学术投稿

应用SYBR Green I荧光染色同源基因定量聚合酶链反应快速诊断21-三体综合征

张茜;谢湘芝;经承学

关键词:21-三体综合征, 诊断, 荧光, SYBR Green I, 同源基因定量聚合酶链反应
摘要:目的建立一个快速、准确诊断21-三体综合征(21-三体)方法.方法取26例21-三体患儿及20例正常人DNA标本,引用一对引物同时PCR扩增两个同源基因片断:21号染色体长臂的人肝型磷酸果糖激酶基因(PFKL-CH21)及1号染色体的人肌型磷酸果糖激酶基因(PFKM-CH1),用SYBR Green I荧光染色,琼脂糖凝胶电泳、凝胶成像系统分析软件测光密度进行定量分析.结果 24个PCR循环检测两个同源基因扩增产物光密度之比:病例组为1.61±0.18;正常人组为1.01±0.06,两组比值分布无重叠区,诊断结果与染色体核型分析一致,约4 h可完成.结论 SYBR Green I荧光同源基因定量PCR方法省时、简单、快捷、准确诊断21-三体,为临床及产前诊断21-三体提供一种新的诊断方法.
中华实用儿科临床杂志相关文献
  • 小儿喉乳头状瘤18例

    目的探讨小儿喉乳头状瘤(JLP)的临床特点及治疗方法.方法回顾性分析18例JLP的临床资料.结果平均发病年龄2.6岁,2~4岁占66.2 %(12/18);平均病程3.5年,手术次数平均4.78次,治愈率66.7 %,有效率100 %,复发率22.2 %.结论 JLP病变广泛,有侵袭性及复发性,采用手术加免疫治疗,疗效满意.

    作者:张爱民;卢振民;连荣 刊期: 2004年第06期

  • Rett综合征男童1例

    患儿,男,5岁6个月,因智力减退、语言障碍伴手刻板运动2年余入我院.

    作者:屈素清;詹东明 刊期: 2004年第06期

  • 病毒性脑炎患儿血清镁与钾相关性

    1998年8月-2003年8月我们对病毒性脑炎患儿血清镁、钾离子关系进行研究.现报告如下.

    作者:赵虹光 刊期: 2004年第06期

  • 急性肺炎多病原混合感染的检测及分析

    目的了解急性肺炎时肺炎链球菌(SP)、流感嗜血杆菌(Hi)、卡他布兰汉菌(BC)、肺炎支原体(MP)及肺炎衣原体(CP)等多病原混合感染的发病情况.方法采用酶免疫分析法,对53例住院急性肺炎患儿的双份血清进行不定型Hi抗体、B型Hi荚膜多糖抗体和全菌抗体进行检测,SP溶血素抗体和C-多糖抗体,循环免疫复合物中SP溶血素抗体、表面蛋白A抗体和C-多糖抗体,CB全菌抗体及MP抗体的检测;采用免疫荧光法检测患儿双份血清中CP抗体;并同时进行血液普通细菌培养.结果 53例肺炎患儿中32例(占60.4 %)病原学检测阳性.其中单一病原体感染21例,2种和3种病原体混合感染分别为8例和3例.在各种病原体中,SP和CP感染常见(各占20.8 %,11/53),其次为MP感染(占16.7 %,7/42)和Hi感染(占13.2 %,7/53).结论急性肺炎时SP、CP、MP和Hi等是常见的病原,在小儿肺炎经验治疗时,多病原体混合感染情况应予以重视.

    作者:王亚亭;杨永弘;胡允文;王亚娟;Didier Leboulleux;Maija leinonen;Heikki Peltola 刊期: 2004年第06期

  • 兰菌净对反复呼吸道感染患儿唾液分泌型免疫球蛋白A水平影响

    目的观察兰菌净对呼吸道黏膜免疫的激活效应及对反复呼吸道感染(RRI)预防效果.方法选择门诊病例35例,根据年龄分为3组:<1岁4例、1~3岁18例、>3岁13例,兰菌净预防呼吸道感染,由家长记录或门诊随访呼吸道感染发作次数、病程.收集用药前后患儿唾液标本经放免法(DAB-PEG法)检测分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量,并计算sIgA提高率.结果兰菌净明显提高患儿唾液sIgA含量(P<0.01),显著降低呼吸道感染的发病次数,缩短病程,减轻病情.用药前后唾液sIgA提高率以<1岁组高,>3岁组居中,1~3岁组低.治疗过程中不良反应轻微.结论兰菌净可有效激活呼吸道黏膜免疫,预防呼吸道感染.

    作者:方红;金红芳;董永绥;王宏伟 刊期: 2004年第06期

  • 应用SYBR Green I荧光染色同源基因定量聚合酶链反应快速诊断21-三体综合征

    目的建立一个快速、准确诊断21-三体综合征(21-三体)方法.方法取26例21-三体患儿及20例正常人DNA标本,引用一对引物同时PCR扩增两个同源基因片断:21号染色体长臂的人肝型磷酸果糖激酶基因(PFKL-CH21)及1号染色体的人肌型磷酸果糖激酶基因(PFKM-CH1),用SYBR Green I荧光染色,琼脂糖凝胶电泳、凝胶成像系统分析软件测光密度进行定量分析.结果 24个PCR循环检测两个同源基因扩增产物光密度之比:病例组为1.61±0.18;正常人组为1.01±0.06,两组比值分布无重叠区,诊断结果与染色体核型分析一致,约4 h可完成.结论 SYBR Green I荧光同源基因定量PCR方法省时、简单、快捷、准确诊断21-三体,为临床及产前诊断21-三体提供一种新的诊断方法.

    作者:张茜;谢湘芝;经承学 刊期: 2004年第06期

  • 新生儿高未结合胆红素血症与代谢性酸中毒的关系

    目的探讨代谢性酸中毒对新生儿高未结合胆红素血症的影响.方法对200例新生儿高未结合胆红素血症患儿进行血浆二氧化碳结合力(CO2CP)检测.结果 CO2CP低于正常值182例(91 %).结论及时发现并纠正代谢性酸中毒,有利于新生儿高未结合胆红素血症患儿黄疸的消退.

    作者:张晓云 刊期: 2004年第06期

  • 儿童消化道出血病因的临床与病理研究

    目的分析儿童消化道出血(GIB)的病因,了解其临床与病理检查结果的关系.方法对153例GIB患儿进行胃镜或结肠镜及其相应病理学等检查,包括幽门螺杆菌(Hp)检测.结果明确病因140例,确诊率91.5 %,上、下消化道出血(UGIB、LGIB)分别为74例和66例.胃病理检查56例,均显示慢性浅表性胃炎(CSFG),Hp(+)33例.炎症组与溃疡组 Hp(+)检出率有显著差异(P<0.05).对轻、中、重度炎症Hp(+)检出率进行比较,3组均有显著差异(P均<0.05).LGIB前3位病因依次为结、直肠息肉、梅克尔憩室和肠重复畸形.LGIB 66例中,病理证实64例(97 %).结论儿童UGIB以十二指肠溃疡(DU)并CSFG多见,溃疡组Hp感染率高于炎症组,且胃部炎症越严重,Hp感染率越高.LGIB以结、直肠息肉多见.小肠部位的肠系膜及肠壁血管瘤少见,且经常规检查不易确诊.

    作者:徐樨巍;王惠玲;申芳娥 刊期: 2004年第06期

  • 痉挛型脑性瘫痪271例临床分析

    脑性瘫痪(CP)指在妊娠期到新生儿期各种原因而致的非进行性病变为基础,形成永存的、但可变化的运动姿势异常.其发病率国外报道活婴0.15 %~0.5 %[1],我国发病率为0.18 %~0.4 %[2],其中痉挛型占60 %~70 %.现将我院近年来收治痉挛型CP病例报告如下.

    作者:邓亚仙;高宝勤;杨伟力;俞雅珍;王桂芬 刊期: 2004年第06期

  • 酸性多糖治疗幼鼠骨质疏松症实验研究

    目的观察酸性多糖治疗骨质疏松的效果.方法将34只1月龄性未成熟雌性大鼠以70 mg/(kg·d)维甲酸灌胃15 d复制骨质疏松模型,模型复制成功后随机分为A、B组进入治疗期.A组大鼠以常规饲料+10 mg/(kg·d)酸性多糖口服15 d;B组大鼠以常规饲料+10 mg/(kg·d)葡萄糖口服15 d作对照.治疗15 d后,取大鼠下肢骨样本制成病理切片,观察治疗效果.结果酸性多糖治疗后,A组大鼠骨小梁平均宽度增加,骨小梁平均间隔宽度减少;B组大鼠骨小梁稀少,骨小梁平均间隔宽度增加.结论酸性多糖可抑制破骨细胞活性,明显增加骨质疏松大鼠的股骨骨量.

    作者:司予北;王家勤;郭学鹏 刊期: 2004年第06期

  • 新生儿胎粪吸入综合征血液淋巴细胞L-selectin水平变化

    目的了解新生儿胎粪吸入综合征(MAS)患儿血液淋巴细胞L-selectin水平变化,探讨其在MAS中意义.方法采用流式细胞仪检测21例MAS患儿生后d1及25例足月健康新生儿脐血淋巴细胞表面L-selectin水平.结果 MAS患儿生后d1 L-selectin水平[(82.85±8.71) %]明显高于对照组.MAS患儿L-selectin与生后1 h血pH的相关系数为0.114.结论 MAS患儿生后d1淋巴细胞L-selectin明显增高,与血pH无关.

    作者:宋金枝;吴本清;潘小梅;唐沂;贺务实 刊期: 2004年第06期

  • 早产儿呼吸机相关性肺炎临床分析

    目的探讨早产儿呼吸机相关性肺炎(VAP)的发病因素和防治措施 .方法对应用呼吸机治疗的69例早产儿临床资料进行回顾性分析.结果发生VAP 28例;插管次数≥3次、机械通气(MV)时间>72 h、胎龄≤32周及出生体质量<1500 g的VAP发生率高,与其他组比较有显著差异(P<0.01).结论插管次数、MV时间、胎龄及出生体质量是早产儿VAP的高危因素.对早产儿VAP应采取综合性措施防治.

    作者:杨平 刊期: 2004年第06期

  • 孤独症16例误诊分析

    目的探讨孤独症误诊原因.方法对20例孤独症患儿临床资料进行分析.结果误诊为精神发育迟滞6例、表达性语言障碍5例、注意缺陷多动障碍4例、儿童精神分裂症1例.结论本症误诊原因为临床表现多样及医师对该病认识不足.故应提高对该病的认识,以降低误诊.

    作者:李文军 刊期: 2004年第06期

  • 早产儿窒息性脑损伤的计算机X线断层照像术分析

    目的探讨早产儿窒息性脑损伤的计算机X线断层照像术(CT)特征及其与窒息程度的关系.方法分析67例窒息性脑损伤早产儿CT表现,并进行脑损伤分度及其与窒息程度相对照.结果窒息早产儿67例中脑损伤轻度21例,中度24例,重度22例;脑损伤并出血15例.结论早产儿窒息性脑损伤的CT诊断要密切结合临床资料,才能做出正确诊断.

    作者:侯庆宇;郭纪生;李培嵩 刊期: 2004年第06期

  • 1,6-二磷酸果糖对新生儿窒息疗效及其对血清酶的影响

    目的探讨1,6-二磷酸果糖对新生儿窒息疗效及其对血清酶的影响.方法将64例新生儿窒息伴血清酶变化患儿,随机分为治疗组与对照组,两组均采用综合治疗,治疗组予1,6-二磷酸果糖250 mg/(kg*次),2次/d静推,疗程7~10 d,并于入院后12 h内及治疗后检查血清酶.结果窒息新生儿治疗前血清酶均增高,且与窒息程度呈正相关;轻度窒息治疗组与对照组治疗后门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)相比较无显著差异(P>0.05),α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)、CK-MB、肌酸激酶(CK)相比较有显著差异(P<0.05);重度窒息治疗组与对照组治疗后AST、LDH、CK-MB、HBDH测定比较有显著差异(P<0.05).结论 1,6二磷酸果糖可使窒息新生儿升高的血清酶显著下降,提示其对治疗新生儿窒息及预防器官损伤有一定作用.

    作者:高东培;高雯;段红宝 刊期: 2004年第06期

  • 卡介苗、干扰素γ及维生素A预防毛细支气管炎患儿发生哮喘的临床研究

    目的探讨卡介苗(BCG)或联用干扰素γ(IFN-γ)/维生素A(VitA)预防毛细支气管炎(毛支)患儿发生喘息的效果.方法 44例毛支患儿予单独BCG或联用IFN-γ/ VitA治疗,于治疗前和治疗3个月后进行PPD皮试,并随访,平均1年时间,观察喘息发作情况.19例未接受BCG接种的毛支患儿,作为疾病对照组.结果 BCG接种后PPD平均硬结直径大于干预前及对照组恢复期,以联合IFN-γ/ VitA治疗组更突出.BCG单用或联用IFN-γ/VitA组1年内喘息发作频率低于对照组恢复期,单用或联用组间差异无显著意义.结论 BCG可促进毛支患儿PPD皮试阳转,1年内喘息发作频率降低,可预防毛支患儿日后发展为哮喘.IFN-γ/VitA与BCG具有一定的协同作用.

    作者:刘雅丽;杨锡强;王莉佳;蒋莉萍 刊期: 2004年第06期

  • 新生儿高胆红素血症的防治

    新生儿黄疸是新生儿期常见症状,尤其是早期(生后1周内)新生儿更多见.由于新生儿胆红素代谢的特点,约有50 %足月儿和80 %早产儿可出现肉眼可见黄疸,一般足月儿血清胆红素浓度不超过205 μmol/L(12 mg/dl),早产儿胆红素不超过256 μmol/L(15 mg/dl),称为生理性黄疸.在此时期内,由于围生、感染、溶血等因素所致病理性黄疸也不少见,胆红素常超过205~256 μmol/L,称为高胆红素血症(简称高胆,主要以未结合胆红素增高为主的病理性黄疸).足月儿如超过308~342 μmol/L(18~20 μmol/L)即引起胆红素脑病(核黄疸),而早产儿由于血脑脊液屏障功能差,如同时有病理因素存在,影响其血脑脊液屏障功能,超过171 μmol/L(10 mg/dl)即有发生核黄疸可能,可危及生命或造成中枢神经系统永久性损害而致残.国内高胆发病率较高,不少资料报道以高胆为主诉者占住院新生儿首位,可达30 %~50 %.就诊较晚的重症高胆患儿常于住院时已发生核黄疸而失去治疗时机.本症多可防治,在一些发达国家对生后具有高危因素新生儿均进行预防性治疗,高胆已很少见.如何降低高胆的发病率、死亡率和致残率已是当务之急.应从以下3方面着手.

    作者:黄德珉 刊期: 2004年第06期

  • 纳洛酮与硫酸镁治疗新生儿缺氧缺血性脑病疗效对比

    目的比较纳洛酮与25 %硫酸镁治疗新生儿缺氧缺血脑病(HIE)疗效.方法将79例HIE患儿随机分为A组(39例)和B组(40例),A组肌注25 %硫酸镁,B组静滴纳洛酮.治疗后检测其红细胞游离钙、血浆钙、镁及β-内啡肽浓度变化.结果 A组患儿红细胞游离钙浓度和血浆钙、镁浓度改善较B组快,而B组患儿β-内啡肽降低幅度大于A组.结论 25 %硫酸镁对HIE急性期治疗效果较好,而纳洛酮有利于受损神经细胞功能恢复.

    作者:杨中文;夏小岚;章奕 刊期: 2004年第06期

  • 室息新生儿器官功能损害的临床研究

    目的了解窒息新生儿器官功能损害的发生率及程度,探讨与之有关的高危因素,为降低窒息患儿病死率寻求新途径.方法将222例窒息患儿分为轻度窒息、重度窒息组进行研究.并将主要器官的功能损害分为轻度与重度加以分析.结果窒息后器官损害发生率达90.1 %,多器官损害发生率为71.6 %.重度窒息组器官受损率明显高于轻度窒息组(P<0.05).而各器官损害均以轻度为主.重度窒息5 min Apgar评分≤ 6分、入院时即刻血气分析pH≤ 7.20、入院晚及需用机械通气治疗患儿多器官损害发生率均明显高于对照组(P均<0.05).结论器官损害的发生与窒息程度、复苏效果及接受治疗的早晚有关;提示加强围生期母子保健、提高医护人员复苏水平、及时转运危重患儿及采取合理有效的综合治疗等措施均有利于降低窒息新生儿的器官损害发生率及病死率.

    作者:刘捷;曾超美 刊期: 2004年第06期

  • 含CpG基序的寡聚脱氧核糖核苷酸辅助乙肝疫苗对孕鼠和仔鼠的免疫效果

    目的观察不同剂量CpG-1826联合乙肝疫苗注射孕鼠后,对孕鼠本身及其仔鼠的特异性免疫效果.方法分别用不同剂量(10、20、40 μg/只)CpG-1826作为乙肝疫苗佐剂辅助免疫孕鼠,ELISA方法检测孕鼠和仔鼠血清乙肝表面抗体(HBsAb)水平,并观察仔鼠存活数量和生长发育指标(体质量、身长、胎脑和胎仔体质量系数)变化.结果给孕鼠注射CpG-1826+乙肝疫苗或单纯乙肝疫苗后,孕鼠血清HBsAb水平总是高于仔鼠水平(P<0.01),但孕鼠与仔鼠血清HBsAb水平间无相关性存在(r=0.379 P>0.05);CpG-1826+乙肝疫苗免疫孕鼠后,20 μg/只剂量组孕鼠和仔鼠血清HBsAb含量均高于10、40 μg/只剂量组,单纯乙肝疫苗组及空白对照组(P<0.05),但仔鼠存活数量及体质量、身长、胎脑和胎仔体质量系数等生长发育指标间均无显著差异(P均>0.05).结论 CpG-1826(20 μg/只)联合乙肝疫苗免疫孕鼠时,既能显著提高孕鼠及其仔鼠血清特异性免疫抗体水平,又不对仔鼠生长发育造成不良影响,是一种在妊娠期即可刺激免疫系统不成熟个体免疫活性的理想免疫佐剂.

    作者:肖昕;徐春光;熊爱华;蒋建伟;徐燕芳 刊期: 2004年第06期

中华实用儿科临床杂志

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