目的:通过RNA干扰阻断T24细胞中Eg5基因的表达,研究Eg5基因对 T24细胞增殖和迁移的影响。方法T24细胞株分为3组:干扰组、空白对照组、阴性对照组。化学合成针对Eg5的小干扰RNA,通过脂质体转染至T24细胞中,应用Western blot法检测转染后T24细胞中Eg5蛋白表达,采用台盼蓝拒染实验检测细胞死亡率,用噻唑蓝( MTT)比色分析法和平板克隆形成实验检测细胞增殖抑制率,通过细胞划痕实验检测细胞的迁移能力。结果干扰组Eg5蛋白表达显著低于空白对照组和阴性对照组;干扰组细胞死亡率显著升高,与空白对照组及阴性对照组比较差异有统计学意义( P<0.05);干扰组的克隆形成率下降,与空白对照组和阴性对照组比较差异有统计学意义( P <0.05);MTT结果提示,干扰Eg5基因表达后,T24细胞的增殖率明显下降(P<0.05);划痕实验结果显示干扰组细胞迁移能力受到明显抑制(P<0.05)。结论 Eg5基因在膀胱移行细胞癌起重要作用,干扰Eg5基因能有效抑制T24细胞的增殖与迁移,促进细胞死亡,以Eg5为靶点有望成为膀胱癌基因治疗的新基因靶点。
作者:陈杰勋;于德新;张志强;王铮;谢栋栋;王毅;张涛 刊期: 2014年第06期
目的:研究乳源抗菌-免疫调节融合肽( AIFP)对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响。方法采用MTT法测定AIFP对卵巢癌细胞株SKOV3细胞和原代培养的卵巢癌细胞增殖的影响;流式细胞术测定AIFP对SKOV3细胞和原代卵巢癌细胞凋亡、周期的影响;并用RT-PCR检测 AIFP 对 SKOV3细胞及原代癌细胞凋亡和周期相关基因表达水平的影响,以探讨其可能机制。结果 MTT法显示,AIFP对卵巢癌细胞的增殖具有抑制作用,且具有时间和剂量依赖性,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。流式细胞术检测结果显示,AIFP诱导卵巢癌细胞的凋亡,具有剂量和时间依赖性,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。 RT-PCR结果表明,AIFP可以影响细胞凋亡和细胞周期相关基因(Akt、CDC25C 和cyclinB1)的表达。结论 AIFP 上调卵巢癌细胞凋亡和周期相关基因 Akt、CDC25C和cyclinB1的表达,对卵巢癌细胞株SKOV3具有抑制增殖和促进凋亡的作用。
作者:唐宜桂;李小勤;刘琛;雷婷;秦宜德 刊期: 2014年第06期
目的:研究缬沙坦对人冠脉内皮细胞( HCAEC)氧化应激过程中gp91 Phox的影响。方法对照组:体外贴壁培养HCAEC,不进行其他干预;实验组:相同培养条件下加入缬沙坦(10μmol/L)培养24 h。应用Western blot法和细胞免疫荧光法测定两组细胞中gp91 Phox的水平,对两组结果进行统计分析并比较。结果实验组HCAEC中gp91 Phox的水平明显低于对照组,差异有统计学意义( P<0.01)。结论缬沙坦可以显著减少HCAEC中尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亚基gp91Phox的表达,从而降低氧化应激水平。
作者:王成;韩卫星;吴继军;刘超;刘晓颖 刊期: 2014年第06期
目的:探讨高脂血症( HL)影响小鼠睾丸睾酮合成机制及辛伐他汀( SIMV)的干预作用。方法18只C57BL/6J雄性小鼠随机均分为3组:HL 组、SIMV 组和正常对照组( CTRL组);4个月后测血脂、体重;3β-HSD免疫组化法检测睾丸间质细胞; RT-PCR法和Western blot法检测类固醇激素合成急性调节蛋白( StAR)与细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)的表达。结果① HL组和SIMV组体重、总胆固醇( TC )和低密度脂蛋白胆固醇( LDL-C )明显高于CTRL组( P<0.05);SIMV组体重和TC比HL组显著下降(P<0.05),LDL-C无明显变化。② HL组StAR和P450scc的mRNA与蛋白表达较 CTRL 组显著下调(P <0.05,P <0.01);SIMV组较HL组则两者表达均升高(P<0.01)。③3β-HSD免疫组化染色显示各组小鼠睾丸间质细胞数差异无统计学意义。结论 SIMV可以改善HL引起的睾丸间质细胞合成睾酮能力下调。
作者:王慧君;吕正梅;戎玉罗;王琦;叶宁宁;程媛媛;张凯 刊期: 2014年第06期
目的:观察转染 CDX2基因后人胃癌细胞系 BGC-823基因表达谱的变化。方法通过脂质体介导法转染pEGFP-C1-CDX2和空载体pEGFP-C1至人胃癌细胞系BGC-823中,经G418筛选后获得稳定转染细胞,逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR)检测CDX2基因的表达。应用人类表达谱芯片Affymetrix 2.0对两组细胞同时进行基因芯片分析,筛选出差异表达基因(以表达差异≥2.0或≤0.5倍为限),选择部分差异表达基因进行实时荧光定量逆转录聚合酶链反应( Real-time PCR)验证。结果基因芯片筛选出CDX2转染人胃癌细胞BGC-823差异表达基因599个,其中上调基因275个,下调基因324个,这些基因主要涉及细胞增殖、分化、凋亡、信号转导、蛋白酶活性、肿瘤侵袭和转移等方面;Real-time PCR 检测部分差异表达基因 DKK3、FOXP1、TWIST1、GATA6、RUNX3和BMP2,其结果与芯片结果一致,确定芯片结果可靠。结论应用人类表达谱芯片成功筛选出CDX2转染人胃癌细胞BGC-823后差异表达基因,为深入探讨CDX2在胃癌中的作用机制提供线索。
作者:陈晓双;秦蓉;储婧;陈宗科 刊期: 2014年第06期
目的:观察基质金属蛋白酶1( MMP-1)及其抑制剂(TIMP-1)在白藜芦醇治疗佐剂性关节炎(AA)的滑膜组织和关节软骨中的表达,探讨MMP-1及TIMP-1的异常表达是否参与AA的发病机制。方法60只SD大鼠随机分为2组:正常组(10只),模型组(50只)。模型组弗氏完全佐剂注射诱导关节炎12 d后,在其足趾出现继发性免疫炎症反应时,又随机分成4组:模型对照组、白藜芦醇低剂量组(5 mg/kg)、白藜芦醇高剂量组(15 mg/kg)、阳性对照雷公藤多苷组(100 mg/kg)。大鼠每天均灌胃给予溶媒或药物,持续16 d后处死大鼠;免疫组化法检测滑膜组织MMP-1、TIMP-1表达;滑膜组织匀浆,Western blot法检测MMP-1、TIMP-1蛋白含量。结果白藜芦醇能明显抑制模型组大鼠病理损害程度,模型组滑膜组织MMP-1、TIMP-1高表达,白藜芦醇治疗组能抑制MMP-1、TIMP-1的高表达,在抗关节炎的作用上有相关性。结论白藜芦醇具有抑制AA大鼠的炎症作用,防止关节退变的病理变化,其机制与调节大鼠的基质金属蛋白酶在滑膜组织和关节软骨的表达有关。
作者:安梅;孙和炎;卢锦森;马中飞;纵何香;叶桂萍;郭利梅;何舒宁;陈晓宇 刊期: 2014年第06期
目的:研究非诺贝特改善非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠的胰岛素抵抗是否与内质网应激( ERS)有关。方法采用高热量高胆固醇饮食( HCD )建立 NAFLD小鼠模型,非诺贝特40 mg/( kg·d)灌胃治疗2周,葡萄糖耐量试验( GTT)和胰岛素耐量试验( ITT)分析胰岛素抵抗的改善作用,检测血清血脂和丙氨酸氨基转移酶( ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)指标,HE及油红O染色观察肝脏组织的病理学变化,Real-time PCR和Western blot法检测过氧化物酶体增殖物激活受体α( PPARα)、ERS标志物葡萄糖调节蛋白78( GRP78)和转录因子 GADD153( CHOP )的表达。结果与正常饮食( SCD)组相比,HCD组小鼠胰岛素抵抗明显,血清三酰甘油( TG)、总胆固醇( TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)显著升高(P<0.01,P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显降低(P<0.01),肝细胞内有大小不等的脂滴形成,可见气球样变的肝细胞及炎性细胞浸润;PPARα、GRP78 mRNA 及蛋白表达显著降低, CHOP mRNA及蛋白表达显著升高。与 HCD 组相比, HCD +非诺贝特( HCF)组小鼠血清TG明显降低( P<0.05),肝细胞脂滴含量、变性肝细胞及浸润的炎细胞明显减少, PPARα、GRP78 mRNA及蛋白表达明显升高,CHOP mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论非诺贝特有明显的改善NAFLD小鼠胰岛素抵抗、降低TG的作用,这可能与激活PPARα及减轻ERS有关。
作者:沈馨茹;鲁云霞;章秋 刊期: 2014年第06期
目的:探讨天麻素预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤( MIRI)作用的可能机制。方法健康SD大鼠60只,随机分为假手术组,MIRI组,天麻素低、中、高剂量组(0.1、0.2、0.4 g/kg),采用结扎大鼠左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min的方法制备MIRI模型,分别测定血清及心肌组织中肿瘤坏死因子-α( TNF-α)和白介素-6( IL-6)的变化以及心肌组织中肌浆网Ca2+-ATP酶( SERCA)的变化。结果0.2、0.4 g/kg 天麻素预处理后,血清及心肌组织中TNF-α和IL-6的含量均降低(P<0.05),心肌组织中SERCA的含量均升高( P<0.01)。结论天麻素预处理减轻大鼠MIRI的机制可能与减少炎症因子TNF-α和IL-6的释放以及增加SERCA含量有关。
作者:位凯;王飞;张瑾;李珍;沈兵;王烈成;孔德虎;胡金兰 刊期: 2014年第06期
目的:研究牛蒡子苷元(ATG)对刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠脾细胞增殖和相关细胞因子分泌的影响及其可能的分子机制。方法 MTT法检测ATG对小鼠脾细胞的毒性;H3-胸腺嘧啶核苷掺入法检测ATG对小鼠脾细胞的增殖抑制水平;ELISA法检测细胞因子干扰素γ( IFN-γ)和白介素2(IL-2)的分泌水平;Western blot法检测mTOR通路相关蛋白(mTOR、P70S6K、Akt、AMPK、Raptor)的表达及磷酸化水平。结果 ATG对小鼠脾细胞无显著毒性;ATG显著抑制了ConA诱导的小鼠脾细胞增殖;ATG显著减少了小鼠脾细胞上清液中淋巴因子IFN-γ和IL-2的含量,且具有浓度依赖性;ATG显著降低了mTOR和P70S6K的磷酸化水平,增加了上游AMPK和Raptor的磷酸化,而Akt的磷酸化水平没有明显变化。结论 ATG可显著抑制ConA诱导的小鼠脾细胞增殖并减少 IFN-γ、IL-2的分泌,该作用可能与其增强AMPK、Raptor 的磷酸化,抑制 mTOR、P70S6K 的磷酸化有关。
作者:陆明;姬飞虹;张林杰 刊期: 2014年第06期
目的:探讨金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)对巨噬细胞自噬的影响,并研究其在巨噬细胞吞噬病原微生物中的作用。方法以小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7为研究对象,以磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)为干预药物,空白处理作为对照组,金葡菌感染作为实验组,3-MA干预作为抑制组。金葡菌感染细胞后,Western blot检测自噬蛋白Beclin1、LC3以及吞噬相关蛋白Rac1的表达,激光共聚焦显微镜观察自噬、吞噬现象。结果金葡菌感染RAW264.71 h后,实验组LC3Ⅱ和PI3K蛋白表达强( P<0.05),抑制组Beclin1和LC3Ⅱ表达显著降低(P<0.05),自噬颗粒聚集显著减少( P<0.05), Rac1表达显著降低( P<0.05),同时,RAW264.7吞噬金葡菌数目显著减少(P<0.05)。结论金葡菌诱导的自噬增强了巨噬细胞吞噬能力,自噬抑制剂3-MA抑制PI3K活性的同时,减弱了巨噬细胞自噬吞噬金葡菌的能力。
作者:吕允相;吴惠梅;方磊;刘荣玉 刊期: 2014年第06期
养,每天取1块培养板用CCK-8检测其吸光度值( OD)。结果 CD45阴性表达,CD29、CD90、CD44阳性表达,3种完全培养基培养的BMSCs的表面标志物在前2代时差别较大,但在P3,P4时差别已较少,P4时均可以获得较纯的BMSCs;细胞周期结果显示,在同一时间点,G0/G1期:A、B、C 3组随着FBS浓度的增加,G0/G1期降低且差异无统计学意义;G2/M期:在培养后的24 h,A、B、C 3组差异有统计学意义( P<0.05,F=12.412),但随着时间的延长,差异消失;S期,3组均无差别;S+G2/M期随FBS浓度的增加而增高。细胞活力结果显示,在24 h时A、B、C 3组的OD值依次增大,差异有统计学意义(P<0.05,F=5.002),随时间的延长3组之间无明显差异。结论这3种培养基在 P4能获得较纯的BMSCs;细胞周期及活力结果显示,3种完全培养基均能促进BMSCs的增长,3组之间不存在差异。体积分数为0.10的FBS已满足BMSCs的分离和扩增,要想在短期内获得较纯的BMSCs,原代培养使用体积分数为0.15,传代用0.10 FBS的完全培养基。
作者:陈小丹;何家才 刊期: 2014年第06期
目的:选用人巨细胞病毒( HCMV)抗原性强且亲水性较高片段构建融合抗原表达质粒,诱导其表达,纯化目的蛋白;并初步鉴定其免疫反应性。方法通过Protean软件分析了HCMV UL32、UL44、UL83序列,设计合理引物;各基因片段用Overlap方法连接,并引入BglⅡ、BamHⅠ酶切位点,使之可通过酶切与质粒pQE-80L连接。重组质粒转化入感受态BL21(DE3)菌株,经PCR、酶切鉴定目的基因后再诱导、表达、纯化,获得目的蛋白,采用Western blot法检测免疫反应性。结果诱导后的重组菌pQE80-L-UL32-UL44-UL83经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE )证实蛋白表达在包涵体。纯化后获得大小约为52 ku的目的蛋白,采用Western blot法检测证实重组嵌合抗原能与HC-MV阳性血清有反应。结论构建了重组嵌合抗原表达质粒,并诱导、表达、纯化获得目的蛋白。 Western blot法鉴定嵌合抗原是HCMV特异性抗原且有免疫反应性。
作者:曾宪聪;汪小五;陈伟;王林定 刊期: 2014年第06期
目的:观察远端缺血预处理( RIPC)对严重失血性休克大鼠在体心脏功能的保护作用及其机制。方法32只雄性SD大鼠,体重300~350 g,随机分成4组:对照组( C组)、失血性休克组( S 组)、RIPC组( R组)、RIPC +线粒体KATP通道阻滞剂组( B组),每组8只。采用经大鼠颈动脉60 min内放血占总血容量50%,观察30 min后经颈静脉30 min回输释放的血液建立严重失血性休克和复苏模型。在放血前双侧后肢以止血带捆绑阻断血流5 min,再灌注5 min,反复4个循环形成RIPC。 B组在RIPC前15 min经颈静脉注入线粒体KATP通道阻滞剂(5-羟基葵酸盐)10 mg/kg。 C组所有手术操作同S组,但不放血。持续监测心电图、平均动脉压( MAP)到血液回输后2 h,在放血前、放血后、输血前、输血后即刻、输血后1、2 h用彩色超声仪测量心输出量( CO)、左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、心肌做功指数(MPI)、左室后壁厚度(LVPWD)。结果在失血和休克阶段,与 C 组比较, S 组、B 组和 R 组 MAP、CO、LVEF、LVFS均降低(P<0.01),MPI、 LVPWD升高(P<0.01);血液回输后,与 C 组比较, R 组 MAP、CO、LVEF、LVFS、MPI、LVPWD差异无统计学意义;与R组比较,S组和B组MAP、CO、LVEF、LVFS明显降低( P<0.01), MPI、LVPWD明显升高(P<0.01);S组和B组各心脏功能指标差异无统计学意义。结论 RIPC明显保护严重失血性休克大鼠在体心脏功能,其保护作用可能与线粒体KATP通道激活有关。
作者:胡宪文;蒋玲玲;刘晓芬;吴云;李云;张野 刊期: 2014年第06期
目的:探讨精神分裂症患者快感缺失与童年创伤经历的关系。方法采用中文版修订社会快感缺失量表(RSAS-C)、中文版修订躯体快感缺失量表(RPAS-C)和童年创伤问卷( CTQ)对198例精神分裂症患者和271例正常健康者进行评估,分析快感缺失与童年创伤间的关系。结果患者组RSAS-C评分(13.32±6.12)、RPAS-C评分(19.04±8.53)、CTQ总分(47.63±13.49)及其各因子分均显著高于正常组(分别为10.40±5.05,16.80±7.89,38.82±10.05),差异有统计学意义( P<0.05);患者组RSAS-C评分、RPAS-C评分与阳性与阴性症状量表( PANSS)总分及阴性症状分均呈正相关(rs =0.266~0.439,P<0.01);患者组RSAS-C评分(rs =0.419,P<0.01)和RPAS-C评分(rs =0.322,P<0.01)与CTQ总分呈正相关,控制PANSS总分后,快感缺失评分与童年创伤评分间的相关性仍存在。结论精神分裂症患者快感缺失程度较高,与童年创伤经历之间存在关联,提示早年的创伤经历可能会影响个体对躯体及社会交往快乐的体验能力。
作者:马玉婷;董毅;汪凯;赵菁;王龙;刘勇;张玉;李慧;耿峰;陈学全 刊期: 2014年第06期
目的:研究经枕外侧小脑绒球下入路对中血管神经复合体的暴露,为临床面肌痉挛血管减压术提供解剖学参考。方法湿尸头上模拟枕外侧小脑绒球下入路显微手术,选择乳突切迹后下方与后颅凹外下方交界区开窗,并沿乙状窦内下侧视野显微暴露并观察;术毕将骨窗及术野上移,行枕下乙状窦后入路下视野暴露并显微观察。结果①经枕外侧小脑绒球下入路可显露中后部桥小脑角区,充分暴露面听神经;经舌咽神经与小脑绒球间隙可直视中血管神经复合体相关结构,手术减压有效、安全、彻底;②枕下乙状窦后入路暴露中血管神经复合体手术创伤大,暴露角度受限,术中操作困难。结论经枕外侧小脑绒球下入路行面肌痉挛血管减压术视野暴露充分,手术操作安全,减压效果彻底,值得临床推广。
作者:程宏伟;单明;冯春国;李志范;肖瑾;罗靖;张科 刊期: 2014年第06期
目的:检测热休克蛋白75( Mortalin)在肝细胞癌中的表达,探讨其与血管生成和上皮间质转化( EMT)的关系。方法收集100例原发性肝癌( HCC)患者的癌组织和癌旁组织及10例正常肝组织,采用免疫组织化学染色、Western blot和qPCR检测Mortalin的表达,分析Mortalin表达与肝癌临床病理特征之间的关系。同时分析100例HCC患者癌组织中Mortalin、波形蛋白( Vimentin)和微血管密度( MVD)的表达情况,判断Mortalin的表达与EMT、肿瘤血管生成之间的关系。结果免疫组织化学显示Mortalin主要表达在细胞质中。肝癌组织中高表达Mortalin的比率是77%,显著高于癌旁组织的19%和正常组织的10%(χ2=67.388,16.669;P<0.01)。 Mortalin的高表达与肝癌Edmondson分级、TNM分期、血管侵犯和淋巴结转移有关(P<0.05)。 Western blot和qPCR检测结果显示肝癌组织中Mortalin相对含量明显高于癌旁和正常组织( P<0.05)。免疫组织化学染色检查显示,肝癌组织中Mortalin的表达与Vimentin的表达存在正相关(r=0.235, P<0.05),而高表达Mortalin的肝癌组织比低表达的有更高的MVD的趋势,但差异无统计学意义( t=1.630, P>0.05)。结论 Mortalin不能促进肝癌血管形成,但可能通过诱导肝癌组织的 EMT而参与肝癌的侵袭和转移。
作者:陈静;李建生;刘文斌;荚卫东;许戈良;马金良;余继海;葛勇胜 刊期: 2014年第06期
目的:探讨中青年毒性弥漫性甲状腺肿(甲亢)患者血清Ⅰ型前胶原氨基端前肽( PINP)及Ⅰ型胶原羧基端肽(β-CTx)的变化及其与甲状腺激素水平和骨密度( BMD)的关系。方法选择中青年甲亢患者150例为甲亢组,60例年龄匹配的正常者为对照组。使用双能 X 线骨密度仪( DXA)分别测定受试者前臂(桡骨全部)、腰椎( L2~4)及股骨颈BMD;用ELISA法测定受试者PINP及β-CTx。用化学发光法测定甲亢患者的游离三碘甲腺原氨酸( FT3)、游离甲状腺激素(FT4)及促甲状腺激素(TSH)。用自动生化分析仪测定钙( Ca)、磷( P)。根据国际骨质疏松基金会( IOF)对伴有影响骨代谢疾病的中青年骨质疏松诊断定义,按BMD T值将甲亢组分为骨量正常组( ON组)、骨量减少组( OD组)及骨质疏松组( OP组),比较3组间上述各项指标的差异。结果与对照组比较,甲亢组PINP、β-CTx、Ca显著升高( P<0.01),前臂、L2~4及股骨颈BMD均降低(P<0.05)。甲亢患者中,OP组与 ON 组比较, PINP、β-CTx、FT3、FT4明显升高,TSH明显降低( P<0.01), OP组与OD组比较, PINP、β-CTx、FT3及TSH差异有统计学意义( P<0.01),而OD组与ON组比较, PINP、β-CTx、TSH 差异有统计学意义( P <0.01)。相关分析显示,中青年甲亢患者PINP、β-CTx分别与FT3、FT4呈正相关( P<0.05),与TSH及前臂BMD呈负相关(P<0.05)。结论中青年甲亢患者骨转换加快,破骨细胞功能增强伴成骨细胞活性增加。 PINP及β-CTx联合BMD检测可更准确的反映中青年甲亢患者骨代谢情况。
作者:陈玮;徐将;陈超;祝捷;王计艳;吴玉洁;董林;杨光伟;邢学农 刊期: 2014年第06期
目的:探讨冠状动脉三维可视化系统(V1.02)在冠心病介入诊疗中的应用效果。方法收集冠状动脉慢性完全闭塞病变( CTO)患者121例,根据是否使用三维可视化系统进行经皮冠状动脉介入治疗( PCI)分组,60例为对照组,单独采用冠状动脉介入影像定量分析系统辅助PCI。61例为观察组,结合三维可视化系统( V1.02)辅助PCI。分析比较两组患者介入术成功率,严重并发症发生情况和对医患X线辐射暴露时间的影响。结果观察组和对照组介入成功率分别为88.5%(54/61)和73.3%(44/60),差异有统计学意义(P<0.05);介入并发症发生率分别为3.3%(2/61)和16.7%(10/60),差异有统计学意义(P<0.05);手术时间分别为(75.9±9.2) min和(101.5±15.8) min,差异有统计学意义( P<0.01)。结论三维可视化系统( V1.02)应用于CTO介入诊疗中,可以明显提高手术成功率,减少冠状动脉痉挛、血管夹层及血管穿孔破裂等并发症,缩短医患X线辐射暴露时间,值得在临床上进一步推广。
作者:何云;晋军;成小凤;胡建波;何永铭 刊期: 2014年第06期
目的:观察辅助性T细胞17(Th17)和调节性T淋巴细胞( Treg)在稳定期慢性阻塞性肺疾病( COPD)患者外周血中的表达及平衡关系变化,探讨其在 COPD发病机制的作用。方法选取22例肺功能正常不吸烟者( A组)、22例肺功能正常吸烟者( B组)以及36例稳定期COPD患者( C组)作为研究对象。运用流式细胞术检测外周血提取外周单个核细胞( PBMC)中的 Th17和 Treg的表达及平衡关系的变化。结果 C组外周血Th17的表达率明显高于 B组及 A组,差异有统计学意义(P<0.01),B组Th17细胞外周血中的表达高于A组( P<0.01); C组外周血中Treg细胞的表达率高于A 组(P <0.01)和 B 组(P <0.01),B 组高于 A组,差异有统计学意义( P<0.01);Th17/Treg比值C组明显高于A组和 B 组,A 组和 C 组的差异有统计学意义( P <0.01),但A组与B组及B组与C组的差异无统计学意义(P>0.05)。3组数据汇总分析外周血中Th17细胞和Treg细胞的表达与吸烟量呈正相关( P<0.01), Th17/Treg的比值与吸烟量无明显相关性( P>0.05);3组数据分析 Th17细胞、Treg细胞以及 Th17/Treg 比值与第1秒用力呼气容积( FEV1)/预计值(%)和FEV1/用力肺活量( FVC)(%)呈负相关。结论 C组外周血中Th17细胞和Treg细胞表达水平明显升高,可能参与COPD的发病机制;C组的Th17/Treg比值升高,平衡失调,可能是COPD发病的免疫机制;Th17和Treg细胞表达水平与吸烟量呈正相关,与FEV1/预计值(%)及FEV1/FVC(%)呈负相关。
作者:严青;徐晓玲;夏淮玲;徐飞;陈军;刘辉;石建邦;李庆 刊期: 2014年第06期
目的:探讨非创伤性股骨头坏死局部组织中Ezrin表达的变化及其临床意义。方法采用免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR)对38例非创伤性股骨头坏死(实验组)和16例股骨颈骨折(对照组)组织中Ezrin的表达情况进行检测。结果实验组中Ezrin mRNA表达水平低于对照组,差异有统计学意义( P<0.01)。同时非创伤性股骨头坏死中Ezrin表达水平与性别、年龄、体重指数( BMI)、职业及病因无关,但与疾病分期有关。结论 Ezrin可能参与非创伤性股骨头坏死的发病过程,并可能起着重要调控作用。
作者:罗正亮;李旭;尚希福 刊期: 2014年第06期
目的:探讨持续非卧床腹膜透析( CAPD )患者的肺功能变化及与炎性标志物和透析相关指标的相关性。方法选择CAPD超过2个月的患者101例,根据患者炎性标志物与透析相关指标水平分组,比较各组间肺功能指标的变化。结果通过测量肺活量( VC)、用力肺活量( FVC)、一秒钟用力呼气容积(FEV1)、大呼气流速(PEF)、75%大呼气流量( MEF75)、50%大呼气流量( MEF50)、25%大呼气流量( MEF25)、大呼气中段流量( MMEF )、大通气量(MVV)、肺一氧化碳弥散量(DLCO)来检测肺功能,数据以VC%、FVC%、FEV1%、PEF%、MEF75%、MEF50%、MEF25%、MMEF%、MVV%和DLCO%呈现, CAPD患者均明显低于正常者(P <0.05)。分组比较显示 C-反应蛋白(CRP)≥10 mg/L患者的 VC%、FVC%、PEF%、DLCO%水平明显低于CRP<10 mg/L患者(P<0.05);血清白蛋白(Alb)<35 g/L患者DLCO%水平明显低于Alb≥35 g/L患者(P<0.05);总尿素氮清除指数( Kt/v )<1.7患者 MEF50%、MEF25%、MMEF%、MVV%明显低于总Kt/v≥1.7患者(P<0.05);残余肾小球滤过率( rGFR)<1 ml/min 的患者 MEF25%、DL-CO%明显低于rGFR≥1 ml/min患者(P<0.05);标准化蛋白氮呈现率(nPNA)<1 g/(kg·d)的患者FVC%、PEF%、MEF75%、MMEF%、MVV%明显低于nPNA≥1 g/( kg·d)患者(P<0.05)。结论 CAPD患者血清 CRP水平升高、Alb水平降低及透析不充分、残余肾功能( RRF)下降可能与肺功能损害有关。
作者:齐向明;沈裕欣;胡志伟;张培;吴永贵;张炜 刊期: 2014年第06期
目的:运用Meta分析方法评价中国人群中血清胸腺激酶1(TK1)与乳腺疾病的相关性。方法通过计算机检索中国知网( CNKI)、万方、维普、PubMed 数据库,结合文献追溯和采用公共搜索引擎( www. baidu. com; scholar. google. com)网上检索,收集所有关于中国人群中血清TK1与乳腺疾病的相关性的研究。以血清TK1与乳腺疾病的相关性的相对危险度(RR)值及标化均数差(SMD)值为效应指标,各资料间进行一致性检验,以确定采用固定或随机效应模型进行合并分析。发表偏倚通过漏斗图和Egger′s线性回归检验进行评估。统计分析应用RevMan5.1软件进行,Egger’ s线性回归检验选用STATA 10.0软件计算。结果共入选相关文献15篇, Meta分析显示血清TK1在乳腺癌患者与乳腺良性疾病患者及健康人群之间比较差异均有统计学意义(P<0.05);血清TK1在淋巴结转移及无转移组间以及不同分期间差异无统计学意义。结论血清TK1水平对乳腺癌及乳腺良性疾病的鉴别有一定的参考价值;而对预测及评估乳腺癌患者中是否存在淋巴结转移以及评估乳腺癌分期的参考价值较低。
作者:孙晨宇;王本忠;裴静;许骏;张一聪 刊期: 2014年第06期
目的:应用前瞻性随机对照研究,比较R4(第4肋骨表面交感神经主干)交感神经链联合R3(第3肋骨表面交感神经主干)侧枝切断术与单纯R4切断术治疗原发性手汗症( PH)的疗效,以及术后代偿性多汗等并发症,探讨旁路纤维( Kuntz束支)在手汗支配中的作用。方法选择连续就诊的重度手汗症患者120例,依据患者就诊先后次序随机分为A组(施行R4联合R3侧枝切断术)60例、B组(施行单纯R4切断术)60例。术前和术后6个月分别评估患者情况。结果术后6个月随访到患者91例(75.8%),其中A组51例,B组40例。术后6个月,A、B两组双手出现中度出汗分别为1例(1.96%)、3例(7.5%),轻度出汗2例(3.9%)、5例(12.5%),差异有统计学意义(P<0.05)。 A、B两组代偿性出汗分别为30例(58.82%)、31例(77.5%),两组比较差异无统计学意义。结论胸腔镜下胸交感神经链切断术( VATS)治疗手汗症安全、有效,患者满意度较高。在单节段R4切断基础上增加R3侧枝的预防性切除,可增加患者术后手掌效果,更接近于生理状态,且不增加代偿性多汗的发生率。
作者:李彩伟;朱彦君;李玉华;伍青;吴科;张希东;王桂洪 刊期: 2014年第06期
目的:探讨以氨氯地平为基础的联合治疗方案,对原发性高血压患者降压疗效的比较。方法收集51~72岁伴心血管病危险因素的原发性高血压患者55例。采用多中心随机开放对照盲终点评估的临床试验方法将患者随机分为A组(28例):低剂量氨氯地平(2.5 mg/d)+复方阿米洛利(半片/d);B组(27例):低剂量氨氯地平(2.5 mg/d)+替米沙坦(40 mg/d),计划治疗随访3年。观察两组原发性高血压患者血压的变化。结果 A、B两组原发性高血压患者的血压达标率分别为 A组85.7%(1年)、89.3%(2年)和96.4%(3年)和B组66.7%(1年)、85.2%(2年)和96.3%(3年),收缩压和舒张压与基线值比较均有显著降低(P<0.05),但两组间收缩压与舒张压比较差异无统计学意义( P>0.05)。结论早期资料分析提示患者多为高危人群,随机分配良好;以氨氯地平为基础的联合治疗均能有效降低血压,仅在第1年氨氯地平联合复方阿米洛利的血压达标率高于氨氯地平联合替米沙坦的血压达标率。
作者:雷蔚;莫新玲;谢福生;刘琼;廖发荣 刊期: 2014年第06期
目的:探讨血清高迁移率族蛋白B1( HMGB1)在慢性阻塞性肺疾病急性加重期( AECOPD)、肺炎、肺癌患者中的表达水平及意义。方法按照入组标准纳入AECOPD患者40例,肺炎患者40例,非小细胞肺癌( NSCLC )患者30例,健康对照者30例;抽取AECOPD、肺炎、肺癌患者及健康对照者全血,检测 HMGB1( ELISA法)水平,外周血白细胞(WBC)计数、C-反应蛋白(CRP)水平以及肺癌标志物如癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角质蛋白19片段( CYFRA21-1)等。结果 AECOPD、肺炎、肺癌患者血清HMGB1浓度水平高于健康对照者( P<0.01),直线相关分析显示AECOPD及肺炎患者HMGB1水平与WBC( P=0.008,P=0.002)及CRP(P=0.001, P=0.001)均呈正相关,NSCLC患者血清HMGB1水平与CEA和CYFRA21-1( P=0.036, P=0.008)呈正相关。结论血清HMGB1水平在AECOPD、肺炎、肺癌患者明显升高,提示其可能在呼吸系统炎症性疾病及肺癌发病机制中起重要作用,并对疾病的严重程度有一定的提示。
作者:崔正森;李菡;姜宝珍;张志红 刊期: 2014年第06期
目的:探讨小剂量睾酮补充治疗( TST)对男性迟发性性腺功能减退症( LOH)合并代谢综合征( MS)的有效性和安全性。方法选取80例合并有男性LOH和MS的患者,以3∶1的比例随机分为实验组和对照组:实验组给予口服十一酸睾酮(每次40 mg,每日2次,餐后服用);对照组不做任何治疗。随访12个月,比较各项指标水平差异,分析TST的有效性及安全性。结果与对照组相比,实验组采用TST ;3个月后中老年男性症状问卷( AMS)评分、睾酮水平、空腹胰岛素( FINS)及胰岛素敏感指数( ISI)变化差异有统计学意义(P<0.05),其他MS指标及国际勃起功能指数表(IIEF-5)评分变化差异均无统计学意义;12个月后 AMS 评分为(23.5±2.7)分,睾酮水平为(18.2±5.3) nmol/L,均达到正常范围, IIEF-5评分、腰围( WC )、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FBG)、FINS及ISI变化差异均有统计学意义( P<0.05)。治疗期间,对照组各指标变化差异均无统计学意义,实验组未出现明显不良反应,前列腺特异性抗原( PSA)、血红细胞计数( RBC)、血红蛋白( Hb)及红细胞压积( HCT)变化差异均无统计学意义。结论小剂量TST对LOH合并MS安全有效。
作者:杨佳佳;张贤生;高晶晶;汤冬冬;叶元平;郝宗耀;周骏;张翼飞;樊松;梁朝朝 刊期: 2014年第06期
对志愿者头颅部进行螺旋CT扫描,利用Mimics软件进行实体模型的重建,优化后导入Ansys 软件中赋值及网格划分,建立左侧下颌第一磨牙缺失的包含微型种植体、直丝弓托槽、牙列、牙周膜、牙槽骨的下颌三维有限元模型,实验模拟与临床基本相符。
作者:吴映燕;蒋勇;陈琳 刊期: 2014年第06期
44例阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征( OSAHS)患者经可控式阻鼾器干预,分别于干预前、干预后3个月进行多导睡眠监测( PSG )、Epworth 睡眠量表( ESS )及魁北克睡眠问卷( QSQ)简体中文版的信息评价,比较分析干预前、后主客观指标及各评价指标的相关性。OSAHS患者干预前、后3个月比较分析,疗效差异有统计学意义(P<0.05),且主客观评价参数的相关系数绝对值在干预前、后第3个月分别为0.321~0.433和0.306~0.437, OSAHS患者的PSG指标与ESS、QSQ间相关性凸显,差异有统计学意义(P<0.05)。
作者:王岚;刘业海 刊期: 2014年第06期
回顾性分析在我院接受外科胸腺切除术治疗的行52例重症肌无力( MG)患者的临床资料,对术后近期疗效及危象发生情况进行统计学分析。结果显示手术后症状缓解15例,改善26例,无变化8例,恶化3例,总有效率为78.8%。Osseman分型、术前病程长短、术前溴吡斯的明用量及是否合并胸腺瘤是术后肌无力危象发生的相关危险因素。外科治疗MG具有良好的疗效,围术期做好充分准备并控制相关危险因素可降低术后危象的发生。
作者:赵元;于在诚;胡旭;张仁泉;王云海;刘伟;左剑辉 刊期: 2014年第06期
收集胃食管反流病( GERD)患者189例,其中反流性食管炎( RE)患者56例,非糜烂性反流病( NERD)患者133例,以347例健康体检者作为对照组。 GERD组及对照组填写反流性疾病问卷( RDQ )、综合医院焦虑抑郁量表(HADS)、匹茨堡睡眠质量指数表(PSQI)。 GERD患者接受埃索美拉唑40 mg/d治疗2周。结果显示GERD组焦虑抑郁状态及睡眠障碍的发生率高于对照组( P<0.05);RE患者与NERD患者焦虑抑郁状态及睡眠障碍的发生率差异无统计学意义( P>0.05)。 GERD患者焦虑抑郁状态、睡眠障碍与症状严重程度呈正相关。单因素Logistic回归分析显示女性、NERD、焦虑抑郁状态是质子泵抑制剂( PPI)疗效的影响因素,多因素Logistic回归分析显示女性、NERD是PPI疗效的独立预测因素。
作者:王伟伟;王亚雷;许建明;李仁君;吴军;张开光;牛小平 刊期: 2014年第06期
人工设计合成规律成簇的间隔短回文重复( CRISPR)序列特异性引物,将从临床分离的大肠埃希菌株作为模板,采用PCR扩增方法筛选含有CRISPR系统的大肠埃希菌;利用噬菌斑法从医院未经消毒处理的污水中分离大肠埃希菌噬菌体,经过PEG沉淀的方法浓缩得到高滴度的噬菌体,再用该筛选噬菌体感染上述含有CRISPR的大肠埃希菌以筛选耐受该噬菌体的大肠埃希菌菌株。后从70株大肠埃希菌中筛选到42株含有CRISPR序列的菌株,然后采用噬菌斑法分离到1株大肠埃希菌E. coli 147-30的裂解性噬菌体IME-EC1,在此基础上利用E. coli 147-30筛选到1株耐受噬菌体IME-EC1的大肠埃希菌菌株,命名为E. coli 147-30R1。
作者:滑玉会;黄勇;张志毅;安小平;米志强;尹秀云;陈建魁;童贻刚 刊期: 2014年第06期
选取神经外科住院患者147例为研究对象。利用Sysmex 4000全血细胞分析仪检测患者红细胞分布宽度( RDW)、血红蛋白( Hb)、白细胞计数( WBC)、红细胞平均体积( MCV)等指标,根据患者的各项生理参数和实验室检查结果的进行急性生理功能和慢性健康状况Ⅱ评分(A-PACHE-Ⅱ),同时运用受试者工作特征曲线( ROC曲线)评价RDW对重型颅脑损伤患者住院死亡率的预测价值。重型颅脑损伤患者RDW值随着APACHE Ⅱ评分和患者死亡率的增高而逐渐升高,且3组间RDW值差异有统计学意义(P<0.05)。 ROC曲线分析显示,当RDW和APACHE Ⅱ评分在预测重型颅脑损伤患者住院死亡率时的曲线下面积分别为0.68和0.61,两者联合曲线下面积为0.71。
作者:王宝凤;姚艳丽;杨凯;袁靖中 刊期: 2014年第06期
采用皮下( A组)及腹腔( B组)2种途径将HL-60细胞接种于经环磷酰胺预处理的SCID小鼠。 C组小鼠不做处理作为正常对照。比较不同接种方法构建的小鼠HL-60白血病模型的生物学特性。结果表明皮下、腹腔注射培养的HL-60细胞于SCID小鼠体内均可成瘤。皮下注射成瘤时间短,存活时间长;腹腔注射成瘤时间长,存活时间短。腹腔注射脏器浸润较皮下成瘤严重。接种细胞4周后,B组小鼠外周血白细胞数较A和C组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。 A和B两组小鼠外周血都有白血病细胞浸润,但是比例较低,不超过3%。
作者:单武林;章成芳;马筱玲;常文娇;戴媛媛 刊期: 2014年第06期
采用垂直双蒂结合腺体旋转蒂法,对7例乳房肥大患者行改良McKissock法切除乳房下方及两侧的乳腺组织,且保留乳头外上方部分腺体共同为蒂(蒂部保留了T4肋间神经外侧皮质深浅支),旋转折叠腺体,固定于乳晕下方。该组患者,除1例右侧乳房乳晕下术区血肿(经处理后恢复、无感觉丧失),其余患者术后乳房形态良好,乳头乳晕感觉正常或稍减退,色泽如常;切口均Ⅰ期愈合。
作者:李凤;曹东升;谢娟;李红红;陈增红;朱邦中;鲍琼 刊期: 2014年第06期
目的:探讨阿法替尼(BIBW2992)和吉非替尼分别与培美曲塞联合对肺腺癌细胞 PC-9(突变敏感型)、H1975(T790M耐药型)的增殖和凋亡的影响并阐述其可能机制。方法 MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期变化,Western blot法检测不同浓度BIBW2992和吉非替尼对细胞胸苷酸合成酶( TS)表达水平的影响。结果BIBW2992、吉非替尼以及培美曲塞单独作用后, PC-9和H1975细胞均明显凋亡,同时细胞增殖受到不同程度抑制。BIBW2992与培美曲塞联合在PC-9、H1975细胞中对细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用较单药组均有明显提高(P <0.05),而吉非替尼与培美曲塞联合仅在PC-9细胞中提高单药对细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用( P <0.05)。BIBW2992在PC-9、H1975细胞中均显著降低TS表达,而吉非替尼在 H1975细胞中无显著抑制作用。结论BIBW2992可以克服T790M突变耐药,并且与培美曲塞联合对PC-9、H1975细胞呈协同增效作用;吉非替尼与培美曲塞联合仅对PC-9细胞具有协同增效作用,可能主要与下调TS表达作用有关。
作者:边劲;王琳;寻琛;黄伟 刊期: 2014年第06期
目的:考察小剂量氯吡格雷联合丹皮酚给药抗血小板聚集活性。方法利用二磷酸腺苷体外诱导血小板聚集,大鼠动-静脉旁路血栓重量和小鼠出血时间等指标评价联合给药抗血小板聚集活性。结果联合给药能显著抑制大鼠血小板大聚集率、降低大鼠动-静脉旁路血栓重量并延长小鼠出血时间;且其抑制血小板聚集活性明显强于氯吡格雷和丹皮酚。结论小剂量氯吡格雷联合丹皮酚给药的抗血小板聚集活性明显强于氯吡格雷组,具有一定的临床应用前景。
作者:孙爱华;周碧蓉 刊期: 2014年第06期
目的:探讨白芍总苷( TGP)对糖尿病肾脏组织中内质网应激( ERS )的影响。方法50只大鼠随机分为对照组、模型组和TGP给药组[50、100、200 mg/(kg·d)灌胃]。用链脲佐菌素( STZ)诱导大鼠制备糖尿病模型,8周后留取适量肾组织用免疫组织化学法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、磷酸化的蛋白激酶样内质网激酶(p-PERK)及磷酸化的真核细胞翻译起始因子2α( p-eIF2α)蛋白的表达。结果各TGP给药组大鼠尿白蛋白排泄率( UAER)较模型组明显减少(P<0.01),模型组大鼠UAER水平明显高于对照组(P<0.01)。与对照组相比,模型组大鼠p-PERK在肾小管-间质中的表达以及GRP78、p-eIF2α在肾小球、肾小管-间质中的表达均显著增加( P<0.01)。与模型组相比, TGP各给药组大鼠GRP78、p-PERK在肾小管-间质中的表达以及p-eIF2α在肾小球、肾小管-间质中的表达明显降低(P<0.01)。结论糖尿病大鼠肾脏中ERS反应明显,TGP对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护可能与抑制ERS反应有关。
作者:武晓旭;章超群;许坤;徐兴欣;吴永贵 刊期: 2014年第06期
目的:考察儿茶素对实验性大鼠心力衰竭(简称心衰)模型的保护作用。方法采用腹主动脉结扎制备大鼠心衰模型;通过心衰大鼠血流动力学、心脏重量指数、血管紧张素Ⅱ( AngⅡ)、醛固酮( ALD)和心钠肽( ANP)含量水平评价儿茶素疗效。结果心衰大鼠血流动力学明显紊乱,心脏重量指数显著增加,同时AngⅡ、ALD和ANP浓度水平明显上升;儿茶素50、100 mg /( kg·d)连续2周治疗给药后能明显改善心衰大鼠血流动力学、降低心脏重量指数、下调AngⅡ、ALD和ANP的含量水平。结论儿茶素对大鼠心衰具有明显保护作用。
作者:章琦;胡立群;尹长森;陈萍;李红旗;孙新;严光 刊期: 2014年第06期
目的:研究葛根总黄酮对去势大鼠骨质疏松的保护作用。方法10周龄SPF级SD 雌性大鼠随机分为正常组、假手术组、去势模型组、替勃龙组(1.25 mg/kg)和葛根总黄酮(50、100、200 mg/kg)给药组。各给药组按上述剂量灌胃给药,每天1次,持续12周。12周后,双能X射线骨密度仪测定各组大鼠右股骨骨密度(BMD)和骨矿物含量(BMC),三点弯曲实验测左股骨生物力学的性能,左胫骨HE染色做组织形态学分析。 ELISA法测尿液的羟脯氨酸( HOP)、血清骨特异性碱性磷酸酶( BALP)、卵泡生成素( FSH)、黄体生成素(LH)和雌激素(E2)水平,RT-PCR法检测下丘脑促性腺激素释放激素( GnRH) mRNA的水平。结果葛根总黄酮(100、200 mg/kg)可显著增加去势大鼠右股骨BMD、左股骨生物力学性能,上调下丘脑GnRH mRNA表达,并可降低尿液HOP、血清BALP、FSH和LH的水平,减少骨吸收。结论葛根总黄酮对去势大鼠的骨质疏松有保护和预防性治疗的作用。
作者:陈冠儒;陈飞虎;葛金芳;王晓宇;詹侠;朱娇;武超 刊期: 2014年第06期
肾性继发性甲状旁腺功能亢进( SHPT)是慢性肾脏病常见并发症之一,也是影响慢性肾脏病患者预后的重要因素,近年来成为研究热点。目前认为抗衰老蛋白α-Klotho与SHPT关系密切。现综述近年来α-Klotho对钙、磷代谢以及甲状旁腺激素的合成与分泌的影响,旨在进一步阐明α-Klotho蛋白在肾性SHPT发生、发展中的作用,进而为临床诊治提供科学依据。
作者:闫军放(综述);郝丽;张凌(审校) 刊期: 2014年第06期