王囡;王芬;蔡瑶俊;朱德发
目的检测Her-2/neu、基质金属蛋白酶-2( MMP-2)和瘦素( Leptin)在胃癌血清和组织中表达情况,探讨它们在胃癌发生、发展过程中的作用。方法分别应用ELISA和免疫组化( IHC)法检测胃癌血清和组织中 Her-2/neu、MMP-2和Leptin表达情况。结果 Her-2/neu、MMP-2、Leptin在胃癌血清中阳性表达率明显高于在正常对照组中阳性表达率(P<0.05);Her-2/neu、MMP-2、Leptin在胃癌组织中阳性表达率明显高于在癌旁组织中阳性表达率( P<0.05)。 Her-2/neu、MMP-2、Leptin在胃癌血清和癌组织中阳性表达率具有一致性。 Her-2/neu、MMP-2和 Leptin在胃癌组织中的阳性表达均与浸润深度、淋巴结转移和TNM 分期显著相关( P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位和肿瘤分化程度均无相关性。 Her-2/neu在血清中表达与浸润深度、淋巴结转移和 TNM 分期呈显著正相关( P <0.05);MMP-2在血清中表达与淋巴结转移呈正相关( P <0.05);Leptin在血清中表达与病理特征无明显相关性。结论 Her-2/neu、MMP-2和 Leptin在胃癌的发生、发展和转移过程中起促进作用,针对 Her-2/neu、MMP-2和 Leptin 的检测可用于临床诊断,指导靶向治疗,并为临床预后提供科学合理参考。
作者:葛尔树;刘弋 刊期: 2014年第01期
目的在氧嗪酸钾盐诱导小鼠产生高尿酸血症模型的基础上,探讨岩白菜素的抗高尿酸活性。方法将60只昆明种雄性小鼠随机均分为6组:正常对照组、高尿酸血症模型组、岩白菜素(20、40、60 mg/kg)组、别嘌呤醇(5 mg/kg)组。每天灌胃氧嗪酸钾盐(250 mg/kg)1 h后再灌胃给药,连续1周。分别测定血清中尿酸、肌酐和尿素氮水平,尿液中尿酸和肌酐水平,以及肾脏尿酸转运子1( mURAT1)和葡萄糖转运子9(mGLUT9)的mRNA和蛋白表达水平。结果与高尿酸血症模型组比较,岩白菜素显著降低高尿酸血症小鼠血清中尿酸、肌酐和尿素氮水平,提高24 h尿液尿酸和肌酐排泄量以及尿酸排泄分数,显著下调高尿酸血症小鼠肾脏mURAT1和 mGLUT9的mRNA和蛋白表达水平。结论岩白菜素通过促进高尿酸血症小鼠肾脏尿酸排泄作用及逆转尿酸转运体的过度表达,从而体现抗高尿酸活性。
作者:周宏星;陈玉胜 刊期: 2014年第01期
目的观察甲状腺素联合多奈哌齐对成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠海马munc-18表达及乙酰胆碱含量的影响,探讨甲减脑损伤及恢复的可能分子机制。方法55只SD大鼠随机均分为甲减组、甲状腺素治疗组、多奈哌齐治疗组、联合治疗组及对照组。丙基硫氧嘧啶( PTU)建立成年期大鼠甲减模型共6周。第5周起,在继续甲减造模的前提下,甲状腺素治疗组每日给予左旋甲状腺素(L-T4)6μg/100 g体重( BW)腹腔注射,多奈哌齐治疗组每日在饮用水中加入0.005%( w/v)多奈哌齐,联合治疗组每日给予L-T46μg/100 g BW腹腔注射以及在饮用水中加入0.005%( w/v)多奈哌齐,对照组每日给与等量的生理盐水腹腔注射。采用放射免疫法测定血清甲状腺激素水平,碱性羟胺比色法测定海马内乙酰胆碱含量,免疫组织化学法观察munc-18在大鼠海马各层的表达与分布。结果与对照组比较,甲减组中大鼠血清三碘甲状腺原氨酸( T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)水平减低(P<0.01),促甲状腺激素(TSH)水平升高( P <0.01), munc-18在 CA3区起始层( SO )、放射层( SR)、DG区分子层( ML)、DG区多形层( PL)表达明显减少(P<0.01),海马内乙酰胆碱含量下降(P<0.05);与对照组比较,甲状腺素治疗组及多奈哌齐治疗组中乙酰胆碱表达恢复,但munc-18表达仍然低下( P<0.05);联合治疗组中乙酰胆碱含量及munc-18的表达与对照组相比差异无统计学意义。结论甲状腺素联合多奈哌齐可以改善成年期甲减造成的海马内突触蛋白损伤。
作者:王囡;王芬;蔡瑶俊;朱德发 刊期: 2014年第01期
目的观察西格列汀联合二甲双胍对2型糖尿病患者胰岛素抵抗、血脂和血压等心血管危险因素的影响。方法选择病史在5年以内的2型糖尿病患者60例,随机分为3组:西格列汀( A)组、二甲双胍( B)组、二甲双胍+西格列汀( C)组。服药前和服药后12周分别检测患者体重、身高、空腹血糖( FBG )、空腹胰岛素( FINS )、糖化血红蛋白(HbA1c)、三酰甘油(TG)、胆固醇(TCH)、低密度脂蛋白(LDL-C)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP),并计算其体重指数(BMI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果淤各组用药前比较,FBG、HbA1c、BMI、TG、TCH、LDL-C、SBP、DBP 均下降(P<0.05)。 C组HOMA-IR用药前后比较差异有统计学意义(P<0.05)。于用药后,A 组与 C 组及 B 组与 C 组FBG、HbA1c、TG、TCH、LDL-C、SBP、DBP比较差异均有统计学意义(P<0.05);A组与B组及A组与C组BMI比较差异有统计学意义(P<0.05),B组与C组BMI比较差异无统计学意义;用药后3组HOMA-IR组间比较差异无统计学意义。结论西格列汀、二甲双胍对降低血糖、调节血脂、控制血压、减轻胰岛素抵抗均有作用。二者联合用药后其降糖、调脂、降压、减轻胰岛素抵抗作用较单独用药效果更好。
作者:吕珊珊;潘天荣;钟兴;杜益君;王秀艳 刊期: 2014年第01期
术后认知功能障碍( POCD )是手术麻醉后一种常见的并发症,是麻醉学和认知神经科学研究的热点,但其发病机制至今尚未清楚。越来越多的证据表明麻醉可以导致或增加老年患者 POCD的发生风险,而且老年患者术后阿尔茨海默病( AD)的发生与麻醉的潜在关系也是近年来的研究热点。现主要从麻醉药物、麻醉方法等方面对麻醉与老年患者包括POCD与AD在内的术后认知功能改变的关系作一综述,为临床麻醉方案实施及POCD防治提供参考,减少老年患者术后并发症的发生,促进患者的恢复。
作者:陈琛(综述);徐光红(审校);李元海(审校) 刊期: 2014年第01期
目的构建含NLRC5蛋白功能区的cDNA序列的真核表达载体 pEGFP-C2-NLRC5,并检测其在肾成纤维细胞(COS-7)中的表达。方法采用RT-PCR法从人肝星状细胞(LX-2)中获得 NLRC5蛋白功能区的 cDNA 序列片段,用EcoR玉和BamH 玉双切酶将片段和载体pEGFP-C2双酶切后,酶切产物加入T4连接酶16益连接过夜,构建真核表达载体pEGFP-C2-NLRC5。将构建成功的pEGFP-C2-NLRC5重组质粒经PCR,限制性内切酶酶切和测序鉴定后用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将其转染至COS-7细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达, Western blot法鉴定融合蛋白表达。结果阳性克隆经双酶切法鉴定可见NLRC5基因片段。转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达,而且主要分布在细胞质中,Western blot法也可检测到在74 ku处有一明显条带,其大小符合EGFP-NLRC5表达的蛋白( NLRC5蛋白大小约为47 ku,EGFP蛋白大小约为27 ku),表明融合蛋白可在哺乳动物细胞中成功表达。结论成功构建pEG-FP-C2-NLRC5质粒, NLRC5蛋白可在 COS-7细胞中成功表达。
作者:徐涛;彭云云;李琳;黄成;张磊;金涌;吕雄文;李俊 刊期: 2014年第01期
目的探讨超声造影及彩色多普勒参数在门静脉高压食管静脉曲张的诊断价值。方法根据胃镜检查结果,将29例无食管静脉曲张的正常人设为对照组,60例食管静脉曲张的患者均分为中重度组及轻度组,3组分别接受彩色多普勒及超声造影检查,采集肝内血流循环动态数据,获得时间-强度曲线( TIC曲线),得到以下定量参数:肝静脉减震指数( DI )、门静脉流速( PVV )、造影剂肝动脉到达时间( HAAT)、门静脉到达时间( PVAT )及肝静脉到达时间( HVAT),进而计算造影剂肝动脉门静脉间隔时间( PV-HA,即造影剂到达门静脉时间减去到达肝动脉时间)及肝静脉门静脉间隔时间( PV-HV,即造影剂到达门静脉时间减去到达肝静脉时间)。结果 PV-HV、PV-HA、PVV、DI在3组之间差异有统计学意义( F =72.63、14.97、6.71、13.74, P <0.01)。中重度组与对照组比较,PV-HV、PV-HA、PVV、DI差异有统计学意义(P<0.01),与轻度组比较,PV-HV、PV-HA、DI差异有统计学意义( P<0.01),而PVV差异无统计学意义。轻度组与对照组比较,PV-HA差异有统计学意义( P<0.05),PV-HV、DI及PVV差异无统计学意义。结论利用超声造影及彩色多普勒诊断门静脉高压食管静脉曲张具有重要价值,有望成为其无创诊断的新方法。
作者:崔亚云;王玲;张超学 刊期: 2014年第01期
目的研究脐血干细胞对1型糖尿病小鼠的治疗效应,并探讨其作用机制。方法用四氧嘧啶建立1型糖尿病小鼠模型,造模成功后第5天给予脐血干细胞(0.1 ml/100 g体重)尾静脉注射,采用放射免疫法检测正常组、模型组及治疗组小鼠血清胰岛素、C肽水平,并以OGTT实验评价小鼠胰岛功能,HE染色法观察各组小鼠肾脏及胰腺形态学特点,用Western blot和PCR法检测胰腺组织胰十二指肠同源盒1(PDX-1)以及肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A基因(MafA)的表达。结果模型组小鼠血糖明显升高,血清胰岛素、C肽水平下降,胰腺组织PDX-1及MafA蛋白表达下降,与正常组比较差异有统计学意义( P<0.05);治疗组与模型组相比,小鼠血糖水平下降,血清胰岛素、C 肽水平升高(P <0.01),胰岛素敏感性增加。 HE染色提示小鼠肾脏及胰腺形态学变化得到改善,胰腺组织PDX-1及MafA蛋白表达升高(P<0.05)。结论脐血干细胞改善1型糖尿病小鼠的症状,降低血糖,改善小鼠胰岛功能及靶器官形态结构,并且具有上调PDX-1及MafA蛋白水平的作用,脐血干细胞对1型糖尿病小鼠具有一定的治疗效应。
作者:张维娜;刘尚全;袁媛;李菲;龚一昕 刊期: 2014年第01期
目的用免疫磁珠分离法分选弓形虫速殖子,以去除宿主细胞成分,并尽可能对虫体的生物学特性无不良影响,为弓形虫的基础与临床研究提供技术基础。方法采用弓形虫Wh3株( China 1基因型)速殖子感染小鼠,提取腹腔液,常规方法制备速殖子可溶性抗原,免疫家兔,获得兔抗弓形虫多克隆IgG抗体。用抗体包被的免疫磁珠对小鼠腹腔液内弓形虫速殖子进行纯化,比较其纯度、回收率、虫体活力、毒力与感染性。结果用免疫磁珠分离技术纯化弓形虫速殖子后,其纯度提高到98.2%,细胞清除率为96%,虫体回收率为73.5%;用内盐法( MTS )细胞增殖与毒性检测试剂盒检测分离后的速殖子活性为95.6%。定量分组感染小鼠后死亡时间无显著性差异。结论免疫磁珠分离的速殖子纯度、细胞清除率和虫体回收率较高,能有效去除宿主细胞,且对速殖子的活性和毒力无影响。该法操作简便快速,无需昂贵的仪器设备,具有较大的实用价值。
作者:楼研;沈继龙;程维晟;刘芳;陈鹤;罗庆礼;王林 刊期: 2014年第01期
目的探讨新型全反式维甲酸( ATRA)衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯( ATPR )的在体肠吸收特性。方法建立大鼠在体单向肠灌流模型并采用高效液相色谱( HPLC)法测定灌流液中的ATPR、ATRA的浓度,分别计算100、250、500、1000 mg/L ATPR在空肠及ATPR、ATRA在不同肠段的吸收速率常数( Ka )和有效渗透系数( Pef )。结果随着ATPR浓度的增加,其Ka、Pef值分别为(6.77依1.84)×10-3、(14.85依3.46)×10-3、(12.48依3.15)×10-3、(3.03依0.73)×10-3/s 和(0.61依0.17)×10-3、(1.41依0.25)×10-3、(1.23依0.30)×10-3、(0.29依0.07)×10-3 cm/s,均先增加后减小,存在高浓度饱和现象。灌流液在各肠段(十二指肠、空肠、回肠和结肠)的Ka 和Pef差异均无显著性(P>0.05),且与ATRA在4个肠段的Ka 和Pef比较差异无显著性(P>0.05)。结论 ATPR在大鼠肠道内的吸收机制可能为主动转运或易化扩散,且在全肠段内无特定吸收窗。
作者:詹侠;陈飞虎;汤继辉;徐亚运 刊期: 2014年第01期
目的观察不同体位穿刺腰硬联合麻醉( CSEA)在肥胖产妇剖宫产手术中对产妇麻醉效果、麻醉操作和血流动力学的影响。方法选择剖宫产手术肥胖产妇80例[体重指数( BMI )≥30], ASA 分级玉或域级,随机均分为两组, A组:侧卧位腰硬联合麻醉,腰麻液为0.5%盐酸罗哌卡因2.4 ml。 B组:坐位腰硬联合麻醉,腰麻液同A组。记录两组一次穿刺成功率、麻醉平面、麻醉效果、血流动力学变化及不良反应发生情况(包括术中仰卧位低血压综合征,脊麻后头痛以及术后脊神经刺激)。结果 B组麻醉效果与A组相比差异无统计学意义,但一次穿刺成功率高于A组(P<0.05),血流动力学变化差异有统计学意义( P<0.05)。仰卧位低血压综合征的发生率低于A组( P<0.05)。结论两种体位腰硬联合麻醉在肥胖产妇剖宫产手术麻醉中具有相同的麻醉效果,但坐位腰硬联合麻醉比侧卧位更易于穿刺操作,血流动力学更稳定。
作者:张庆梅;夏晓琼;查显忠 刊期: 2014年第01期
目的通过构建针对视神经病变诱导基因( OPTN)的shRNA的真核表达载体,并转染 HEK293FT 细胞,实现对OPTN基因表达的抑制,为进一步研究OPTN蛋白的分子机制奠定基础。方法根据Origene中OPTN基因序列设计并合成能转录 shRNA 的双链 DNA 序列,插入真核表达载体pRFP-C-RS中,构建重组载体 pRFP-C-RS-shOPTN。经鉴定正确后转染HEK293FT细胞,荧光显微镜下观察shRNA转染情况,Western blot法检测OPTN蛋白表达,检测其干扰效率;沙门菌感染实验检测沙门菌在细胞内的增殖,进一步检测OPTN蛋白干扰后对OPTN蛋白作为自噬受体功能的影响。结果成功构建了针对 OPTN 基因的 shRNA 表达载体,转入HEK293FT 细胞72 h 之后,pRFP-C-RS-shOPTN 表达增强, OPTN蛋白表达受到明显抑制;细胞内的沙门菌感染实验证明OPTN蛋白可以显著抑制沙门菌的增殖。结论靶向OPTN基因的特异性shRNA转染HEK293FT细胞后可抑制OPTN蛋白表达效率达80%以上,可用于OPTN调控自噬的进一步研究,同时自噬调节蛋白OPTN可以显著抑制沙门菌在细胞内的增殖。
作者:顾彧;范礼斌;刘晓颖 刊期: 2014年第01期
应用HE染色、刚果红染色、高锰酸钾氧化刚果红染色、透射式电子显微镜观察病肝组织的显微及超微结构变化。结果显示,光镜下淀粉样物质可逐渐沉积于窦周间隙、肝细胞间、汇管区,这些受累的区域无细胞或细胞过少;电镜下观察肝细胞间沉着大量淀粉样物质,肝细胞萎缩甚至崩解,细胞器消失,出现裸核。
作者:吴敏霞;陈虹;周琳瑛;钟秀容 刊期: 2014年第01期
目的探讨骨髓间充质干细胞( MSCs)及其上清液对大鼠佐剂性关节炎( AA)的预防作用。方法培养扩增SD大鼠骨髓MSCs,收集MSCs及其上清液。将健康雄性SD大鼠右后足跖皮内一次性注射弗氏完全佐剂0.1 ml/只造模。造模后行MSCs及其上清液干预。造模前1 d、造模后7、14、21、28 d测量大鼠体重和后足爪体积,同时观察大鼠生存状况。干预后第28天,行四肢关节X线片及病理检查。结果 MSCs干预组和上清液干预组大鼠,原发性炎症和继发病变均不明显,关节X线片和病理检查均未见明显异常,与模型组大鼠相比,体重和足爪体积差异有统计学意义(P <0.05)。结论 MSCs及其上清液可有效干预弗氏完全佐剂诱导的大鼠AA的进展。
作者:许键炜;何志旭;申长清;赵芳芳 刊期: 2014年第01期
回顾性分析136例急性冠脉综合征患者碎裂QRS波( fQRS)与炎症反应的相关性。fQRS组患者超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平高于非fQRS组(P<0.01),随着hs-CRP水平升高,fQRS导联数明显增多(P<0.01),对fQRS与各参数行多元 Logistic 分析, hs-CRP 的 OR 值(95%可信区间)为1.507(1.172~1.936)(P<0.01)。 fQRS与hs-CRP水平有独立相关性,fQRS可能是急性冠脉综合征患者细胞水平炎症反应的终点效应,代表心血管事件风险增加。
作者:宋璐璐;马兰;时志诚 刊期: 2014年第01期
目的研究核黄素联合紫外光进行血小板病毒灭活的安全性、有效性及对血小板保存中白细胞释放细胞因子的抑制作用;观察灭活后血小板体外各参数的变化。方法实验组:将人巨细胞病毒标准株( HCMV AD169)注入核黄素溶液,混匀后加入到单采血小板中,以一定辐照剂量的紫外光照射,检测照射前后病毒滴度和照射后不同时间细胞因子的变化,并观察体外血小板部分参数的变化。对照组:为相同来源新鲜单采血小板,同步检测其细胞因子的含量和血小板体外各参数。以植物凝集素( PHA)同步刺激两组血小板,用ELISA法检测细胞因子的含量。结果实验组经150μmol/L的核黄素结合辐照剂量为1500 mJ/cm2的紫外光(250<λ<350 nm)照射10 min 可有效灭活血小板中病毒;对照组细胞因子含量随着保存时间的延长而显著增加;实验组第3天和第5天的细胞因子含量相对于保存前(0 d)差异无统计学意义;而在同一保存时间对照组中细胞因子含量高于实验组(P<0.05);实验组和对照组血小板悬液经过PHA同步刺激后:接受PHA刺激的对照组与未接受PHA刺激的对照组相比,细胞因子含量显著增加( P <0.05);而接受PHA刺激的实验组与未接受PHA刺激的实验组相比,细胞因子含量无显著变化。结论核黄素结合紫外光照射可以有效灭活血小板中病毒,抑制血小板保存中白细胞释放细胞因子的能力,而单采血小板体外诸参数和阴性对照比较无明显差异。
作者:钟涛;沈继龙;许伟;张循善;卞茂红;杨鹏 刊期: 2014年第01期
54例心脏瓣膜病合并持续性房颤患者,均在体外循环下行心脏瓣膜置换术+改良冲洗式双极射频消融手术。随机将术后仍为房颤心律的33例患者分成两组:伊布利特组(15例)和胺碘酮组(18例)。伊布利特组10 min内均速静脉注射1 mg 伊布利特;胺碘酮组10 min内均速静脉注射150 mg的胺碘酮,如未转复,则间隔30 min后均重复给药1次,比较两组用药后房颤转复情况和转复时间。结果显示两组使用药物复律期间均未发生严重并发症,伊布利特组60 min内转复房颤率明显高于胺碘酮组(P<0.01),4 h内总转复率亦明显高于胺碘酮组( P<0.05)。伊布利特组平均转复时间明显短于胺碘酮组(P<0.01)。
作者:宣海洋;石开虎;徐盛松;赵旭东;占红英;汪裕琪 刊期: 2014年第01期
回顾性分析31例安徽省妇幼保健院收治的子宫下段剖宫产术后切口瘢痕妊娠患者的临床资料。其中22例明确诊断给予介入手术;1例切口妊娠处破裂急诊入院行介入治疗;另8例由于诊断错误在入院前均经过药流或清宫等处理而有活动性阴道流血入院。结果显示31例患者接受介入及其他治疗后,均未行子宫切除术并且人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)均有明显下降。其中24例行介入后清宫术;3例介入后手术行子宫瘢痕切除术;4例介入后药物保守治疗。表明介入治疗为治疗子宫瘢痕妊娠包括急诊瘢痕妊娠合并大出血的有效措施,它降低了子宫切除率。
作者:马艳;孙玉琴;刘羽 刊期: 2014年第01期
采用单纯胰蛋白酶消化法分离,差速贴壁法纯化新生大鼠心肌细胞。光学显微镜观察心肌细胞基本形态特征,台盼蓝染色检测成活率,肌钙蛋白玉、α-横纹肌肌动蛋白抗体鉴定心肌细胞。结果显示培养24 h后心肌细胞大部分已贴壁,并出现自发搏动现象,48 h后逐渐伸出伪足相互接触交织成网,72 h后逐渐形成细胞簇并出现同步搏动;台盼蓝染色法检测细胞成活率达90%以上;肌钙蛋白玉及α-横纹肌肌动蛋白免疫荧光染色法鉴定心肌细胞纯度达98%以上。
作者:姬婷婷;徐岩;张建华;赵勇 刊期: 2014年第01期
目的探讨基质金属蛋白酶-14( MMP-14)和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子( EMMPRIN)在口腔鳞状细胞癌( OSCC)中的表达及其临床意义,并对二者的相关性进行分析。方法应用逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR)技术对43例手术切除的OSCC组织及11例口腔正常组织( NOT)中的MMP-14及 EMMPRIN mRNA 的表达进行检测。结果MMP-14及 EMMPRIN mRNA 在 OSCC 组中的表达均高于NOT组(P<0.05),在有淋巴结转移组的表达均高于无淋巴结转移组(P<0.05),两者的表达均与肿瘤的病理分期、分化程度及淋巴结转移有关,与患者的性别和年龄无关。相关性分析显示MMP-14及EMMPRIN mRNA之间呈正相关( r=0.801,P<0.01)。结论 MMP-14和EMMPRIN基因的异常表达与OSCC的发生、发展和转移密切相关,联合检测MMP-14和EMMPRIN mRNA的表达状况可以为评价OSCC恶性程度及患者预后提供参考。
作者:陶冶;张令达 刊期: 2014年第01期