石蜡包埋皮肤组织标本中提取RNA进行逆转录PCR的研究

陈柳青；曾学思；孙建方

关键词：石蜡包埋, 皮肤组织, RNA, 逆转录PCR

摘要：目的:研究在存档石蜡包埋皮肤组织标本中提取RNA及进行逆转录PCR的可行性和稳定性.方法:分别抽取1997年、1999～2001年、2004年3个时间段的存档标本各10例,经过蛋白酶K消化后用异硫氰酸-酸性苯酚法提取RNA,设计3对β-Actin不同产物长度的引物,其目的片段的长度分别为445bp、205bp和112bp,比较了以各特异性下游引物及随机引物进行逆转录PCR的结果.结果:随机引物的阳性率很低,产物长度为112bp时很稳定,经卡方检验与另外两个长度间有显著性差异,而各年龄组间无统计学差异.结论:在石蜡包埋组织中提取RNA并进行逆转录PCR,方法稳定,可进行大规模的回顾性研究.

中国麻风皮肤病杂志相关文献

色素性玫瑰糠疹表皮细胞角化不良变性1例

临床资料患者,女,7岁,躯干,四肢起浅红色斑,微痒3个月.患儿于3个月前在腋部、臀部发现数个花生米大小的浅褐色斑,偶有微痒,未予治疗.其后皮疹增多,向胸背、腰腹部和四肢蔓延,并有少量浅红色的皮疹.于2001年8月来我院诊治.患者婴幼儿期体键,无特殊疾病史.

作者：陶晓苹；伍友成；唐素华；杨为刊期： 2006年第01期
持久性色素异常性红斑1例

持久性色素异常性红斑(Erythema dysch romicampersians,EDP),又称灰皮肤病.现将我们所见1例报道如下.

作者：李振洁；罗育武刊期： 2006年第01期
氟芬那酸丁酯软膏治疗颜面湿疹

我们于2004年7～12月采用氟芬那酸丁酯软膏(商品名布特,由同联集团沈阳抗生素厂生产)治疗颜面急性湿疹及亚急性湿疹37例,取得满意的临床疗效.

作者：鞠颖；徐慧；鞠宏；谷娜；于秀丽；孙伟；张庆田刊期： 2006年第01期
遗传性对称性色素异常症一家系报道

临床资料先证者,男,17岁.因双手足色素减退伴色素沉着斑13年,左手指末节伸侧红斑、溃疡、结痂伴痒3个月,于2005年2月25日到我院就诊.患者3岁时发现双手指背、足跟出现白斑,间有褐色斑,无痒痛感,后来皮损逐渐扩大至整个手背、足跟和足侧缘.去年冬季左手指端伸侧出现暗红色斑片,伴痒,受热后加剧.由于反复搔抓,出现浅表溃疡、结痂,故来我院就诊.既往史和个人史无特殊.家系调查:无近亲结婚史,家系中共5人患有类似的疾病,均自幼年发病,其中先证者、患者父亲及姑母皮疹面积较大,而其祖父和另一姑母手足皮疹较轻,所有患者面部均有多发的雀斑样褐色斑疹(图1),家系所有成员未发现有其它特殊的皮肤病和系统性疾病.

作者：尹兴平；夏隆庆刊期： 2006年第01期
恶性血管内皮细胞瘤1例

恶性血管内皮细胞瘤(Malignant Angioendothelioma)又称血管肉瘤(Angiosarcoma),临床上罕见,现将我们所见1例报道如下.

作者：尚英彬；李久宏；毕桂娇；宋芳吉刊期： 2006年第01期
淋球菌mtr外排系统研究进展

淋球菌多重耐药(mtr)外排系统控制着淋球菌对脂溶性因子(HAs)的耐受性.淋球菌的mtr基因系统包括mtr调控基因mtrR和mtrCDE基因复合物.mtrR基因编码的是一个转录抑制蛋白MtrR,调节mtrCDE基因的转录.mtrCDE基因复合物则分别编码淋球菌膜蛋白MtrC,MtrD,MtrE,组成的一个能量依赖型外排泵,能把HAs有效地排出细胞外.mtr基因系统中任何基因的突变、丢失、缺失或其编码蛋白结构的改变,都会影响淋球菌对HAs的耐受性.在转录水平上mtr系统对淋球菌的多重耐药性的调节分为两种机制,一种是mtrR依赖调节,另一种是非mtrR依赖调节,另外还存在有mtrA基因对其进行正向调控.

作者：陈宏翔；涂亚庭刊期： 2006年第01期
皮肌炎伴发恶性肿瘤25例临床分析

皮肌炎是一种以对称性近端肌无力、肌痛伴有特征性皮疹为特征的自身免疫性疾病,与多种恶性肿瘤的发生有着密切的相关性.为了解皮肌炎伴发恶性肿瘤的临床特点,我们回顾性分析了我院1992～2002年收治的资料完整的广东地区25例皮肌炎伴发恶性肿瘤的临床资料.现将结果报道如下.

作者：刁友涛；曾抗；孙乐栋；林子刚；周再高刊期： 2006年第01期
外周血单一核细胞凋亡对复发性生殖器疱疹患者Th1/Th2分化的影响

目的:研究复发性生殖器疱疹(RGH)患者外周血单一核细胞凋亡对Th1/Th2型细胞分化的影响.方法:分离RGH患者和健康体检正常人的外周血单一核细胞(PBMC),在PHA的刺激下体外培养48h后收集细胞和上清液,经流式细胞仪检测凋亡细胞,应用酶联免疫吸附试验检测培养上清液IL-2及IL-10.结果:RGH组新鲜血PBMC的凋亡率很低,与对照组相似(P＞0.05).培养48h后RGH患者的外周血单一核细胞凋亡明显高于正常对照组(P＜0.001),RGH患者的培养上清液IL-2浓度明显低于对照组(P＜0.001),而IL-10浓度显著高于对照组(P＜0.001).结论:PBMC凋亡异常严重影响了Th1/Th2型细胞分化,可能是导致复发性生殖器疱疹患者细胞免疫功能低下的重要机制之一,也可能在生殖器疱疹复发中起一定的作用.

作者：江国英；江惟苏；周青刊期： 2006年第01期
依巴斯汀和左西替利嗪治疗慢性特发性荨麻疹的临床对照研究

选择慢性荨麻疹患者为研究对象,采用随机、双盲、单剂量、平行对照的方法.治疗组93例依巴斯汀片每日1次,每次10mg口服;对照组90例盐酸左西替利嗪片每日1次,每次5mg口服,均连续服用28天.分别于用药后第7、14、28天随访,两组有效率先后分别为83.87%、89.25%、91.40%,和81.11%、87.78%、90.00%.两组比较无显著性差异(P＞0.05).两种药物的不良反应主要为轻度的口干和困倦.依巴斯汀治疗慢性特发性荨麻疹疗效及不良反应与左西替利嗪基本相似.

作者：陈绍谦；蔡川川；郑明振刊期： 2006年第01期
家族性良性慢性天疱疮1例附家系调查

临床资料先证者,男,35岁.因间擦部位反复起红斑、水疱、糜烂伴轻度瘙痒18年,于2004年12月就诊于我科.患者17岁时无明显诱因肛周出现渗出伴瘙痒,3年后头部出现类似表现,均未治疗,皮疹可消退.8年前,颈部开始出现红斑、水疱,疱破后形成糜烂、结痂,在当地医院就诊,按湿疹给予皮炎平、泼尼松等药物治疗,皮损减轻,但停药后又加重,如此反复渐累及腋窝、腹股沟等间擦部位,皮疹冬季缓解,夏季加重.家族中3代共6例患病,见图1.

作者：刘建军；郭淑兰刊期： 2006年第01期
自体表皮移植配合窄波UVB照射治疗稳定期白癜风的临床疗效分析

我们在自体表皮移植术后10天的白斑区,配合窄波UVB照射,每周照射3次,3个月为1疗程.结果表明局部窄波UVB照射,可加速存活皮片的复色率和色素的扩展,与单纯采用自体表皮移植相比,明显提高了疗效(P＜0.01).其疗效与治疗时间、病程、部位、分型有关.节段型与局限型治疗效果无显著差异,泛发型效果较差;面部、颈部效果优于其他部位,以肢端效果差;病程越短效果越好,病程越长效果越差.

作者：刘国艳；刘志香；李惠贞；毕兴杰刊期： 2006年第01期
石蜡包埋皮肤组织标本中提取RNA进行逆转录PCR的研究

目的:研究在存档石蜡包埋皮肤组织标本中提取RNA及进行逆转录PCR的可行性和稳定性.方法:分别抽取1997年、1999～2001年、2004年3个时间段的存档标本各10例,经过蛋白酶K消化后用异硫氰酸-酸性苯酚法提取RNA,设计3对β-Actin不同产物长度的引物,其目的片段的长度分别为445bp、205bp和112bp,比较了以各特异性下游引物及随机引物进行逆转录PCR的结果.结果:随机引物的阳性率很低,产物长度为112bp时很稳定,经卡方检验与另外两个长度间有显著性差异,而各年龄组间无统计学差异.结论:在石蜡包埋组织中提取RNA并进行逆转录PCR,方法稳定,可进行大规模的回顾性研究.

作者：陈柳青；曾学思；孙建方刊期： 2006年第01期
中药熏蒸治疗银屑病

根据160例银屑病患者舌质、舌苔、脉象变化及皮疹特点辨证施治,应用我院研制的中药熏蒸药1、2、3号进行熏蒸治疗,总有效率为85%,对照组总有效率为64%,经方差分析有显著差异(X2=80.4284,P＜0.01).中药熏蒸药1、2、3号,对寻常型斑块状银屑病、关节病型银屑病及红皮病型银屑病稳定期的疗效较好,对进展期银屑病的疗效欠佳.

作者：杨洪浦；吕兵波；蒋俊青；毛舒和刊期： 2006年第01期
武力拔寒散致接触性皮炎1例

临床资料患者,男,50岁.右下肢膝关节伸侧红斑、水疱2天.2天前,因右下肢膝关节疼痛外用武力拔寒散(北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂,批准文号:ZZ-3735-京卫药准字(1996)第006043号,产品批号:2100037),1小时后,自觉涂药部位有烧灼感,1.5小时以后,局部出现红斑、水疱.在附近卫生所诊断为皮炎,给予扑尔敏口服、皮炎平外用后效果不佳来诊.门诊以接触性皮炎收入院.

作者：冯西恩；岳剑平刊期： 2006年第01期
色素性玫瑰糠疹1例

色素性玫瑰糠疹是近20年来新命名的皮肤病种之一.临床上少见,近年来国内有个案报道.近,我所遇到1例,现报道如下.

作者：王成波刊期： 2006年第01期
153例脂溢性角化病的临床与病理分析

回顾性分析我科近4年诊断为脂溢性角化病153例的临床及组织病理学情况.病理诊断主要是棘层肥厚型、角化过度型、棘层肥厚型和角化过度型的混合型、腺样型、刺激型、菌落型与黑素棘皮瘤型.该病临床诊断与组织病理之间有一定的差异性,本组临床诊断为脂溢性角化病的115例中,组织病理符合91例,临床误诊率为20.9%;病理诊断为脂溢性角化病的153例中临床误诊62例.应注意与相关疾病鉴别,日光对脂溢性角化病的形成及其发病年龄提前有一定影响.

作者：王傲雪；王美娜；孙令；孙晓慧刊期： 2006年第01期
SLE患者HSP90基因表达及其与IL-6相关性的研究

目的:通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中热休克蛋白90(HSP90)基因mRNA及IL-6的水平,探讨SLE患者HSP90基因的表达及其与IL-6间存在的相关性.方法:分别使用原位杂交法、双抗体夹心ELISA法检测45例SLE患者外周血中HSP90 mRNA和IL-6的表达,并进行直线相关性分析.取15份健康人血样进行正常对照.结果:SLE活动期、非活动期PBMC中HSP90 mRNA表达的平均光度值分别为0.350±0.225,0.221±0.040,均显著高于正常对照组0.114±0.009(P＜0.01,P＜0.05).SLE活动期HSP90 mRNA表达显著高于SLE非活动期(P＜0.05).SLE活动期、非活动期血清IL-6水平分别为(16.82±1.79)pg/mL,(12.58±1.12)pg/mL,均显著高于正常对照组(10.13±2.95)pg/mL(P＜0.01,P＜0.05).SLE活动期IL-6水平显著高于SLE非活动期(P＜0.01).IL-6的表达与HSP90mRNA的含量之间呈直线正相关关系(r=0.413,P＜0.01).结论:SLE患者体内存在IL-6的过度表达,可导致HSP90mRNA表达的增多,进而导致HSP90蛋白增高,高表达的HSP90可参与SLE的自身免疫反应,这可能在SLE的发病机制中起着一定的作用.

作者：朱里；涂亚庭；冯爱平；黄长征；刘厚君刊期： 2006年第01期
痤愈汤加减治疗痤疮103例

自2001年5月～2004年5月,我们用痤愈汤加减治疗103例痤疮患者取得了较好的临床效果,现报道如下.

作者：张建团；王宝林；宋树玲刊期： 2006年第01期
梅花针叩刺加得宝松外搽治疗斑秃的临床观察

斑秃是常见皮肤病,目前国内外多采用外涂刺激性药物,口服及局部注射糖皮质激素和内服滋肝补肾养阴益气补血之中药,但其疗程长、见效慢,且有不同程度的副作用.笔者从2002年7月开始尝试局部使用梅花针扣刺加得宝松溶液外搽治疗斑秃效果显著、疗程短、见效快,治疗后无明显副作用,现报道如下.

作者：张小青；江光明；赖小娟；黄春艳刊期： 2006年第01期
罗红霉素结合贴压耳穴治疗男性慢性非淋菌性尿道炎临床分析

临床资料586例慢性非淋菌性尿道炎(NGU)患者均为我所性病门诊病人,年龄18～70岁,平均39岁,病程6个月～3年,平均1年.合并附睾炎198例,有非婚性行为史者560例,配偶及性伴有生殖器炎症的476例,同时感染念珠菌者160例.临床症状:轻微尿痛和尿道分泌物200例,尿道微痛伴有尿道口红肿150例,尿道口红肿外翻100例,尿道不适有轻度尿频,尿道刺痒136例.除有以上症状外许多病人常伴有神经症状,包括性功能减退及遗精、多梦,有一部分并发精囊炎与附睾炎.

作者：郝延光；张瑞秋刊期： 2006年第01期