李立萍；张建新；李兰芳
目的 通过正交试验优化子宫内膜异位症大鼠模型的制备方法 .方法 采用自体移植法复制大鼠子宫内膜异位症模型和四因素二水平的正交设计,以移植物体积大小为评价指标,观察不同影响因素对大鼠子宫内膜异位症模型形成的影响及病理形态学变化.结果 子宫内膜佳种植部位在子宫旁韧带.发情情况及子宫内膜种植方向对实验结果 的影响不明显.内膜不与肌肉层分离和外加雌激素对大鼠异位内膜生长起着关键性的作用.4个影响因素重要性依次为注射雌激素＞不分离肌肉层＞种植方向、发情情况.结论 通过优化试验方法 ,可有效提高子宫内膜异位症大鼠模型的造膜效果,为科学评价子宫内膜异位症的药物研究提供技术平台.
作者：楚博；江涛；唐春萍；杨超燕；龚梦鹃 刊期： 2009年第07期
目的 观察利多卡因和异丙酚对RAW264.7巨噬细胞P2X7受体电流的影响及两药之间的相互作用.方法 应用小鼠RAW264.7巨噬细胞,采用全细胞膜片钳记录模式,记录ATP(100～5 000 μmol·L-1)诱发的P2X,受体电流.向细胞施加不同浓度的异丙酚(1～100 μmol·L-1)或利多卡因(10～1 000 μmol·L-1),然后再施加2倍EC50水平的ATP.计算异丙酚或利多卡因对P2X,受体电流的IC50.向细胞先施加IC50水平异丙酚,再同时施加IC50水平的异丙酚与利多卡因(10～1 000 μmol·L-1),或向细胞先施加10μmol·L-1或1 000 μmol·L-1利多卡因,再同时施加相同浓度的利多卡因和IC50水平的异丙酚,观察异丙酚和利多卡因的相互影响.结果 异丙酚或利多卡因可浓度依赖性的抑制2倍EC50ATP诱发的P2X,受体电流,异丙酚或利多卡因的IC50分别为(36.5±5.3)μmol·L-1和(223±34)μmol·L-1.先施加异丙酚后施加利多卡因300 μmol·L-1或1 000mol·L-1可使P2X7受体电流幅度增强.先施加利多卡因后施加异丙酚对P2X7受体电流产生协同抑制作用.结论 利多卡因和异丙酚可浓度依赖性的抑制巨噬细胞膜P2X7受体电流,在P2X7受体已受异丙酚抑制时,低浓度和高浓度的利多卡因对P2X7受体产生先抑制后兴奋的双向调节作用.
作者：刘红亮；戴体俊 刊期： 2009年第07期
苦参碱(Matrine,MT)、氧化苦参碱(Oxymatrine,OMT)是从传统中药豆科槐属植物苦参(Sophora flavescens Air)根中提取分离出来的主要的生物碱,具有抗肝纤维、保肝、抗乙肝病毒等药理作用[1～3].
作者：万旭英；罗明；贺平；吴孟超 刊期： 2009年第07期
目的 复制去势(OVX)大鼠高同型半胱氨酸血症(HHCY)模型,比较植物雌激素α-玉米赤霉醇(α-ZAL)、染料木素(GST)和17β雌二醇(17βE2)对血管内皮的保护作用.方法 实验分为6组:[1]正常对照组(Control);[2]假手术+2.5%蛋氨酸组(Sham);[3]切除卵巢+2.5%蛋氨酸组(OVX);[4]OVX+2.5%蛋氨酸+α-ZAL组(OVX+α-ZAL);[5]OVX+2.5%蛋氨酸+GST组(OVX+GST);[6]OVX+2.5%蛋氨酸+17βE2组(OVX+17βE2).α-ZAL、GST和17βE2分别隔日肌注250μg/0.25 ml,共12 wk.双抗夹心法测定HCY和ET-1浓度,RT-PCR法检测主动脉组织ET-1mRNA表达;主动脉作病理制片.结果 血浆HCY含量(μmol·L-1):Sham与Con组比较明显升高,P＜0.05;OVX组与Sham组相比明显升高,P＜0.05;而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P＜0.01.血浆ET-1(ng·L-1)含量:OVX组与Sham组相比较ET-1升高,P＜0.01,而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P＜0.01.主动脉组织ET-1 mRNA的表达:OVX组与Sham组相比较升高,P＜0.05,而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P＜0.05,其它各组ET-1 mRNA表达均无变化.病理:OVX组血管内皮明显损伤,Sham组、α-ZAL、GST和17βE2组血管内膜大致正常,内皮细胞基本完整,未见明显的炎性细胞浸润.结论 α-ZAL、GST和17βE2均能通过降低HCY含量和减少ET-1分泌、表达而保护血管内皮,三者的内皮保护作用相似.
作者：洪霓；段金虹；张彦东；吴云清；甄攀攀；蒋东桥；戴顺龄；王雯 刊期： 2009年第07期
目的 构建离体血管H2 O2氧化损伤模型,并初步探讨其损伤机制,实验超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)对该损伤的修复作用.方法 采用大鼠离体胸主动脉环,构建H2 O2氧化损伤血管模型,通过乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)引起的舒张评价该模型的内皮功能;通过硝普钠(nitroprusside sodium,SNP)引起的舒张及苯肾上腺素(phenylephrine,PE)引起的收缩评价该模型的平滑肌功能.同时,用120 U·ml-1的SOD作用于该模型30 min,评价SOD对模型损伤的修复作用.结果 H2 O2氧化损伤的血管,对SNP引起的舒张及PE引起的收缩无影响,而对ACh引起的内皮依赖性舒张程度降低,120 U·ml-1SOD作用后,能明显改善该模型的氧化损伤状态.结论 H2 O2 1 mmol·L-110 min能够氧化损伤大鼠胸主动脉内皮,120 U·ml-1的SOD可以较好地修复H2 O2造成的内皮损伤.
作者：陈刚领；郑建普；李亚娟；卞卡 刊期： 2009年第07期
目的 研究中国小型猪冠心病模型心肌组织蛋白表达谱的改变情况.方法 在建立中国小型猪冠心病模型基础上,应用双向电泳分离各组小型猪心肌组织总蛋白;通过图谱分析软件和基质辅助激光解析-飞行时间质谱技术分别进行差异比较和质谱鉴定及数据比对.结果 小型猪冠心病模型组心肌组织与正常组相比共有14个差异蛋白点:13个上调点,1个特异表达点.这些差异点经胶内酶解、MALDI-TOF质谱分析及MASCOT搜索引擎检索,鉴定出HSPA8(Hsc70)、apolipoprotein A-Ⅳ(apoA-Ⅳ)、albumin及desmin 4 种蛋白.结论 初步发现的差异蛋白可能与冠心病的发生、发展相关,但是还需要通过其它方法 做进一步验证.
作者：苗兰；刘建勋；李欣志；潘映红 刊期： 2009年第07期
目的 研究从玉郎伞(Yulangsan,YLS)中首次分离的两种黄酮单体对体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制.方法 建立体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,倒置显微镜下观察加入YLS两种单体的含药血清(10%、5%、2.5%)后,各组缺氧/复氧心肌细胞形态学和搏动频率的变化;以MTT法检测各组细胞的存活率;用ELISA法测定心肌细胞Na+,K+-ATP酶、Ca2+,Mg2+-ATP酶活性及细胞培养上清液中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)活性和丙二醛(MDA)含量.结果 与模型组相比,YLS两种单体含药血清的高、中剂量均能明显增加心肌细胞的存活率,增强Na+,K+-ATP酶、Ca2+,Mg2+-ATP酶活性,降低细胞培养上清液LDH、NOS活性、MDA含量,提高TSOD活性并呈剂量依赖性(P＜0.05).结论 两种YLS单体对体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,其机制可能与清除自由基、抑制心肌细胞Ca2+超载有关.
作者：简洁；刘曦；黄仁彬；蒋伟哲 刊期： 2009年第07期
目的 观察exendin-4(Ex)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠模型胰腺survivin基因表达的影响,旨在探讨exendin-4抗凋亡作用的机制.方法 6 wk ♂ BALB/c小鼠分为3组:STZ组、Ex组(STZ+Ex)、对照组.每周测量血糖,4wk时胰腺行免疫组化、TUNEL检测,实时荧光RT-PCR方法 检测胰腺survivin表达水平.结果 Ex组血糖低于STZ组,胰岛中胰岛素染色阳性面积百分比大于STZ组(39.40±9.72 vs 25.47±9.26,P＜0.01),胰岛凋亡细胞数目少于STZ组.STZ注射后第4周胰腺survivin mRNA水平升高,Ex组更高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Ex可抑制STZ诱导糖尿病小鼠的胰岛细胞凋亡,此作用可能部分通过上调胰腺survivin表达介导.
作者：徐明彤；张莹；陈黎红；吴木潮；严励；程桦 刊期： 2009年第07期
目的 研究α-细辛脑的抗惊厥、抗癫痫作用机制.方法 预先给予小鼠α-细辛脑腹腔注射,30 min后制作癫痫模型,对小鼠脑部的ATP酶、抗氧化指标及氨基酸含量的变化进行研究,探讨其抗惊厥、抗癫痫作用机制.结果 α-细辛脑能明显降低谷氨酸/γ-氨基丁酸的比值,增强抗氧化能力及ATP酶的活力,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 α-细辛脑抗惊厥、抗癫痫的作用机制可能与其清除自由基,维持小鼠大脑中的兴奋/抑制系统及Na+、K+、Ca2+、Mg2+的动态平衡有关.
作者：韩琳；汤道权；印晓星；高媛媛；魏雅芹 刊期： 2009年第07期
目的 构建IL-24基因的真核表达载体,在毕赤酵母GS115中高效表达,研究重组N-糖基化IL-24蛋白体外诱导肿瘤细胞凋亡的活性.方法 借助过渡质粒α/pUC18,将IL-24基因插入到质粒pPIC9K的BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ之间,构建重组质粒IL-24/pPIC9K,转化毕赤酵母GS115分泌表达,Tricine-SDS-PAGE和Western blot鉴定目的 蛋白,ELISA检测蛋白表达量,糖苷酶PNGase F分析IL-24糖基化形式和程度.MTT法和形态学分析重组IL-24诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡的活性.结果 成功构建重组表达质粒IL-24/pPIC9K,IL-24在毕赤酵母高表达量为(81.31±14.46)mg·L-1.约70%的IL-24发生了N-糖基化.重组IL-24诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡,对正常人肺成纤维细胞NHLF没有影响.N-糖基化IL-24对MCF-7抑制率约高于去糖基化IL-24.结论 毕赤酵母分泌形式的表达和适度的糖基化修饰都有利于目的 蛋白IL-24的生物学活性,为后续的研究提供基础.
作者：杨珺；张家敏；黄卫平；张卫军；刘开云；邹全明 刊期： 2009年第07期
银杏是地球上古老的植物之一,具有独特的药理作用和治疗价值,现已证明银杏内酯B(ginkgolide B,GKB)为银杏叶提取物中主要的药效成分之一,为二萜类酸化合物.
作者：赵文杰；陈霁；唐民科；程勇；张均田 刊期： 2009年第07期
目的 研究人参皂苷Rd固体脂质纳米粒(Rd-SLN)的体外释药特性、在大鼠肠道的吸收和体内药物动力学行为.方法 采用透析法测定Rd-SLN体外释药速率;通过大鼠在体分段肠回流实验,研究Rd-SLN的肠道吸收行为;建立血浆样品中人参皂苷Rd的HPLC分析方法 ,在大鼠灌胃给药后测定不同时间的血药浓度,观察Rd-SLN在体内的吸收和药动学特征.结果 Rd-SLN具有缓释特征.在十二指肠和空肠段,Rd-SLN与人参皂苷Rd对照溶液的吸收率差异没有显著性;在回肠和结肠段,Rd-SLN与对照溶液的吸收率差异有显著性.Rd-SLN在回肠段的吸收率高于其它肠段.与对照组相比,Rd-SLN组的血药浓度水平维持时间更长,其Cmax、MRT、AUMC和AUC均明显增加.结论 Rd-SLN具有一定的缓释作用,其在回肠的吸收优于其他肠段,并且能明显提高人参皂苷Rd的生物利用度.
作者：罗德凤；叶建涛；张毅珊；刘德育 刊期： 2009年第07期
目的 研究槲皮索对香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)诱导的人支气管上皮细胞死亡的影响,并初步探讨其机制.方法 槲皮素预处理人支气管上皮细胞(Beas-2b)16 h,然后以CSE刺激不同时间,倒置显微镜下观察细胞形态,以四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)及Western blot分别检测细胞活力和血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白的表达.结果 槲皮素明显减少了CSE诱导的Beas-2b细胞死亡,并对CSE处理后细胞活力的降低具有明显的抑制作用;槲皮素还明显提高了CSE诱导的Beas-2b细胞中HO-1的蛋白表达水平,且呈浓度依赖性.结论 槲皮素对于CSE诱导的人支气管上皮细胞死亡具有明显的抑制作用,其机制可能是通过提高细胞中CSE诱导的HO-1蛋白表达水平.
作者：王莉娟；龚涛；王丽；李粉；杨星昊；李朝军；陈华群 刊期： 2009年第07期
目的 观察双白术内酯对Aβ1-40诱导老年性痴呆大鼠的学习记忆力影响和脑组织中胆碱酯酶含量的变化,从而了解其作用机制.方法 取健康大鼠48只,随机分为6组.分别为正常对照组、模型对照组、阳性药物(盐酸多奈哌齐片,Donepezil)对照组(1.0 mg·kg-1·d-1)、双白术内酯低(BL 0.1 mg·kg-1·d-1)、中(BM 0.3 mg·kg-1·d-1)、高(BH 1.0 mg·kg-1·d-1)剂量组.除正常对照组外,各组大鼠立体定向注射凝聚态Aβ1-40诱导老年性痴呆(Alzheimer's disease,AD)动物模型.连续给药10 d后,用水迷宫法检查学习、训练结果 ;并取脑组织测胆碱酯酶含量.结果 双白术内酯各组大鼠游水迷宫所需时间明显短于模型组,错误次数亦明显少于模型组(P＜0.05或p＜0.01).双白术内酯各组可使大鼠胆碱酯酶活性明显的降低(P＜0.01).结论 双白术内酯可以改善Aβ1-40致痴呆模型大鼠的学习记忆能力,并降低脑内胆碱酯酶水平.
作者：冯星；王正濂；林永成；周源；刘英姿；杨华中 刊期： 2009年第07期
目的 探讨ATP敏感性钾通道开放剂吡那地尔对缺血缺氧PC12细胞凋亡及对Bcl-2 mRNA和蛋白表达的影响.方法 取传代后3 d的PC12细胞,分为正常对照组、缺血对照组、吡那地尔处理组、吡那地尔+格列吡嗪处理组共4组.吡那地尔处理组在PC12细胞缺血缺氧前20 min加入浓度为100 μmol·L-1的吡那地尔;吡那地尔+格列吡嗪处理组则加入浓度100 μmol-L-1的吡那地尔和浓度为500μmol·L-1的KATP通道阻断剂格列吡嗪.采用Annexin-V FITC/PI双染流式细胞分析仪检测凋亡率;应用免疫荧光染色和Westem blot检测Bcl-2蛋白表达水平;应用RT-PCR检测Bcl-2 mRNA表达水平.结果 缺血缺氧后缺血对照组、吡那地尔处理组、吡那地尔+格列吡嗪处理组细胞凋亡率随时间增加而增加,24 h达高峰.吡那地尔组与其余组比较差异均有显著性(P＜0.01).缺血对照组、吡那地尔处理组、吡那地尔+格列吡嗪处理组细胞Bcl-2 mRNA及蛋白表达各时间点均增加,12 h达高峰.吡那地尔组与其余组比较差异均有显著性(P＜0.05,或P＜0.01).缺血对照组和吡那地尔+格列吡嗪处理组比较差异均无显著性(P＞0.05).结论 ATP敏感性钾通道开放剂可能通过提高Bcl-2 mRNA及蛋白表达来减轻缺血缺氧后PC12细胞凋亡,发挥保护作用.
作者：贾春红；张鸿；李佳；鲁杨；杨旭 刊期： 2009年第07期
BAPTA-AM是一前药,进入细胞后在脂酶作用下释出BAPTA,快速与Ca2+络合,控制细胞内钙水平,是研究Ca2+对细胞功能调节作用的标准工具药.BAPTA-AM对缺血缺氧下的神经细胞和细胞毒攻击下肝细胞保护作用强,并且能作用于心血管系统和呼吸系统,有望成为中风、肝功能衰竭、呼吸困难综合症等危重疾病的治疗药,具有很大的开发价值.
作者：宋必卫；储昭兴 刊期： 2009年第07期
目的 探讨酸敏感离子通道(ASICs)阻断剂amiloride对佐剂性关节炎(AA)大鼠关节软骨损伤的影响.方法 将大鼠随机分成正常组,AA模型组,amiloride 50、100、150 mg·kg-1组,地塞米松(0.2 mg·kg-1)对照组.弗氏完全佐剂(CFA)致炎后第10天起,AA大鼠出现继发性炎症,此时腹腔注射amiloride、地塞米松,正常组与模型组灌胃等容量的无菌注射用水,连续7 d.实验结束后,体外用激光共聚焦显微镜检测细胞Ca2+浓度,分析胞外低pH值和ASICs阻断剂amiloride对关节软骨细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响;用足容积法测量继发侧足肿胀度,用免疫组织化学方法 分析大鼠关节软骨Ⅱ型胶原的表达,用alcian蓝染色检测大鼠关节软骨蛋白多糖的变化.结果 细胞外pH(pH 6.5)可使关节软骨细胞内Ca2+水平短暂性升高,amiloride能明显抑制pH 6.5诱导的关节软骨胞内Ca2+水平;各用药组能明显升高AA大鼠关节软骨细胞基质成分Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达量.结论 amiloride可能通过阻断酸敏感离子通道减轻AA大鼠关节软骨破坏,发挥关节保护作用.
作者：袁凤来；陈飞虎；陆伟国；李霞；吴繁荣；张腾跃；王玉 刊期： 2009年第07期
病理性痛(pathological pain)是临床上常见的疼痛,通常分为炎性痛(inflammatory pain)和神经病理性痛(neuropathic pain),具有痛觉过敏和痛觉异常等疼痛神经可塑性特点;丝裂原活化的蛋白激酶(mitogen-activated proteins kinases,MAPKs)作为一种关键细胞信号分子,包括细胞外信号调节激酶(ERK)、p38和c-Jun氨基末端激酶(JNK)3条主要激活通路,在病理性痛觉信号转导和神经可塑性调控中起重要作用.在不同动物模型中,抑制MAPKs信号通路,可明显减轻炎症痛和神经病理性痛,这为MAPKs抑制剂开发成为治疗病理性痛的药物提供了可能,MAPKs已成为治疗病理性痛药物作用的一个重要的潜在的靶点.
作者：张颜波；吕国蔚 刊期： 2009年第07期
目的 观察氨基胍(aminogunidine,AG)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠肺表面活性物质(pulmonary surfactant,PS)时程性变化的影响和对肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)的影响,探讨AG对肺损伤组织的保护作用及其机制.方法 试验一:健康♂SD大鼠随机分为对照组、模型组和AG治疗组.模型组、AG治疗组静脉注射LPS(5 mg·kg-1)复制内毒素性肺损伤模型.LPS 3 h和6 h后腹腔注射AG(100 mg·kg-1,AG治疗组)和生理盐水(对照组及LPS组).原位杂交法(ISH)和Western blot法分别测定肺组织肺表面活性物质蛋白A(SP-A)mRNA及蛋白水平;留取肺泡灌洗液(BALF),测定BALF中的总磷脂(TPL)和总蛋白(TP).试验二:体外分离培养大鼠肺泡巨噬细胞,以LPS(终浓度10 mg·L-1)损伤巨噬细胞,观察AG对肺泡巨噬细胞的影响.结果 与对照组比较,大鼠肺损伤后SP-A mRNA及蛋白表达在LPS 6 h、9 h后明显下降;BALF中TPL明显减少,TP增多.肺损伤3 h用AG治疗3 h后,SP-A mRNA阳性细胞表达及蛋白明显增强,BALF中TPL较LPS组相同时间点明显上升,TP降低,病理显示肺损伤减轻.体外实验显示,与正常对照组相比,LPS处理巨噬细胞后,细胞培养上清中NO、TNF-α、IL-6和LDH浓度明显增高,AG明显减少LPS所致的LDH和NO的释放,降低TNF-α和IL-6浓度.结论 肺损伤后早期给予AG可通过增强肺表面活性物质表达减轻内毒素性肺损伤.AG可抑制LPS对巨噬细胞的作用.
作者：李立萍；张建新；李兰芳 刊期： 2009年第07期
目的 研究苦荞内生真菌KQH-2代谢醇提物EE-2对人肝癌细胞的抑制作用及其作用机制.方法 采用MTT法考察EE-2对人肝癌细胞HepG2体外增殖的抑制作用,显微镜观察EE-2对HepG2细胞形态的影响,琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA完整性,并利用流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡及细胞周期变化情况.结果 用EE-2处理过的HepG2细胞,显微镜观察可见细胞脱壁圆缩,出现凋亡小体;细胞核降解.流式细胞仪检测发现,处理组的DNA直方图上有比对照组加强的SubG1峰,且可将HepG2细胞阻滞于G0/G1期.结论 苦养内生真菌KQH-2代谢醇提物EE-2可诱导人肝癌HepG2细胞的凋亡,且具有细胞周期阻滞作用.
作者：陈荣林；王中康；张传博；殷幼平 刊期： 2009年第07期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
