陈姣；楚世峰；陈乃宏
目的 观察羟氯喹(hydroxychloroquine,HCQ)对人乳腺癌MDA-MB-435细胞增殖及凋亡的影响.方法 采用 MTT法及克隆形成抑制实验观察HCQ对人乳腺癌MDA-MB-435细胞的增殖抑制作用;采用倒置显微镜观察HCQ处理后细胞形态学变化;采用Hoechst 33258荧光染色检测HCQ对人乳腺癌MDA-MB-435细胞凋亡的作用;采用PI 单染流式细胞术检测细胞晚期凋亡水平;采用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)观察HCQ处理人乳腺癌MDA-MB-435细胞后线粒体膜电位的转变.结果 不同浓度的HCQ作用于乳腺癌MDA-MB-435细胞24、48、72 h后,均能明显抑制细胞增殖;在倒置显微镜下可观察到HCQ作用于乳腺癌MDA-MB-435细胞后细胞逐渐萎缩变圆,细胞密度变小,失去正常细胞形态;HCQ能明显抑制MDA-MB-435细胞克隆形成;Hoechst 33258 荧光染色结果显示,HCQ可以诱导乳腺癌MDA-MB-435细胞凋亡;PI结果显示,20、40、60 μmol·L-1 HCQ处理细胞24 h后,晚期凋亡率分别为7.1%、15.9%、35.3%(P<0.05);HCQ作用于乳腺癌MDA-MB-435后JC-1从红色荧光到绿色荧光转变(P<0.05).结论 HCQ可以明显抑制人乳腺癌MDA-MB-435细胞增殖及诱导凋亡.
作者：张倩雯；张媛媛；晁振华；张配；蒋琛琛；刘浩；蒋志文 刊期： 2013年第11期
目的 探寻从豚鼠心肌组织中提取纯化全长的心肌Cav1.2钙通道蛋白的实验方法.方法 采用组织匀浆、超高速离心的方法获得溶解状态的Cav1.2钙通道蛋白,使用亲和层析的方法对钙通道蛋白进行进一步的纯化,再应用Western blot技术使用不同的Cav1.2钙通道抗体对所制备的心肌Cav1.2钙通道蛋白进行鉴定.结果 比较CHAPS和Triton X-100的增溶效果,发现去污剂CHAPS能够更好地促进钙通道蛋白的溶解,且浓度为2%CHAPS是能够使钙通道蛋白溶解且不损害钙通道结构的适浓度;同时,蛋白电泳和免疫印迹结果显示,提取制备所得的蛋白为心肌Cav1.2钙通道蛋白.结论 亲和层析方法提取了纯度较高的全长的心肌Cav1.2钙通道蛋白,为系统研究心肌Cav1.2钙通道奠定了坚实的基础.
作者：封瑞；于丽凤；胡慧媛；郭凤；龟山正树；郝丽英 刊期： 2013年第11期
目的 研究九龙藤总黄酮(Bauhinia championii(Benth)Benth flavones,BCF)对急性心肌缺血的作用及机制.方法 ♂ SD大鼠随机分为生理盐水、模型、阳性药维拉帕米、BCF低、中、高剂量(60、120、240 mg·kg-1)共6组.除生理盐水组外,各组大鼠舌下静脉注射垂体后叶素(pituitrin,pit)造模,观察Ⅱ导联心电图ST段和血流动力学指标、心率(HR)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室内压大上升速率(+dp/dtmax)和左心室内压大下降速率(-dp/dtmax)的变化;紫外分光光度计法检测血清总抗氧化力(T-AOC)、组织Na+,K+-ATP酶、Ca2+,Mg2+-ATP酶活力;ELISA法检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白(cTnI)和肌红蛋白(MyoG)的含量.结果 与模型组相比,BCF能剂量依赖性地抑制注射pit后15 s、1 min心电图ST段抬高,减小HR、+dp/dtmax、-dp/dtmax降低和LVEDP升高的幅度,增加血清T-AOC,改善Na+,K+-ATP、Ca2+,Mg2+-ATP酶活力,减少心肌损伤标志物CK-MB、cTnI、MyoG的漏出(P<0.05或P<0.01).结论 BCF对pit所致大鼠急性心肌缺血有明显保护作用,其机制可能与改善缺血心肌舒缩功能、抗氧化、抑制钙超载、减轻心肌损伤有关.
作者：方瑜；孙瑶；简洁 刊期： 2013年第11期
抑郁症是一种情感障碍性疾病,临床上以兴趣缺乏、情绪低落、睡眠障碍等为主要病症表现,部分患者常伴有自杀倾向.目前研究的抑郁发病机制主要有:单胺假说、神经营养再生假说、神经内分泌假说、表观遗传学假说.近年来的研究发现糖皮质激素和其受体在抑郁的发病机制中起着重要的作用.糖皮质激素是肾上腺分泌的一种激素,在长期应激的作用下,HPA轴持续激活,导致糖皮质激素的持续分泌,引起神经内分泌系统紊乱,在抑郁的发病机制中有重要意义.该文主要针对糖皮质激素及其受体对抑郁发病相关机制的研究进展进行综述.
作者：陈姣；楚世峰；陈乃宏 刊期： 2013年第11期
山荆子[Malus baccata(Linn.)Borkh.],别名山丁子、林荆子、山定子等,是蔷薇科(Rosaceae)苹果属(Malus)多年生木本植物.主要分布于西伯利亚、俄罗斯、蒙古、中国、韩国、不丹、印度、尼泊尔和日本[1-2].在我国其主要分布于东北、华北及西南等地.我国的很多地区用山荆子叶煮茶用来减肥[3].研究表明,山荆子中含有丰富的植物化学成分,其主要的成分是多酚类化合物,并对其抗氧化活性进行了测定[4-5].Wei等[3]研究表明,山荆子叶醇提物能够抑制脂肪酸合酶的能力,具有一定的减肥效果.然而,山荆子叶提取物(MBE)保肝活性尚未见报道.本实验通过CCl4致小鼠急性肝损伤模型研究MBE的保肝活性.
作者：丁传波；赵婷；李永娟；董岭；陈大勇；张传奇；刘文丛；郑毅男 刊期： 2013年第11期
目的 观察荞麦花叶黄酮(FBFL)对2型糖尿病大鼠肝损伤和IRS-2、PI3K及NF-κB表达的影响,并探讨其可能机制.方法 用高脂饲料和链脲佐菌素建立大鼠2型糖尿病模型,以FBFL为干预因素,动态观察随机血糖(PBG)、空腹血糖(FBG)、空腹血胰岛素(FINS)、血ALT、AST,光镜和电镜观察肝脏病理改变,免疫组化和Western blot检测肝IRS-2和PI3K蛋白表达.ELISA法检测肝组织NF-κB含量.结果 与正常组比较,模型组大鼠血中PBG、FBG、FINS、HOMA-IR(胰岛素抵抗指数)、ALT、AST均明显升高(P<0.05,P<0.01),肝病理损伤明显,同时IRS-2、PI3K蛋白表达减少,NF-κB含量增加;FBFL治疗组能明显改善上述指标的变化,增加胰岛素敏感性,使肝组织损伤减轻和上调IRS-2、PI3K蛋白表达及减少NF-κB含量,且FBFL高剂量作用更明显.结论 FBFL对糖尿病肝损伤有抑制作用,其机制可能是通过降低血糖、改善胰岛素抵抗,上调IRS-2、PI3K蛋白表达及下调NF-κB蛋白表达等多途径实现的.
作者：韩淑英；姜妍；王志路；王建行；张博男；韩婷；闫文娜 刊期： 2013年第11期
miRNAs是一种内源性的非编码小分子RNA,长约18～25个核苷酸.能够通过碱基互补配对原则特异性地与一个或多个靶基因的mRNA结合,导致mRNA降解或者抑制其翻译过程,从而在转录后水平沉默靶基因,起到调控作用.Bai等发现外周神经系统存在很多miRNAs,外周炎性刺激可引起其中一些miRNAs的表达变化,推测在疼痛的发生机制中miRNAs可能发挥了重要的作用.因此,对miRNAs在疼痛中的调控作用进行研究,对镇痛药物研发及应用具有重要的意义.
作者：李桂霞；李春莉；吴春福 刊期： 2013年第11期
目的 观察磷酸二酯酶4(phosphodiesterase 4,PDE4)4种亚型(A、B、C和D)的siRNA对内毒素刺激前后小胶质细胞内cAMP的影响.方法 24孔板接种原代培养的小胶质细胞,收集细胞测定PDE4 4种亚型的蛋白含量.随机将细胞分为空白对照组、LPS组、单纯载体组、错配siRNA 组、PDE4A-siRNA组、PDE4B-siRNA组、PDE4C-siRNA组和PDE4D-siRNA组,空白对照组与LPS组细胞不进行转染;其余5组分别转染LipofectaminTM RNAiMAX、错配siRNA、PDE4A siRNA、PDE4B siRNA、PDE4C siRNA和PDE4D siRNA,48 h后收集各组细胞测定4种亚型mRNA及细胞内cAMP的表达水平;除空白对照组外,其余7组细胞在转染48 h后分别给予100 μg·L-1 LPS,刺激30 min后收集各组细胞测定细胞内cAMP的浓度.结果 PDE4 4种亚型蛋白均在小胶质细胞内表达;转染48 h后,PDE4A-siRNA、PDE4B-siRNA、PDE4C-siRNA和PDE4D-siRNA可分别明显抑制相应PDE4亚型mRNA 的表达(P<0.05),各组细胞内cAMP的含量无明显改变(P＞0.05);LPS 刺激后各组细胞内cAMP的含量均比空白对照组明显增高(P<0.05),与LPS组相比,仅PDE4B-siRNA组细胞内的cAMP含量明显升高(P<0.05).结论 PDE4B-siRNA可有效抑制PDE4B mRNA的表达并能明显升高LPS刺激后细胞内的cAMP含量.
作者：和晓韵；和底妍；张利东；刘健；刘清珍；李伟彦；嵇晴 刊期： 2013年第11期
目的 了解α干扰素(IFN-α)单独处理和拉米夫定联合IFN-α序贯处理对人肝胚瘤细胞株HepG2.2.15表达干扰素诱导跨膜蛋白(IFITM1、IFITM2、IFITM3)的影响,探讨拉米夫定与IFN-α序贯处理抗病毒机制.方法 以0～1 000 kU·L-1 IFN-α连续处理的HepG2.2.15细胞为α干扰素单独处理组,以20 μmol·L-1拉米夫定联合0～1 000 kU·L-1 IFN-α处理的HepG2.2.15细胞为序贯处理组;分别用免疫印迹法和Southern blot法检测不同组别细胞内干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1、IFITM2、IFITM3的表达和细胞内HBV复制水平,再将表达抗病毒蛋白IFITM1的真核表达质粒pEGFP-IFITM1转染入HepG2.2.15细胞,以ELISA和荧光定量PCR法分别分析细胞外HBV抗原分泌和HBV-DNA水平.结果 免疫印迹分析提示IFN-α单独处理和拉米夫定联合IFN-α序贯处理均能诱导HepG2.2.15细胞表达干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1、IFITM2、IFITM3,并且拉米夫定联合IFN-α序贯处理能够明显增强干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1的表达;Southern blot法分析表明IFN-α单独处理HepG2.2.15细胞不能有效抑制细胞内HBV复制,而拉米夫定联合IFN-α序贯处理能够完全抑制细胞内HBV复制.进一步研究发现,拉米夫定联合IFN-α序贯处理诱导的干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1具有一定抗HBV活性.结论 在体外细胞模型中,IFN-α能够诱导HepG2.2.15细胞表达干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1、IFITM2、IFITM3;拉米夫定联合IFN-α序贯处理能够增强HepG2.2.15细胞表达干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1,这可能是拉米夫定联合IFN-α序贯治疗慢性乙型肝炎重要机制之一.
作者：杨凯；管世鹤；王爱华；潘颖；吴园园；孙蓓蓓 刊期： 2013年第11期
目的 探讨内质网应激(ERS)在四氯化碳(CCl4)致急性肝损伤中的作用.方法 24只成年健康♂ ICR小鼠经腹腔注射CCl4(300 μl·kg-1),于CCl4处理后不同时点(0、2、6、12、24和72 h)剖杀小鼠,采集血清和肝脏组织,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)活性;TUNEL技术检测肝脏细胞凋亡;Western blot检测肝脏GRP78、CHOP、p-IRE1α、p-JNK和裂解型Caspase-12蛋白水平;免疫组化检测肝脏GRP78分布.结果 与对照组相比,CCl4处理组小鼠肝脏重量、肝脏系数和ALT水平均明显升高;病理组织学结果显示,CCl4处理引起肝细胞凋亡和坏死,以CCl4处理后24 h损伤明显;进一步观察发现,CCl4处理明显升高肝脏 GRP78、p-IRE1α和p-JNK蛋白水平,上调肝脏CHOP蛋白表达,导致肝脏细胞凋亡相关蛋白Caspase-12裂解.结论 ERS在CCl4致急性肝损伤过程中可能起重要作用.
作者：陶莉；陈熙；张程；何薇；任晓非；许建明；徐德祥 刊期： 2013年第11期
目的 探讨无创肢体缺血预适应对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及机制.方法 56只健康♂ Wistar大鼠随机分为缺血/再灌注(I/R)组、肢体缺血预适应(LIP)组、I/R+5-羟基癸酸钠(5-hydroxydecanoate,5-HD)组和LIP+5-HD组.LIP组和LIP+5-HD组左后肢每天经历3次5 min缺血/5 min再灌注,连续3 d.d 4,全部大鼠冠状动脉左前降支经历30 min缺血/120 min再灌注,I/R+5-HD组和LIP+5-HD组于缺血前及I/R期间给予mitoKATP阻断剂5-HD.测定心肌梗死面积、心肌细胞凋亡指数、凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间和纤维蛋白原含量,观察心肌形态学改变.结果 与I/R组相比,LIP能缩小心肌梗死面积(约38.24%,P<0.05),减少心肌细胞凋亡(约23.33%,P<0.01),改善心肌形态学改变.LIP对基础状态下的凝血功能无影响,但能降低I/R后血浆纤维蛋白原增加程度(约12.5%,P<0.05).上述LIP作用被5-HD取消.结论 LIP对大鼠心肌I/R损伤具有保护作用,机制可能涉及mitoKATP的开放.
作者：侯微；袁恒杰；温克；吴艳娜；娄建石 刊期： 2013年第11期
对抗复杂疾病强调药物联合干预.网络药理学利用网络分析药物复杂作用机制,该网络的模块化解构是我们关注的焦点.希望通过对模块相关概念、划分方法和模块间结构特点的简要介绍,使我们能够了解如何利用模块解码药物干预疾病的复杂机制,以便明确模块化分析方法的优势.
作者：张莹莹；陈寅萤；王忠；王永炎 刊期： 2013年第11期
目的 研究三七总皂苷(PNS)对H9c2心肌细胞P450酶主要亚型表达的影响.方法 不同浓度的PNS处理H9c2细胞48h,MTS法检测细胞的存活率,测定LDH释放率评价细胞损伤程度,Real Time PCR法检测PNS各处理组对CYP450酶各亚型mRNA表达的变化.结果 MTS结果表明随着PNS浓度的增大,细胞的存活率逐渐降低并呈浓度依赖性,IC50(5.28±0.08)g·L-1,同时LDH的释放率也逐渐增大.在对P450酶mRNA表达影响层面,PNS使CYP2J3、CYP4A1、CYP4A2、CYP4F1和CYP4F5表达上调(P<0.05或P<0.01);对CYP2C11、CYP4A3和CYP4F4表达下调(P<0.05或P<0.01),但高浓度时(5 g·L-1)对CYP4A3和CYP4F4有上调作用(P<0.01).结论 PNS对心脏和血管有一定的保护作用,高浓度(5 g·L-1)的PNS对H9c2细胞有一定细胞毒作用,因此使用PNS时应注意用药剂量,使其发挥疗效而尽量减少药物不良反应的发生.
作者：胡东华；王宇光；陈志武；马增春；梁乾德；肖成荣；谭洪玲；汤响林；高月 刊期： 2013年第11期
目的 研究萘哌地尔(naftopidil)对α1受体亚型的选择性作用.方法 大鼠胸主动脉、脾、输精管分别富含了α1D、α1B、α1A 3种亚型受体,分别制备这3种离体组织,在存在和不存在萘哌地尔时,按浓度累积法加入去甲肾上腺素(noradrenaline,NA),至组织达到大收缩效应,得到相应的量效曲线,通过Schild法计算拮抗参数pA2值.结果 萘哌地尔对主动脉、脾、输精管的拮抗参数pA2值分别为7.93(±0.13)、6.75(±0.01)、7.48(±0.30),其对α1D-AR的选择性是对α1B-AR的15.1倍,是对α1A-AR的2.8倍.结论 萘哌地尔为一种高选择性的α1A/1D亚型拮抗剂.
作者：易艳珍；黄珺珺；黄美华；黄敏怡；朱柳；袁牧 刊期： 2013年第11期
氯胺酮是临床常用静脉麻醉药,特别是广泛用于小儿短小手术的麻醉和术前基础麻醉.已知氯胺酮进入体内之后,大部分经肝脏细胞色素P450代谢,形成去甲氯胺酮.有必要进一步研究氯胺酮的代谢机制和影响其代谢的遗传机制.
作者：赵芸慧；王晓龙；田阿勇；马虹；王俊科 刊期： 2013年第11期
灯盏细辛是菊科飞蓬属植物短葶飞蓬[Erigeron breviscapus (Vant.)hand-Mazz.]的干燥全草,具有活血化瘀、通经活络等功效,为贵州少数民族常用药物.灯盏乙素是其主要活性成分,而灯盏乙素苷元为灯盏乙素的主要活性代谢产物[1-2].因此,有必要研究灯盏乙素苷元在大鼠肝微粒体中的代谢规律.CYP3A4是人体含量丰富的P450酶,大约占人肝P450总含量的30%,参与50%以上药物的代谢[3-4],有关灯盏乙素苷元对大鼠CYP3A的抑制作用未见相关报道.实验建立了UPLC-MS/MS法,研究灯盏乙素苷元在大鼠肝微粒体中的代谢规律.通过研究睾酮的相对代谢量来反映其是否对CYP3A有抑制作用,为指导临床合理用药及预测可能产生的药物相互作用提供理论依据.
作者：黄勇；陆苑；郑林；何峰；李勇军；兰燕宇 刊期： 2013年第11期
目的 建立吗啡诱导的斑马鱼条件性位置偏爱模型,探讨诱导斑马鱼形成位置偏爱的佳条件.方法 根据条件性位置偏爱(CPP)原理和斑马鱼的生物学特性,对斑马鱼的天然偏爱进行测定后,腹腔注射不同浓度的吗啡,并与非偏爱箱(伴药箱)进行搭配;随之,斑马鱼注射等体积生理盐水,与偏爱箱进行搭配.经过连续3次的训练,观察吗啡诱导的斑马鱼CPP效应.结果 斑马鱼注射40～50 μg·g-1吗啡并进行连续3次CPP训练,能诱导其在伴药箱中的活动时间增加,与训练前相比,差异有显著性(P<0.01),与生理盐水组相比,差异也具有显著性(P<0.01).结论 斑马鱼进行腹腔注射给药40～50 μg·g-1吗啡,并进行连续3次训练,能形成明显的CPP.
作者：彭菊；刘伟；罗超华；陈小辉；张文清；莫志贤 刊期： 2013年第11期
目的 研究染料木素对人宫颈癌细胞株(HeLa)增殖的影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法 用无酚红DMEM高糖培养基(含10%活性炭处理过的胎牛血清)培养HeLa细胞,使用不同浓度染料木素(0.001～10 μmol·L-1)作用,采用MTT法检测细胞增殖变化,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡的变化,Western blot检测雌激素受体ERα蛋白表达的变化.结果 实验浓度区间的染料木素作用于HeLa细胞48、72 h后,均能促进HeLa细胞的增殖.在该浓度区间下,染料木素能够促进HeLa细胞由G1期进入S期,增加HeLa细胞S期细胞比例,减少G1期细胞比例;同时,细胞凋亡降低,ERα蛋白表达量提高.结论 染料木素在0.001～10 μmol·L-1浓度范围内能够刺激HeLa细胞增殖,这一增殖效果可能是通过上调ERα表达量、调节细胞周期及凋亡相关信号通路产生的.
作者：郑秋玲；聂少平；李文娟；胡晓娟；谢明勇 刊期： 2013年第11期
心肾综合征(cardiorenal syndrome,CRS)是慢性心脏衰竭(chronic heart failure,CHF)和肾脏衰竭(chronic renal failure,CRF)发展的终末期阶段.然而,心肾交互损伤的确切启动机制尚未明确.目前尚未有合适的动物模型能够高度模拟临床CRS(心肾共损程度适宜),该文对心肾共损动物模型进行归纳,并结合肾素原(受体)-肾素-血管紧张素系统的变化特点予以综述,为心肾综合征的药物研究提供动物实验方法参考.
作者：王蕾；郝迪；李旭；王梓 刊期： 2013年第11期
目的 研究辽东楤木叶总皂苷(ETS)对HT-29细胞生长的抑制作用及作用机制.方法 采用MTT法检测ETS对HT-29细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测ETS对HT-29细胞周期和凋亡的影响;Western blot法检测ETS对HT-29细胞PLK1蛋白表达的影响.结果 ETS对结肠癌HT-29细胞增殖有明显抑制作用,IC50值为39.62 mg·L-1.在10～40 mg·L-1剂量作用下,可剂量依赖性诱导HT-29细胞凋亡.ETS主要将细胞周期阻滞在G0/G1期,从而可剂量依赖性抑制肿瘤细胞增殖.ETS可明显抑制HT-29细胞PLK1蛋白的表达.结论 ETS体外可明显抑制HT-29细胞的生长,其抗肿瘤作用与细胞周期阻滞、细胞凋亡及抑制PLK1蛋白表达有关.
作者：尹丽颖；李凤金；边晓燕；牛雯颖；敖鹏；肖洪彬 刊期： 2013年第11期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
