿瘤组织30份,分别采用PCR-SSCP、DHPLC和基因测序对BRCA1基因第2、8-1、8-2和20外显子进行突变检测;对104例肿瘤组织切片进行免疫组化染色标记BRCA1蛋白表达,分析免疫组化结果与临床资料的关系.结果:分别在外显子8-1和8-2的28 821和28 978位点上发现3例碱基缺失和置换现象.BRCA1蛋白在乳腺癌组织中表达下降,且与患者生存状态有关.结论:在中国散发性乳腺癌患者中BRCA1基因外显子2、8和20的突变率较低(2.3%),可以认为在普通中国人群中乳腺癌的发生与该部分碱基序列突变的关系不大,但BRCA1蛋白低表达乳腺癌患者复发的危险性增大.

    作者:周守君;王亚平;李桂梅;李祥周;张军妮;李金田 刊期: 2003年第10期

  • 畸胎瘤螺旋CT诊断与病理对照分析

    收集经螺旋CT诊断及手术病理证实的畸胎瘤30例,均行螺旋CT平扫+增强扫描和病理组织学检查,并将螺旋CT表现与病理表现进行对照分析.结果良性囊性畸胎瘤28例,恶性畸胎瘤2例.CT扫描对于瘤内的脂肪、钙化以及类似牙齿和骨骼状组织等多种成分均可清楚显示,对于灶周的转移病灶亦可较全面的显示.螺旋CT表现与手术病理表现基本一致.

    作者:曾庆勇;何志辉;蓝博文;杨清绪 刊期: 2003年第10期

  • 双吻合器在直肠癌低位前切除术中的应用及并发症分析

    分析1999年4月以来采用双吻合器技术治疗的中低位直肠癌30例的疗效,肿瘤复发及并发症的发生与预防情况.30例中近期均有不同程度的腹泻,无远期排便障碍;术后1例局部复发;吻合口瘘1例;吻合口狭窄1例;炎性肉芽肿1例.双吻合器技术的应用可以扩大Dixon手术适应证的范围,但必须严格掌握根治原则及无瘤原则.

    作者:孙民昌;侯新丽;燕归如;刘小明;赵立志 刊期: 2003年第10期

  • nm23H1和E-Cadherin在人非小细胞肺癌中的表达及临床意义

    目的:研究nm23H1和E-Cadherin蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)的表达及临床意义.方法:采用S-P免疫组化法测定NSCLC中nm23H1和E-Cadherin蛋白的表达.结果:有淋巴结转移的NSCLC组织中,nm23H1和E-Cadherin蛋白阳性表达率分别为29.4%(5/17)和11.8%(2/17),无淋巴结转移的则分别为82.4%(14/17)和42.9%(9/17),差异有极显著意义,P<0.01或显著意义,P<0.05.nm23H1和E-Cadherin表达与NSCLC的分期及肿瘤分化程度有关,P<0.05;基因蛋白表达在NSCLC组织中呈正相关,P<0.01.结论:nm23H1和 E-Cadherin蛋白可作为判断NSCLC转移潜能及预后的重要指标.

    作者:王涛;阎景铁;张毅;王善政 刊期: 2003年第10期

  • 三氧化二砷对人膀胱癌细胞BIU-87作用的体外研究

    目的:观察三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对人膀胱癌细胞株BIU-87的作用,并探讨其作用机制.方法:采用四氮唑蓝(MTT)法检测As2O3不同浓度、不同时间对BIU-87细胞的生长抑制率,同时流式细胞仪检测不同浓度As2O3作用72 h后细胞中与凋亡有关蛋白Fas、Bcl-2的表达.结果:As2O3可有效抑制BIU-87细胞的生长,具有浓度、时间依赖性特点.Fas、Bcl-2的表达分别与浓度增加呈正、负相关,P<0.05,且二者随浓度增高呈负相关,P<0.05.结论:As2O3可有效抑制膀胱癌细胞生长,其作用机制与凋亡有关.

    作者:廖湘鲁;王兴武;国前;魏玲;宋现让;薛兴奎;陈正勤 刊期: 2003年第10期

  • 高龄胃癌患者临床病理学特点分析

    分析高龄胃癌的临床、病理特点.对所有病例按年龄分组≥70岁,60~69岁,31~59岁,≤30岁,高龄胃癌与各组之间对照观察.结果提示高龄胃癌发病率男性高于女性,组织学类型以高分化腺癌为主,占64.7%.Ⅲ、Ⅳ期病例占86.3%.手术切除率为62.7%.3年、5年生存率分别为20.9%和13.9%.临床分期较晚是高龄胃癌预后差的重要原因.X线双重造影及纤维胃镜是高龄胃癌早期诊断的重要方法.尽可能手术切除以提高生存率.

    作者:苗瑞政;姜言明;张敏 刊期: 2003年第10期

  • 人非小细胞肺癌组织p63和p73的表达及意义

    目的:探讨p53家族新成员p63和p73在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义.方法:利用免疫组化S-P法对60例NSCLC和7例正常肺组织检测p63和p73基因的蛋白表达.结果:在NSCLC中,p63和p73蛋白表达的阳性率分别为80.0%(48/60)、73.3%(44/60);与正常肺组织相比,p63和p73蛋白阳性表达的差异均有显著意义,P<0.05.p63蛋白表达与肺癌组织学类型(P=0.000 3)和淋巴结转移有关,P=0.028;而与分化程度和临床分期无关,P>0.05.p73蛋白表达与肺癌组织学类型、淋巴结转移、分化程度和临床分期均无关,P>0.05.在肺癌中,p63蛋白和p73蛋白表达之间呈显著正相关,P=0.000 1.结论:p63和p73高水平的表达协同促进肺癌的形成,p63是肺鳞癌恶性进展的一个标志物.

    作者:陈洪雷;陈福春;王敏;陶鸿潮;张玉霞;叶波;刘铭球 刊期: 2003年第10期

  • 艾迪注射液联合化疗治疗中晚期恶性肿瘤疗效观察

    为了比较艾迪注射液联合化疗与单纯化疗治疗中晚期恶性肿瘤的疗效与毒副反应,将82例中晚期肿瘤患者随机分为联合化疗组和单纯化疗组.结果联合组有效率和KPS评分改善率均高于单纯化疗组,P值分别为>0.05、<0.05,而疾病进展率及消化道骨髓毒性发生率均低于单纯化疗组,P值均<0.05.初步研究结提示,艾迪注射液配合化疗治疗恶性肿瘤效果显著,同时降低化疗毒副反应,作用肯定,值得临床使用.

    作者:刘文峰;杨晓君 刊期: 2003年第10期

  • 急性白血病各亚型共刺激分子CD80和CD137L的表达特点

    目的:研究急性白血病(AL)各亚型肿瘤细胞表面共刺激分子CD80(B7.1)和CD137L(4-1BBL)的表达特点及其在急性白血病发病学和治疗学中的重要作用.方法:应用流式细胞术(FACS)检测了50例AL患者(其中ANLL M1 8例,M2 11例,M3 7例,M4 3例,M5 10例,M6 2例,ALL 9例)肿瘤细胞表面两种重要的共刺激分子CD80和CD137L的表达.结果:1)所有病例中,CD80和CD137L的表达倾向相同,即单核细胞起源之AL表达阳性率高(40%;50%),粒细胞起源之低(0;0),淋巴细胞起源之属中(11%;11%);CD137L表达稍高于CD80,但差异无显著意义,P>0.05;2)同一病例CD80和CD137L的表达不尽相同,即同一白血病标本中不存在二者同时表达阳性.结论:AL细胞表面CD80和CD137L的共表达是激活T细胞介导的抗肿瘤免疫反应所必需的,其缺陷是急性白血病尤其是急性髓性白血病(AML)细胞逃避宿主免疫监视的重要原因,可能是其发病机理之一.

    作者:马肖容;张王刚;何爱丽;曹星梅;陈银霞;田玮 刊期: 2003年第10期

  • 三氧化二砷对人肝癌细胞作用的研究

    目的:应用体外培养的肝癌细胞株(SMMC-7721)观察砷剂(As2O3)的凋亡诱导作用.方法:采用MTT 法检测As2O3对肝癌细胞增殖的影响,DNA电泳及流式细胞仪检测不同浓度As2O3作用不同时间对肝癌细胞的凋亡诱导作用及细胞周期的影响.结果:As2O3抑制肝癌细胞的增殖并具有剂量-时效关系;As2O3可使肝癌细胞周期改变,与浓度有关,与作用时间未见明显关系;As2O3诱导肝癌细胞发生凋亡,并与浓度、时间有关.结论:As2O3能抑制肝癌细胞增殖,改变肝癌细胞周期,诱导肝癌细胞凋亡.

    作者:苏颖;陈增;邹长棪;林可焴;林华妹 刊期: 2003年第10期

  • 鼻咽癌50例误诊分析

    鼻咽癌早期及临床表现不典型,易被医生忽视而误诊,而鼻咽癌的早期诊断直接影响其疗效及预后.作者对1990-2000年误诊的50例鼻咽癌患者临床资料进行回顾分析,结果报道如下.

    作者:刘维亚 刊期: 2003年第10期

中华肿瘤防治杂志

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主管:齐鲁肿瘤杂志;肿瘤防治杂志;当代肿瘤学杂志

主办:国家卫生和计划生育委员会