包志明；丁宸；迟银娥
目的建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌(HP)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫渗滤法(DIGFA).方法采用枸橼酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记葡萄球菌A蛋白(SPA),将重组的CagA抗原固定于硝酸纤维素膜上.血清中抗CagA IgG与金标记SPA及硝酸纤维素膜上的固相抗原结合后,形成肉眼可见的红色斑点.结果用DIGFA与酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒对比检测了326份血清标本中抗CagA抗体,两法符合率为96.6%.结论 DIGFA检测血清中的抗CagA抗体特异性强,简便快速,无需特殊仪器设备,有实用价值.
作者：侯瑜；张菊；李质馨；田洪艳；刘晓冬；徐冶 刊期： 2003年第06期
目的建立一种基于单碱基延伸原理的基因分型新方法 ,即 SnaPshot.方法设计单条PCR引物,使其将要延伸的第一个碱基就是需进行基因分型的位点,用荧光标记的双脱氧NTP(ddNTP)作为测序底物,使测序反应只延伸一个碱基,从而能够鉴定该SNP.结果 SnaPshot能同时对7～8个不同的SNP位点进行96个样本基因分型.结论 SnaPshot是一种快速、高通量的基因分型新方法,可加快基因分型以及疾病致病基因的研究速度.
作者：吴刚；李梅 刊期： 2003年第06期
为了建立白族地区静脉血血细胞参数的参考值,我们对大理地区白族健康成人1 110例进行静脉血血液分析仪各参数调查,现将结果报告如下.
作者：张群智；孔山；沈红霞；左秀华；陈体仙；何作顺 刊期： 2003年第06期
尿液室内质控属等级资料,不能象计量资料那样直观、及时地发现误差和反映误差的性质,为此,笔者提出了一种新的室内质控方式--偏倚累加法质控图,作为当前尿液质控的一种补充,暂称它为双偏倚质控图.
作者：顾春刚 刊期： 2003年第06期
目的筛选用于三维试验和鉴别ESBLs及AmpC两类β-内酰胺酶的适宜酶抑制剂浓度.方法选择能抑制ESBLs的克拉维酸(CA)和能抑制AmpC酶的邻氯西林(CLO),稀释成不同浓度,对E.coli DH5αTEM-1、E.coli DH5αSHV-1、肺炎克雷伯菌(K.pne)ATCC700603、阴沟肠杆菌(E.clo)029、E.clo 1194E、E.clo 029M和E.coli DH5αACT-1等7株已知菌进行单一抑制剂佳浓度的选择,再据此进行两种抑制剂的联合抑酶作用检测.用耐药性较强的临床分离的138株阴沟肠杆菌考察方法的可行性.结果 CA和CLO的适浓度分别为 20 mg/L和2 mol/L,产AmpC酶的E.clo 029M和E.coli DH5αACT-1,以及产ESBLs的K.pne ATCC700603菌的酶活性均可被各自相应的酶抑制剂抑制,也可被两种酶抑制剂联合抑制,而不显现抑制剂自身对试验指示菌的抑制作用.临床分离株中同时产ESBLs和AmpC酶的菌株,不被单一的酶抑制剂抑制或只能部分抑制,需用CA和CLO联合才能抑制酶的全部活性.结论所选择的两种抑制剂的浓度能对产单一ESBLs或AmpC酶的菌株,以及同时产这两种酶的菌株所提取的酶活性起良好的抑制作用.
作者：邵海枫；刘金波；张小卫；王卫萍；李珍大 刊期： 2003年第06期
目的探讨血浆高半胱氨酸(Hcy)在肾脏病患者发生心血管疾患中的影响.方法采用荧光偏振免疫分析、DNA基因型别分析等技术,对50例晚期肾脏病患者及肾移植受者进行了Hcy水平、N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性分布测定及相关分析,并与肾病综合征患者及正常人进行对照.结果 (1)受检人群中Hcy水平较正常人及肾病综合征患者组明显升高;(2)受检人群中MTHFR的TT突变机率较正常人及肾病综合征组明显升高;(3)TT基因型与Hcy水平升高及心血管疾患的发生机率密切相关.结论血浆中的Hcy可能是晚期肾脏病患者和肾移植受者体内的一种重要毒性物质.受检人群中MTHFR的高频率TT突变可能与血浆Hcy的水平升高有关.
作者：姜傥；曾智杰；刘云启；刘敏；周建中；何惠娟；关伟明 刊期： 2003年第06期
慢性肾功能不全患者常伴有动脉硬化与脂代谢紊乱.为了探讨慢性肾功能不全患者的血脂变化,测定了肾功能不全病人及健康对照者各项血脂,结果如下.
作者：李辉；马建锋 刊期： 2003年第06期
目的建立简便、多重HBV 多聚酶基因序列中拉米呋啶耐药性相关的基因突变的检测方法.方法采用终点终止法和偏振光检测技术进行点突变的检测.对HBV多聚酶基因进行PCR扩增,然后用特异探针与扩增产物中待测核苷酸的下游序列杂交,使探针的3′可以在DNA聚合酶的作用下,依据其互补链上的待测核苷酸连接上一个标有特定荧光素的ddNTP,然后检测该3′端带有荧光素的探针,根据检测到的荧光素种类和偏振光的强度判定待测点是何种核苷酸.结果该方法可以检测出HBV 多聚酶基因序列中特定位置的核苷酸类型,能检测1×101个拷贝的模板量.对30例经过6个月以上拉米呋啶治疗的患者血清进行检测,检测出其中有3例是甲硫氨酸(M)密码子ATG中的A→G变异;2例是ATG中的G→C变异;1例是ATG中的G→T.结论该技术可以对血清中HBV 多聚酶基因序列中点突变以及其他基因突变进行检测.
作者：郭晏海；吕贯庭；赵锦荣；张菊；白玉洁；闫小君 刊期： 2003年第06期
我们使用超敏CRP试剂盒测定血浆CRP,观察体外循环及因心肌缺血/再灌注损伤引起的CRP水平的改变.
作者：蒋朝晖；范荣坦；左大鹏 刊期： 2003年第06期
目的建立检测人体皮肤组织中趋化因子受体基因的RT-PCR方法.方法取20例银屑病患者皮损及皮损边缘未受累部位皮肤,并收集10例健康人皮肤,用2.5 g/L分散酶(dispase)消化分离真皮、表皮,TRIzol提取RNA ,逆转录合成cDNA,PCR扩增CXC型趋化因子受体CXCR2片段.结果银屑病患者皮损部位表皮及真皮中的CXCR2 表达水平(为靶序列与β-肌动蛋白序列吸光度之比,下同)分别为1.29±1.13和2.42±1.26,明显高于皮损边缘部位及健康对照皮肤(分别为0.52±0.46、0.92±0.60和0.02±0.02、0.05±0.04)(均P＜0.01),CXCR2 基因表达在真皮高于表皮.结论 CXCR2可能参与银屑病的发病机制,建立的检测人体皮肤组织中趋化因子受体基因的RT-PCR基本可靠.
作者：杨桂兰；陈志强；郑家润；李新宇；陈沄 刊期： 2003年第06期
我院于2003年5月收治了2例临床确诊为SARS的患者,为研究SARS病程中血清酶的变化规律,对其进行了全程血清酶检测,现报告如下.
作者：周镇先；薛蓉；张永臣；赵伟 刊期： 2003年第06期
目的建立血清氯化物的α-淀粉酶及其底物2-氯-4-硝基苯-α-D-麦芽三糖苷(CNP-G3)直接测定方法.方法根据氯离子是α-淀粉酶的激动剂原理建立氯化物测定方法,并做方法学评价.结果测定结果的平均偏差率为0.46%;线性范围50～150 mmol/L;平均回收率为100.62%;批内CV＜1.24%,日间CV＜1.86%,总CV1.45%～2.24%;加入高浓度的维生素C、葡萄糖、蔗糖、果糖、α-淀粉酶、三酰甘油、血红蛋白、胆红素、钙离子、溴离子、碘离子、氟离子、硫氰酸钾、对硝基酚、叠氮钠和硫酸铵均未显示干扰.与硫氰酸汞比色法(MTC)(±s)比较:MTC法(X):(95.66±14.45)mmol/L,酶法(Y):(95.62±14.93)mmol/L,t=0.078,P＞0.5,Y=1.016X-1.587,r=0.984,n=93,P＜0.001;与离子选择电极法(ISE)(±s)比较:ISE法(X):(99.00±13.11)mmol/L,本法(Y)(98.61±12.70)mmol/L,t=0.140,P＞0.5,Y=0.962X+3.375,r=0.993,n=44,P＜0.001.溶解的工作试剂(R1、R2)2～8℃冷藏至少可以稳定14天.结论该方法测定成本低,准确、精密、线性范围宽,稳定性好,在抗卤族元素溴、碘及硫氰酸等阴离子的干扰方面,显著优于其他方法.
作者：张孝山；帅真；李明润；关俊玲；何庆；杨彬；徐海津 刊期： 2003年第06期
为了解致病性弧菌对抗生素的耐药情况,我们于2002年6月～10月对本市沿海某医院肠道门诊的1 146例急性腹泻病人的粪便进行了致病性弧菌的分离鉴定和药敏试验,结果如下.
作者：庞五妹 刊期： 2003年第06期
目的建立前列腺特异膜抗原(PSM)mRNA检测方法.方法利用异硫氰酸胍/酚/氯仿/异戊醇一步法从前列腺癌患者外周血有核细胞或前列腺癌组织中提取总RNA,进行RT-PCR扩增.结果在PCR反应体系中投入相当于1～100个癌细胞所含总RNA量时,均能得到清晰的262 bp的产物带.结论本法有很高的稳定性和灵敏度.临床应用有助于早期发现前列腺癌转移、复发和判断疗效.
作者：杨道理；李保昌 刊期： 2003年第06期
目的使用Fast-Read10板进行尿沉渣计数时,通过AMP 2000-U对三种不同计数方式的扫描结果进行比较,选择佳计数方式.方法选择50份尿常规显微镜检阳性标本,分别用三种计数方式测定标本中的红细胞、白细胞数目,将同一份标本取得的三个结果进行配对t检验,并与UF-100的结果比较.结果 (1)选取每个中格内靠左下角小角进行计数的第一种方式与选取每个中格内四个不同角的小格进行计数的第二种方式的计数结果无显著差异(P＞0.05).(2)第三种方式选取每个中格中央任一小格进行计数的结果与前两种计数方式比较有差异(P＜0.01).(3)第三种计数方式的计数结果与UF-100的计数结果无显著差异(P＞0.05).结论三种计数方式计数尿沉渣的结果不一致;计数每个中格中央小格尿沉渣的计数方式与UF-100结果一致,比较可靠.
作者：周春红；顾可梁；陈巧林 刊期： 2003年第06期
当前,自动化的血液及尿分析仪在我国已相当普及,它不仅大大提高了临床检验的效率,减轻劳动强度,促进了检验方法的标准化和结果的可比性,而且在一定程度上也提高了检验的精密度和准确性.这类仪器的显著特点之一是,将原先要在显微镜下辨认或计数的细胞,改变为根据细胞的大小、内部和表面结构、加入特殊试剂(如溶血剂、细胞化学试剂和染色剂等)后细胞的变化,用测量其电阻、对高频电磁波的传导性、在不同角度测细胞对光的散射程度以及用光度计测定颜色变化等光学和电学方法,直接或间接地加以计数和区分.
作者：朱忠勇 刊期： 2003年第06期
目的探讨适于推广的标准、规范的尿沉渣检查方法.方法将自己研制的尿沉渣倒置显微镜分析系统与FAST-READR 102尿沉渣定量计数板法对比观察尿液标本中的细胞及管型.结果两种方法计数结果无显著性差异(P＞0.05),均具有良好的重复性.结论计数板法操作要求严格,程序较为繁琐,目前普及尚有困难;尿沉渣倒置显微镜分析系统操作简单、准确,适于临床基层推广.
作者：程大林；蔡媛媛；陈宏础 刊期： 2003年第06期
为了了解常州地区Neisseria gonorrhoeae(NG,淋病奈瑟菌)分离株青霉素耐药状况和可能存在的耐药机制,我们对23株NG配对作了青霉素药敏试验、TEM基因和β-内酰胺酶检测.并对2株具青霉素耐药表型而TEM基因、β-内酰胺酶均为阴性的NG进行了penA基因分析,结果报告如下.
作者：郑亚芬；承晓京；黄瑞萍 刊期： 2003年第06期
目的探讨553株肠球菌标本的分布,了解其对18种抗生素的药物敏感情况和耐万古霉素菌株的检出情况.方法选取2000年1月～2001年12月院内感染患者分离标本,使用Vitek-two鉴定系统进行菌种鉴定及药敏试验,并根据万古霉素和替考拉宁药敏情况进行万古霉素耐药临床分型.结果 553株肠球菌中粪肠球菌508株(91.9%),屎肠球菌45株(8.1%).粪肠球菌对18种抗生素呈多重耐药,20%粪肠球菌耐高浓度庆大霉素.18株耐万古霉素菌株分型为VanB 9株,VanA 6株,VanC 3株.45株屎肠球菌未发现万古霉素耐药株.结论肠球菌是院内感染的重要病原菌,由于其多重耐药,成为临床治疗的难题.在治疗肠球菌感染时要合理使用抗生素.
作者：张正；王贺；许淑珍；赵素蕊；刘文云；严薇 刊期： 2003年第06期
无乳链球菌需用CAMP试验鉴定,该试验的准确性直接影响鉴定结果.血平板是该试验的关键培养基.为探讨血平板中的血液、基础粉、湿度、保存时间对试验的影响,我们分别用五种血平板:(1)哥伦比亚琼脂粉加羊血液;(2)哥伦比亚琼脂粉加人血液;(3)营养琼脂粉加羊血液;(4)营养琼脂粉加人血液;(5)市售商品血平板,在不同时间做CAMP试验.所用无乳链球菌为卫生部临床检验中心质评菌株.
作者：郭志勤 刊期： 2003年第06期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
