程钢；秦媛媛；程迪；杨磊；沈夕坤；黄玉宇；张慧灵；顾振纶
目的 观察17β-雌二醇对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的影响及其与雌激素受体(estrogen receptor,ER)的关系.方法 酶机械法分离豚鼠单个心室肌细胞;膜片钳全细胞模式观察17β-雌二醇对单个心室肌细胞L型钙电流(ICa-L)的影响,并通过加入雌激素受体阻断剂tamoxifen(TAM)研究该作用与雌激素受体的关系.结果 17β-雌二醇(10-9~10-7mol·L-1)使ICa-L峰电流密度值从(-3.5±0.6) pA·pF-1分别减少至(-2.4±0.3) pA·pF-1、(-1.9±0.3) pA·pF-1和(-1.1±0.3) pA·pF-1(与对照组比较,均为P＜0.01,n=5).TAM(10-7 mol·L-1)预处理后,17β-雌二醇(10-7 mol·L-1)使ICa-L峰电流密度值从(-3.5±0.6) pA·pF-1减少到(-1.0±0.2) pA·pF-1(与对照组比较,P＜0.01,n=5),与未应用TAM(10-7 mol·L-1)预处理时比较,ICa-L峰电流密度值无变化(P＞0.05,n=5).结论 17β-雌二醇抑制豚鼠心室肌细胞ICa-L的作用呈浓度依赖性,雌激素受体阻断剂TAM不能阻断17β-雌二醇对豚鼠心室肌细胞ICa-L的抑制作用,提示17β-雌二醇对ICa-L的抑制作用可能与ER作用无关.
作者：赵金生；李刚；高青华；郭凤；赵美眯；刘书源；朱彤；郝丽英 刊期： 2013年第03期
目的 研究丘脑室旁核(PVT)和下丘脑外侧区(LH)在环境线索(CC)或条件性线索(CS)诱导的大鼠海洛因复吸中的作用.方法 SD大鼠进行生理盐水(对照组)或海洛因的自身给药训练,随后自然戒断,海洛因戒断大鼠随机分成模型组、CC组和CC+CS组;在戒断d 14,对照组和CC组均以环境线索诱导、CC+CS组以环境线索联合条件性线索诱导测定海洛因觅药行为的恢复,模型组不测定;利用免疫组化法检测所有组别大鼠PVT和LH脑区c-Fos蛋白的表达.结果 环境线索或条件性线索均能够诱导大鼠海洛因觅药行为的恢复;环境线索诱导大鼠海洛因觅药恢复时PVT脑区c-Fos免疫阳性表达明显增加(P<0.01);而LH脑区c-Fos免疫阳性表达在环境线索或条件性线索诱导大鼠海洛因觅药恢复时均明显增加(P<0.01).结论 PVT参与环境线索诱导的大鼠海洛因复吸过程,而LH同时参与环境线索或条件性线索诱导的大鼠海洛因复吸.
作者：朱华强；刘惠芬；陈为升；陈俊丰；张茵；徐泽民；周文华 刊期： 2013年第03期
目的 研究TRB3介导的促肿瘤作用与TGF-β/Smad3信号通路的关系.方法 利用PCR扩增具有组成活性的Smad3突变体Smad3D,并将其构建至pcDNA3.1/Myc-His(-)B真核表达载体中.在稳定沉默TRB3的HepG2细胞中转染Smad3D-Myc表达质粒,利用G418筛选稳定表达Smad3D-Myc的细胞株.利用双荧光素酶报告基因系统检测3TP-lux转录活性.利用Transwell实验观察细胞侵袭能力变化.结果 成功构建Smad3D突变体真核表达质粒.成功建立稳定沉默TRB3,同时稳定表达Smad3D突变体的HepG2细胞株.过表达Smad3D能明显增强3TP-lux转录活性,并在一定程度上逆转沉默TRB3后对肿瘤侵袭的抑制作用.结论 TGF-β/Smad3信号通路参与了TRB3促进肿瘤的作用.
作者：花芳；余娇娇；孙巍；胡卓伟 刊期： 2013年第03期
肺癌是当今恶性肿瘤死亡率高的癌症[1].早期肺癌主要以手术治疗为主,并辅以放疗化疗.但是化疗药物毒副作用大,且抗药性在一些肿瘤靶向性药物中逐渐显现.因此,亟需新的抗肿瘤药物[2].天然产物是小分子新药的主要来源.我们在对天然小分子化合物的筛选过程中发现D261(从固体发酵物中提取,纯度大于95%)具有潜在的抗肿瘤活性,且对非小细胞肺癌的抑制作用显著.因此,本文对D261影响非小细胞肺癌NCI-H460及其相关机制作了初步探讨.
作者：王萍；宋玉仙；窦静杰；侯亚义 刊期： 2013年第03期
目的 探讨Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)2和TLR4在糖尿病大鼠肾脏巨噬细胞的表达水平及tacrolimus对其的调节作用.方法 将40只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、tacrolimus(0.5、1.0 mg·kg-1)给药组,通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型,4周后测大鼠血糖、相对肾质量、尿白蛋白排泄率(UAER),应用免疫组化单染及双染方法检测肾组织ED-1+细胞、NF-κB-p-p65+细胞及ED-1+TLR2+细胞、ED-1+TLR4+细胞的表达.结果 tacrolimus 1.0 mg·kg-1给药组大鼠相对肾质量明显低于模型组(P<0.05),tacrolimus(0.5、1.0 mg·kg-1)给药组大鼠UAER较模型组明显减少(P<0.05或P<0.01).免疫组化显示:模型组大鼠肾组织ED-1+、ED-1+TLR2+、ED-1+TLR4+及NF-κB-p-p65+细胞数明显高于对照组(P<0.01),tacrolimus 0.5与1.0 mg·kg-1给药组ED-1+细胞数与模型组比较无差异,而ED-1+TLR2+、ED-1+TLR4+及NF-κB-p-p65+细胞数则明显低于模型组(P<0.05).结论 糖尿病大鼠肾脏巨噬细胞TLR2和TLR4的过度表达与巨噬细胞的活化及由此引发的炎症反应有关,tacrolimus可通过直接或间接作用下调肾脏巨噬细胞TLR2与TLR4表达,从而抑制与TLR-NF-κB信号转导及调控途径有关的炎症反应.
作者：陈姗姗；齐向明；张炜；吴永贵 刊期： 2013年第03期
目的 寻找与奇果菌素促进宫颈癌HeLa细胞凋亡相关的蛋白质.方法 随机将宫颈癌HeLa细胞分成两组,一组为对照组,另一组以奇果菌素(剂量为半数抑制率)处理24 h.提取蛋白质做双向电泳(2-dimensional electrophoresis,2-DE),基质辅助激光解吸/离子化飞行时间质谱仪(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectroscopy,MALDI-TOF-MS)鉴定2组细胞间有明显差异表达的蛋白质.结果 奇果菌素作用于HeLa细胞的蛋白质组,质谱鉴定出6种蛋白质表达差异有显著性,分别是:塌陷反应介导蛋白1(CRMP-1)、转胶蛋白2(Transgelin-2)、磷酸化应激诱导蛋白1(StIP1)、腺苷酸环化酶(ATPase)、磷酸甘油酸变位酶1(PGM-1)和原肌球蛋白4(TPM-4);其中StIP1表达下调,其他蛋白均上调.结论 奇果菌素能够通过诱导宫颈癌HeLa细胞发生凋亡而发挥抑制HeLa细胞生长作用,奇果菌素可能通过上调或下调上述蛋白质的表达参与促进宫颈癌HeLa细胞的凋亡.
作者：罗永红；曾海涛；胡红珍；倪观太 刊期： 2013年第03期
目的 研究线粒体通路和死亡受体通路在中华眼镜蛇毒组分(naja naja actra venom component,NNAVC)诱导KG1a 细胞凋亡过程中的作用.方法 以人急性髓系白血病细胞株KG1a细胞为研究对象,采用Annexin V-FITC/PI荧光染色法进行凋亡细胞的形态学观察,流式细胞仪检测细胞凋亡率,分光光度法检测Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3的活性,ELISA法检测胞质内细胞色素C的表达水平,流式细胞仪分析TRAIL死亡受体(DR4、DR5)和诱骗受体(DcR1、DcR2)的改变.结果 NNAVC作用后,荧光显微镜下可见明显的凋亡细胞,细胞凋亡率随药物作用浓度的增加而升高;Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3蛋白被激活,胞质内细胞色素C的表达明显增加;流式细胞仪检测结果显示,NNAVC具有降低死亡受体DR4和诱骗受体DcR1的表达率,而提高DR5和DcR2的表达水平的作用.结论 线粒体凋亡通路和死亡受体通路均参与NNAVC诱导KG1a细胞凋亡的过程,这可能是NNAVC发挥抗白血病作用的机制之一.
作者：贺艳杰；李玉华；卢会芳；黄宇贤；黄睿；郭坤元 刊期： 2013年第03期
目的 探讨苯并咪唑衍生物BM935抑制人T细胞增殖的作用机制.方法 流式细胞术检测细胞增殖、CD25表达及细胞周期.ELISA检测细胞培养上清IL-2含量.结果 BM935能抑制PHA或anti-CD3/CD28活化的T细胞增殖及混合淋巴细胞反应.BM935不抑制anti-CD3/CD28活化的T细胞产生IL-2和表达CD25,但将细胞周期阻滞在G0/G1期.结论 BM935通过阻滞细胞周期进程抑制T细胞增殖.BM935可以作为一种先导化合物用于开发新型免疫抑制剂.
作者：刘进；余小平；舒茂；罗兴燕；郭波；刘阳；林治华；邹强 刊期： 2013年第03期
目的 探讨丹参素与川芎嗪在心血管方面的协同效应,为其复方制剂提供科学依据.方法 通过大鼠颈静脉插管滴注受试药(丹参素、川芎嗪、丹参素+川芎嗪),观察对在体大鼠平均动脉压(MAP)、心率(HR)的影响;采用langendorff离体心脏灌流技术对大鼠心脏灌流给予受试药,labchart生物信号采集仪器记录观察各受试药对左心室收缩压(LVSP)、左心室发展压(LVDP)、心率(HR)、左心室内压大上升速率(+dp/dtmax)、左心室内压大下降速率(-dp/dtmax)以及冠脉流量(CF)等心功能指标的影响.结果 在体实验中,丹参素组平均动脉压降低约7%,川芎嗪组降低约12%,而丹参素+川芎嗪组降低约26%,但各组均对大鼠心率影响不明显.在离体心脏灌流实验中,丹参素+川芎嗪组与空白对照组、丹参素组和川芎嗪组相比,具有较强的负性肌力作用,能明显降低LVSP、LVDP、+dp/dtmax和HR,且升高-dp/dtmax和CF,其差异具有统计学意义(P<0.05).结论 丹参素、川芎嗪联合应用对心血管的效应有协同作用.
作者：黄文东；杨永飞；陈建文；朱邦豪 刊期： 2013年第03期
目的 探讨炎症因子白介素-1β(IL-1β)是否通过α1,3-岩藻糖基转移酶Ⅶ(FucT-Ⅶ)对血管内皮细胞中功能蛋白糖基化修饰调控单核细胞与内皮细胞的黏附作用,为揭示炎症因子损伤血管内皮细胞的分子机制奠定基础.方法 建立不同浓度IL-1β损伤EA.hy926血管内皮细胞的模型,通过与荧光标记的THP-1单核细胞共培养,观察细胞间的黏附作用;采用Real time-PCR及Western blot检测EA.hy926细胞中FucT-Ⅶ差异表达;用蛋白免疫印迹法检测细胞内sLex糖支链蛋白差异表达;运用siRNA干扰FucT-Ⅶ基因,观察细胞间黏附的变化.结果 IL-1β可以促进内皮细胞与单核细胞的黏附,同时内皮细胞中FucT-Ⅶ表达上调;sLex糖支链蛋白表达也上调.当干扰内皮细胞中FucT-Ⅶ基因后,细胞间的黏附能力明显下降,且sLex糖支链蛋白表达下调.结论 IL-1β可能通过调控EA.hy926细胞中FucT-Ⅶ的糖基化修饰作用增加其对单核细胞的黏附能力,这可能是炎症早期发生时影响血管内皮功能新的重要分子机制之一.
作者：琚娜娜；吴明军；赵德璋；屈茹楠；王应雄；杨竹；于超 刊期： 2013年第03期
目的 观察瓜子金皂苷己(polygalasaponin F,PGSF)对氧糖剥夺/复供(oxygen-glucose deprivation and reperfusion,OGD/R) 所诱导的PC12细胞凋亡的作用及其机制.方法 以连二亚硫酸钠合并无糖Earle's液造成氧糖剥夺,继而恢复为完全培养基以建立体外OGD/R模型,以Hoechst33342 / PI双染及流式细胞术观察细胞受损和凋亡情况;以JC-1荧光染色法测定细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP);以Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达.结果 PGSF可明显改善细胞形态并降低细胞受损和凋亡百分率,抑制MMP水平的降低,增加Bcl-2/Bax表达比值.结论 PGSF对OGD/R诱导的PC12细胞凋亡具有明显抑制作用,机制与其调节Bcl-2和Bax的表达及稳定MMP有关.
作者：石瑞丽；胡金凤；孔令雷；牛非；吴苗苗；何鑫；李培锋；陈乃宏 刊期： 2013年第03期
胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)在脑内广泛分布,通过其受体复合物介导激活细胞内信号转导通路,发挥维持神经元功能和损伤修复等作用.胶质细胞源性神经营养因子家族受体α (GDNF family receptor α,GFRα)和RET是其受体复合物的主要成员.GDNF和其受体复合物可能参与多种脑部病变的病理生理过程,是潜在的治疗靶点之一.
作者：陈琳；戴建国；王中立；张绘宇；黄玉芳；赵玉男 刊期： 2013年第03期
利多卡因是临床常用的中效局部麻醉药,过量或误入血管可导致毒性反应,甚至引起惊厥.而NMDA受体拮抗药可显著减轻惊厥发作的程度,也降低了惊厥发生率和死亡率[1].氯胺酮麻醉效应与拮抗NMDA受体有关[6],但在惊厥反应中的作用仍尚无定论[2].丙泊酚作为静脉麻醉药,有实验也表明,其能有效控制局麻药毒性反应引起的惊厥发作.
作者：申磊；李贺；邢欢欢；何胤琰；龚海鹏；沈飞斌；陈旋；顾春淼；李伟；蔡军；武玉清 刊期： 2013年第03期
目的 左金丸是黄连和吴茱萸按6:1配伍组成,临床常用于胃溃疡的治疗.该文主要探讨左金丸总生物碱(ZJPTA)对束缚水浸应激性胃溃疡模型大鼠神经体液调节的影响.方法 采用束缚水浸法复制大鼠胃溃疡模型,测定ZJPTA对大鼠胃溃疡指数,胃黏膜TNF-α含量的影响.测定大鼠海马、皮质、下丘脑、纹状体等脑区中单胺类神经递质5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)及其代谢产物5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量以及肾上腺组织中NE和肾上腺素(E)含量的影响.结果 预先口服ZJPTA可明显降低应激性胃溃疡大鼠的溃疡指数,明显降低胃黏膜中TNF-α的含量.各剂量ZJPTA可不同程度降低大鼠脑组织单胺类神经递质的浓度,与模型组比较差异具有显著性(P<0.05或P<0.01).模型组肾上腺组织NE和E含量明显升高,ZJPTA能明显抑制其升高(P<0.05或P<0.01).结论 ZJPTA可通过神经体液调节作用,对抗应激性胃溃疡损伤.
作者：林科名；丁世兰；王强松；崔元璐 刊期： 2013年第03期
血中游离DNA指血中游离于细胞之外的一类DNA,简称循环核酸,于1947年由Mandel和Metais发现.肿瘤患者外周血DNA水平高于正常人且血中游离DNA具有肿瘤细胞DNA的特征,如肿瘤相关基因的突变、微卫星改变、甲基化异常和线粒体DNA突变等.随着肿瘤分子生物学的深入研究,血中游离DNA定性定量分析已开始应用于肿瘤的早期诊断、个体化治疗和预后判断等.血中游离DNA结合各类分子生物学检测技术,有望成为具有一定敏感性及高特异性的临床诊断方法.此外,血中游离DNA还有可能成为非细胞形式的肿瘤转移的新途径.
作者：王庆琳；张荣；肖莉；王伟大；孙爱娟；李凯；顾振纶 刊期： 2013年第03期
间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是来源于中胚层的一类具有高度自我更新能力和多向分化潜能的非造血干细胞,具有很好的组织迁移能力和肿瘤靶向性.MSCs用于抗肿瘤治疗已经开展了广泛的研究,MSCs可以作为细胞载体发挥抗肿瘤作用,同时通过促肿瘤血管生成、免疫抑制、分化为肿瘤相关成纤维细胞等方式促进肿瘤的恶性行为.该文对近年来该领域的研究进展进行简要综述.
作者：田超；江国荣；周梁；刘兆国；朱智杰；郑仕中；王爱云；陆茵 刊期： 2013年第03期
目的 建立和比较不同品系小鼠肥胖模型,并研究C57BL/6J小鼠肥胖形成的分子机制.方法 选用C57BL/6J、ICR和KM 3个品系♂小鼠,各品系小鼠随机分为正常对照和高脂模型组,分别在饲养4周与8周后测定小鼠体重、脂肪重量、Lee's指数;脂肪细胞形态学观察和横截面面积计量;酶法检测血脂和LPL活性,应用荧光实时定量PCR技术探讨模型形成分子机制.结果 C57BL/6J小鼠模型组体重、脂肪重量、Lee's指数、脂肪细胞横截面面积与对照组比较均明显升高,形成良好肥胖模型,而ICR和KM小鼠肥胖指标不如C57BL/6J 小鼠变化明显.机制研究表明,C57BL/6J小鼠造模后血清LPL活性升高,肝脏PPARα、脂肪组织PPARγ和DGAT表达上调,脂肪组织HSL、ATGL和TGH表达下调,这些酶、受体的表达变化是形成肥胖的重要机制.结论 C57BL/6J小鼠经高脂饲料诱导4周后可形成良好肥胖模型,PPARα、PPARγ、LPL、DGAT、HSL、ATGL和TGH既是肥胖形成的主要机制,也是减肥药物作用靶点判断的生物标志物.
作者：刘芳；高南南；杨润梅；冀敏；初欣欣；康卓颖 刊期： 2013年第03期
目的 探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用及其抑制凋亡的作用机制.方法 采用大鼠永久性大脑中动脉阻塞(permanent middle cerebral artery occlusion,pMCAO)方法,建立脑缺血模型,大鼠pMCAO术后通过腹腔给予OMT(30、60、120 mg·kg-1),以脑梗死体积、脑含水量和行为学症状等指标评价OMT对脑缺血的神经保护作用.通过HE染色方法观察OMT对缺血皮层神经细胞的形态变化以及数目的 影响;应用Western blot法检测OMT对缺血皮层Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白水平的表达.结果 在大鼠局灶性脑缺血体内模型中,OMT(30、60、120 mg·kg-1)可明显减小脑梗死体积、脑含水量和改善行为学体征(P<0.01).HE染色结果提示:OMT可明显增加神经细胞的存活率改善神经细胞的形态.Western blot 结果显示:与假手术组相比,大鼠pMCAO后3、6、12、24 h,缺血皮层Caspase-3、Bax蛋白的表达水平在3 h开始上升,24 h达到峰值;而Bcl-2的表达水平在3h开始下降,24 h降到低.给予OMT后可下调pMCAO大鼠缺血皮层中Caspase-3、Bax蛋白,上调Bcl-2蛋白.结论 氧化苦参碱对脑缺血损伤有直接的神经保护作用,其机制可能通过上调Bcl-2及下调Bax 、Caspase-3蛋白水平抑制凋亡发生.
作者：程钢；秦媛媛；程迪；杨磊；沈夕坤；黄玉宇；张慧灵；顾振纶 刊期： 2013年第03期
目的 观察黄芩素(黄芩苷元,baicalein,BAE)对TGF-β1体外诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的影响.方法 体外培养人胚胎肺成纤维细胞(WI-38),TGF-β1诱导后,通过Western blot 检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)相关蛋白表达的变化,同时采用免疫组化法观察细胞形态变化.TGF-β1体外诱导肺成纤维细胞WI-38 成肌成纤维细胞模型,再给予不同剂量的黄芩素,检测转化过程中相关蛋白α-SMA、collagen 1、Smad 2、p-Smad 2 的表达变化.结果 与模型组相比,黄芩素2 000 nmol·L-1～125 nmol·L-1对TGF-β1体外诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化有抑制作用.黄芩素组以剂量依赖性下调α-SMA(P<0.01)、collagen 1(P<0.01)、Smad 2(P<0.05)、p-Smad 2(P<0.05)蛋白的表达.结论 黄芩素对TGF-β1体外诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化过程中有一定的抑制作用,该作用与下调α-SMA,抑制细胞内胶原合成及干预TGF-β/Smads 信号通路有关.
作者：董丽霞；蒋小岗；李梦姣；毛新妍；侯燕；顾振纶 刊期： 2013年第03期
随着表观遗传学研究的不断深入,表观遗传学药物的研究取得了巨大进展.目前已有研究并批准上市的表观遗传学药物主要针对DNA异常甲基化和组蛋白的异常修饰.潜在的药物有DNA甲基转移酶抑制剂、赖氨酸去甲基化酶抑制剂、蛋白质甲基转移酶抑制剂、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、组蛋白乙酰基转移酶抑制剂、含溴结构域蛋白抑制剂及甲基化组蛋白结合蛋白的抑制剂等.该文综述了近年来表观遗传学治疗在药理学上的进展,以期为疾病防治和基础研究提供一些新的思路.
作者：张玲；盛树力；秦川 刊期： 2013年第03期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
