学术投稿

HO-1基因真核表达载体pcDNA3.1-hHO-1的构建及表达

王媛;金国平;马惠敏;单杰

关键词:血红素加氧酶-1, Eca-9706细胞, pcDNA3.1质粒
摘要:目的:构建人HO-1真核表达载体peDNA3.1-hHO-1并检测其表达.方法:利用分子牛物学技术,将hHO-1基因与质粒pcDNA3.1连接,构成重组质粒并用RT-PER及Western blotting方法检测重组载体在Eca-9706细胞中的表达情况,终确定重组载体是否构建成功.结果:用Hind Ⅲ和BamH Ⅰ双酶切,RT-PCR检测.Western blotting检测证明hHO-1成功克隆入表达载体pcDNA3.1中.结论:本部分实验成功构建了能够在细胞内大量表达HO-1基因产物的真核表达载体pcDNA3.1-hHO-1,为进一步实验奠定基础.
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  • 国内十大医学新闻

    作者: 刊期: 2009年第01期

  • 三切口食管-胃单层宽边颈部吻合行胸上段食管癌根治术临床研究

    目的:研究胸上段食管根治术中采取右侧颈胸腹三处切口及食管-胃单层宽边吻合的临床治疗效果.方法:我们医疗组自1996年6月~2008年6月共治疗胸上段食管癌199例,其中行根治性手术189例,术中采用颈胸腹三处切口入路,胃与食管吻合采用单层宽边方法:胃代食管.结果:全组无手术死亡,出现吻合口漏1例、吻合口狭窄5例、幽门梗阻2例、再次丌胸止血1例、胸腔感染2例以及乳糜胸1例、随访143例,五年生存率为31.2%.结论:此术式简便有效,局属淋巴结清扫方便,彻底,值得推广.

    作者:马海波;马春茂;梁志强 刊期: 2009年第01期

  • 外伤性颈椎间盘突出型脊髓损伤的手术治疗

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    作者:邹坤明;张卫东;张森;郑哲 刊期: 2009年第01期

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    在治疗骨科伤病中帮助修复或替代骨组织方面,金属材料依然起着非常重要的作用[1].与陶瓷和多聚体材料相比,金属材料具有较高的机械强度和断裂韧性,所以更适合在负重方面的应用.现在主要在临床上使用的金属生物材料包括不锈钢、钛以及钴铬合金等.但这些金属生物材料具有其使用不足之处:即可能在腐蚀或磨损过程中释放有毒的金属离子或/和金属颗粒,产生可导致组织缺损以及降低生物相容性的炎症级联.并且,当前的金属生物材料的弹性模量与正常骨组织并不十分相称,这会导致应力遮挡效应.这样的后果是对新生骨组织产生和塑性的刺激减弱,并使内植物的稳定性下降,且必须在患者充分痊愈后行二次手术将其取出.多次手术会增加医疗过程中的费用且会造成患者死亡率的上升.

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  • 影响女性卒中发病的几个因素

    作者: 刊期: 2009年第01期

  • 盐酸戊乙奎醚在鼾症患者腭咽成形术麻醉前用药的临床观察

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    作者:周灿华;徐鹏;刘聪霞;孟庆友;智宗协 刊期: 2009年第01期

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    目的:探讨显微外科手术切除联合间质内树状突细胞(dendritic cells,DC)疫苗治疗复发脑胶质瘤的临床疗效和安全性.方法:对8例复发脑胶质瘤患者行开颅显微手术全切除,术中瘤腔内安置Ommaya囊,术后从复发瘤组织分离培养出脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cells,BTSC),制备个体特异性DC疫苗,术后4 W、6 W、8 W、10 W、12 W经由Ommaya囊行瘤腔内自体免疫治疗.随访6~15个月,观察治疗效果.结果:8例患者均获随访,3个月无复发,无死亡;6个月复发3例,死亡1例,生存期明显延长.全部患者均无明显的不良反应,生存质量得到明显改善.结论:显微手术力争全切除,术后联合间质内BTSC抗原脉冲DC疫苗自体免疫治疗,是一种靶向BTSC治疗复发脑胶质瘤的安全有效方法.

    作者:步星耀;赵跃武;赵红卫;张建国;柴昌;周伟;李玉 刊期: 2009年第01期

  • 药物治疗对不明原因复发性流产患者Th1、Th2细胞

    目的:通过观察安胎种子丸治疗对不明原因复发性流产(URSA)患者Th1、Th2细胞闪子的影响,探讨其治疗URSA的机理.方法:33例URSA患者用安胎种子丸治疗,每次6克,3次/日,3个月为一疗程.采用酶联免疫吸附法分别榆测33例URSA患者治疗前后和正常妇女(30例)血清Th1(IL-2)细胞因子、Th2(IL-10)细胞因子水平,观察治疗前后患者血清中Th1(IL-2)、Th2(IL-10)水平的变化.结果:治疗前URSA患者IL-2水平明显高于正常妇女,IL-10水平明显偏低,差异均有显著性(P<0.05);治疗后与治疗前相比,IL-2水平明显降低,IL-10水平明显升高,差异均有显著性(P<0.05).结论:安胎种子丸可能通过调节细胞因子平衡而达到保胎作用,初步揭示其安胎的机理.

    作者:田葱;李娟;攸毅;张效本;常兴隆 刊期: 2009年第01期

  • 老年人群代谢综合症与缺血性脑卒中的关系探讨

    目的:了解老年人群MS在缺血性脑卒中的危险性.方法:对2006年3月至2007年5月在我院接受体检的65~82岁离退休老干部共361人进行病史调查、体检、实验室检查及影像学检查,根据2004年中华医学会糖尿病学分会推荐的MS诊断标准将所有受检者分为MS组和非MS组.通过统计学方法对两组间的资料进行对比.结果:MS组98人(27.1%).两组之间血压、BMI、各项生化指标、影像学检查缺血性脑卒中检出率等的差异均具有统计学意义,P<0.05.结论:老年人群MS患者缺血性脑卒中的危险性明显升高.

    作者:王兆福 刊期: 2009年第01期

  • HO-1基因真核表达载体pcDNA3.1-hHO-1的构建及表达

    目的:构建人HO-1真核表达载体peDNA3.1-hHO-1并检测其表达.方法:利用分子牛物学技术,将hHO-1基因与质粒pcDNA3.1连接,构成重组质粒并用RT-PER及Western blotting方法检测重组载体在Eca-9706细胞中的表达情况,终确定重组载体是否构建成功.结果:用Hind Ⅲ和BamH Ⅰ双酶切,RT-PCR检测.Western blotting检测证明hHO-1成功克隆入表达载体pcDNA3.1中.结论:本部分实验成功构建了能够在细胞内大量表达HO-1基因产物的真核表达载体pcDNA3.1-hHO-1,为进一步实验奠定基础.

    作者:王媛;金国平;马惠敏;单杰 刊期: 2009年第01期

  • 子宫内膜增生及子宫内膜腺癌中PTEN、P16蛋白的表达及临床意义

    目的:研究子宫内膜增生组织及内膜癌组织中PTEN、P16蛋白的异常表达,探讨其与子宫内膜痛变的关系和作为早期癌变生物学标志及评判预后的可能性.方法:应用免疫组化S-P法对20例正常子宫内膜组织、40例子宫内膜增生症组织、30例内膜腺癌组织中PTEN、P16蛋白的表达进行研究.结果:在正常增生期子宫内膜、子宫内膜增生症(单纯型增生、复杂型增生、不典型增生)、子宫内膜腺癌组织中PTENP16蛋白的阳性表达率呈递减趋势,子宫内膜腺癌与除不典型增生外的子宫内膜增生症组织及正常子宫内膜组织的PTEN蛋白表达差异有显著性(P<0.05),正常子宫内膜、单纯型增生与不典型增生组织的PTEN蛋白表达差异有显著性(P<0.05),子宫内膜腺癌与正常子宫内膜及单纯型增生子宫内膜P16蛋白表达差异有显著性(P<0.05),正常子宫内膜与增生症子宫内膜差异无显著性(P>0.05)增生症子宫内膜各组间P16蛋白表达无显著性差异(P>0.05),PTEN P16蛋白的表达与子宫内膜癌的手术分期、组织学分级,肌层浸润有关(P>0.05).PTEN、P16蛋白表达存在正相关性(r=0.978,P<0.01).结论:PTEN、P16蛋白的异常表达与子宫内膜的癌变过程相关,PTEN基因表达异常及细胞周期调控失常致细胞增殖与子宫内膜的早期癌变有关,PTEN基因异常可促使子宫内膜细胞增殖及恶变.两者有可能成为评判预后及子宫内膜组织早期癌变的分子标记物.

    作者:薛玲玲;何涛;米建强;李会平 刊期: 2009年第01期

  • EMs异位内膜中基质金属蛋白酶-2及其特异性抑制物的研究

    目的:研究摹质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其特异性抑制物金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)在子宫内膜异位症发生发展中的作用.方法:采用明胶酶谱法测定异位子宫内膜30例、在位内膜27例及正常子宫内膜26例(对照组)中MMP-2的含量,并采用RT-PCR技术测定MMP-2mRNA及TIMP-2mRNA在三组内膜的表达水平.结果:①MMP-2存异位内膜病灶中呈高表达(P<0.05).②MMP-2 mRNA/TIMP-2 mR-NA在异位内膜病灶的表达明显升高(P<0.05).结论:异位病灶中MMP-2与TIMP-2的表达失衡,使异位内膜具有更强的侵袭能力,易于发生种植转移,可能在EMs的发生发展中起重要作用.

    作者:鲍志敏;申太峰;曲首辉 刊期: 2009年第01期

  • 胺碘酮转复阵发心房颤动的疗效观察

    目的:研究胺碘酮转复阵发心房颤动的疗效.方法:阵发心房颤动患者45例随机分为两组:胺碘酮组25例,给予胺碘酮负荷量150 mg静注后,继以0.6~1.0 mg/rain维持点滴,依心室率情况调整胺碘酮剂量.心律平组20例,静脉给予心律平1.4~2.0 mg/kg/5 min内注射,继以0.28 mg/min维持静点,无效者改用胺碘酮治疗.结果:胺碘酮组转复成功率为84.0%(21/25),心律平组转复成功率60.0%(12/20),且心律平组转复心律失败的部分病例使用胺碘酮仍有效;胺碘酮组平均复律时间(103±65)min短于心律平组(160±78)min.结论:胺碘酮在转复阵发心房颤动比心律平更加快速、安全、有效.

    作者:董艳丽 刊期: 2009年第01期

  • 体外RNA干扰抑制RANKL表达对成骨细胞功能的影响

    目的:观察用RNA干扰的方法抑制大鼠成骨细胞核激活因子受体配体(Ligand of receptor activator of NF-kB.RANKL)mRNA表达后,成骨细胞RANKL、OPG蛋白表达和Ⅰ型胶原表达、细胞增殖能力的时间变化规律.方法:设计4条RANKL序列特异性小干扰RNA(siRNA),用Lipofectamin2000转染成骨细胞,采用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)检测RANKL的表达.筛选出有效的干扰序列,并用Western blot检测转染后1、2、3、5、7天RANKL、OPG蛋白的表达,同时观察成骨Ⅰ型胶原表达、细胞增殖能力在相同时间点的变化.结果:对siRNA中有一对可使大鼠成骨细胞的RANKLmRNA水平下降89%.用佳siRNA转染后1、2、3、5、7天.与空白对照组相比,RANKL蛋白表达率分别为59.1%、39.5%、26.6%、40.0%、57.3%(P<0.05),OPG蛋白表达率较空白对照组降低,但差异不具有显著性(P>0.05).成骨细胞的Ⅰ型胶原表达、增殖能力在相同时间点较空白对照组降低,差异也不具有显著性(P>0.05).结论:靶向siRNA可显著下调成骨细胞RANKL表达,同时对OPG表达及成骨细胞的主要功能无显著影响.

    作者:高延征;高坤;于正红;司文腾 刊期: 2009年第01期

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    作者: 刊期: 2009年第01期

河南医学研究杂志

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