张建营
目的：检测不同品系SV40T转基因小鼠血浆胃泌素水平。方法：取已建立的8个品系SV40T转基因小鼠和B6小鼠空腹血,应用ELISA法检测血浆胃泌素水平。结果：B6小鼠、2#、4#、16#、24#、51#、57#、61#和73#品系转基因小鼠血浆胃泌素水平（μg/L）分别为（2.814±0.209）、（1.135±0.114）、（0.853±0.701）、（2.371±0.335）、（1.371±0.190）、（0.685±0.374）、（2.274±0.251）、（2.471±0.251）和（0.986±0.173）,9组相比,差异有统计学意义（F=17.449,P〈0.001）;其中2#、4#、24#、51#及73#品系转基因小鼠血浆胃泌素水平较B6小鼠明显降低（P〈0.05）。结论：筛选出了5个稳定表达的SV40T转基因小鼠品系。
作者：申琦；邵蓓新；郜十伟；陈辉；张钦宪 刊期： 2010年第06期
目的：构建人SMRT基因真核和原核表达载体。方法：体外人工合成SMRT-C645bp对应的基因片段,克隆至pUC57载体,酶切,测序正确后,PCR扩增目的基因片段,酶切后亚克隆至pCMV-myc载体和pGEX-6p-1载体,并酶切和测序鉴定。结果：成功构建了人pCMV-myc-SMRT真核表达载体和pGEX-6p-1-SMRT原核表达载体。结论：成功构建了人SMRT真核和原核表达载体,为下一步蛋白间相互作用的证实提供了基础。
作者：王春美；盛光耀；卢洁；郝庆飞；谢垒；白松婷；许松涛；薛乐勋 刊期： 2010年第06期
宫颈癌复发患者治疗困难，预后差，常规治疗宫颈癌复发患者多在2a内死亡［1］。作者回顾性分析了121例治疗后未控及复发转移的宫颈癌患者的资料，探讨宫颈癌治疗后不良预后因素，为临床治疗提供参考。
作者：程淑霞；成慧君；王莉 刊期： 2010年第06期
目的：探讨母体铅暴露对仔鼠大脑皮层组织中白细胞介素-1β（IL-β1）蛋白表达的影响。方法：采用自由饮水的方式于母鼠孕哺期染毒,染毒剂量分别为0.3、1.0和3.0g/L,每组10只。另设对照组。在仔鼠出生第21天后测其血液和大脑皮层组织中铅的含量,用免疫组织化学法测定大脑皮层组织中IL-β1蛋白的表达,并进行水迷宫实验。结果：各组仔鼠血液和大脑皮层组织中的铅含量比较,差异均有统计学意义（F分别为53.125和10.012,P均〈0.05）,且各染毒组均高于对照组（P均〈0.05）。水迷宫实验结果显示各组间错误次数和平均逃避潜伏期比较,差异均有统计学意义（F分别为303.475和26.922,P均〈0.001）,且中、高剂量组均高于对照组（P均〈0.05）。各组仔鼠大脑皮层组织中IL-β1蛋白表达水平差异有统计学意义（F=852.913,P〈0.001）,且染毒组高于对照组（P均〈0.05）。结论：铅可能通过诱导皮层中IL-β1蛋白的高表达,影响学习记忆,从而造成神经系统损害。
作者：冯静；李宁；郑艳涛；贾金霞；李静；李文杰 刊期： 2010年第06期
目的：构建具有绿色荧光蛋白（GFP）标记及嘌呤霉素（puro）抗性的重组慢病毒载体。方法：改建慢病毒载体质粒pLKO-1-puro的多克隆位点（MCS）,以质粒pEGFP-C3为模板扩增出CMV-EGFP并与pLKO-1-puro连接,形成重组的慢病毒载体质粒pLKO-1-EGFP-puro,后者与包装质粒Δ8.2和包膜蛋白质粒VSV-G在293T细胞中进行包装,产生重组慢病毒颗粒,感染非洲绿猴肾细胞Vero细胞,观察GFP的表达。结果：成功改建了慢病毒载体质粒pLKO-1-puro并插入了CMV-EGFP,形成了新型慢病毒载体质粒pLKO-1-EGFP-puro。3质粒共转染293T细胞产生的重组慢病毒颗粒感染Vero细胞后高表达绿色荧光。结论：成功构建了高效的带GFP报告基因及嘌呤霉素抗性的慢病毒载体。
作者：宋波；韩志强；吴少璞；刘景伟；蔡晓辉；杨靖；许予明 刊期： 2010年第06期
上消化道黏膜下肿瘤是指生长于黏膜层以下、被黏膜覆盖而生长发育的肿瘤[1,2]。，包括平滑肌瘤、间质瘤、血管瘤和脂肪瘤等，多数患者因进食梗噎感或上腹部不适等上消化道症状就诊，行普通胃镜检查发现黏膜隆起，后经超声胃镜明确病变的组织起源、层次、性质及大小，从而明确诊断。上消化道黏膜下肿瘤的传统治疗是以外科手术切除为主口。，但手术创伤大，费用高，术后生活质量下降。近年来，
作者：郭长青；胡艳艳；邵经浩；褚燕君；张连峰；徐峰；乔瑞敏；卢瑞利 刊期： 2010年第06期
过敏性紫癜也称亨一舒综合征（Henoch—Schon—lein purpura，HSP），是一种儿童常见的系统性血管炎性综合征，多发于学龄前和学龄儿童，其发病呈逐年增多趋势。HSP的发病机制目前仍未明确，感染常常是HSP的诱发因素。为探讨HSP与病原体感染的关系，指导临床治疗，作者检测了50例HSP患儿和50例健康对照儿童9种病原体的感染情况，现报道如下。
作者：李晓红；盛光耀 刊期： 2010年第06期
目的：检测食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中Livin与半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）蛋白的表达。方法：采用免疫组化SP法检测53例ESCC及53例癌旁正常食管组织中Livin及Caspase-3蛋白的表达。结果：ESCC组织中Livin蛋白的阳性表达率（52.8%）高于癌旁正常食管组织（7.5%,χ2=20.346,P〈0.001）,其阳性表达率与ESCC浸润深度及淋巴结转移有关（P均〈0.05）。ESCC组织中Caspase-3的阳性表达率（39.6%）低于癌旁正常食管组织（83.0%,χ2=16.690,P〈0.001）,其阳性表达率与ESCC组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关（P均〈0.05）。ESCC组织中Livin与Caspase-3蛋白的表达负关联（rP=-0.302,P=0.021）。结论：Livin和Caspase-3蛋白参与了ESCC的发生与发展;Livin蛋白可能通过抑制Caspase-3蛋白的活性发挥作用。
作者：高萍；臧文巧；王涛 刊期： 2010年第06期
舒芬太尼是一种新型强效麻醉性镇痛药，其理化性质与芬太尼相似，而作用强度为芬太尼的5～10倍，有研究[1]显示等效剂量的舒芬太尼较芬太尼对血流动力学的影响小，应激反应轻。2008年以来，作者在舒芬太尼或芬太尼联合丙泊酚静脉全麻下实行无痛膀胱镜检查，现对其效果与安全性分析报道如下。
作者：赵璞；张卫 刊期： 2010年第06期
目的：评价PCR短串联重复序列（PCR-STR）在异基因外周血干细胞移植（Allo-PBSCT）后监测中的应用价值。方法：采集13例造血干细胞移植（HSCT）患者首次术后10、20和30d的口腔颊黏膜上皮细胞及外周静脉血,提取基因组DNA,采用PCR-STR法比较其外周血与口腔黏膜细胞中D7S3048、D4S2639、D14S306、D18S535、F13A01、FESFPS、vWA、CSF1PO、TPOX和THO1等STR位点联合基因型改变。结果：13例HSCT患者的外周血中均发现外源STR基因型。10、20和30d13例患者口腔黏膜细胞与外周血检测的10个STR基因位点均至少有5个不同。结论：对受者外周血与口腔黏膜多个STR基因位点的基因型进行对比,可随时监测HSCT患者植入效果。
作者：孟晓峰；徐朝阳；陈辉；李晓文 刊期： 2010年第06期
随着人们生活水平的提高，糖尿病的患病率越来越高，白内障是糖尿病的主要并发症之一。目前显微技术的发展使得自内障手术目趋成熟，并发症也越来越少。但是糖尿病患者白内障手术后的急性前房炎症反应较重，严重影响患者的术后效果。
作者：帖红艳；陈彬川；王永成 刊期： 2010年第06期
微囊藻毒素（microcystins，MC）是由微囊藻等蓝藻产生的具有生物活性的单环七肽小分子化合物，在目前的检测条件下检测到80多种同分异构体［1］，其中MC-LR是常见也是研究较深入的一个亚型。蓝藻的生长受多种因素的影响，有研究［2］。表明总氮和总磷等与水中藻类密度密切相关。
作者：张慧珍；张丰泉；王钧；易丹；李超峰；段丽菊；陈姜；程学敏；崔留欣 刊期： 2010年第06期
胶质瘤占脊髓内肿瘤的90％以上，其中95％为室管膜瘤及星形细胞瘤。MRI为目前诊断脊髓内肿瘤重要的手段，尤其是钆喷酸二甲葡胺（Gd-DT—PA）增强扫描对于术前确定诊断有重要意义［1］。由于室管膜瘤边界清楚，手术可完全切除，预后较好，而星形细胞瘤呈浸润生长，与脊髓组织分界不清，肿瘤全切困难，预后相对较差，因此术前对2者的鉴别诊断有重要的临床意义［2-4］。作者回顾性分析13例室管膜瘤和9例星形细胞瘤的MRI表现，探讨对该病的诊断及鉴别诊断。
作者：王岸飞；张焱；胡瑛；李建灵；荆彦平；王晓艳 刊期： 2010年第06期
目的：观察黄体酮对脑梗死大鼠脑组织基质金属蛋白酶9（MMP-9）和Ⅳ型胶原（collagenⅣ）表达水平的影响。方法：用线栓法制作大脑中动脉局灶性脑缺血模型（pMCAO）,将成模大鼠随机分成模型组、环糊精（HBC）溶剂治疗组和黄体酮治疗组,每组设12、24、48及72h4个时间点,每个时间点6只大鼠,另选6只大鼠作为假手术组。用免疫组织化学技术检测各组大鼠脑组织MMP-9蛋白和collagenⅣ的表达情况。结果：脑梗死发生后大鼠脑组织MMP-9蛋白的表达水平均明显升高,经黄体酮治疗后其表达水平有所下降;4组间在不同时间点比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。collagenⅣ的表达随着缺血时间的延长而逐渐减少,经黄体酮治疗后其丢失程度有所减轻;4组间在不同时间点比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：黄体酮可通过抑制MMP-9的表达、减少collagenⅣ的降解来减轻脑水肿。
作者：王建平；郝玉金；蒋超；陈宁宁 刊期： 2010年第06期
目的：分析24个常染色体短串联重复序列（STR）在河南省汉族群体的遗传多态性及其在亲子鉴定案例中的应用价值。方法：应用多位点复合PCR扩增技术及聚丙烯酰胺凝胶电泳分型技术,对773例亲子鉴定案例进行分析。结果：D7S3048、D18S51、D8S1179、D8S1132、D11S2368、D2S1338、D4S2639和D12S391的个体识别率≥0.94,观察杂合度≥0.79,多态性信息含量≥0.80,且这些位点参与联合排除父权率均在40%以上。结论：短串联重复序列D7S3048、D18S51、D8S1179、D8S1132、D11S2368、D2S1338、D4S2639和D12S391可作为亲子鉴定的首选基因座,在法医学应用和群体遗传学研究中有较高的价值。
作者：陈辉；徐朝阳；李晓文；郑红；程晓丽；贺颖；宋国英；刘华 刊期： 2010年第06期
目的：构建同时表达VEGF、c-myc、survivin和hTERT基因的shRNA真核表达质粒,研究其对人鼻咽癌细胞系CNE-2Z的干扰作用。方法：根据VEGF、c-myc、survivin和hTERT基因序列,各设计2条寡核苷酸序列,合成互补DNA链,插入真核表达质粒pGenesil-1中,同时构建单基因（VEGF）质粒pGenesil-2。分别转染CNE-2Z细胞,分为多基因质粒（P-1）组和单基因质粒（P-2）组,并设空白对照（BC）组和阴性对照（NC）组。采用MTT法检测细胞增殖活性。采用实时定量PCR和Western-blot检测4种基因在人鼻咽癌细胞系CNE-2Z中的表达。体内裸鼠成瘤实验观察单基因和多基因质粒干预对肿瘤的抑制作用。结果：通过酶切和测序证实重组真核表达载体构建正确。MTT显示细胞增殖受到抑制,且多基因质粒对细胞增殖的抑制作用明显强于单基因质粒。目的基因在mRNA和蛋白水平上表达均下降。裸鼠实验显示P-1组抑制肿瘤细胞增长的作用要强于P-2组。结论：成功构建一个载体编码4个不同基因的shRNA质粒载体系统。转染鼻咽癌细胞后,与单独沉默VEGF相比,同时干扰VEGF、c-myc、survivin和hTERT基因可以更好地抑制细胞增殖。
作者：宋英；董明敏；杨海峰 刊期： 2010年第06期
目的：探讨HPV感染及k-ras基因突变与直肠腺癌的关系。方法：应用PCR/SSCP银染法检测75例直肠腺癌患者癌及相应正常大肠黏膜组织中HPV DNA和k-ars基因第12、13密码子。结果：直肠腺癌组织中HPVDNA阳性检出率为73.3%（55/75）,而正常黏膜未检测到HPV DNA。HPV感染与患者年龄、Duke’s分期及淋巴结转移有关,而与患者的族别、性别、肿瘤直径、大体类型、组织学类型及浸润深度无关。75例直肠腺癌组织中检测到k-ras基因突变34例（45.3%）,均与患者年龄、肿瘤的大体类型、组织学类型、侵袭深度、淋巴结转移及Duke’s分期无关,且与HPV感染亦无关联（χ2=0.240,P=0.624,rP=0.056）。结论：HPV感染可能是导致直肠腺癌恶性表型的重要因素;而k-ras基因突变与HPV感染无关。
作者：杨新辉；赵泽亮；库热西；王海江；范川文；赵为民；孙振强 刊期： 2010年第06期
目的：观察虎杖总蒽醌对糖尿病肾病（DN）肾脏皮质糖基化终末产物（AGEs）、糖基化终末产物受体的（RAGE）影响。方法：运用链脲佐菌素制作DN模型,将成模NH小鼠随机分为模型组,开搏通组,虎杖总蒽醌高、中、低剂量组（每组17只）,另外选取17只NH小鼠作为正常对照组。运用荧光法、免疫组化法分别观察小鼠肾脏皮质AGEs、RAGE水平的变化。结果：与正常对照组相比,模型组组小鼠肾皮质AGEs水平明显升高,而高、中剂量虎杖总蒽醌组肾脏皮质AGEs水平明显下降（F=15.200,P〈0.001）;模型组小鼠肾皮质RAGE的表达高于正常对照组,而高、中剂量虎杖总蒽醌组较模型组降低,差异具有统计学意义（F=12.485,P〈0.001）。结论：AGEs、RAGE与DN形成有关;虎杖总蒽醌能够降低DN小鼠肾皮质AGEs水平,抑制肾RAGE的表达。
作者：王辉；陈清江；杨再刚；李伟；燕树勋；张冰；苗明三 刊期： 2010年第06期
以往针对乳头溢液疾病的诊断方法主要有溢液涂片细胞学检查、乳管造影等，但这些方法均存在诊断率不高、不直观且定位困难等缺点［1］。2007年6月至2009年6月，新乡市中心医院头颈乳腺科运用乳管镜对114例乳头溢液患者进行了诊治，效果良好，报道如下。
作者：冯跃庆；王钟富；张志敏 刊期： 2010年第06期
目的：构建DNA聚合酶β（polβ）靶向的小干扰RNA（siRNA）真核表达载体。方法：根据GenBank中人DNApolβ基因（M13140）的全长序列,利用设计分析软件设计2个DNApolβ靶向发卡样siRNA结构,退火后形成双链,克隆入表达载体pslience2.0-GFP,得到重组质粒pslience2.0-GFP-sipolβ1和pslience2.0-GFP-sipolβ2。通过限制性核酸内切酶酶切和DNA序列测定对重组质粒进行鉴定。结果：经酶切鉴定寡核苷酸已成功插入表达载体pslience2.0-GFP,DNA序列分析表明插入片段序列与合成的siRNA序列相同。结论：成功构建了靶向DNApolβsiRNA真核表达载体。
作者：赵春临；王志举；樊红琨；赵国强；董子明 刊期： 2010年第06期
郑州大学学报（医学版）杂志
主管:河南省教育厅
主办：郑州大学
