学术投稿

逆转录病毒载体介导PIG-A基因在突变型K562细胞中的表达

李振宇;徐开林;邱婷婷;潘秀英;何徐彭;孙海英;李德鹏;鹿群先

关键词:逆转录病毒载体, Pig-a基因, 突变型K562细胞
摘要:目的 应用逆转录病毒载体将PIG-A cDNA转导至突变型K562细胞中,观察是否能够逆转K562细胞CD59的表达.方法 采用PCR方法从质粒pEBPIG-A中扩增PIG-A基因片断,BamH Ⅰ及xho Ⅰ双酶切后连接至逆转录病毒载体pLEGFP-C1相应位点.脂质体法转染PA317包装细胞,收集病毒上清感染突变型K562细胞,流式细胞仪测定感染前后CD59的表达情况.结果 重组逆转录病毒载体转染PA317包装细胞后,24~48 h荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白的表达.G418筛选后,病毒滴度测定达(1.6±0.2)×105CFU/mL.感染K562细胞前后测定CD59的表达率分别为4.5%±0.7%及21.3%±0.3%(P<0.01).结论 成功构建了PIG-A基因逆转录病毒载体,感染突变型K562细胞后可以提高其CD59的表达.
中国血液流变学杂志相关文献
  • 特发性血小板减少性紫癜患者B细胞CD40的表达及临床意义

    目的 探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者B细胞水平及其表面CD40表达水平的变化.方法 利用流式细胞术(FCM)检测患者外周血中B细胞水平及其表面CD40表达水平的变化.结果 ITP组B细胞及其表面CD40表达水平显著高于正常对照组,两者之间无相关性.结论 B细胞及其表面CD40表达水平的变化能在一定程度上反映ITP的病理机制,为ITP的诊断提供一定的帮助.

    作者:刘莱;钱毓晋;李莼华 刊期: 2006年第04期

  • 186例儿童急性淋巴细胞白血病免疫表型特征

    目的 回顾分析186例儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)免疫表型结果,以期了解儿童ALL免疫表型的特征,为临床诊断、微小残留病(minimal residual disease,MRD)的监测提供依据.方法 采用多参数流式细胞术(multiparameter flow cytometry,MFC),利用CD45PE-cy5/SS设门,完成186例儿童ALL病人的免疫分型.结果 在186例ALL中,B系ALL78.5%(146/186),T系ALL19.3%(36/186),T/M混合型ALL1.1%(2/186),B/M混合型ALL1.1%(2/186).白血病相关免疫表型(characterization of leukemia-associated immunotyping,LAIP)的出现频率为:B-ALL CD19+/CD10+/CD117+1.4%;CD19+/CD10+/CD13+25.3%;CD19+/CD10+/CD33+21.3%;CD19+/CD10+/CD2+5.5%;CD10+/CD34+/CD45±86.9%;CD19+/CD34+/CD20+24.7%;CD19+/CD10++/CD45±67.1%;CD19+/CD10-/CD20-4.1%.T-ALL CD7+/CD13+/CD45±5.6%;CD7+/CD33+/CD45±2.8%;TdT+/CD3+/CD45±100%;CD7++/CD2±/CD45±77.8%;CD7+/CD4+/CD3-16.7%;CD7+/CD8+/CD3-16.7%.结论 儿童B-ALL比率高于T-ALL,约为T-ALL的4倍,混合细胞白血病在儿童很少见.而且儿童ALL均具有独特的LAIP特征,因此免疫表型分析对于白血病的诊断和MR监测可提供非常客观的依据.

    作者:朱明清;耿美菊;何海龙;王爱清;陈黎 刊期: 2006年第04期

  • 股骨粗隆下骨折的治疗体会

    目的 探讨股骨粗隆下骨折的不稳定骨折的治疗方法.方法 自2000年1月~2004年8月采用切开复位股骨近段解剖钢板和重建钉内固定,共25例.结果 根据术前和术后X片及手术后髋关节功能站立、行走等情况评估随访6月~2年,优8例,良12例,差5例.结论 股骨近段解剖钢板治疗股骨粗隆下不稳定骨折在基层医院虽并发症较多,但容易开展,重建钉有一定难度,但较髓外固定效果更佳.另外两者均应重视内侧皮质骨的复位.

    作者:丁伟 刊期: 2006年第04期

  • Twin-block矫治器在安氏Ⅱ1分类错(牙合)畸形的临床应用与分析

    目的 探讨Twin-block矫治器在安氏Ⅱ1分类错(牙合)畸形患者中的应用与疗效情况.方法 选择12例以下颌后缩为主的替牙(牙合)晚期或恒牙(牙合)早期的安氏Ⅱ1分类错一畸形患者,年龄10~12岁,平均年龄11.2岁,每天24h配戴Twin-block矫治器10~12个月;通过对患者治疗前后X线头颅侧位定位片进行比较和分析.结果 12患者应用Twin-block矫治器后,SNB角明显增加,ANB角明显减小,下颌体和升支明显增加,磨牙关系中性或接近中性,前牙覆(牙合)覆盖正常或基本正常,均取得满意疗效.

    作者:王先军 刊期: 2006年第04期

  • 乳腺癌的高频超声表现与手术后病理对照分析

    目的 探讨乳腺癌的高频声像图特点及病理基础,以进一步提高超声诊断水平.方法 对经手术后病理证实的48例乳腺癌声像进行回顾性分析.结果 该组大部分病例(除4例误诊外)形态不规则,常呈分叶状,毛刺状,边缘粗糙,境界不清,内部回声不均匀,可见微小砂粒状钙化灶,后方回声衰减,恶性肿块的血流显示率较高,收缩期大血流速度及阻力指数高于良性肿块.结论 1)超声对乳腺肿块的定性诊断具有明确的临床应用价值.2)乳腺恶性肿块的病理基础不同,导致了不同类型的超声表现.

    作者:卞和星 刊期: 2006年第04期

  • 老年患者经尿道前列腺汽化电切术的麻醉处理

    经尿道前列腺汽化电切术(简称TUVP)是近几年国内外开展腔内治疗前列腺增生症的新方法,具有手术创伤小、病人痛苦少、恢复时间快、并发症少等优点,深受广大患者欢迎.现将我院近年来收治的36例TUVP病人麻醉处理体会报告如下.

    作者:钱美娟;吴学东;鄂勇;赵建华;方志源 刊期: 2006年第04期

  • 斑点酶联免疫法在伤寒沙门菌外膜蛋白单克隆抗体研制中的应用

    目的 评价斑点酶联免疫法在伤寒沙门菌外膜蛋白单克隆抗体研制中的应用.方法 将伤寒沙门菌62(ST62)抗原提取物以微量加样器点于预处理过的硝酸纤维素膜上,待干后,以含10%小牛血清的0.05M Tris-HCl缓冲液进行封闭,用于筛选阳性杂交瘤细胞株,同时应用免疫印迹法鉴定其所分泌的单克隆抗体的特异性.结果 采用斑点酶联免疫法筛选,获得5株抗伤寒沙门菌外膜蛋白的单克隆抗体(A3、C1、D4、E6、F5),其中A3株经免疫印迹试验证实,仅在52KDa蛋白处出现一条清晰的条带.结论 实验结果证实该法简便、快速、经济,具有较高的敏感性和特异性,可操作性强,适合于在单克隆抗体研制中的应用.

    作者:徐培君;顾冠彬;万海燕 刊期: 2006年第04期

  • 小儿腹部闭合性损伤49例诊治体会

    随着社会经济与现代化交通的发展,小儿腹部闭合性损伤的发生率有逐年上升的趋势,现将2002年1月~2006年4月苏州大学附属儿童医院收集的49例腹部闭合性损伤患儿的诊治情况分析如下,以供临床参考.

    作者:樊明月;孔庆林;顾志成 刊期: 2006年第04期

  • 降钙素基因相关肽对内皮细胞MDA、T-SOD、T-ant-OX、ICAM-1和TIMP-2的影响

    目的 探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对内皮细胞(EC)的保护调控作用.方法 用CGRP分别作用于培养的正常内皮细胞和经联胺损伤的内皮细胞后,分别收集上清和细胞,用上清检测丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力以及总抗氧化能力(T-ant-OX)的代谢变化;用一步法提取细胞总RNA,反转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测内皮细胞细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的mRNA含量.结果 CGRP有上调T-SOD、T-ant-OX的代谢和TIMP-2mRNA表达的作用,下调MDA代谢和ICAM-1mRNA表达的作用(P<0.05).结论 CGRP对内皮细胞有一定的保护调控作用,并且在EC的抗损伤方面,尤其是抗早期损伤方面,可能起重要作用.CGRP能下调内皮细胞脂质过氧化损伤和黏附分子ICAM-1的表达,上调TIMP-2的表达,这些可能是其作用机制之一.结果提示CGRP在动脉粥样硬化的防治方面可能发挥重要作用.

    作者:杨亚安;吴开云;王彩英;杨芹;杨刚 刊期: 2006年第04期

  • 60例短暂性脑缺血(TIA)患者的血液流变性分析

    目的 观察短暂性脑缺血(TIA)患者的血液流变学特点及临床意义.方法 测定60例TIA患者及80例正常人的血液流变学各项指标.结果 TIA患者的血液流变学多项指标与正常对照组比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.01).结论 血液流变学各参数通过不同的机制,导致血液动力学改变,而引起短暂性脑缺血发作,且TIA是缺血性脑卒中重要的危险因素,故应对TIA引起足够的重视.

    作者:康琼英;温洁新;赵景;韩世民 刊期: 2006年第04期

  • 术中和术后自体血回收在全髋置换术中的应用

    目的 探讨术中和术后自体血回收在全髋置换术中应用的可行性.方法 全髋置换术68例,分为两组.实验组:34例,术中和/或术后自体血回收.对照组:34例,自体血未回收.以术后HGB低于90g/L为输异体血指标,监测术前及术后HGB,观察术中失血、输血情况、输血反应和输血费用.结果 实验组的异体血使用量和输血反应均明显少于对照组;两组在术中出血和输血费用上没有显著差异.结论 术中和术后自体血回收是减少全髋置换术中输血及输血反应的有效方法.

    作者:陶然;王志伟;刘璠 刊期: 2006年第04期

  • 术后病理性腹腔粘连小鼠模型制作的实验研究

    目的 探讨术后病理性腹腔粘连小鼠模型的制作及运用.方法 昆明小鼠30只,分成2组,分别用什锦锉与干纱布制作术后病理性腹腔粘连小鼠模型,术后饲养7d,分析这两种造模的区别.结果 2组造模效果均达到Nair腹腔粘连五级评分标准Ⅲ~Ⅳ级,但什锦锉组死亡率73.3%显著高于纱布组26.7%(P<0.05).结论 选择小鼠作为术后病理性腹腔粘连动物模型,以干纱布为造模工具较好.

    作者:蒋立新;赵郁;凌立君 刊期: 2006年第04期

  • 45例真性红细胞增多症伴发脑血管疾病的临床回顾分析

    真性红细胞增多症(PV)是一利克隆性骨髓多能干细胞增生性疾病,其外周血红细胞显著增多,并常伴有白细胞和血小板增高,因而易并发血栓及出血性疾病,尤以脑血管常受累.据文献报道PV所致脑血管病(CVD)致残率及死亡率高,PV所致CVD起病隐袭,进展缓慢,临床缺乏特异性,易误诊误治.现将我院1996年~2005年神经内科及血液科收治的45例伴随CVD进行临床分析,深入了解真性红细胞增多症并发脑血管病的发病机制、临床特点,探讨有效的诊疗措施.

    作者:张剑平 刊期: 2006年第04期

  • LIF基因在COS-7细胞中的表达及活性研究

    目的 人白血病抑制因子(LIF)基因在COS-7细胞中进行瞬时表达,检测表达产物对HL-60白血病细胞的作用.方法 用脂质体转染法将pcDNA3.0-LIF真核表达质粒导入COS-7细胞,通过形态学观察、MTT、FCM法研究COS-7细胞表达产物对HL-60细胞的影响.结果 人LIF基因可在COS-7细胞中进行有效表达,表达产物对HL-60白血病细胞具有抑制生长和诱导凋亡的作用.结论 人LIF基因在COS-7细胞中能有效表达,表达产物具有较强的抑制白血病细胞生长,诱导细胞凋亡的作用.

    作者:郁心;苗丽;盛伟华;缪竞诚 刊期: 2006年第04期

  • 维生素C对骨髓基质细胞的诱导分化作用

    目的 观察维生素C对骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cells,BMSCs)向神经元方向分化的作用及对其递质分泌的影响.方法 采用percoll液分离大鼠骨髓基质细胞,体外扩增.当第二或第三代细胞生长达到60%~70%融合时,加入不同浓度的维生素C,分别于不同时间观察其形态学改变,取诱导后的细胞作免疫细胞化学鉴定,取诱导后的诱导液作HPLC测定其中的单胺类递质的含量.结果 用不同浓度的维生索C可使骨髓基质细胞表现出典型的神经元样细胞的形态.免疫组织细胞化学鉴定显示,诱导后的细胞表现为NSE阳性,GFAP阳性.HPLC测定结果显示,用维生素C诱导后,诱导液中的肾上腺素和去甲肾上腺素的含量明显增多.结论 维生素C可诱导骨髓基质细胞向神经元样细胞方向分化,并且可增加其中单胺类递质的释放.

    作者:邵君飞;单立冬;惠国桢;王海秋;姚建社 刊期: 2006年第04期

  • Tcf-1基因在再生障碍性贫血患者骨髓CD4+T细胞中的表达

    目的 探讨Tcf-1基因在再生障碍性贫血(再障)患者骨髓CD4+T细胞中的表达情况.方法 用Mini-MACS磁珠分选系统分离出骨髓CD4+T细胞,用半定量RT-PCR方法检测Tef-1 mRNA在再障患者和正常人骨髓CD4+T细胞中的表达.结果 Tcf-1 mRNA在再障患者骨髓CD4+T细胞中的表达水平显著高于正常人(P<0.01),且重型再障患者骨髓CD4+T细胞中的表达水平明显高于非重型再障患者(P<0.01).结论 与正常人相比,Tef-1基因在再障患者骨髓CD4+T细胞中表达上调,且在重型再障患者骨髓CD4+T细胞中表达水平更高,推测Tef-1基因表达水平的高低可能与骨髓CD4+T细胞增殖活化的程度相关.

    作者:郑邈;刘文励;孙汉英;周剑峰;付劲蓉;罗莉 刊期: 2006年第04期

  • 乌司他丁治疗急性胰腺炎的临床研究

    急性胰腺炎是临床常见急腹症,近年来发病率逐渐增高,乌司他丁对急性胰腺炎有良好的疗效,为进一步观察乌司他丁的疗效,对15例急性胰腺炎患者进行了临床观察.

    作者:白云 刊期: 2006年第04期

  • 原发性高血压和血液流变学异常之间的关系的研究

    目的 探讨原发性高血压病和血液流变学异常改变之间的关系.方法 对80例高血压病人进行血液流变学观察.结果 原发性高血压病组血液流变学多项指标出现异常升高,与正常对照组比较差异有显著性,其主要表现为全血粘度增高,其增高程度和血压升高程度之间呈正相关趋势.其中红细胞压积增高可能是血液粘度增高的重要因素.结论 高血压病患者的血液流变学异常和血压增高程度之间有密切相关性.

    作者:苏海洪;王天佑 刊期: 2006年第04期

  • 炎性乳腺癌诊治体会

    目的 探讨炎性乳腺癌的临床特征、治疗和预后.方法 对1990年~2005年收治的12例炎性乳腺癌作回顾性分析.结果 炎性乳腺癌的主要症状为乳房皮肤的局部或弥漫红肿,不发热.12例患者中位年龄57岁.首选手术治疗5例,中位生存期为6个月.首选化疗7例,中位生存期30个月.首先化疗者中位生存期明显延长.结论 炎性乳腺癌应采用以化疗为主的综合治疗.

    作者:张红丹 刊期: 2006年第04期

  • 老年高血压患者自我保健能力调查分析及护理

    目的 调查老年高血压病人接受健康教育与自我保健能力的现状,为高血压病的防治及健康教育寻找有效方法 和策略.方法 采用自制的高血压病人调查问卷表,对238例年龄≥65岁的高血压病人就文化程度、接受健康教育方式和自我保健能力等方面进行调查.结果 文化程度越高,接受健康教育率越高,P<0.005.健康教育形式以小传媒多,人际传播少.接受教育者自我保健能力高于未接受者,P<0.05.结论 健康教育接受率与文化程度有密切关系,健康教育导致自我保健能力的增强将改善高血压病人的预后.

    作者:邵晴;周建平 刊期: 2006年第04期

中国血液流变学杂志

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主管:中国科学技术协会

主办:中国生物医学工程学会,苏州大学