学术投稿

毛细管电泳技术与分子信标技术结合检测基因

姜晓峰;王雅杰;张锟

关键词:基因检测, 毛细管电泳技术, 分子信标技术, 胃癌
摘要:目的研究毛细管电泳技术和分子信标技术结合进行基因检测,建立一种简便、敏感、特异和快速自动化的基因检测的新方法学.方法提取胃癌患者的癌组织及癌旁组织DNA, PCR扩增p16基因外显于2,进行琼脂糖电泳检测、SSCP分析, PCR扩增产物与自行设计探针杂交后毛细管电泳检测.结果有p16外显子2 PCR扩增产物的癌组织与分子信标探针液相杂交后毛细管电泳仪检测可见检测峰.结论毛细管电泳技术和分子信标技术结合检测基因产物是在临床及基础研究中可作为一种基因产物检测的实用手段.
中国实验诊断学杂志相关文献
  • C反应蛋白与急性冠脉综合征的临床研究

    目的探讨C反应蛋白(CRP)与急性冠脉综合症(ACS)的关系.方法测定ACS患者40例(其中不稳定型心绞痛患者组23例,急性心肌梗死组17例)以及20例非冠心病对照者血清CRP浓度.结果与对照组相比,急性冠脉综合症各组CRP水平无显著性增高.不稳定型心绞痛组与急性心肌梗死组(包括非ST段抬高心肌梗死)CRP浓度也无显著性差异.结论急性冠脉综合症与血清CRP水平关系不甚密切.CRP浓度可能不适合作为急性冠脉综合症的监测指标.

    作者:高长斌;张蕾;石琳琳;刘也 刊期: 2003年第03期

  • 准分子激光屈光性角膜切削术后泪膜功能分析

    目的探讨准分子激光角膜切削术(photorefeactive keratectomy PRK)后泪膜功能的改变.方法对59例近视患者118只眼进行了泪膜功能检测,观察PRK术前及术后10天、1个月、3个月,角膜荧光素染色试验,泪膜破裂时间(break-up time, BUT),泪液分泌量.结果 PRK术前,术后10天、1月、3月平均泪液分泌量为16.21、15.97、10.11、12.88mm;平均BUT为15.53、11.01、9.87、11.32s,PRK术后3个月内BUT明显缩短,差异有显著意义.PRK 术后泪液分泌量亦明显减少.术后10天角膜荧光素染色比术前加重.结论 PRK术后可导致泪液缺乏,泪膜稳定性下降,产生干眼症状,主要原因可能与术后角膜知觉减退有关.

    作者:李勤;王旭飞;刘冰 刊期: 2003年第03期

  • 脾海绵状血管瘤1例

    1 临床资料患者,女,51岁,因左上腹部不适伴食欲下降15天,为明确诊治入我院.病程中无恶心、呕吐、查体:T:36.5℃,BP16/10kPa,营养中度,发育正常,心肺无异常.腹部柔软,肝脾未触及,剑突下及左肋缘下压痛.彩色多普勒超声检查:脾脏厚44mm,其内布满强回声光团,大的为24mm×21mm.CDFI显示,未见异常血流.超声诊断:脾脏占位性病变(血管瘤).手术所见:脾脏增大,表面不光滑,但不硬,行脾切除.病理诊断:脾海绵状血管.

    作者:左晓文 刊期: 2003年第03期

  • UF-100全自动尿沉渣分析仪与尿沉渣镜检的对照研究

    尿中有形成份分析对临床多种疾病的诊断和鉴别诊断是至关重要的.为了探讨UF-100全自动尿沉渣分析仪的临床应用价值,本文对全自动尿沉渣分析仪与尿沉渣镜检进行了对照研究,结果报告如下.

    作者:谭家成;朱网娣 刊期: 2003年第03期

  • 脑脊液14-3-3蛋白对皮质-纹状体-脊髓变性诊断价值的研究

    对皮质-纹状体-脊髓变性(Creutzfeldt-Jakob,CJD)患者进行脑脊液中14-3-3蛋白检测,以便为CJD提供一个支持临床诊断的有力依据.

    作者:崔俐;吕晓民;吕洋 刊期: 2003年第03期

  • 脐尿管腺癌的诊断

    自1985年9月至2001年9月我们共收治脐尿管腺癌7例,现对其诊断与治疗情况报告如下.

    作者:刘全国;李建立;王敏 刊期: 2003年第03期

  • 骨内高压动物模型的建立与实验研究

    目前已知,许多骨科疾病与骨内压增高有关[1,2],如股骨头坏死,骨性关节炎、跟痛症等.关于骨内压产生的机理,许多报道己表明,骨内静脉瘀滞是引起骨内压增高的主要原因,骨内微循环瘀滞是骨内高压症的病理本质[3,4].尽管静脉回流障碍是导致骨内压升高的主要原因已被普遍接受,但骨内血管,特别是骨内动脉的活动特性在骨内高压发生中的作用尚不明了.因此,观察骨内血管对血管活性物质的反应,阐明骨内血管活动在骨内高压发生中的作用,对揭示骨内高压的病理机制是十分重要的.

    作者:韩桂全;张德光;刘亚;金成文;孙志霞 刊期: 2003年第03期

  • 电视胸腔镜对肺结节样病变的诊断价值

    目的讨论电视胸腔镜在肺结节样病变中的诊断作用.方法诊断不明的单侧肺结节样病变的患者22例,肿物部位探寻明确后,电视胸腔镜下行肺楔形切除术,术中送冰冻快速病理.结果肺癌5例(占22.7%)、转移瘤3例(占13.6%)、肺结核瘤5例(占22.7%)、炎性假瘤3例(占13.6%)、炎性肿块3例(占13.6%)、肺包虫病2例(占9.2%)、肺结节病1例(占4.6%),经VATS单纯肺楔形切除术16例,中转开胸6例.后者中5例为腺癌,行肺叶切除加淋巴结清扫;1例为炎性肿块,直径仅1.0cm.结论 VATS给胸外科医生提供了一个新的诊治手段,对患者生理干扰小,确诊率高,易被患者所接受.

    作者:于磊;林凤武;马山;李建业;陈海山 刊期: 2003年第03期

  • 医院感染中主要革兰阴性杆菌的分布及耐药性分析

    目的监测医院感染中的主要革兰阴性杆菌的分布,对抗生素的耐药性及其耐药变化趋势,为临床合理选择抗生素治疗感染性疾病提供理论依据.方法采用纸片琼脂扩散法对临床分离的3 992株革兰阴性杆菌进行药敏试验,用WHONET5按照NCCLS2000版对结果进行判定和统计.结果受检的3 992株革兰阴性杆菌中,大肠埃希菌980株,占24.6%,铜绿假单胞菌774株,占19.4%,肺炎克雷伯菌408株,占10.2%;呼吸道分离1 549株,占38.8%,泌尿道分离1 114株,占27.9%,血培养为271株,占6.8%;耐药率低的是亚胺培南7.6%,其次为头孢哌酮/舒巴坦8.1%和阿米卡星14%,头孢他啶16.2%,大肠埃希菌对环丙沙星的耐药率为70.4%,嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明耐药率为21.4%,铜绿假单胞菌对亚胺培南为11.7%,对环丙沙星为13%.结论大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌仍然是医院感染的主要病原菌,洋葱伯克霍尔德菌、阴沟肠杆菌的检出率也呈上升趋势,并且有较高的耐药性,在医院感染中也仍引起足够的重视.

    作者:年华;褚云卓;丁丽萍;张丽霞 刊期: 2003年第03期

  • KAI1在原发性肝癌组织中的表达水平及调控机制的初探

    目的初探KAI1/CD82在原发性肝细胞癌组织中的表达水平及可能涉及的机制.方法采用多重逆转录聚合酶链反应,对8例原发性肝细胞癌组织和4例肝血管瘤正常组织中KAI1/CD82mRNA表达水平进行半定量检测,并对肝癌细胞株用Bel-7402和SMMC-7721在肿瘤促进剂佛波醇肉桂酸乙酸酯(PMA)和去甲基化试剂5-氮脱氧胞苷作用下KAI1/CD82表达水平及可能涉及的机制进行了初步探讨.结果肝癌癌组织中KAI1/CD82mRNA表达水平(0.70±0.13)较癌旁组织(1.47±0.18)和肝血管瘤的正常肝组织中KAI1/CD82mRNA表达水平(1.53±0.03)呈显著降低(P<0.05),后两者之间则不存在明显差异.去甲基化试剂5-氮脱氧胞苷使Bel-7402中KAI1/CD82mRNA表达有一定增高,但对SMMC-7721中KAI1/CD82mRNA表达水平无明显作用.PMA对Bel-7402和SMMC-7721中KAI1/CD82mRNA表达具有一定的调节作用.结论原发性肝细胞癌组织KAI1/CD82表达明显降低,可能是癌细胞转移的一个标志,这种表达降低可能涉及到基因甲基化等多种复杂调控的机制.

    作者:张捷;陈晓华 刊期: 2003年第03期

  • 健康成年人扩展高频听力阈值的测试分析

    正常情况下,人类能感受到各种声音,其频率变化范围很大,从20~20000Hz.通常使用的纯音听力计,只测125~8000Hz 6个倍频程范围的听阈,8000Hz以上频率的变化很难在普通听力计中显示出来.由于扩展高频听力计的发展,国内外学者利用该仪器来检测高频(10~20kHz) 听力,并在不同年龄正常人的听力检测上作了大量的研究工作,由于没有统一的标准,所以各家检测的结果有所不同.本文对120名健康成年人进行10~20kHz测试,以了解健康成年人的扩展高频阈值范围,供临床参考.

    作者:王越;韩宇丹;李玉兰 刊期: 2003年第03期

  • TLMV的研究现况

    TLMV是一种新型与输血性肝炎相关的人类DNA病毒.由日本学者Shunji Mishiro等在2000年初首次发现,目前来自全自世界如日本、法国和巴西的TLMV感染已被证实[1].国内有关TLMV的研究刚刚起步.

    作者:刘媛媛;牛俊奇;于永利 刊期: 2003年第03期

  • 胆道镜在胆道疾病诊治中的应用价值

    目的探讨胆道镜在胆道疾病诊治中的应用价值.方法于1990年10月~2002年10月应用胆道镜诊治胆道疾患,术中应用580例,术后应用780例,进行总结.结果术中应用取石成功率84%,成功确诊治疗胆管肿瘤22例.术后取石成功率94.9%.无严重并发症.结论胆道镜可大大降低胆道残石率,提高胆道疾病的确诊率,对其治疗方案起到合理的指导作用,胆道镜在胆道疾病诊治中作用显著.

    作者:左伟;刘润平;张东宝 刊期: 2003年第03期

  • 精浆抗精子抗体与精液主要参数关系分析

    目的分析精液量、密度、活动率和活力与精浆抗精子抗体(AsAb)的关系.方法:间接血凝法测定AsAb. 结果:3253例男性不育就诊者精浆AsAb阳性率为9.81%.随着精液量、密度、活动率、活力降低, AsAb阳性率均明显增加(P<0.05).以AsAb阳性与否分成的两组间的精液量、精子密度、活动力和活率比较差异均有显著性(P< 0.05).结论:精浆AsAb对精液量、密度、活动率、活力均有明显影响.

    作者:刘睿智;李付彪;沙艳伟;许宗革;辛暨丽;薛百功;王忠山 刊期: 2003年第03期

  • 以持续高热首发症状的肺鳞癌1例报告

    1 临床资料患者,男,32岁因高热1个月,咳嗽7天于2002年11月13日院.曾于我院门诊抗炎治疗效果不佳.

    作者:陈桂芝;李琛;卢颖 刊期: 2003年第03期

  • 门奇断流术后门静脉系统血栓形成原因分析

    目的分析脾切除、贲门周围血管离断术(以下简称门奇断流术)术后门静脉系统血栓形成原因.方法对我院1998年5月至2003年4月期间96例门奇断流术的病人进行回顾性分析.结果本组病例共发生门静脉系统血栓17例(17.71%),均发生在20天内,早发生于术后第7天.结论门静脉系统血栓形成的主要原因为手术操作不仔细、脾切除、门静脉系统血流动力学变化、应用止血药过多等原因有关.

    作者:张丹;张学文;赵吉生;刘伟 刊期: 2003年第03期

  • 毛细管电泳技术与分子信标技术结合检测基因

    目的研究毛细管电泳技术和分子信标技术结合进行基因检测,建立一种简便、敏感、特异和快速自动化的基因检测的新方法学.方法提取胃癌患者的癌组织及癌旁组织DNA, PCR扩增p16基因外显于2,进行琼脂糖电泳检测、SSCP分析, PCR扩增产物与自行设计探针杂交后毛细管电泳检测.结果有p16外显子2 PCR扩增产物的癌组织与分子信标探针液相杂交后毛细管电泳仪检测可见检测峰.结论毛细管电泳技术和分子信标技术结合检测基因产物是在临床及基础研究中可作为一种基因产物检测的实用手段.

    作者:姜晓峰;王雅杰;张锟 刊期: 2003年第03期

  • Henaney法与球囊导管内转流装置在全肝血流阻断下行无血切肝的血液动力学变化的比较研究

    目的本实验在分析以往无血切肝术式基础上,自行设计了一种双球囊导管门腔心房内转流装置,探讨一种对机体血液动力学影响更小的全肝血流阻断方法.方法实验将12条成年健康家犬随机分为2组,A组采用Henaney在1966年首创的经腹全肝血流阻断法做为标准对照组,B组采用自行设计的球囊导管门腔心房内转流法,在阻断肝血流中及开放肝血流后不同时间监测全身MAP、MPAP、CVP、CO的变化.结果在阻断肝血流前、阻断即刻、20min及开放肝血流后5 min、30 min、60 min A组MAP、MPAP、CVP、CO与B组相比存在显性差异(P<0.05).结论通过双球囊导管门腔心房内转流对无血切肝时全身血液动力学影响小.

    作者:杨立群;马光;左国杰 刊期: 2003年第03期

  • 心功能参数图像对陈旧性冠心病梗死灶定位诊断价值的研究

    目的观察心功能参数图像对陈旧性冠心病(CAD-OMI)梗死灶的定位检出率及定位价值.方法采用心功能参数图像观察陈旧性心肌梗死组并与放谢性核素心肌灌注断层显像及心电图(ECG)对比分析.结果应用心功能参数图像定位CAD-OMI患者梗死部位,发生在左心室和心尖部位的病灶检出率高,室间隔部位心肌梗死灶检出率低;总体心肌梗死灶的定位检出率明显高于ECG(P<0.05).结论心功能参数图像对心肌梗死灶具有较高的定位诊断价值.

    作者:张云平;姜莉;梅树江;孙平辉 刊期: 2003年第03期

  • 利用表面等离子体谐振技术检测金黄色葡萄球菌肠毒素B

    本文研究了利用自行研制开发的表面等离子体谐振(SPR-2000)生化分析仪检测金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)与其羊单克隆抗体IgG的免疫吸附反应,并研究了用SPR技术检测生物大分子相互识别反应相关的一些问题.为了消除溶液间本体折射率差异的影响,我们采用牛血清白蛋白(BSA)本体折射率补偿法,使通入流动系统的不同溶液获得基本一样的本体折射率,获得了很好的效果.在此基础上, SPR-2000生化分析仪初步实验已经能检测到的SEB低浓度是1μg/ml,相当于3.5×10-8M.进一步的实验仍在进行中.

    作者:向四海;崔大付;蔡浩原;李亚亭;王于杰;陈翔 刊期: 2003年第03期

中国实验诊断学杂志

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主管:中华人民共和国教育部

主办:吉林大学中日联谊医院 上海交通大学医学院附属瑞金医院