郑全喜；王昆；刘超
目的:建立并评价复合型老年肝郁失眠证候大鼠模型.方法:Wistar大鼠随机分为环境对照组,单因素模型组(睡眠剥夺组),复合型模型组,复合型模型+舒郁安神方35g·kg-1·d-1治疗组.采用D-半乳糖腹腔注射60mg·kg-1·d-1大鼠6周致亚急性衰老模型,然后采用夹尾刺激法致肝郁,每次刺激30min,1日2次,持续1周,后放入自制睡眠剥夺箱中进行快速眼动睡眠(REMS)剥夺48h,制作老年肝郁失眠证候大鼠复合型模型.观测大鼠体征、脑部自由基水平及血浆6-酮-前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)、血栓素B2(TXB2)含量.结果:与环境对照组、单因素模型组、舒郁安神方组比较,老年肝郁失眠证候复合型模型组大鼠丙二醛(MDA)、TXB2含量均显著升高(P＜0.01),而超氧化物歧化酶(SOD)活性、6-keto-PGF1a含量及6-keto-PGF1a/TXB2均显著降低(P＜0.01).结论:老年肝郁失眠证候大鼠模型具有临床证候病理特征,是可行、可靠的复合型动物模型.
作者：游秋云；王平；田代志；张舜波；黄攀攀 刊期： 2013年第02期
目的:研究中药复方平肺浸膏对人肺腺癌A549细胞增殖的影响及诱导细胞凋亡的作用.方法:采用CCK-8比色法和磷脂酰丝氨酸外翻分析法分别检测平肺浸膏对人肺腺癌A549细胞增殖和细胞凋亡的作用.平肺浸膏(1 g·mL-1)由中日友好医院药学部提供,实验前经定性滤纸粗滤,0.22μm滤膜过滤后分装.人肺腺癌A549细胞常规复苏、培养及传代,处于对数生长期开始用于实验.实验分为空白对照、生药终浓度1,5,10 g·L-1共4组.细胞以7×104/mL接种于96孔培养板,24 h细胞贴壁后加不同浓度平肺浸膏,对照组只换液不加药.分别于加药后24,48,72 h用CCK-8法检测细胞增殖情况.将细胞以3×104/mL接种于6孔培养板,5h细胞贴壁后加不同浓度的平肺浸膏.药物作用17 h后收获细胞,应用磷脂酰丝氨酸外翻分析法,于流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:平肺浸膏生药5,10 g·L-1在体外作用24 h以上表现出对A549细胞增殖的抑制作用,与常规对照组相比存在统计学差异(P＜0.05),且这种抑制作用随时间和药物浓度增加而增强.生药10 g·L-1可诱导早期细胞凋亡,与常规对照组相比存在统计学意义(P＜0.05).结论:中药复方平肺浸膏能够抑制人肺腺癌细胞A549的增殖,诱导细胞凋亡.
作者：王玥姣；刘轩；朱世杰 刊期： 2013年第02期
目的:优化牛蒡根总黄酮的超声提取工艺.方法:以总黄酮提取率为指标,采用单因素考察乙醇体积分数、料液比、粉碎粒度、提取次数、超声时间、温度及功率对牛蒡根总黄酮提取工艺的影响；选取乙醇体积分数、提取时间、超声功率及粉碎粒度为考察因素,通过正交试验法优化牛蒡根总黄酮超声提取条件,并使用SPSS软件对试验数据进行统计分析.结果:乙醇体积分数、超声时间、超声功率和粉碎粒度是影响牛蒡根总黄酮提取效果的主要因素.优选的提取工艺为牛蒡根粗粉加20倍量60％乙醇提取3次,每次40 min,超声功率60 W,温度60℃.结论:优选的提取工艺稳定可行,可推广于大生产应用.
作者：郝宁；管莹；李艳辉；鲁巍巍；李宏博 刊期： 2013年第02期
目的:观察补阳还五汤对偏头痛患者血浆降钙素基因相关肽(CGRP)和内皮素(ET)的影响.方法:72例偏头痛患者随机分为两组,西药组36例,口服尼莫地平20～40 mg,每日3次；急性发作期加服麦角胺咖啡因片1～2片/次.中药组36例,给予补阳还五汤,每日1剂,水煎分早晚服.两组均连续治疗3个月.治疗前、后监测偏头痛发作频率、持续时间、严重程度、药物的不良反应、CGRP和ET的水平,并与36例正常人对照.结果:中药组的总有效率显著高于西药组(P＜0.05)；两组偏头痛患者均较正常人ET明显增高(均P＜0.01),CGRP明显降低(均P＜0.01)；西药组和中药组均可降低ET水平、偏头痛积分,提高CGRP水平(均P＜0.01),但中药组比西药组作用更明显(均P＜0.01).服用补阳还五汤未发生明显的不良的反应.结论:补阳还五汤能通过调节血管活性物质CGRP,ET水平,改善血管的异常舒缩状况,从而达到缓解偏头痛的作用.
作者：张洪涛；张淑玲 刊期： 2013年第02期
目的:优选大孔吸附树脂纯化益髓通经方中马钱子生物碱的工艺条件.方法:以马钱子碱和士的宁的含量为指标,HPLC进行含量测定,通过静态吸附和解吸试验筛选大孔吸附树脂型号,采用单因素试验考察大孔树脂吸附和洗脱条件,确定益髓通经方中马钱子生物碱的纯化工艺.结果:佳纯化工艺为采用X-5型大孔吸附树脂,上样液质量浓度0.1g·mL-1,上样速度1.0 mL· min-1,上样量4 BV,吸附时间2h,加1 BV水洗除杂,用6 BV 50％乙醇以2.0 mL·min-的速度进行洗脱.结论:采用大孔吸附树脂纯化马钱子提取物中生物碱是可行的,优选的纯化工艺简单、经济.
作者：金文淑；张炜煜 刊期： 2013年第02期
目的:建立血浆样品中丹酚酸A浓度的分析方法,并测定丹酚酸A的血浆蛋白结合率,为进一步展开丹酚酸A的代谢和药动学研究及指导临床用药提供参考.方法:采用超滤法和HPLC测定丹酚酸A在牛血清白蛋白(BSA),大鼠血浆,新西兰兔血浆和比格犬血浆中的蛋白结合率.结果:丹酚酸A在0.01～2.5 mg·L-1线性良好,标准曲线方程为Y =0.8073X+0.013 2(r =0.999 4).丹酚酸A与BSA,大鼠血浆,新西兰兔血浆和比格犬血浆在5.0,50.0,100.0 mg·L-1的含药血浆中其平均蛋白结合率分别为(99.79±0.02)％,(99.79±0.03)％,(99.73±0.06)％,(99.81±0.03)％.结论:所建立的方法灵敏度高,专属性和重复性好,操作简单,能够满足定量分析测试要求.丹酚酸A与血浆蛋白有很强的结合,且在已考察的血药浓度范围内其血浆蛋白结合率无明显浓度依赖性和种属差异性.
作者：陈豆；涂星；张英丰 刊期： 2013年第02期
目的:比较研究不同产地雄黄及其炮制品中主成分As2S2及可溶性砷盐As2O3的含量差异.方法:采用2010年版《中国药典》雄黄项下的滴定法测定不同产地雄黄及其炮制品中As2S2的含量,采用AFS-230E型原子荧光光度计检测上述样品中可溶性砷盐As2O3含量.结果:不同产地的雄黄及其炮制品中As2S2,As2O3含量存在显著差异.雄黄炮制后,炮制品中As2S2含量均提高,As2O3含量均明显降低.除吉林和江苏2个产地的的雄黄及其炮制品中As2S2含量＜90.0％,其余样品均符合药典规定；且雄黄炮制品中As2O3含量均能控制在1.7mg·g-1以下.结论:研究结果可为指导雄黄临床合理用药提供参考依据.
作者：李化；赵明惠；梁爱华；李春英；王金华；薛宝云；杨滨 刊期： 2013年第02期
目的:对24种药用植物醇提物的乙酰胆碱酯酶抑制活性和抗氧化活性进行筛选研究.方法:70％乙醇回流提取植物粗提物；目标粗提物采用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取,得到氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和水部位；乙酰胆碱酯酶抑制活性测定采用改良的Ellman法和薄层色谱(TLC)生物自显影法相结合的方法；抗氧化活性采用清除DPPH自由基能力进行评价.结果:结合改良Ellman法和TLC生物自显影法对24种植物的醇提物的抗乙酰胆碱酯酶抑制活性进行评价,结果表明红毛七、金不换、飞龙掌血、白花映山红和八角枫5种植物粗提物具有显著的抑制活性,在终浓度为1g·L-1时,其抑制率分别为(88.72±1.47)％,(82.25±1.32)％,(77.71±1.61)％,(77.00±1.38)％,(75.22±1.28)％,其清除DPPH自由基IC50分别为153.75,74.95,50.00,10.87,24.40mg·L-1.在这5种植物粗提物不同萃取部位中,红毛七和金不换氯仿部位对乙酰胆碱酯酶抑制活性强,其IC50为33.97,38.79mg·L-1,其清除DPPH自由基的IC50为302.95,79.45 mg·L-1.结论:金不换和红毛七粗提物氯仿部位具有较强的乙酰胆碱酯酶抑制活性和抗氧化活性,可进行进一步的追踪分离研究.
作者：杨赟；刘敏；李建；张玉强；陆亮 刊期： 2013年第02期
非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一系列除外酒精和其他明确损肝因素所致的,以肝实质细胞脂肪堆积为主要特征的一组代谢性疾病,包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纤维化及肝硬化等,这类疾病与肥胖、糖尿病、胰岛素抵抗等代谢综合征的相关组分关系密切.查阅了近10年内国内外相关文献,对NAFLD动物模型的建立进行了阐述.NAFLD动物模型主要分为营养、药物或毒物等环境因素诱发模型和基因敲除或基因突变等遗传因素诱发模型.由于目前NAFLD的发病机制尚未完全明确,临床治疗上也缺乏有效措施,因此,建立高质量的动物模型对于该疾病的发病机制、药物治疗的研究有着重大意义.
作者：郑全喜；王昆；刘超 刊期： 2013年第02期
目的:通过研究导痰汤干预细胞间黏附分子1(ICAM-1)与p53的表达,分析导痰汤治疗动脉粥样硬化的机制.方法:人脐静脉内皮细胞(HUVEC),传代培养1～3代用于实验.含药血清的制备为将导痰汤按照0.9g·kg-1·d-1剂量给SD大鼠ig 10d后,经腹主动脉采血,分离血清.实验共分7组:正常HUVEC为空白对照组,不含药血清处理HUVEC为空白血清对照组,肿瘤坏死因子α(TNF-α,200 U·mL-1)预处理HUVEC为TNF-α诱导组,先采用5％ (0.015 g·mL-1),10％ (0.03 g·mL-1),20％ (0.06g·mL-1)含药血清预处理HUVEC,再与TNF-α共培养为5％,10％,20％导痰汤组,使用p53特异性阻滞剂PFT-α(0.009g·mL-1)处理HUVEC为PFT-α阻滞组.通过PCR和Western blot等方法,观察导痰汤对TNF-α刺激脐静脉内皮细胞培养内皮细胞ICAM-1 mRNA的表达和p53表达的影响.结果:①TNF-α诱导组ICAM-1 mRNA和p53 mRNA的表达显著高于正常对照组和导痰汤对照组(P＜0.01)；使用导痰汤含药血清或PFT-α处理后,ICAM-1和p53 mRNA的表达显著下降(P＜0.05)；②TNF-α诱导组ICAM-与p53蛋白显著高于正常对照组和导痰汤对照组(P＜0.01).使用导痰汤含药血清或PFT-α处理后,ICAM-1与p53表达显著下降(P＜0.05)；③p53mRNA与ICAM-1mRNA表达水平呈显著正相关(r=0.981,P ＜0.01)；p53活性与ICAM-1水平呈显著正相关(r=0.854,P＜0.01).结论:导痰汤可以通过调节p53表达而抑制TNF-α刺激所致的脐静脉内皮细胞ICAM-1 mRNA的表达,故能起到治疗动脉粥样硬化的作用.
作者：陈文强；王玉来 刊期： 2013年第02期
目的:通过研究益气养血温阳方对泻药性便秘大鼠结肠Cajal间质细胞含量的影响,阐明益气养血温阳方治疗泻药性便秘的机制.方法:大鼠按照200mg· kg-1·d-1大黄免煎剂灌胃,再按每日200mg·kg-1·d-1递增,至半数以上动物出现腹泻,如此反复用药3月,造成“泻药性便秘”动物模型.将60只SD大鼠随机分为空白对照组、阳性对照(福松1.65g·kg-1)组、模型组、益气养血温阳方低、中、高剂量(8.35,16.7,33.4g·kg-1)组.阳性对照组、模型组、益气养血温阳方低、中、高剂量组给予大黄建立便秘大鼠模型,阳性对照和益气养血温阳方低、中、高剂量组按剂量给予药物治疗2周,取大鼠结肠组织,采用RT-PCR方法检测结肠中Cajal间质细胞表达.结果:益气养血温阳方高剂量组结肠组织Cajal细胞mRNA相对表达量为0.365 08±0.047,中剂量组为0.370 97±0.040,与模型组大鼠结肠组织中表达为0.298 55±0.046比较,有显著差异(P＜0.05).结论:益气养血温阳方通过改变Cajal间质细胞表达,促进结肠运动,起到治疗便秘的作用.
作者：吴至久；王飞 刊期： 2013年第02期
目的:探讨参苓白术散对抗生素相关性腹泻(AAD)主要致病菌艰难梭菌的体外抑菌作用.方法:按正常培养组(脑心浸液培养基培养)和加药培养组(脑心浸液培养基中加入不同稀释梯度的参苓白术散水煎剂,加药体积分别为体积比为:10-1,10-2,10-3,10-4),应用连续采样和分光光度法,测定4株艰难梭菌((NC-1,NC-2,SH182,和SH186,其中2株为A+B+,2株为A-B+)的体外生长曲线.结果:加药(参苓白术散水煎剂)体积比为:10-1,10-2,10-3,10-4的培养基对艰难梭菌NC-1,以及加药体各为10-1的参苓白术散水煎剂对艰难梭菌NC-2有明显的抑制作用(P＜0.05),不同稀释度的加药培养基对4种不同的艰难梭菌均有一定的影响,艰难梭菌大生长细菌菌落均有一定程度的减少.结论:参苓白术散对AAD病主要致病菌艰难梭菌在体外具一定的抑制作用.
作者：舒青龙；徐刚；叶荷平；章喜林；封勇；魏娜 刊期： 2013年第02期
目的:优选小蓟新型流动性饮片的制备工艺,并与传统小蓟饮片进行比较.方法:以蒙花苷质量分数为指标,选取粉碎度、加水量、滚丸转速为考察因素,采用正交试验优选流动性饮片的制备工艺；利用TLC,HPLC,红外等对小蓟传统饮片和流动性饮片进行比较.结果:优选的制备工艺为粉碎度80目,加1.8倍量水,滚圆转速300 r·min-1,制备的流动性饮片平均粒径(1.94±0.20) mm,圆整度9.09～27.7,堆密度0.3943g·cm-3,真密度0.6557g·cm-3,平均硬度6.2N,平均脆碎度0.30％.二者TLC图谱相同,传统饮片和流动性饮片中蒙花苷分别为0.64％,0.72％.二者煎出曲线较为接近,小蓟流动性饮片和传统饮片煎液的红外图谱基本一致.结论:小蓟新型流动性饮片和传统型饮片在药学上具有对等性,可替代使用.
作者：王苗苗；迟宗良；丛晓东；焦坤；张云；蔡宝昌 刊期： 2013年第02期
目的:建立川黄柏、关黄柏中6种有效成分含量的同时测定方法.方法:以HPLC采用Diamonsil C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),乙腈-水(1‰乙酸,2mmol醋酸铵)为流动相梯度洗脱,检测波长280nm,柱温25℃,流速1mL·min-1.结果:绿原酸、黄柏碱、木兰花碱、药根碱、巴马汀和小檗碱分别在20.00～320.00,18.75～130.00,25.00 ～ 200.00,5.00～100.00,20.00～ 200.00,0.09～1.80mg·L-1峰面积和质量浓度线性关系良好(r≥0.9990),平均加样回收率分别为98.1％,99.4％,97.5％,97.3％,104.0％,98.5％,RSD分别为0.5％,0.6％,0.8％,1.0％,1.4％,0.9％.结论:含量测定方法简便、稳定、重复性好,为黄柏药材质量控制和评价提供了依据.
作者：廉莲；万国盛；贾伟利；高慧媛 刊期： 2013年第02期
目的:以冠心平片为模型,研究中药半浸膏薄膜衣片的成型工艺.方法:单因素考察冠心平片的处方设计及制粒、压片的工艺条件；以包衣操作时间和包衣外观合格率为综合评价指标,采用正交试验优选冠心平片的薄膜包衣工艺参数,并对半成品、成品进行吸湿性研究.结果:冠心平片的流化床制粒处方为干膏粉加1.5％～2％微粉硅胶混匀,以1.9～2.0倍量60％乙醇为湿润剂；工艺条件为雾化压力0.10～0.12 MPa,物料温度51～53℃,进风温度85～90℃,风机流量120～140M3·h-1,供液泵转速10～15～20～26 r·min-1.薄膜包衣佳工艺参数为包衣液质量浓度16％,主机转速6～8r·min-1,片床温度45～50℃.冠心平颗粒佳含水量7.0％～9.0％,压片机压力0.4～0.6 MPa.吸湿率随相对湿度变化的数学方程为逻辑斯蒂模型,操作环境的相对湿度应控制＜62％.结论:优选的成型工艺稳定可行,可推广于冠心平片的大生产应用,为中药半浸膏薄膜衣片的大生产提供试验依据.
作者：张源；周琴妹；高洁 刊期： 2013年第02期
目的:分析掌叶半夏脂溶性成分的化学成分.方法:对乙醇提取后氯仿萃取得到的脂溶性成分进行了GC-MS分析.HP-5MS色谱柱(0.25 mm×0.25 mm×30 m);程序升温,进样口温度280℃,进样量1.0μL,分流比10:1.结果:共分离鉴定出三氯乙酸1.86％,顺式-1,2-环己二醇3.56％,庚基氢过氧化物1.66％,Z型-2-十一碳烯5.54％,1-丁氧基-2-乙基己烯4.13％,吡咯并[1,2-A]吡嗪-1,4-二酮6.36％,棕榈酸23.32％,10-十一碳炔酸33.81％,环戊烷十一酸1.11％,2,5-哌嗪,3-苄基-6-异丙基2.95％,2-溴(正)壬烷1.04％,吡咯并[1,2-A]吡嗪-1,4-二酮,六氢-3(苯)5.73％,4-乙基四氢-2H-噻喃1.77％,1,2,2溴二十二烷1.26％,1,1-二氯-2,2,3,3-四甲基环丙烷2.31％,(Z,Z,Z)-6,9,12-十八三烯苯基甲基酯等19种成分.结论:进一步确定了掌叶半夏脂溶性部分的化学成分,为掌叶半夏的抗肿瘤作用深入研究提供参考.
作者：栾阳；张慧；康廷国 刊期： 2013年第02期
目的:优选刺五加提取物缓释微球的制备工艺.方法:以载药量和包封率的综合评分为指标,采用正交试验法考察海藻酸钠质量分数、刺五加提取物与海藻酸钠的质量比、氯化钙质量分数和交联时间对制备工艺的影响.结果:佳制备工艺为海藻酸钠质量分数3.5％,剌五加提取物与海藻酸钠的质量比1:1,氯化钙质量分数4.0％,交联时间2h,载药量和包封率分别为10.11％,21.74％.制备的刺五加提取物缓释微球呈黑褐色、外观形态较圆整,粒径约0.45 mm,12h累积释放率达96.12％.结论:优选的制备工艺简单易行.
作者：汪洋；焦海胜 刊期： 2013年第02期
目的:优选D101型大孔吸附树脂纯化鸡骨草总黄酮的工艺条件.方法:以芦丁为对照品,采用紫外比色法测定总黄酮含量,以吸附率和洗脱率为指标,通过单因素试验考察对大孔树脂动态吸附和解吸条件.结果:佳工艺条件为上样质量浓度3g·L-1,上样流速3BV·h-1,2BV 80％乙醇为洗脱剂,pH 6.0,洗脱流速3.5 BV·h-1.鸡骨草黄酮纯度由17.95％提高到52.80％.结论:D101型大孔树脂对鸡骨草黄酮类物质有较好的纯化效果,该优选的工艺简单可行.
作者：廖春燕；杨欣绿 刊期： 2013年第02期
目的:建立培元通脑胶囊的质量标准.方法:采用薄层色谱法对培元通脑胶囊中何首乌、肉桂、赤芍及肉苁蓉进行定性鉴别；HPLC测定何首乌中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷的含量.色谱条件:Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(15:85),流速1.0 mL·min-1.结果:TLC的斑点清晰、分离度较好,阴性无干扰；2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷在0.0645～0.805 9μg线性关系良好,平均回收率为99.4％,RSD 2.2％(n=6).结论:所建标准可用于培元通脑胶囊的质量控制.
作者：李海燕；宋汉敏；李振国 刊期： 2013年第02期
目的:观察狼毒多糖(EFP-AW1)对S180荷瘤鼠免疫逃逸功能的影响.方法:将50只雄性ICR小鼠随机分为空白对照组、模型组、狼毒多糖100 mg·kg-1组、环磷酰胺100 mg·kg-1组(CTX)、联合给药组(EFP-AW1+ CTX).分组给药10d后,通过噻唑蓝(MTT)、酶联免疫吸附实验(ELISA)、流式细胞术(FCM)之方法,检测荷瘤鼠脾淋巴细胞增殖情况、转化生长因子β1(TGF-β1)、T淋巴细胞亚群(CD4+ T,CD8+ T)表达.结果:狼毒多糖可增加刀豆蛋白A(ConA)/脂多糖(LPS)诱导的荷瘤鼠脾淋巴细胞增殖能力(P＜0.05),降低血清中TGF-β1的分泌(P＜0.05),增加CD8+T细胞百分含量(P＜0.05).结论:ESP-AW1可通过增强荷瘤鼠抗肿瘤免疫应答功能,抑制肿瘤细胞在体内转移和复发.
作者：崔立然；徐浩；刘吉成；孙永旭；蒋丽艳 刊期： 2013年第02期
中国实验方剂学杂志
主管:国家中医药管理局
主办：中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
