学术投稿

白细胞介素18基因工程表达方法

乔友军;汪欣;高杰;王宝;贾春祎

关键词:白细胞介素-18, 基因重组质粒
摘要:目的:探讨人白细胞介素(IL)-18基因工程表达方法。方法复苏含有pGEX-IL-18重组体质粒的 E.coli JM109,并进行增菌培养;利用质粒提取试剂盒提取pGEX-IL-18重组体质粒,通过琼脂糖凝胶电泳、基因片段测序、基因库比对等技术鉴定 IL-18基因序列;将提取得到的pGEX-IL-18重组体质粒转化到DH5α,制成高效表达的IL-18原核表达系统。结果含有pGEX-IL-18重组体质粒的E.coli JM109增菌培养后提取质粒,酶切电泳与Marker比对,证实质粒大小2.7 kb;经测序并利用基因库比对证实,所制备的 DNA 片段符合 IL-18基因序列。将 pGEX-IL-18转染DH5α细菌内,并经过蓝白筛选系统进行筛选,证实转染成功。结论经过系统的实验研究,成功建立了IL-18的基因工程表达系统。 IL-18具有重要的生物学功能,在后续的科研工作中将对IL-18的应用价值进行系统研究。
中国老年学杂志相关文献
  • DNMT3 a基因shRNA质粒表达载体的构建及其沉默作用

    目的:以DNMT3a mRNA 保守序列为靶基因设计针对DNMT3a mRNA的siRNA序列和无效干扰对照序列(HK),并利用基因重组技术将其克隆到真核表达载体pGensil-1中,构建pGenesil-1-DNMT3a-shRNA、pGenesil-1-HK-shRNA重组质粒。方法应用转化技术将重组质粒转化到大肠杆菌 DH5a中,通过卡那霉素抗性筛选出阳性菌落后提取质粒进行酶切和测序鉴定,应用质粒转染技术转染耐顺铂肺腺癌 A549细胞( A549-DDP),利用RT-PCR技术检测转染重组质粒24、48、72 h后 DNMT3a的沉默效率。结果测序结果与合成序列一致,重组质粒不能够被PstⅠ切开,转染pGenesil-1-DNMT3a-shRNA能够明显抑制DNMT3a的表达,抑制率分别达到25.5%,56.2%,63.4%,且呈明显时间依赖性,而 pGenesil-1-HK-shRNA无明显抑制作用。结论成功构建了DNMT3a基因shRNA及HK质粒真核表达载体,为进一步实验研究奠定了基础。

    作者:吴艳凤;李德涛;郑倩;李雪;薛成军;陈辉 刊期: 2015年第06期

  • 异氟烷对老年患者全身麻醉术后认知功能的影响

    术后认知功能障碍( POCD)多数患者是一过性的,但部分患者可以出现长期的POCD,少数患者可能发生永久POCD〔1〕。老年患者由于体质减退,对手术的耐受能力降低,术后更易发生POCD。从Bedford〔2〕于1955年首次发现并报道了认知功能下降以来,许多研究表明POCD可发生在各个年龄组,其中老年人发病率高。异氟烷具有麻醉效果好、麻醉深度易于调节、对循环影响轻、毒性小、诱导和苏醒迅速等特点,因此广泛应用于临床麻醉。然而,越来越多的研究发现异氟烷可导致认知功能下降〔3~5〕,甚至引起POCD。本文就异氟烷对老年患者全身麻醉术后发生POCD的可能机制作一综述。

    作者:崔香淑;金梦;崔常雷;韩树海;金立民 刊期: 2015年第06期

  • 氟西汀及共情技术对老年高血压伴抑郁患者生活质量及焦虑抑郁情绪的影响

    目的:探讨氟西汀及共情技术对老年高血压伴抑郁患者生活质量及焦虑抑郁情绪的影响。方法选择老年高血压伴抑郁患者120例为研究对象,随机分为观察组和对照组,各60例。对照组采用硝苯地平控释片治疗,观察组在此基础上加用氟西汀及共情技术干预。结果干预后,观察组患者舒张压和收缩压的下降幅度大于对照组(P<0.01);SAS评分、SDS评分的下降程度大于对照组(P<0.01);病情、一般生活、体力状况、工作状况、社会心理状况、医疗状况等评分优于对照组( P<0.01)。结论老年高血压伴抑郁患者在硝苯地平控释片治疗的基础上配合氟西汀及共情技术干预,能够进一步提高疗效,改善患者的心理状态,促进患者生活质量的提高。

    作者:林海英;胡申江 刊期: 2015年第06期

  • 慢性阻塞性肺疾病患者生活质量及其影响因素

    目的:分析慢性阻塞性肺疾病( COPD)患者生活质量的现状,并探讨影响其生活质量的相关因素。方法选取2013年3月至2014年3月在大连医科大学附属第一医院三部呼吸科住院的COPD稳定期患者88例作为研究对象。将患者一般情况调查表、圣乔治呼吸问卷( SGRQ)、疾病家庭负担量表(FBS)、领悟社会支持量表(PSSS)、焦虑量表(SAS)、抑郁量表(SDS)相结合,采用SPSS17.0统计软件进行分析。结果不同疾病COPD患者SQ无差异。年龄、家庭经济收入对COPD患者生活质量有影响。相关分析显示,患者心理状况与生活质量有很强的关联,抑郁、焦虑的情况越重,SQ越差。多因素分析显示,经济收入越低、经济负担越重、自我活动能力越小、焦虑程度越重,家庭成员躯体健康越差,影响单项得分越高, SQ越差。结论 COPD患者的生活质量普遍较低。影响COPD患者生活质量的主要因素是年龄、经济收入、心理因素、疾病负担等。

    作者:郭薇;刘启贵;张娜 刊期: 2015年第06期

  • 降脂抗氧化合剂联合瑞舒伐他汀治疗老年混合型高脂血症的疗效

    目的:观察中药降脂抗氧化合剂联合瑞舒伐他汀治疗老年混合型高脂血症患者的疗效。方法72例混合型高脂血症患者随机分为治疗组和对照组,对照组单服瑞舒伐他汀(10 mg,1次/晚);治疗组予降脂抗氧化合剂(20 ml,3次/d)联合瑞舒伐他汀(10 mg,1次/晚)。服药前和服药12 w后,检测空腹血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及肌酸激酶(CK)。结果治疗组和对照组均能降低血清TC、LDL-C,但组间无差异(P>0.05);降 TG、升高 HDL-C疗效治疗组优于对照组( P<0.05),两组均无明显副作用( P>0.05)。结论降脂抗氧化合剂联合瑞舒伐他汀安全,能更有效地纠正老年混合型脂质代谢紊乱。

    作者:钱卫东;方祝元;鲁海婷 刊期: 2015年第06期

  • 应用螺旋CT实施灌注显像综合诊疗胰腺癌的价值

    目的:探讨应用螺旋CT实施灌注显像( MSCTPI)对于胰腺癌患者的诊疗价值。方法对比胰腺癌患者和正常人胰腺组织的MSCT-PI参数、胰腺癌组织和癌周相对正常组织的MSCTPI参数,同时对36例采用化疗的患者进行化疗前后MSCTPI参数对比。结果胰腺癌组的血容量(BV)、局部血流量(BF)和峰值(PE)显著低于对照组,而达峰时间(TTP)和渗透性(PS)显著高于对照组(P<0.01)。胰腺癌组的 BV、BF和 PE显著低于癌周相对正常组织,而TTP和PS显著高于癌周相对正常组织( P<0.01)。胰腺癌化疗后的BV、BF和 PE显著高于化疗前,而 TTP和 PS显著低于化疗前(P<0.01)。结论采用MSCTPI进行检测有助于胰腺癌的诊断和治疗疗效评估。

    作者:杨洪;郑伟 刊期: 2015年第06期

  • 养老机构老年人护理安全管理研究进展

    护理安全是指患者在接受护理全过程中,不发生法律和法定的规章制度允许范围以外的心理、机体结构或功能上的损害、障碍、缺陷或死亡〔1〕。护理安全管理就是为保证病人身心健康,对各种不安全因素进行有效控制〔2〕。本文就目前养老机构护理安全管理现状存在的问题及对策的研究进展进行综述。

    作者:童立纺;袁义芹 刊期: 2015年第06期

  • 胸膜孤立性纤维瘤的诊疗进展

    胸膜孤立性纤维瘤( SFTP )是一种少见、生长缓慢的间叶组织肿瘤。文献报道的病例数仅有900例左右。初, SFTP被认为是发生于胸膜腔,并且是与胸膜相关的、界限清楚的孤立性肿块。组织来源、细胞特点及临床预后都不确定。随着人们对SFTP组织学及病理学表现认识的不断深入,发现SFTP组织学形态呈多样性,发病部位广泛,主要发生于胸膜,也偶发生于肺、生殖系统、腹腔、软组织和肌肉等处结缔组织〔1〕,给病理诊断和鉴别诊断造成一定困难。目前对SFTP的外科治疗采用何种方式,如开胸手术或胸腔镜手术、楔形切除或胸壁切除以及后续是否使用放化疗等问题仍无统一意见。

    作者:贾腾;张科伟;张克剑;杨波;刘伟 刊期: 2015年第06期

  • 锁定髓内针系统与锁定钢板治疗老年肱骨近端骨折的临床疗效

    肱骨近端骨折在全身骨折中占4%~9%,占关节周围骨折的13.5%〔1〕。对于无移位的肱骨近端骨折,保守治疗效果较好。 Neer〔2〕于1970年提出了肱骨近端骨折的四部分分类法,将肱骨上端4个组成部分即肱骨头、大结节、小结节、肱骨上端相互移位程度分6个基本类型,移位>1 cm或成角>45°,否则不能认为是移位骨块。对于移位明显的肱骨近端骨折需要进行手术治疗,常用治疗方法包括肱骨近端锁定髓内针、锁定钢板内固定及人工肱骨头置换术等。老年患者多合并其他系统疾病,对围术期的整体诊疗提出了更高的要求,因此选择一种创伤小、操作简便、固定牢固的手术固定系统显得尤为重要。笔者对老年肱骨近端二部分骨折患者分别应用锁定型钢板或锁定型髓内针进行固定,随访患者的肩关节功能恢复情况,对比两种内固定物术后的疗效并总结各自的优缺点。

    作者:李雪飞;王林祥;王铁军;周修五;秦大明 刊期: 2015年第06期

  • 老年糖尿病患者脂肪餐后血管内皮活性因子的动态变化及其与血脂的关系

    目的:探讨在脂肪餐试验后,老年糖尿病患者血管内皮活性因子的变化以及其与血脂的关系。方法2型糖尿病老年患者62例作为研究组,同时选取老年健康者50例作为对照组,两组分别进行6 h脂肪餐负荷试验,测定血清一氧化氮(N0)、内皮素(ET)-1等指标。结果研究组脂肪餐后0、2、4、6 h甘油三酯(TG)均明显高于对照组(P<0.05);研究组脂肪餐后0、2、4、6 h NO均明显低于对照组(P<0.05),而 ET-1水平高于对照组(P<0.05);研究组脂肪餐后0、4 h 纤维溶解酶原激活物抑制剂(PAI)-1水平明显高于对照组(P<0.05),而组织型纤维溶解酶原激活物(t-PA)明显低于对照组(P<0.05);研究组TG与NO、t-PA呈负相关(P<0.05),而与ET-1、PAI-1呈正相关(P<0.05)。结论老年糖尿病患者血脂异常可加重血管内皮活性因子平衡失调,使NO和t-PA明显降低,而ET-1和PAI-1显著升高。

    作者:李骏;麦高阳;李有佳;唐景华 刊期: 2015年第06期

  • 自体骨髓间充质干细胞动脉和静脉移植治疗急性脑梗死的疗效对比

    目的:探讨系统评价自体骨髓间充质干细胞( BMSCs)动脉移植治疗急性脑梗死( ACI)的疗效和安全性。方法将脑梗死患者112例随机分为干细胞动脉移植组和静脉移植组各56例。两组BMSCs均取自患者本人。动脉组行介入移植术,将 BMSCs超选注入脑病变供血动脉。静脉组将BMSCs静脉回输入体内。两组于治疗前、治疗后1个月、3个月监测美国国立卫生医院神经功能缺损(NIHSS)评分。结果动脉移植组治疗后1个月、3个月NIHSS评分显著低于静脉移植组( P<0.05)。两组均无不良反应发生。结论 BMSCs动脉移植和静脉移植治疗脑梗死疗效均显著,安全,动脉移植获益更大。

    作者:王旭;张志彬;杨宏;贾芙蓉;张丽艳;荣继平 刊期: 2015年第06期

  • 阿托伐他汀钙治疗2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化的系统评价

    目的:评价阿托伐他汀钙治疗2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化的有效性和安全性。方法采用计算机检索中国知网、中国维普科技期刊数据库及万方数据库,检索发表的有关阿托伐他汀钙联合常规降血糖药物治疗2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化的临床随机对照试验,检索的时间范围为建库时间至2014年8月,将符合纳入标准的文献进行meta分析。结果在治疗2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化方面应用阿托伐他汀钙联合常规降血糖药物的疗效明显优于单用常规降血糖药物( P<0.05),不良反应发生率与单用常规降血糖药比较无显著差别( P>0.05)。结论常规降血糖药物联合阿托伐他汀钙治疗2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化安全、有效,但由于纳入文献质量限制,上述结论仍需进一步设计严谨的大样本随机对照试验加以验证。

    作者:胡荣芳;宫立程;吴金义;张涛 刊期: 2015年第06期

  • 抗戾解毒汤体内抑制小鼠高致病性禽流感病毒 H5N1增殖

    目的:探讨抗戾解毒汤体内抑制高致病性禽流感病毒H5 N1增殖的效果。方法小鼠麻醉后使用高致病性禽流感病毒 H5 N1的鼠适应株滴鼻以感染,感染后120 min内,实验组给予抗戾解毒汤灌胃,奥司他韦组给予奥司他韦溶液腹腔注射,对照组给予PBS缓冲液灌胃,之后观察体重变化和死亡率,并通过实时PCR方法检测肺部病毒负载水平。结果实验组存活率(80%)较奥司他韦组(53.3%)和对照组(3.3%)显著提高(P<0.01),实验组体重下降也低于其他两组;实验组肺部病毒负载水平较对照组显著降低(P<0.01),和奥司他韦组无明显差异(P>0.05)。结论抗戾解毒汤对感染H5 N1病毒的小鼠的病毒增殖抑制作用明显,且保护作用强,可以作为流感病毒的备选或者辅助药物。

    作者:李佩琼;章钧;曾军;王芳;田琪 刊期: 2015年第06期

  • 白细胞介素18基因工程表达方法

    目的:探讨人白细胞介素(IL)-18基因工程表达方法。方法复苏含有pGEX-IL-18重组体质粒的 E.coli JM109,并进行增菌培养;利用质粒提取试剂盒提取pGEX-IL-18重组体质粒,通过琼脂糖凝胶电泳、基因片段测序、基因库比对等技术鉴定 IL-18基因序列;将提取得到的pGEX-IL-18重组体质粒转化到DH5α,制成高效表达的IL-18原核表达系统。结果含有pGEX-IL-18重组体质粒的E.coli JM109增菌培养后提取质粒,酶切电泳与Marker比对,证实质粒大小2.7 kb;经测序并利用基因库比对证实,所制备的 DNA 片段符合 IL-18基因序列。将 pGEX-IL-18转染DH5α细菌内,并经过蓝白筛选系统进行筛选,证实转染成功。结论经过系统的实验研究,成功建立了IL-18的基因工程表达系统。 IL-18具有重要的生物学功能,在后续的科研工作中将对IL-18的应用价值进行系统研究。

    作者:乔友军;汪欣;高杰;王宝;贾春祎 刊期: 2015年第06期

  • 冷冻球囊消融在房颤治疗中的优越性

    冷冻球囊导管消融是治疗房颤的一项新技术,其原理是通过液态制冷剂的吸热蒸发,带走组织的热量,在球囊接触处进行消融,使得目标消融部位温度降低,病变的心肌细胞遭到破坏,阻止异常电信号的传递,从而达到预防和治疗心房颤动( AF)的目的。与传统的射频消融技术相比,不需要借助三维标测系统,冷冻能量形成的疤痕有保持内膜面完整性、连续性及纤维化边界清晰等特点。冷冻消融可保持细胞的连续性和骨架结构的完整性,且消融过程中对内皮组织的损伤较轻微,从而引起的血栓风险、肺静脉狭窄、疼痛、心肌穿孔和心房-食管瘘等严重并发症出现较传统射频消融较少。

    作者:刘展睿;夏禹华;李亚琳;高丽华;胡庆鹰;王智慧 刊期: 2015年第06期

  • 不同类型老年冠心病患者外周血单核细胞程序性死亡因子配体2的表达及与血清超敏C反应蛋白、白细胞介素6的相关性

    目的:探讨不同类型老年冠心病(CHD)患者外周血单核细胞程序性死亡因子配体(PD-L)2的表达情况及其与血清高敏 C 反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素(IL)-6等炎性因子的联系。方法老年CHD患者112例,其中急性心肌梗死(AMI)患者34例,不稳定型心绞痛(UAP)患者41例,稳定型心绞痛( SAP)患者37例,同时选取体检的健康人33名作为对照组,检测各组PD-L2、hs-CRP、IL-6以及 IL-8表达水平。结果 AMI组PD-L2蛋白表达水平明显高于其他组,而对照组低;AMI组血清 hs-CRP、IL-6和 IL-8水平明显高于其他组(P<0.05);SAP组和对照组血清 hs-CRP、IL-6和IL-8差异无统计学意义( P>0.05);PD-L2表达水平与 hs-CRP、IL-6表达水平呈正相关( P<0.05) ,而与 IL-8表达水平无相关性( P>0.05)。结论老年CHD患者外周血单核细胞PD-L2表达水平明显升高,可能促进了血清hs-CRP、IL-6的分泌。

    作者:于靖;曹绪芬;赵荣诚;郑晔;颜利求;王佳旺 刊期: 2015年第06期

  • 多元化健康教育对老年骨质疏松骨折患者生活质量的影响

    目的:探讨多元化健康教育对老年骨质疏松( OP)骨折患者生活质量的影响。方法将河北省石家庄市某三甲医院2013年1月至2014年7月收治的168例老年OP骨折患者,随机分为常规健康教育组和多元化健康教育组各84例。常规健康教育组给予循证支持《骨质疏松健康知识手册》;多元化健康教育组在常规健康教育组的基础上,每2 w给予包括OP健康知识教育、饮食护理、运动管理、用药指导、综合康复指导、心理疏导等多元化健康教育,干预时间共3个月。对比两组干预后康复总有效率、二次骨折率、生活质量、OP知识、健康信念及自我效能水平差异。结果两组的康复总有效率、二次骨折率比较具有统计学意义( P<0.01);干预前两组间各量表评分无统计学差异( P>0.05),干预后两组生活质量、OP知识、健康信念及自我效能水平评分均显著高于干预前,且多元化健康教育组显著高于常规健康教育组(均 P<0.01)。结论多元化健康教育能有效提高老年OP骨折患者的临床疗效,降低再次骨折率,显著改善其生活质量,从而提高老年OP骨折患者的生活满意度。

    作者:马京华;薛娜娜;纪敬敏;陈金金;王慧 刊期: 2015年第06期

  • 姜黄素对放疗致Lewis肺癌荷瘤小鼠机体损伤的保护作用

    目的:观察姜黄素对Lewis肺癌荷瘤小鼠放疗致机体损伤的保护作用。方法将Lewis肺癌细胞接种于 C57BL/6小鼠皮下建立小鼠Lewis肺癌体内移植肿瘤模型,成瘤后采用姜黄素联合放疗治疗小鼠,末次给药后称取小鼠体重,测量肿瘤重量及体积,测定各组小鼠外周血白细胞数量、骨髓有核细胞计数、脾及胸腺指数,同时测定荷瘤小鼠T淋巴细胞转化率、NK细胞杀伤活性。结果姜黄素与放疗联合应用可减少放疗引起的体重减轻、食欲下降,对放疗引起的白细胞水平降低及骨髓有核细胞减少有显著的升高作用,且对放疗引起的脾脏及胸腺指数下降有显著改善作用,亦可明显提高荷瘤小鼠的T淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性。结论姜黄素能保护放疗对机体的损害,与放疗联合可协同治疗肿瘤。

    作者:钱程;施丹;武宁;程光惠 刊期: 2015年第06期

  • 老年心房颤动患者死亡的相关因素

    目的:探讨老年心房颤动患者死亡的相关因素。方法选取184例心房颤动患者,搜集患者的性别、年龄、体质指数( BMI)、动脉血压、心率及既往史等资料;记录患者药物及手术治疗情况。并对所有患者进行为期1年的电话随访或者门诊随访,对患者的终点事件及房颤的治疗方法进行记录,根据患者是否全因死亡将其分为死亡组及生存组,对比两组患者的临床一般资料以及治疗情况,分析其死亡的相关因素。结果184例患者中,有74例患者全因死亡,死亡率高达40.22%。两组患者在年龄、房颤类型以及心力衰竭、慢性阻塞性肺疾病、脑血管意外等并发症方面差异显著( P<0.05)。两组患者在利尿剂、β受体阻滞剂、血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂、地高辛、抗心律失常药、阿司匹林、华法林、其他抗凝药的应用方面相比较差异显著( P<0.05)。经多因素Logistic回归分析发现,年龄、房颤类型、心力衰竭、慢性阻塞性肺疾病、脑血管意外等基础性疾病、未用血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂、未用阿司匹林、未用华法林等成为影响老年房颤患者死亡的独立危险因素( P<0.05)。结论年龄、房颤类型以及心力衰竭、慢性阻塞性肺疾病、脑血管意外等基础性疾病、未用血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂、未用阿司匹林、未用华法林等均为影响老年房颤患者死亡的独立危险因素。

    作者:云电 刊期: 2015年第06期

  • 医护合作健康教育模式在帕金森病患者中的应用

    目的:了解医护合作健康教育模式对帕金森病( PD)患者生活质量的影响。方法将116例PD患者按就诊先后随机分为观察组和对照组,每组58例,两组患者按医嘱常规药物治疗,对照组采用传统的健康教育模式,观察组患者住院期间采用医护合作健康教育的模式对患者及家庭照料者实施健康教育,出院后每2周到医院复诊一次,每2个月参加一次医、护、康复师共同组织的PD病友会。所有患者在入院时、干预6个月及12个月均进行汉密尔顿抑郁量表( HAMD)评分、服药依从性评定,干预结束时进行PD不安全事件评定。结果两组患者在入组时HAMD 评分、服药依从性评定差异无统计学意义(P>0.05),干预6、12个月后,观察组患者服药依从性明显优于对照组,HAMD评分明显低于对照组,运动功能改善,并发症发生率明显低于对照组( P<0.05)。结论医护合作健康教育能够改善 PD 患者的抑郁情绪,提高服药依从性,减少并发症,改善运动功能,提高生活质量。

    作者:王培芝;代桂宁;刘丽;王彦永 刊期: 2015年第06期

中国老年学杂志

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主管:中国老年学学会

主办:中国老年学学会 吉林省卫生厅